脊髓损伤后组织基因表达谱的变化

目的 通过基因芯片全面了解组织损伤后基因表达变化情况，研究脊髓损伤后组织基因表达谱的变化。方法 健康成年SD大鼠9只，体质量300—400R，雌雄不拘，随机数字法分为无损伤组及损伤2、48h组，每组3只。以打击法制成大鼠脊髓闭合性损伤的动物模型，利用表达谱基因芯片技术，检测正常及伤后2，48h脊髓组织基因表达谱，寻找伤后发生显著差异性表达的基因。结果 有45条基因在脊髓损伤后2h发生了显著差异性表达，其中22条表达升高，23条表达下降；183条基因在伤后48h发生显著变化。包括61条表达升高，122条表达下降。结论 脊髓损伤后不同时期，多条基因发生了表达变化，提示继发性脊髓损伤是一个多因素参与的过程。     

磁刺激对脊髓损伤组织c-fos基因表达的影响

目的　观察磁刺激对损伤脊髓组织中c -fos基因表达的影响。方法　用Allen氏WD法制造大鼠T8脊髓损伤的动物模型。 38只Wistar大鼠随机分为正常组 ( 6只 )、脊髓损伤治疗组 ( 16只 )和对照组 ( 16只 )。治疗组于术后 15min、1h、2h和 4h分别予以磁刺激 ( 0 .5Hz ,70 %最大输出强度 ) ,对照组无特殊处理。治疗组、对照组分别于术后 15min、1h、2h和 4h各取 4只动物处死 ,取损伤段脊髓组织 ,作石蜡切片 ,用地高辛标记的c -fos基因探针进行原位杂交 ,测定c -fosmRNA在损伤脊髓组织中的表达 ,用免疫组织化学方法检测fos蛋白的表达。结果　fos蛋白OD值在正常组为 3.78± 0 .72 ,在对照组明显增多 (最高达 16 .49± 1.3) ,而治疗组在各时段均低于对照组 (P <0 .0 1) ,c -fos基因表达在正常脊髓组织中呈弱阳性 ,在对照组中表达明显增加 ,治疗组c -fos基因表达的数目少于对照组 (P <0 .0 1)。结论　应用磁刺激能抑制脊髓损伤后c -fos基因的表达 ,这可能是磁刺激保护神经元并减轻脊髓继发性损伤的机理之一。     

大鼠脊髓损伤后中性粒细胞趋化因子基因表达的变化

目的：探讨大鼠脊髓损伤后中性粒细胞趋化因子(CINC—1)表达的变化规律。方法：SD大鼠42只，随机分为7组，采用改良Allen’s脊髓损伤打击模型，以反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)法测定伤段脊髓组织CINC—1表达情况。结果：正常脊髓组织内存在CINC—1 mRNA的表达，脊髓损伤后1h表达迅速增强，伤后6h达峰值(1．027&;#177;0．124)与假手术组(0．175&;#177;0．095)比较差异有非常显著性意义，(t=13．359，P&;lt;0．01)，随后逐渐下降但维持较高水平至损伤后72h。结论：脊髓损伤后CINC—1 mRNA表达迅速增强，提示CINC-1参与了继发性脊髓损伤过程，并可能是一种损伤因素。     

大鼠脊髓损伤后中性粒细胞趋化因子基因表达的变化

目的:探讨大鼠脊髓损伤后中性粒细胞趋化因子(CINC-1)表达的变化规律。方法:SD大鼠42只,随机分为7组,采用改良Allen's脊髓损伤打击模型,以反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定伤段脊髓组织CINC-1表达情况。结果:正常脊髓组织内存在CINC-1mRNA的表达,脊髓损伤后1h表达迅速增强,伤后6h达峰值(1.027±0.124)与假手术组(0.175±0.095)比较差异有非常显著性意义,(t=13.359,P<0.01),随后逐渐下降但维持较高水平至损伤后72h。结论:脊髓损伤后CINC-1mRNA表达迅速增强,提示CINC-1参与了继发性脊髓损伤过程,并可能是一种损伤因素。     

脊髓损伤后两种结构型一氧化氮合酶基因表达的变化

目的探讨大鼠脊髓损伤后两种结构型一氧化氮合酶(cNOS)mRNA表达的变化.方法以Nystrom方法建立大鼠脊髓压迫伤模型,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定伤段脊髓组织神经型及诱导型NOS(nNOS,eNOS)mRNA的表达情况.结果脊髓压迫伤后nNOSmRNA及eNOSmRNA表达均增强,伤后6h达到高峰,eNOSmRNA表达增强更明显.结论脊髓损伤后结构型NOSmRNA的表达主要在伤后早期增强,不同的结构型NOSmRNA表达增强的程度不同.     

应用cDNA微阵列分析脊髓损伤后基因表达的差异

背景:基因芯片可以大规模地平行检测分析上千个基因的表达模式,克服了传统的一次实验仅能对单个或数个基因表达水平进行分析的局限.目的:应用含有1 176条人类全长基因的cDNA表达谱芯片,对大鼠急性脊髓损伤模型中基因表达水平的变化进行动态观察.方法:雌性SD大鼠70只随机分成正常对照组、手术对照组、损伤4 h,24 h,3 d,7 d,10 d组7组.损伤组切除T7、T8的椎板,并用钢棒从高处自由落下致脊髓损伤.手术对照组仅进行T7、T8椎板切除.正常组和各损伤组于伤后各时间段,手术对照组于术后3 d取T6～T10段脊髓,提取总RNA,运用AtlasImageTM 2.01软件(Clontech)对放射自显影基因表达谱进行分析,各个处理组与正常组相比,灰度值差异超过3倍的基因定为有表达差异.结果与结论:结果显示共有显著表达差异基因81条,其中表达上调的基因有46条,表达下调的基因有35条,并在国内外首次观察到神经激肽B、神经肽Y、垂体后叶加压素V2受体等数个基因在脊髓损伤中的变化.结果表明利用基因芯片技术结合实验动物模型能大规模、高通量地观察急性脊髓损伤继发性损伤的基因表达谱,筛选疾病相关基因,对进一步阐明疾病在基因水平上的发病机制,有重要的意义.     

脊髓损伤后大鼠Cdh1 mRNA表达的变化

目的：探讨大鼠脊髓损伤（SCI）后损伤区脊髓组织Cdh1 mRNA的表达变化。方法：32只雄性SD大鼠随机分成对照组（C组）、SCI组（M组）,每组16只。M组采用改良Allen打击法建立SCI模型;C组行假手术,仅暴露脊髓。术后第1、3、5、7天对大鼠后肢运动功能采刖Basso—Beattie—Bresnahan（BBB）评分进行评估;取损伤节段脊髓,提取组织总RNA,采用实时荧光定量PCR检测损伤区脊髓组织Cdh1 mRNA的表达。结果：术后各时点M组BBB评分均低于C组（P〈0．05）。术后各时点C组Cdh1 mRNA表达比较．差异无显著性意义,M组Cdh1 mRNA表达逐渐降低（P〈0．05）。与C组相比,M组术后第1天Cdh1 mRNA的表达增加（P〈0．05）,术后第5、7天Cdh1 mRNA的表达减少。结论：大鼠SCI后损伤区脊髓组织Cdh1 mRNA表达降低,提示APC—Cdh1可能参与SCI后的病理生理过程。     

脊髓损伤后大脑皮质的变化

脊髓损伤对大脑皮质产生的影响包括神经元形态和基因的表达、大脑皮质自身的功能和结构重组、局部血流、神经营养因子及其受体的表达等.这些变化可能对脊髓损伤患者的康复治疗和功能恢复有一定的影响.因此,了解脊髓损伤后大脑皮质的变化对进一步探讨脊髓损伤的机制,寻找新的脊髓损伤治疗途径有非常重要的意义.     

脊髓损伤后肌肉萎缩组织中差异表达基因的生物信息学分析

目的 通过生物信息学方法分析脊髓损伤后肌肉萎缩患者肌肉组织的差异表达基因,筛选出与该病相关基因.方法 选取基因表达数据库(GEO)中GSE21497芯片,通过R语言软件筛选出差异基因.将筛选出的差异表达基因进行GO、KEGG分析,构建蛋白质互作用网络.使用分子复合物检测算法(MCODE)筛选相互作用紧密的显著差异表达基...     

大鼠颈段红核脊髓束损伤后炎症反应相关基因表达谱

目的探讨大鼠颈段红核脊髓束(RST)损伤后急性期炎症反应的分子机制。方法 Sprague Dawley(SD)雌性大鼠18只,随机分为2组:双侧RST损伤组(n=9)和假手术对照组(n=9)。制作双侧RST损伤模型,24 h后处死动物,以损伤处为中心取长约0.5 mm脊髓组织,将各组中的3只动物标本混合,提取总RNA,共得到6份RNA样品,使用含有28000个大鼠基因的Affy-metrix表达谱基因芯片检测基因变化。结果大鼠RST损伤后24 h表达发生变化的有153条基因,表达上调的有136条,表达下调的有17条。与炎症相关的基因大部分表达上调(Scn9α除外),Toll样受体信号途径中有8条基因表达上调。结论 RST损伤后多种炎症反应相关的基因表达出现变化。     

脊髓损伤后细胞凋亡及iNOS的表达

目的研究大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的特点与诱生型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesynthase,iNOS)的表达规律以及两者之间的关系。方法成年SD大鼠随机分为 3组 ,分别造成轻、中、重度脊髓急性损伤模型 ,于损伤后不同时间点 (4h、8h、1d、3d、7d、1 4d、2 1d)处死。用HE染色观察损伤脊髓组织病理变化 ,用免疫组化染色检测iNOS、Bax阳性细胞 ,TUNEL法标记凋亡细胞。结果HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变随着损伤程度的增加而加重。免疫组化结果显示正常对照组及单纯椎板切除组神经元、神经胶质细胞、室管膜细胞、血管内皮细胞极少量表达iNOS ;损伤后 8小时上述细胞iNOS表达增加 ,7天达高峰 ,1 4天仍较明显 ,2 1天降低。Bax表达及TUNEL标记阳性细胞的时间分布特点与iNOS相似 ,7天达高峰 ,阳性细胞以白质中胶质细胞为主。iNOS表达与脊髓损伤程度及神经细胞凋亡指数间存在正相关 (r=0 41 4 ,P <0 0 1 ;r=0 854 ,P <0 0 1 )。结论大鼠脊髓损伤后iNOS和Bax表达增强 ,凋亡神经细胞大量出现。iNOS表达与脊髓原发损伤程度及损伤后神经细胞凋亡指数间存在正相关     

急性脊髓损伤后差异蛋白的表达

背景：在质谱分析中,任何一种同位素标记相对和绝对定量试剂标记的不同样本中的同一蛋白质表现为相同的质荷比,而在串联质谱中,信号离子表现为不同质荷EL（114—121）的峰,因此可以分析得到相关蛋白质的定量信息。目的：建立大鼠急性脊髓损伤后脊髓组织差异蛋白质谱,应用同位素标记相对和绝对定量技术联合LC．MS／MS质谱技术从分子水平来探索脊髓差异蛋白的表达情况。方法：取8只SD大鼠,参照Allen’s等方法建立大鼠急性脊髓损伤模型,随机分为脊髓损伤后0h组和8h组,每组各4只。损伤后取脊髓组织,用同位素标记相对和绝对定量技术分析大鼠急性脊髓损伤后脊髓组织的差异蛋白质。结果与结论：共鉴定到了220个差异表达的蛋白,上调的差异蛋白数是116个,下调的差异蛋白有104个。其中相关神经再生的差异蛋白12个,其中上调的有7个,下调的有5个。提示实验中检测到的多种差异蛋白及表达明显的神经生长因子可能作为急性脊髓损伤的生物标记物或可能作为临床管理监测急性脊髓损伤的损伤进程、靶向治疗及评估疗效的有力证据。     

β-七叶皂甙钠抑制损伤脊髓细胞胶质纤维酸性蛋白的表达

背景：研究证实脊髓损伤后早期应用甲基强的松龙冲击治疗可以减轻脊髓损伤的病理程度,但是近20年未再有突破性进展。 目的：观察β-七叶皂甙钠对脊髓损伤大鼠脊髓神经细胞坏死及胶质纤维酸性蛋白抗体表达的影响。 方法：采用改良Allen撞击方法建立脊髓损伤大鼠模型,将建模成功的180只SD大鼠按照随机数字表法分成3组,每组60只,造模后即刻给药,β-七叶皂甙钠组腹腔注射5 mg/kgβ-七叶皂甙钠,甲基强的松龙组腹腔注射100 mg/kg甲基强的松龙,对照组腹腔注射等体积生理盐水。每天给药1次,于治疗后8,24,96 h,治疗后7,14 d 5个时间节点处死实验动物并取损伤段脊髓进行苏木精-伊红染色及免疫组化染色观察脊髓组织坏死神经细胞数及胶质纤维酸性蛋白抗体表达情况。 结果与结论：各组均于治疗后8 h出现坏死细胞且7 d达高峰,14 d时水肿减轻但坏死细胞并未减少,但β-七叶皂甙钠及甲基强的松龙两组同一时间点上坏死细胞数目均明显少于对照组（P〈0.05）;各组胶质纤维酸性蛋白吸光度均随着时间延长而增加,β-七叶皂甙钠组与对照组在96 h内增加快速,而甲基强的松龙组缓慢均匀增加,24 h以内β-七叶皂甙钠组与对照组之间无明显差别,但均低于甲基强的松龙组（P〈0.05）,96 h后β-七叶皂甙钠及甲基强的松龙两组均明显低于对照组（P〈0.05）,7 d后各组均开始缓慢下降。结果表明β-七叶皂甙钠对脊髓损伤大鼠脊髓细胞具有明显保护作用,可通过减少胶质纤维酸性蛋白的表达促进神经功能恢复,在用药2周时间内的效果与甲基强的松龙相似。     

高位脊髓损伤大鼠α2-肾上腺素受体基因的变化

目的 研究大鼠高位脊髓损伤后脊髓α2-肾上腺素受体(α2-ARs)基因的变化特点,为临床围手术期麻醉管理提供实验依据.方法 采用改良Aliens打击法建立脊髓胸4节段重度损伤动物模型:分别于损伤后1、3 d及1、2、3、4周处死动物,取损伤段及邻近上下段脊髓组织.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定脊髓不同节段α2-ARs mRNA表达.结果 与不损伤脊髓假手术组比较.损伤段以上节段在损伤后受体表达持续减少,2周达最低(P＜0.01),此后受体表达开始逐步增加,4周受体表达增加至正常水平;损伤段在损伤后受体表达持续减少,1周达最低(P＜0.01).此后受体表达开始逐步增加.但至4周时仍未恢复至正常水平(P＜0.05);损伤段以下节段在损伤后1 d受体表达减少(P＜0.05).但1周后增加至正常水平.4周时仍未见明显变化.结论 大鼠高位脊髓损伤4周后.损伤段脊髓a2-ARs表达下调.而邻近上下节段脊髓a2-ARs表达恢复至正常水平.α2-ARs数目表达变化可能是引起高位脊髓损伤后"脊髓休克"及自主反射异常的中枢机制之一.     

大鼠脊髓损伤后细胞凋亡特点及其与一氧化氮合酶表达的相关性

目的探讨脊髓损伤后细胞凋亡特点与诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达规律及二者之间的关系.方法成年大鼠32只,随机分为8组(每组4只)单纯椎板切除对照组和脊髓损伤后7个时间点处死组(4、8 h和1、3、7、14、21 d).用免疫组化染色检测iNOS、p53阳性细胞,原位末端标记法(TUNEL)标记凋亡细胞.另取大鼠32只进行同样分组,用Western blot analsis法检测iNOS表达.结果免疫组化结果显示单纯椎板切除对照组神经元、神经胶质细胞、室管膜细胞、血管内皮细胞极少量表达iNOS;损伤后8 h上述细胞iNOS表达增加,7 d达高峰,14 d仍较明显,21 d降低.p53表达及TUNEL标记阳性细胞的时间分布特点与iNOS相似,7d达高峰,阳性细胞以白质中胶质细胞为主,主要分布于损伤部及相邻区.iNOS的Western blot灰度扫描数值时间变化曲线与免疫组化阳性细胞率时间变化曲线一致.iNOS表达与神经细胞凋亡指数及p53表达存在正相关(r＝0.854,P＜0.01;r＝0.951,P＜0.01).结论大鼠脊髓损伤后iNOS与p53表达增强,凋亡神经细胞大量出现.iNOS表达与脊髓损伤后神经细胞凋亡指数间存在正相关.     

持续性脊髓压迫对脊髓损伤程度的影响

目的 探讨脊髓损伤(SCI)后脊髓压迫时间对损伤程度的影响。方法 以大脑皮层诱发电位(CSEP)和不同压迫时间为参数,自行设计一种犬的运动—静止压迫型SCI模型,选择T13为损伤中心,压迫脊髓,当 CSEP波幅下降达基础值的 50%时,维持静止压迫。将28只犬随机分为A、B、C、D 4组,A、B、C组脊髓分别受压30 min、90 min和180 min,D组为对照组,观察各组动物的组织病理学、影像学和行为学变化。结果 损伤组脊髓组织学均有损害,MRI显示损害程度随脊髓受压时间的延长逐渐加重( P<0.01);至术后28 d,各损伤组动物后肢功能均有恢复,BBB分级评分法评估组间有显著性差异( P <0.05)。结论 SCI后持续性脊髓压迫能加重损伤程度,应尽早解除脊髓压迫。     

支气管动脉插管并发脊髓损伤治疗的再探讨

目的：探讨支气管动脉插管中并发脊髓动脉损伤的有效治疗方法。方法：对选择性支气管动脉造影（BAG）,支气管动脉灌注化疗（BAI）及支气管动脉栓塞（BAE）中出现脊髓损伤的11例分别采取普通方法和推荐方法治疗。结果：用普通方法治疗的4例中1例永久性截瘫,2例单侧下肢麻木,肌力下降为Ⅲ-Ⅳ级,1例基本恢复。用推荐方法治疗的7例中除2例遗留右下肢肌力Ⅳ^ 级外,其余5例均基本恢复。结论：脊髓损伤治疗时间窗为术后5小时内,早期贯序性应用扩血管药、足量激素、脱水剂、神经营养药能有效地治疗脊髓动脉损伤,并使之恢复正常。     

Health problems of persons with spinal cord injury living in the Netherlands

Purpose. To investigate the prevalence of health problems among persons with spinal cord injury (SCI) living in the Netherlands, to identify the problems experienced as most important, and to analyse the experienced impact of these most important problems on daily activities and social life.

Method. Postal survey among all members of the Dutch Association of Patients with SCI. The questionnaire focused on 26 health problems: 13 secondary impairments, 8 problems of daily living and 5 psychosocial problems.

Results. The respondents (response rate 45.5%, 454 persons) experienced an average of 8 health problems. The most frequently occurring problems regarded bladder and bowel regulation, spasms, pain, oedema and sexuality. Except for oedema, these problems were also most often cited as the most important. The most disabling condition for both daily and social activities was pain. Few significant relationships were found between the prevalence of health problems and the level, completeness and duration of the injury or gender.

Conclusion. Persons with SCI living in the community experience many health problems and limitations in daily activities and social life due to these problems. The occurrence of these problems does not diminish with increasing time after injury. This strongly emphasises the need for follow-up care.     

Health problems of persons with spinal cord injury living in the Netherlands

Purpose.?To investigate the prevalence of health problems among persons with spinal cord injury (SCI) living in the Netherlands, to identify the problems experienced as most important, and to analyse the experienced impact of these most important problems on daily activities and social life.

Method.?Postal survey among all members of the Dutch Association of Patients with SCI. The questionnaire focused on 26 health problems: 13 secondary impairments, 8 problems of daily living and 5 psychosocial problems.

Results.?The respondents (response rate 45.5%, 454 persons) experienced an average of 8 health problems. The most frequently occurring problems regarded bladder and bowel regulation, spasms, pain, oedema and sexuality. Except for oedema, these problems were also most often cited as the most important. The most disabling condition for both daily and social activities was pain. Few significant relationships were found between the prevalence of health problems and the level, completeness and duration of the injury or gender.

Conclusion.?Persons with SCI living in the community experience many health problems and limitations in daily activities and social life due to these problems. The occurrence of these problems does not diminish with increasing time after injury. This strongly emphasises the need for follow-up care.