利用Genescan分析TCR Vβ亚家族CDR3长度的方法检测AML的T细胞克隆性

目的 分析急性髓性白血病（ＡＭＬ）的Ｔ细胞克隆性，方法 利用反转－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法分析５例ＡＭＬ，８例正常人的外周血单个核细胞和Ｔ细胞株Ｊｕｒｋａｔ的Ｔ细胞受体ＴＣＲＶβ２４个亚家族的互补决定区３（ＣＤＲ３）长度，ＰＣＲ产物进一步进行基因扫描（ｇｅｎｅｓｃａｎ）和核苷酸序列分析，结果 ＲＴ－ＰＣＲ分析显示８例正常人外周血单个核细胞除Ｖβ２０外，存在各Ｖβ亚家族的Ｔ细胞，而５例病人则仅     

非小细胞肺癌患者肿瘤浸润性淋巴细胞中T细胞克隆性增殖

目的：分析非小细胞肺癌（ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）病人肿瘤浸润性淋巴细胞（ｔｕｍｏｒ－ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ,ＴＩＬ）的Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖβ２４个亚家族基因的克隆性增殖及分布情况。方法：肺腺癌症人１例,术中取新鲜肺癌组织,肺癌组织经处理后分别与自身肿瘤细胞共同培养３．５天和７天。１０例健康人、Ｔ细胞株Ｊｕｒｄａｔ和Ｂ共同培养３．     

利用TCRVβ家族CDR3长度分析检测HCL和c-ALL的克隆性增殖T细胞

目的推介检测分析Ｔ细胞克隆性增殖的新方法,探讨判别恶性肿瘤免疫状态的新途经。方法应用ＲＴ－ＰＣＲ检测Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖβ２４个亚家族的互补决定区３（ＣＤＲ３）长度,并经基因扫描（ｇｅｎｅｓｃａｎ）分析检测３例多毛细胞白血病（ＨＣＬ）和１例普通型急性淋巴细胞白血病（ｃ－ＡＬＬ）病人外周血的Ｔ细胞克隆性。结果４例病人的部分Ｖβ家族的扩增产物出现单峰（单克隆）或—主峰（寡克隆）图像,而正常对照的全部ＰＣＲ产物呈多峰（多克隆）图像。结论ＨＣＬ和ｃ－ＡＬＬ病人外周血中存在克隆性生殖Ｔ细胞,可能是宿主对白血病抗原的一种直接反应。该特点可作为微小残留病变（ＭＤＲ）的检测指标     

利用TCRVβ家族CDR3长度分析检测HCL和c—ALL的克隆性增殖T细胞

推介检测分析Ｔ细胞克隆性增殖的新方法，探讨判别恶性肿瘤免疫状态的新途径。方法应用ＲＴ－ＰＣＲ检测Ｔ细胞受体Ｖβ２４个亚家族的互补决定区３长度，并经基因扫描分析检测３例多毛细胞白血病和１例普通型急性淋巴细胞白血病病人外周血的Ｔ细胞克隆性。     

TCRVβ基因谱系分析在检测肿瘤病人T细胞克隆性中的研究

利用ＲＴ－ＰＣＲ和基因扫描等分析方法，通过对ＴＣＲ Ｖβ２４个基因谱的ＣＤＲ３长度分析，检测Ｔ细胞的克隆性，是近年国外新开展的特殊检测方法。本文着重介绍该方法在肿瘤病人中的研究和应用前景。     

抗人小细胞肺癌T细胞受体嵌合基因的克隆

目的克隆人小细胞肺癌抗体／Ｔ细胞受体嵌合基因。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术将人小细胞肺癌单克隆抗体的变区ＶＨ、ＶＫ与Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）恒区Ｃα、Ｃβ进行拼接，构建成ＶＨＣβ、ＶＫＣα嵌合ＴＣＲ，并分别克隆至ｐＭＡＭ、ｐＸＴ１真核表达载体。结果应用ＰＣＲ中重叠延伸剪接（ＳＯＥ）方法，能简化基因拼接步骤；该嵌合基因的克隆有助于对肿瘤免疫治疗新途径的探索。     

基因扫描分析一例T—NHL病人外周血的T细胞克隆性

Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）重排时，由于ＶＤ，ＤＪ区之间可有不同数量和序列的核苷酸插入（Ｎ区），故形成一可变的区域（ＶＮＤＮＪ区），称为互补决定区３（ＣＤＲ３）。不同重排（不同克隆）时，其ＣＤＲ３长度不同［１］，利用这一特点，采用基因扫描分析方法检测ＴＣ...     

两种双标记细胞系的构建及其检测具复制能力逆转录病毒 …

本实验分别以逆转录病毒载体ＬＸＳＮ（含内启动子）和ＧＣＥＮ（含ＩＲＥＳ元件）构建了含β－半乳糖苷酶基因（ＬａｃＺ）和新霉素磷酸转移酶基因（Ｎｅｏ＾Ｒ）的两种双标记细胞系ＬＧ－３Ｔ３和ＧＣ－３Ｔ３，并观察比较了两种细胞在标记拯救实验中检测有复制能力的逆转录病毒（ＲＣＲ）的灵敏度的差异，结果表明两种细胞系均可用于标记拯救，其中ＧＧ－３Ｔ３检测ＲＣＲ的灵敏度比ＬＣ－３Ｔ３高１００倍，为提高标记拯救实验的     

多聚阳离子对非病毒载体转移效率的影响*

目的：制备Ｔ淋巴瘤ＴＣＲＶβ核酸疫苗。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出人Ｔ淋巴瘤细胞Ｊｕｒｋａｔ的ＴＣＲ　Ｖβ基因片段,并将其重组入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３。用重组表达载体转染ＳＰ２／０细胞,在ｍＲＮＡ水平上检测其表达。再用ｐｃＤＮＡ３和重组载体分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,收集抗血清,用免疫组化技术检测抗体产生情况。结果：扩增出ＴＣＲ Ｖβ的基因片段,测序结果证实其序列与已发表的一致。并构建出重组表达载体ｐｃＤＮＡ３－ＴＣＲ Ｖβ。该质粒转染到 ＳＰ２／０细胞,可在ｍＲＮＡ水平上检测到其表达。在用ｐｃＤＮＡ３－ＴＣＲＶβ免疫的小鼠抗血清中检测到抗Ｊｕｒｋａｔ细胞 ＴＣＲ Ｖβ的抗体。免疫组化结果表明,该血清不与表达 ＴＣＲγδ的人Ｔ淋巴瘤细胞发生反应,而与转染该基因的ＳＰ２／０细胞产生强阳性反应。正常小鼠血清与ｐｃＤＮＡ３免疫的小鼠血清与Ｊｕｒｋａｔ细胞不产生显色反应。结论：所制备的Ｔ淋巴瘤ＴＣＶβ核酸疫苗能有效地诱导机体产生体液兔疫反应。     

抗体导向酶——前药疗法的研究和应用进展

目的：制备Ｔ淋巴瘤ＴＣＲ－Ｖβ核酸疫苗。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出人Ｔ淋巴瘤细胞Ｊｕｒｋａｔ的ＴＣＲ Ｖｐ基因片段,并将其重组人真核表达载体ｐｃＤＮＡ３。用重组表达载体转染ＳＰ２／０细胞,在ｍＲＮＡ水平上检测其表达。得用ｐｃＤＮＡ３和重组载体分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,收集抗血甭,用免疫组化技术检测抗体产生情况。结果：扩增出ＴＣＲ Ｖβ的基因片段,测证实其序列与已发表的一致。并构建出重组表达载     

非小细胞肺癌p16基因突变的初步研究

为了解非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）ｐ１６基因突变的情况,本研究应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测了２４例ＮＳＣＬＣ肿瘤组织中ｐ１６基因外显子２的突变情况,现将结果报告如下。１　材料与方法２４例ＮＳＣＬＣ肿瘤组织及同一病例非肿瘤肺组织均为住院病例手术切除标本,并经病理证实。按常规方法提取ＤＮＡ。ＰＣＲ反应在ＰＥ９６００热循环仪中进行,扩增ｐ１６基因第２外显子,引物序列：　　ＰＳ１：５′－ＡＣＡＡＧＣＴＴＣＣＣＴＴＣＣＧＴＣＡＴＧＣ－３′ＰＳ２：５′－ＴＣＴＧＡＧＣＴＴＴＧＧＡＡＧＣＴＣＴＣＡＧ－３′循…     

间变性大细胞淋巴瘤EB病毒基因表达产物的检测及其意义

目的：了解间变性大细胞淋巴瘤与埃泼斯坦－巴尔（ＥＢ）病毒的关系。方法：采用原位杂交及免疫组化ＬＳＡＢ法对１２例间变性大细胞淋巴瘤（ＡＬＣＬ）进行ＥＢＶ编码的ＲＮＡ（ＥＢＥＲｓ）及ＥＢＶ潜伏膜蛋白（ＬＭＰＩ）和潜在膜抗原检测。结果：本组１２例ＡＬＣＬ中ＥＢＥＲｓ阳性率为２５％（３／１２）,１２例ＡＬＣＬ ＬＭＰ１检出率为８．３％,ＥＢＮＡ２检出率为０（０／１２）;１２例ＡＬＣＬ免疫表型,８例为Ｔ源性     

毛细血管扩张性共济失调细胞放射敏感性的研究

目的 探讨是否毛细血管扩张性共济失调（ＡＴ）细胞互补基因（ＡＴＤＣ）具有抑制ＡＴ细胞放射敏感性的作用和Ｘ线照射后ＡＴ细胞信号传导系统－ＰＫＣ－δ蛋白表达的改变。材料与方法 ＬＭ２１７为ＳＶ４０转化的正常人成纤维基质细胞。ＰＢ０６－１为ＳＶ４０转化的ＡＴ病人的成纤维基质细胞。实验分ＬＭ２１７和ＰＢ０６－１±四环素（１μｇ／ｍｌ）３个组，分别照射不同剂量，求Ｄ０、α、ＳＦ２值，利用抗－ＰＫＣ－δ和抗－     

原发性非小细胞肺癌的P^16基因变异

采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术，对２７例原发性非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的癌组织标本进行了Ｐ＾１６基因外显子２的缺失和突变的检测，结果发现６例基因缺失和３例基因突变，且Ｐ＾１６基因的变异多发生在ＮＳＣＬＣ的晚期。结论Ｐ＾１６基因的变异在ＮＳＣＬＣ的形成和发展中起重要作用。     

APL患者外周血TCR VβT细胞克隆性增生特点

目的了解急性早幼粒细胞白血病（APL）患者TCR Vβ亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法利用RT—PCR和基因扫描技术分析21例APL患者外周血单个核细胞的TCR Vβ24个亚家族基因的CDR3长度,10例正常人作为对照。结果21例患者外周血T细胞所表达的Vβ亚家族数量差别很大,2～21个Vβ家族不等,其中,以Vβ2（71．4％）,Vβ15（61．9％）和Vβ5（57．1％）出现频率较高,而Vβ10,和Vβ14出现频率最低（14．3％）。除2例外,患者外周血均可检测到某些Vβ亚家族的克隆性T细胞,主要为Vβ12,Vβ21和Vβ23克隆性T细胞。结论APL患者外周血Vβ亚家族T细胞的倾斜性分布特点,并存在克隆性增生的T细胞,这可能是机体T细胞受白血病细胞相关抗原的刺激作用而引起机体产生相应的特异性免疫反应。     

PCR技术检测儿童急性淋巴细胞白血病TcRγ基因重排

应用ＰＣＲ技术检测２０例急性淋巴细胞白血病ＴｃＲγ基因（ＶγＩ，Ｊγ＿（１－２））重排，其扩增产物的长度为４００ｂｐ左右。初治和复发的１３例患儿中有７例检出ＴｃＲγ基因重排，其中复发的３例患儿均有ＴｃＲγ基因重排，完全缓解的７例患儿中有４例检出ＴｃＲγ基因重排，此４例患儿目前继续维持治疗，尚无复发之临床表现。ＴｃＲγ基因重排几乎存在于全部的Ｔ－ＡＬＬ和大部分Ｂ－ＡＬＬ中，其稳定性强。对ＴｃＲγ基因重排的检测可用于协助急淋患儿的诊断及长期监测。进一步研究对指导治疗，判断预后和发病机理的研究有重要意义。     

CD44V6在非小细胞肺癌中的表达及其预后意义

应用免疫化Ｓ－Ｐ方法对６２例有５５年随访资料的非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织进行ＣＤ４４Ｖ６的检测，以探讨其在ＮＳＣＬＣ组织中的表达及其预后的意义。测得ＮＳＣＬＣ的Ｄ４４Ｖ６阳性表达率为６９．３％，和组织分型无明显相关；ＣＤ４４Ｖ６阳性表达和ＮＳＣＬＣ的临床分期、淋巴结构转移以及３年、５年术生生存率有关（Ｐ〈０．００５￣０．０５）。结果还表明ＣＤ４４Ｖ６强阳性表达者均为〉６ｃｍ的肺癌。提示ＣＤ４４     

Langerhans细胞,T—淋巴细胞浸润与宫颈癌患者临床,病理和预？…

为探讨中晚期宫颈癌组织中Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ细胞（ＬＣ），Ｔ－淋巴细胞（Ｔ－ｃｅｌｌ）的浸润与组织学分级及临床，预后的关系，用ＬＳＡＢ免疫组分方法，观察了１１３例宫颈组织，其中鳞癌９３例，腺癌１２例，正常宫颈组织８例，随访存活１０ａ以上５５列１ａ内死亡５０例，结果Ｓ－１００蛋白阳性的ＬＣ突起沿着癌组织之间的间隙伸入与癌组织紧密连接，宫颈鳞癌１，２级ＬＣ浸润阳性率４４％，Ⅲ级阳性率为２３．３％，（Ｐ     

LICC的抗癌活性及其对外周血B细胞和T细胞亚群的影响

为了寻找较ＬＡＫ、ＴＩＬ细胞更为优越的抗癌活性细胞，研究了淋巴因子诱导的细胞毒细胞（Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄＣｙｔｏｔｏｘｉｃＣｅｌｌ，ＬＩＣＣ）的抗癌作用及其对荷癌机体免疫功能的影响。实验结果显示，ＬＩＣＣ能够有效地抑制荷瘤ＢＥＲＨ－２肝癌ｗｉｓｔａｒ大鼠腹水的产生及其癌肿的扩散。荷瘤鼠外周血Ｔ细胞亚群动态监测结果显示，ＬＩＣＣ能够有效地阻止荷瘤鼠外周血Ｔ总、Ｔｈ细胞的下降，抑制Ｔｓ细胞的升高。从实验的第３周开始，两组间的Ｔｈ、Ｔ总细胞水平有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；而ＰＦＣ、ＱＨＳ测定结果提示，ＬＩＣＣ对机体体液免疫的影响甚微。     

食管癌与郎汉斯细胞和T细胞定理的相关性研究

目的 探讨食管癌患者癌组织和癌旁间质中Ｌｃ、Ｔｃ的密度与组织学分类、生物学行为及与预后的关系。方法 采用Ｓ－１００、ＣＤ３抗体和免疫组织化学ＡＢＣ方法，对２４９例原发食管癌分别标记观察癌巢内和癌旁质中Ｌｃ、ｃ的开矿、颁特点和密度。结果 Ｔｃ阳性细胞阳性定位在细胞核和细胞质，不均质褐色颗粒。Ｔｃ细胞性细胞阳性定位在胞膜呈棕黄色。癌巢内Ｌｃ数量与肿瘤分化程度、浸润深度淋巴结转转移呈正相关，与患者生存期