神经营养因子酪氨酸激酶受体B对人永生化成骨细胞hFOB1.19恶性转化细胞体外侵袭力的影响

目的研究神经营养因子酪氨酸激酶受体B(neurotrophic tyrosine kinase receptor B,TrKB)对恶性转化人永生化成骨细胞hFOB1.19体外侵袭力的影响,探讨TrKB在骨肉瘤侵袭和转移机制中发挥的作用。方法RT-PCR和免疫荧光细胞染色检测hFOB1.19恶性转化细胞和SaOS-2骨肉瘤细胞中TrKB的mRNA和蛋白表达水平;进一步研究hFOB1.19恶性转化细胞中TrKB的功能,处理组hFOB1.19恶性转化细胞加入特异性酪氨酸激酶抑制剂K252a处理24h,非处理组加入DMSO作对照,倒置相差显微镜下观察细胞形态;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;actin免疫荧光细胞染色检测细胞微丝骨架。结果TrKB在hFOB1.19恶性转化细胞中mRNA和蛋白表达水平均明显高于SaOS-2骨肉瘤细胞(P0.05);K252a处理组hFOB1.19恶性转化细胞和未处理组相比,细胞变圆、聚集甚至发生融合,侵袭能力明显减弱(P0.01),微丝回缩变短,排列紊乱。结论人永生化成骨细胞hFOB1.19恶性转化细胞中TrKB的高表达可促进该细胞的体外高侵袭力;该受体被阻断后,可能通过改变细胞微丝骨架结构从而降低细胞的体外侵袭力;TrKB可能在骨肉瘤侵袭和转移机制中起着促进作用。     

葡萄球菌核酸酶样结构蛋白1/SLC7A11抑制铁死亡对骨肉瘤发生发展的影响

目的 探讨葡萄球菌核酸酶样结构蛋白1(SND1)对骨肉瘤细胞生物学功能的影响,及其通过SLC7A11调控骨肉瘤细胞铁死亡的作用机制。方法 检测人成骨细胞hFOB1.19以及骨肉瘤细胞系Saos-2、U2OS、HOS和143B中SND1的表达水平。采用小干扰RNA敲减骨肉瘤细胞HOS和143B中SND1的表达(si-SND1),采用CCK8法、细胞克隆形成实验、细胞迁移和侵袭实验探究SND1的表达对骨肉瘤细胞生物学功能的影响;调控骨肉瘤细胞中SND1以及SLC7A11基因的表达,探究SND1通过SLC7A1基因对骨肉瘤铁死亡介导的肿瘤细胞凋亡的影响。结果 骨肉瘤细胞Saos-2、U2OS、HOS和143B中SND1 mRNA和蛋白的表达水平显著高于人成骨细胞hFOB1.19(P均<0.01)。与对照组比较,si-SND1转染显著降低HOS和143B细胞中SND1的表达水平(P均<0.01),且细胞活性显著降低,克隆形成数量显著减少,细胞迁移和侵袭能力显著降低(P均<0.001)。铁死亡诱导剂Erastin促进骨肉瘤HOS和143B细胞凋亡,而抑制剂Ferrostatin...     

人永生化成骨细胞hFOB1.19恶性转化的研究

目的 建立人胚永生化成骨细胞系(hFOB1.19)的恶性转化模型, 作为骨肉瘤癌变过程细胞分子生物学研究的模型.方法 通过克隆形成率实验确定N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG)对hFOB1.19细胞转化浓度后,以MNNG作启动剂,佛波酯(12-0-Te-tradecanoyl phorbol 13-acetate, TPA)作促进剂对hFOB1.19细胞进行转化,90 d后通过细胞形态、DNA含量分析、软琼脂集落形成试验和裸鼠体内致瘤试验鉴定细胞恶性转化程度.结果 经MNNG和TPA协同处理hFOB1.19细胞90 d后,细胞中出现形态异常的转化灶,转化灶细胞失去接触抑制; 高倍体细胞数,转化组(81.08%) 高于对照组(55.03%);软琼脂克隆形成率明显增加;转化细胞在裸鼠皮下成瘤,病理组织学证实为低分化骨肉瘤.结论 模拟人体细胞发生恶性转化的过程,建立了人胚永生化成骨细胞系的恶性转化模型.     

骨肉瘤细胞中端粒酶逆转录酶mRNA的表达及意义

目的研究不同骨肉瘤细胞中人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA成分的表达情况。方法用全基因组芯片检测人骨肉瘤细胞U2-OS、MG-63、SAOS-2及人成骨细胞hFOB1．19中hTERTmRNA表达;用逆转录PCR、实时定量PCR法检测人宫颈癌细胞株HeLa、人骨肉瘤细胞U2-OS、MG-63、SAOS-2及人成骨细胞hFOBl．19中hTERTmRNA表达。结果全基因组芯片法显示MG-63、SAOS-2、U2-OS、hFOB1．19细胞系中hTERTmRNA表达强度分别为0．9、-0．1、-0．8、11．4,各细胞系均处于相对低表达水平;荧光实时定量PCR法显示MG-63、Hela细胞系中hTERTmRNA相对表达水平分别为1．00±0．08和2．13±0．11,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论hTERTmRNA在骨肉瘤各细胞系中表达率较低,端粒延伸替代机制可能在骨肉瘤端粒维持方面发挥重要作用。     

人骨肉瘤组织中抑癌基因P27蛋白的表达

目的探讨人骨肉瘤组织中P27蛋白的表达及其与骨肉瘤发生、发展和病理分型的关系.方法采用免疫组化SP法,检测10例骨软骨瘤组织和30例骨肉瘤组织(骨母细胞型14例,软骨母细胞型5例,纤维母细胞型8例,混合型3例;高分化7例,低分化23例)中P27蛋白的表达情况.结果骨肉瘤组织中P27蛋白阳性表达率为33.33%(10/30),低于骨软骨瘤中的80%(8/10)(P＜0.05).骨肉瘤高分化组P27蛋白阳性表达率为71.43%(5/7),高于低分化组的21.74%(5/23)(P＜0.05).骨肉瘤各病理亚型间P27蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P＞0.05).结论P27蛋白表达与骨肉瘤发生、发展密切相关,可作为判断骨肉瘤恶性程度的一个指标.     

miR-132通过降低HMGA2的表达抑制骨肉瘤细胞迁移、侵袭及上皮间质转化

目的：研究微小RNA-132（miR-132）对骨肉瘤细胞迁移和侵袭能力的影响及其机制。方法：利用实时定量PCR（qRT-PCR）检测骨肉瘤细胞系U2OS和HOS及人成骨细胞系hFOB1.19中miR-132的表达水平。分别向HOS及U2OS细胞转染miR-132模拟物和抑制物,以过表达或敲低细胞内miR-132的表达,利用qRT-PCR验证转染效率。采用Transwell实验、qRT-PCR及Western blot检测过表达和敲低miR-132对骨肉瘤细胞迁移、侵袭及上皮间质转化的影响。通过对Targetscan网站进行检索并利用荧光素酶报告基因实验探究HMGA2为miR-132的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测miR-132对HMGA2表达的调控作用。结果：与人成骨细胞系hFOB1.19相比,miR-132在骨肉瘤细胞中的表达水平显著降低（P＜0.05）;向U2OS细胞转染miR-132模拟物后,细胞miR-132的表达水平显著增加（P＜0.01）;过表达miR-132后,U2OS细胞的迁移和侵袭能力显著降低,E-cadherin表达增加,Vimentin表达降低（P＜0.05）;向HOS细胞转染miR-132抑制物后,细胞miR-132的表达水平显著降低（P＜0.01）;敲低miR-132后,HOS细胞的迁移和侵袭能力显著增强,E-cadherin表达降低,Vimentin表达增加（P＜0.05）;生物信息学检索及荧光素酶报告基因证明HMGA2基因为miR-132的靶基因。过表达miR-132可明显降低骨肉瘤细胞中HMGA2的表达,而敲低miR-132可明显增加骨肉瘤细胞中HMGA2的表达（P＜0.05）。结论：miR-132在骨肉瘤细胞中低表达,miR-132可通过抑制HMGA2的表达抑制骨肉瘤细胞的迁移、侵袭及上皮间质转化。     

miR-99a抑制物对骨肉瘤细胞生物行为学的影响

目的:探索miR-99a在骨肉瘤中的表达情况及其对骨肉瘤细胞生物学行为特性的影响。方法:收集7例骨肉瘤组织及瘤旁骨组织,RT-PCR检测并比较miR-99a表达情况;RT-PCR技术检测miR-99a在骨肉瘤细胞系143B、MG-63和U2OS中的相对表达量,以人成骨细胞系hFOB1.19作为对照比较;RT-PCR检测hepG2、lovo、A549和MCF-7中的miR-99a相对表达量,以143B作对照比较。培养人骨肉瘤细胞系143B,瞬时转染miR-99ainhibitor后,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,划痕试验检测细胞迁移,Transwell小室法检测细胞侵袭,Western Blot检测RECK、MMP-2、MMP-9蛋白的表达情况。结果:miR-99a在7例骨肉瘤组织中的相对表达量(0.81±0.06)要明显高于瘤旁骨组织(0.48±0.06)(P<0.01)。3组骨肉瘤细胞系miR-99a表达量均高于人成骨细胞hFOB1.19,差异有统计学意义(P<0.01);骨肉瘤细胞系中miR-99a相对表达明显高于四种非骨肉瘤细胞系(P<0.05)。miR-99ainhibitor转染组细胞增殖速率显著减慢,低于inhibitor-NC组和空白组(P<0.05);转染组早期凋亡和晚期凋亡均未明显增加(P>0.05);转染组细胞迁移能力明显受到抑制;转染组143B细胞穿过小室底膜的数目明显低于inhibitor-NC组和空白组(P<0.05);转染组RECK蛋白表达上调,MMP-2和MMP-9蛋白表达下调。结论:miR-99a在骨肉瘤组织和细胞系中呈现高表达,下调miR-99a能抑制骨肉瘤细胞系143B增殖、侵袭和转移能力,其机制可能是通过调控RECK/MMP-2蛋白表达而实现的。     

藤黄酸对骨肉瘤中端粒酶逆转录酶和P53蛋白的影响

目的 研究藤黄酸对骨肉瘤(HOS)中端粒酶逆转录酶(hTERT)和P53蛋白的影响,为藤黄酸治疗HOS的临床应用提供理论依据.方法 以0.125、0.25、0.5、1、2、4、8μmol/L剂量的藤黄酸分别作用于对数生长期的HOS细胞,用CCK-8法测定细胞存活率,通过免疫组化SP法测定hTERT、P53蛋白的表达情况,应用生物医学影像分析软件Image Pro Plus和Image J对免疫组化图片进行半定量分析.结果 随着藤黄酸作用时间的延长和浓度的增高,HOS细胞存活率降低;随着藤黄酸作用时间的延长,hTERT的表达减弱,P53蛋白的表达明显增强.结论 在藤黄酸作用下,藤黄酸剂量越高,作用时间越长,HOS细胞存活率越低;HOS细胞存活率越低,hTERT表达越少,P53蛋白表达越多;hTERT与P53蛋白两者属非同步关系.     

P53蛋白和增殖细胞核抗原在骨肉瘤中的表达及其与预后的关系

目的探讨骨肉瘤组织中P53蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)表达状态之间及两者与预后的关系.方法采用免疫组化染色(SP法)对40例骨肉瘤活检标本,分别进行P53蛋白、PCNA表达的检测.结果P53蛋白阳性率为55.0%;PCNA指数范围5%～96%,平均56.83%±29.80%;P53蛋白的阳性率与PCNA指数呈正相关(P＜0.01);P53蛋白、PCNA表达与肿瘤的大小存在正相关(P＜0.05);生存组与死亡组P53蛋白表达和PCNA指数均有显著差异(P＜0.01或0.05);预后分析提示P53蛋白、PCNA高度表达的病人预后差,但两者并非独立的预后指标.结论P53蛋白与PCNA的表达之间有明显相关性,P53蛋白和PCNA表达对骨肉瘤病人的预后有明显影响.     

腮腺恶性肿瘤P53、P63 表达关联及临床意义

目的: 探讨P53、P63 蛋白的表达与腮腺恶性肿瘤的发生发展,生物学行为的相关性。方法: 收集内
蒙古医科大学附属医院和青岛口腔医学院口腔颌面外科2006 ～ 2016 年腮腺恶性肿瘤癌以及癌旁组织存档蜡块
标本40 例。标本经资深病理专家确诊,并具有完整的临床资料,证实术前均未经放化疗。采用免疫组化S－P 法
检测P53、P63 蛋白的表达,采用SPSS 13．0统计软件进行统计分析,应用χ² 检验,P＜0．05具有显著性差异,有统
计学意义。结果: 1．P53 蛋白在腮腺恶性肿瘤癌组织中的表达均高于癌旁组织,两者有显著性差异( P＜0．05) ,其
表达与恶性度有关,而与病人性别,年龄,淋巴结转移无关。2．P63 蛋白在腮腺恶性肿瘤癌组织中的表达均高于
癌旁组织,两者有显著性差异( P＜0．05) ,其表达与病人性别,年龄,淋巴结转移,恶性度无关。3．腮腺恶性肿瘤的
癌组织中P53、P63 蛋白的表达互相间无显著性差异( P＞0．05) 。结论: P53、P63 蛋白在腮腺恶性肿瘤病人癌组
织中呈高表达,P53 蛋白表达并与生物学行为有关。P53、P63 蛋白有可能在腮腺恶性肿瘤的发生过程中发挥一
定的作用,对腮腺恶性肿瘤的诊断可提供重要参考价值。     

帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响

目的：研究帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法： Western 印迹检测骨肉瘤细胞株(MG-63,Saos-2和U2OS)及正常人成骨细胞株hFOB1.19中DJ-1和第10号染色体上缺失的 磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted from chromosome 10,PTEN)基因的表达。DJ-1 siRNA处 理人骨肉瘤细胞后,采用Western印迹检测DJ-1的蛋白表达水平;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细 胞存活率;膜联蛋白V(annexin V)-异硫氰酸荧光素(fl uorescein isothiocyanate,FITC)/碘化吡啶(propidium iodide,PI)双染 检测细胞凋亡;Transwell侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移水平。结果：与hFOB1.19细胞比较,骨肉瘤细胞DJ-1蛋 白表达水平显著升高(均P<0.05),其中U2OS细胞升高最为显著(P<0.01)。DJ-1 siRNA可显著降低U2OS细胞中DJ-1蛋白 表达水平、降低细胞存活率、促进细胞凋亡、抑制细胞侵袭和迁移水平,以及增加PTEN蛋白表达水平(均P<0.05)。 另外,与hFOB1.19细胞比较,PTEN在骨肉瘤细胞中的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论：DJ-1可抑制人骨肉瘤 细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞侵袭和迁移水平,其机制可能与增加PTEN蛋白的表达水平有关。     

P16和PCNA在骨肉瘤中的表达及临床意义

目的：研究P16和增殖细胞核抗原（PCNA）在骨肉瘤中的表达及其与临床病理参数的关系,探讨两者在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法：应用免疫组织化学方法（SP）对10例正常骨组织和71例骨肉瘤组织中的P16与PCNA蛋白进行定量检测,并结合临床资料进行分析。结果：①P16在骨肉瘤组织中表达的阳性率明显低于正常骨组织（P<0.05）,PCNA在骨肉瘤组织中表达的阳性率明显高于正常骨组织（P<0.05）;②P16表达与骨肉瘤的组织学分级、预后有关（P<0.05）,与组织学类型、临床分期无关（P>0.05）。PCNA表达与骨肉瘤的预后有关（P<0.05）,与临床分期、组织学分级及组织学类型无关（P>0.05）。③P16与PCNA表达呈负相关关系(r_s=－0.58,P<0.05)。结论：P16及PNCA在骨肉瘤的发生、发展和转移过程中起着重要作用,与骨肉瘤的预后有关。     

P14ARF和PCNA在骨肉瘤中表达及其意义

目的:探讨P14ARF和增殖细胞核抗原(PCNA)在骨肉瘤中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测52例骨肉瘤中的P14ARF和PCNA表达,并以15例骨软骨瘤作为对照,与临床病理参数进行比较分析。结果:P14ARF在骨肉瘤的阳性表达率为26.9%(14/52),在骨软骨瘤为73.3%(11/15),差异有统计学意义(P<0.01);PCNA在骨肉瘤的阳性表达率为84.6%(44/52),在骨软骨瘤为13.3%(2/15),差异亦有统计学意义(P<0.01);P14ARF和PCNA在骨肉瘤的表达与患者年龄、性别、组织类型及民族均无相关性(P>0.05)。结论:P14ARF和PCNA表达与骨肉瘤的发生、发展有关,其可作为诊断骨肉瘤及评价其预后的辅助指标。     

miR-125b-5p通过负调控RAB3D基因表达抑制骨肉瘤细胞增殖与迁移

目的 探讨 miR-125b-5p 调控 RAB3D 在骨肉瘤增殖与迁移中的作用机制。方法 通过 qRT-PCR 检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系（MG63、HOS）中miR-125b-5p的表达水平。骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化;通过生物信息学软件预测miR-125b-5p可能调控的靶基因为RAB3D;通过Western blot检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系（MG63、HOS）中RAB3D的表达水平;骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过Western blot及qRT-PCR实验检测骨肉瘤细胞中RAB3D mRNA及蛋白表达水平;并在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染升高或降低RAB3D的表达,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤增殖和迁移的变化;随后在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染同时升高miR-125b-5p和RAB3D的表达量,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化。结果 qRT-PCR结果表明在骨肉瘤细胞（MG63、HOS）中miR-125b-5p的表达明显下调（P<0.05）。3种生物信息学软件预测RAB3D是miR-125b-5p可能调控的靶基因。qRT-PCR、Western blot结果显示,miR-125b-5p 表达量升高,骨肉瘤细胞（MG63、HOS）中 RAB3D 的蛋白表达量下降（P<0.05）;miR-125b-5p 表达量降低,骨肉瘤细胞（MG63、HOS）中RAB3D的蛋白表达量下降（P<0.05）,而RAB3D的mRNA水平没有发生变化。细胞增殖及迁移实验结果显示,miR-125b-5p与RAB3D对细胞增殖及迁移的影响相反,而同时在骨肉瘤细胞内升高miR-125b-5p与RAB3D的表达量,RAB3D对骨肉瘤细胞增殖及迁移的影响在重新升高miR-125b-5p表达量时被阻断（P<0.05）。结论 miR-125b-5p在转录后水平通过调控RAB3D的表达抑制了骨肉瘤细胞的增殖和迁移。     

胃癌组织P53、P63蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的：探讨P53、P63蛋白表达及细胞凋亡在胃癌发生发展中的可能机制。方法：选择57例手术切除的胃癌及胃癌旁组织,用免疫组化方法检测组织中的P53、P63蛋白表达,同时用Tunel方法检测胃癌组织中的凋亡细胞。结果：胃癌组织P53、P63蛋白表达率显著高于胃癌旁组织（P〈0.05）;低、未分化型腺癌表达率显著高于高、中分化型腺癌（P〈0.05）;有淋巴转移显著高于无转移组（P〈0.05）;P53、P63高表达的癌组织,细胞凋亡指数减少,早期胃癌低于晚期胃癌（P〈0.05）。结论：胃癌组织P53、P63蛋白高表达,可能延缓细胞凋亡;细胞凋亡机制障碍可能是胃癌增生失控的基础。     

miR-4306通过下调SATB2表达抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移与侵袭

目的: 研究miR-4306在骨肉瘤细胞中的表达及其对骨肉瘤细胞生物学行为的影响。方法: 选取人成骨细胞hFOB 1.19和骨肉瘤细胞Saos-2、MNNG/HOS CI #5,采用qRT-PCR检测miR-4306表达水平。将miR-4306 mimics和阴性对照分别转染至骨肉瘤细胞Saos-2和MNNG/HOS CI #5,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移及侵袭,蛋白质免疫印迹检测细胞内上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition, EMT）标志蛋白表达水平。通过在线靶基因预测网站Targetscan、Starbase预测miR-4306靶基因可能为富含AT序列特异性结合蛋白2（special AT rich sequence binding protein 2, SATB2）,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。将miR 4306 mimics、LV SATB2共转染至骨肉瘤细胞中,检测细胞增殖、迁移、侵袭以及EMT标志蛋白表达水平变化。结果: 与人成骨细胞hFOB 1.19比较,骨肉瘤细胞Saos 2、MNNG/HOS CI #5中miR-4306表达明显降低（P均＜0.01）。转染miR-4306 mimics后,骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力下降,N-钙黏蛋白、血管内皮生长因子表达水平显著降低,E 钙黏蛋白表达水平显著升高（P＜0.05或＜0.01）。SATB2是miR-4306下游的直接靶标;与miR-4306 mimics+LV-NC组比较,miR-4306 mimics+LV-SATB2组部分逆转miR-4306对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移和EMT的影响。结论: miR-4306在骨肉瘤细胞中呈低表达,其可通过下调SATB2表达抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。     

Nanog mRNA在骨肉瘤类肿瘤干细胞中的表达和意义

目的：观察骨肉瘤类肿瘤干细胞中Nanog基因的表达和意义．方法：用无血清培养法从骨肉瘤细胞株U2-OS和MG-63中分离培养悬浮细胞球,免疫磁珠分选Stro-1阳性细胞,反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测Stro-1阳性细胞、Stro-1阴性细胞及悬浮生长细胞中NanogmRNA的表达．结果：Stro-1阳性细胞和悬浮细胞NanogmRNA表达水平为1．69±0．14和1．56±0．18,均高于Stro-1阴性细胞的表达水平（0．19±0．35,P〈0．05）．随着培养时间的延长,悬浮细胞球NanogmRNA的表达比早期悬浮细胞球有所下降（P〈0．05）．结论：骨肉瘤类肿瘤干细胞高度表达NanogmRNA,该基因可能有助于骨肉瘤类肿瘤干细胞自我更新和维持其未分化状态．     

Expression and significance of P53 protein and MDM-2 protein in human gliomas

Background  P53 is one of the most studied tumor suppressors in the cancer research, and over 50% of human tumors carry P53 mutations. MDM-2 is amplified and/or overexpressed in a variety of human tumors of diverse tissue origin. The aim of this study was to examine the expression of P53 protein and MDM-2 protein in gliomas, and to investigate the relationship between the expression of the two proteins and the histopathological grades of glioma. The relationship between MDM-2 protein expression and P53 protein expression was also analyzed.

Methods  The expression of P53 protein and MDM-2 protein was immunohistochemically detected using monoclonal antibodies in 242 paraffin embedded tissues, including 30 normal brain tissues from patients with craniocerebral injury and 212 tissues from patients with primary glioma (grade I–II group: 5 cases of grade I, 119 cases of grade II; and grade III–IV group: 53 cases of grade III, and 35 cases of grade IV).

Results  The P53 positive rate was significantly higher in the glioma groups than in the control group (P <0.0001). The P53 positive rate was significantly higher in glioma tissues of grade III–IV than in glioma tissues of grade I–II group (P=0.001). The MDM-2 positive rate was significantly higher in glioma groups than in the control group (P <0.0001). There was no significant difference in the MDM-2 positive rate between the two glioma groups (P=0.936). The expression of P53 protein was not related to expression of MDM-2 protein (P=0.069)

Conclusions  Overexpression of P53 protein might be related to the occurrence and progression of glioma. Overexpression of MDM-2 protein may play an important role in glioma tumorigenesis, but may not be involved in glioma progression. The overexpression of MDM-2 protein was an early event in malignant transformation of glioma. MDM-2 may be a key player in glioma in its own right.

     

人骨肉瘤抗失巢凋亡细胞的生物学特性研究

目的 获得人骨肉瘤抗失巢凋亡细胞,了解其生物学特性.方法 采用本室建立的人永生化成骨细胞(hFOB1.19)恶性转化细胞株(转化细胞),用抗黏附培养法,模拟脱离基质情况,获得抗失巢凋亡细胞.电子显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪观察悬浮培养后不同时相点细胞的形态学改变和凋亡率.MTT法、Transwell小室分别检测细胞增殖情况和细胞的迁移能力.结果 形态学观察可见到典型的凋亡细胞,流式细胞仪检测细胞悬浮后24、48、72 h的凋亡(PI染色)情况,凋亡率逐渐升高.抗失巢凋亡细胞再次悬浮同时相凋亡率与转化株相比下降;抗失巢凋亡细胞较对照组(转化细胞)的细胞增殖能力增强,迁移能力增强,转化细胞差异有统计学意义(P＜0.05).结论 经过14 d的悬浮培养处理后,获得的人骨肉瘤抗失巢凋亡细胞小仅抗失巢凋亡能力有所增强,增殖能力和迁移能力也有增强.     

膀胱癌组织P53表达的检测及其临床意义

目的探讨肿瘤抑制基因P53蛋白在膀胱癌组织中的异常表达并分析其临床意义。方法应用免疫组织化学ABC方法检测72例膀胱癌组织标本中P53蛋白的表达水平并结合随访,观察其预后。结果膀胱癌组织P53蛋白表达的阳性率为47.22%(34/72),不同病理分期及分级的膀胱癌组织P53阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05),P53蛋白表达与膀胱癌的浸润程度和分化程度呈正相关。结论P53蛋白的表达在膀胱癌的浸润转移中起重要作用,P53表达与膀胱癌组织浸润、分化程度、生存期及预后密切相关。