透明质酸钠-溴化十六烷基吡啶缔合物体系的共振瑞利散射光谱及其应用

在pH 4.3的Britton-Robinson缓冲溶液中,透明质酸钠和溴化十六烷基吡啶各自单独存在时,共振瑞利散射(RRS)强度非常弱,但当两者反应形成离子缔合物时,RRS大大增强并产生新的RRS光谱,最大RRS峰位于335 nm处.透明质酸钠在0.1～3.0 μg/ml浓度范围内与RRS强度成正比.据此,建立了共振瑞利散射光谱法测定透明质酸钠,检测限为29ng/ml.     

小檗碱对培养大鼠心肌细胞胞内游离Ca2+的作用

利用Fura-2技术和AR-CM-MIC阳离子测定系统,直接观察了小檗碱对培养大鼠心肌细胞胞内[Ca²⁺]i的影响。结果显示:小檗碱可明显升高心肌细胞静息[Ca²⁺]i且具饱合性,维拉帕米和CoCl₂对其有一定的抑制作用;小檗碱与高K⁺,高Ca²⁺,去甲肾上腺素,哇巴因合用比单用上述激动剂更能明显增高[Ca²⁺]i;维拉帕米对其有抑制作用;在胞外无外Ca²⁺和无外Ca²⁺,外K⁺,外Na⁺时,小檗碱30～200μmol·L^-1仍能升高静息[Ca²⁺]i,维拉帕米只对前者有一定抑制作用。结果提示:小檗碱可能通过促胞外Ca²⁺内流和胞内Ca²⁺释放等途径有限度地增高心肌细胞内游离Ca²⁺浓度,显示强心作用。     

在体单向肠灌流模型研究小檗碱及其在复方配伍环境中的大鼠肠吸收特性

本实验主要考察药物浓度、肠段、pH、P-糖蛋白 (P-glycoprotein, P-gp) 及Na⁺依赖型葡萄糖转运体 (Na⁺-dependent glucose transporter, SGLT1) 对小檗碱肠吸收的影响, 并探索复方配伍环境中小檗碱的肠吸收情况。实验以酚红为标示物, 采用大鼠在体单向肠灌流模型, 运用高效液相色谱法考察小檗碱单体 (36.70、46.17和92.33 μg·mL⁻¹)、黄连解毒汤模拟体系 (主要指标成分单体混合物: 小檗碱 + 黄芩苷 + 栀子苷, 其中小檗碱浓度为92.33 μg·mL⁻¹) 及黄连解毒汤全方 (小檗碱浓度为92.33 μg·mL⁻¹) 中小檗碱在大鼠各肠段的吸收变化情况。结果表明: 小檗碱在一定浓度范围内 (20～100 μg·mL⁻¹), 部分大鼠小肠吸收速率参数 (K_a) 无显著性差异, 提示药物的吸收机制可能为被动扩散, 其转运过程可能受SGLT1和P-gp的影响; 单体混合物和全方中小檗碱在各肠段的K_a和有效渗透系数 (P_eff) 值均有显著性增加 (P < 0.05)。说明小檗碱在整个肠段均有吸收, 具有广泛的吸收窗, 其中结肠段吸收较好; 配伍对小檗碱的大鼠肠吸收特性有一定影响, 较单体而言, 单体混合物和全方灌流时小檗碱在小肠中吸收更好。     

小檗碱对培养大鼠神经细胞内游离Ca2+的影响

以Fura-2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用AR-CM-MIC阳离子测定系统,直接测定了体外培养的新生大鼠神经细胞内游离钙([Ca²⁺]i)值,并观察了小檗碱(Ber)的影响。结果表明,Ber对神经细胞静息[Ca²⁺]i无明显影响,Ber1～100μmol·L^-1能剂量依赖地抑制去甲肾上腺素和H₂O₂引起的[Ca²⁺]i升高,其IC₅₀分别为39.9和17.9μmol·L^-1。高剂量Ber(10～100μmol·L^-1)能抑制高K+引起的[Ca²⁺]i升高。姐果提示,Ber对去甲肾上腺素,高K⁺及H₂O₂引起的[Ca²⁺]i升高的抑制作用可能是其抗脑缺血作用机制之一。     

克拉霉素的极谱催化波及其应用

目的建立灵敏快速测定克拉霉素的新方法。方法基于氧化剂存在时克拉霉素产生的极谱催化波,用线性单扫描极谱法快速测定克拉霉素。结果在0.24 mol·L^-1 KH₂PO₄-Na₂HPO₄ (pH 6.81)支持电解质中，克拉霉素于-0.79 V (vs SCE)电位处产生1个还原波。加入过二硫酸钾后，该还原波峰电流增加约20倍，峰电位基本不变，产生一极谱催化波。其二阶导数峰电流i_p″与克拉霉素的浓度在4.0×10^-7-5.0×10^-5mol·L^-1呈良好线性关系(r=0.999 1,n=10)，检出限为2.0×10^-7 mol·L^-1。结论该方法可用于药剂中克拉霉素含量的测定。     

阿霉素在纳米钴修饰电极上的电化学行为及其应用

采用NaBH₄还原法制备了钴纳米粒，将其固定于氧化铟锡(ITO)电极上，首次制成了纳米钴修饰电极(NpCo/ITO)，并研究了阿霉素(adriamycin，ADM)在NpCo/ITO上的电化学性质。用循环伏安法(CV)、扫描电子显微镜(SEM)和能量色散谱(EDS)等对纳米钴修饰电极表面进行了表征。在纳米钴修饰电极上，阿霉素(ADM)在0.01 mol·L^-1 KH₂PO₄-K₂HPO₄溶液(pH 8.0)中，出现还原峰，峰电位为-0.67 V(vs Ag/AgCl),峰电流与ADM浓度在1.0×10^-8～2.0×10^-6 mol·L^-1呈线性关系，检测限为5.0×10^-9 mol·L^-1。循环伏安法研究表明，该体系属于具有吸附性的不可逆过程，NpCo/ITO对ADM的电化学还原过程产生较大的促进作用。     

小檗碱与大黄酸沉淀作用的毛细管电泳法

目的研究大黄酸和小檗碱沉淀反应的热力学和动力学性质，为深入研究中药复方泻心汤和芍药汤提供依据。方法用毛细管电泳法测定在不同条件下沉淀反应溶液中两组分的平衡浓度，研究沉淀反应的热力学和动力学。结果沉淀中两组分摩尔比1∶1，20 ℃时溶度积常数k_sp=［B］［R］=(3.29±0.19)×10^-9mol²·L^-2。沉淀反应为吸热过程，k_sp受温度的影响不大。沉淀反应在混合时很快发生，然后是沉淀的陈化过程。结论中药复方泻心汤和芍药汤在煎煮过程中产生的来自于大黄蒽醌和生物碱的沉淀有一定的溶解度。毛细管电泳采用加大进样量后用峰高定量的方法有助于提高简单样品测定结果的重现性。     

槐果碱对HERG钾通道电生理功能的影响

HERG(human ether-a-go-go-related gene)钾通道在心律失常的发生及治疗中具有重要作用， 因此已成为近些年来的研究热点。本研究应用全细胞膜片钳技术记录在HEK(human embryonic kidney) 293细胞上稳定表达的HERG钾通道的电流和动力学曲线(激活、 失活、 复活和去活化)来研究不同浓度槐果碱对HERG电流及动力学曲线的影响， 以了解槐果碱抗心律失常的作用机制。结果表明， 槐果碱浓度依赖性地抑制HERG时间依赖性电流(I_step)及其尾电流(I_tail)。在0 mV时， 10、 30、 100及300 μmol·L^-1槐果碱对I_step的抑制率分别为(10.7±2.8)%、 (11.3±5.5)%、 (47.0±2.3)%及(53.7±2.5)%， 对I_tail的抑制率分别为(1.1±3.0)%、 (17.1±3.3)%、 (32.7±1.9)%(P<0.05， n=12)及(56.0±2.4)%(P<0.05， n=13)。100 μmol·L^-1槐果碱作用后失活时间常数减小， 失活速率变快；复活时间常数在大部分指令电压下明显减小(P<0.01， n=12)，复活速度加快；瞬时失活时间常数减小(P<0.05， n=12)；稳态激活、去活化无明显改变。由此可看出，槐果碱通过影响通道的失活过程抑制HERG钾电流，使得心肌细胞复极时间延长，改善快速性心律失常。     

星点设计法优化盐酸小檗碱树脂复合胃黏附给药系统的研究

本文以离子交换树脂(IER)作为载体吸附盐酸小檗碱，通过包衣将其制成胃黏附微囊，并以胃黏附微囊的载药量，胃滞留时间和体外释药时间作为评价指标，对处方进行优化。考察不同型号载体与不同浓度、温度和pH值的药物溶液对IER载药量的影响；以卡伯姆934与IER的比例(X₁)、丙烯酸树脂(Eudragit)与IER的比例(X₂)、Eudragit RL与Eudragit RS的比例(X₃)为自变量，以制剂累计释放量85%的时间点(Y₁)、制剂在大鼠胃体外黏附滞留百分比(Y₂)为因变量，通过星点设计—效应面法优化胃黏附包衣处方。优化后载药工艺为在37 ℃、pH 5左右条件下，用IRP88离子交换树脂对1.0 mg·mL^-1盐酸小檗碱溶液载药；优化后的包衣液组成为X₁=0.75、 X₂=0.9、 X₃=0.6，所得制剂单位质量载药量高，可在300 min左右达到累计释放总量的85%，同时在所设计条件范围内胃黏附作用最强。     

醋酸甲羟孕酮的极谱行为及其分析应用

目的:研究醋酸甲羟孕酮(MPA)的电极反应机理,拟定了测定MPA的单扫描示波极谱法。方法:用单扫描示波极谱法、快速扫描循环伏安法、恒电位电解法、紫外分光光度法等多种技术进行研究。结果:在醋酸盐缓冲溶液中,MPA的C=C双键首先发生单电子单质子还原,产生了中间体自由基HMPA·。随后HMPA·可以单电子单质子方式进一步还原,形成产物H2MPA;同时也可以与中性MPA分子形成二聚体自由基HMPA·MPA·。在0.2mol·L^-1HAc—NaAc缓冲液中,MPA还原波的二阶导数峰电流iP″与其浓度C_MPA在2.0×10^-6～6.0×10^-5mol·L^-1范围内成线性关系,相关系数γ=0.998。结论:证实MPA的还原过程有中间体自由基参与。     

高灵敏共振瑞利散射技术快速检测药物中的美司那

目的 建立快速、准确测定药物中美司那的高灵敏共振瑞利散射新方法。方法 在BR 弱碱性溶液中,亮绿与美司那以静电作用生成的缔合物使共振瑞利散射(RRS)信号显著增强,RRS 强度在最大共振瑞利散射峰处与美司那的浓度有线性关系。检测波长：344 nm。结果 在pH 7.75 BR缓冲溶液中,亮绿与美司那结合生成绿色二元离子缔合物,产生以294 nm、344 nm 和468 nm 为特征峰的新共振瑞利散射光谱。最大共振瑞利散射峰位于344 nm,线性范围为0.006～0.41 mg/L,检出限为0.0052 mg/L。该法用于市售美司那药物中美司那的测定,加标回收率和相对标准偏差(RSD,n=6)分别为98.3%～103% 和1.6%～2.3%。结论 该法简便、快速,有高灵敏度和高选择性,用于实际药物中美司那的测定,结果满意。     

阿莫西林与甲基紫的共振瑞利散射及应用

目的建立测定痕量阿莫西林的共振瑞利散射法。方法以甲基紫作探针的共振瑞利散射法测定阿莫西林。结果在pH 9.90的Tris-HCl溶液中,阿莫西林和甲基紫相互作用后,共振瑞利散射显著增强,在376 nm处的△IRRS最强。阿莫西林的浓度在2.0×10-8~1.5×10-6 mol.L-1内与△IRRS成正比,检出限（3Sb/S）为0.042μg.mL-1。结论该法简便、快速、灵敏,可用于痕量阿莫西林的测定。     

共振瑞利散射光谱法测定血浆和尿样中的帕珠沙星

目的建立了共振瑞利散射光谱法测定血浆、尿样中帕珠沙星含量的新方法。方法于pH4.8～5.9的Britton-Robinson缓冲溶液中,帕珠沙星与钴(Ⅱ)形成阳离子配合物,其共振瑞利散射(resonance rayleigh scattering,RRS)十分微弱,但当其进一步通过静电引力和疏水作用与刚果红(congo red,CR)阴离子反应形成三元离子缔合物时,RRS出现新的共振瑞利散射光谱,其2个散射峰分别位于380和562nm处。结果在380nm处,帕珠沙星的质量浓度在0.031～3.18μg.mL-1范围内,与RRS强度有良好的线性关系,其检出限(3σ)为24.6ng.mL-1。结论该方法简单、快速,具有良好的选择性和重复性,可用于不同体液中帕珠沙星的测定。     

共振瑞利散射法测定微量唑来膦酸

建立了共振瑞利散射法测定微量唑来膦酸。在酸性条件下,唑来膦酸被破坏后产生的无机磷进一步与钼酸铵结合形成磷钼杂多酸,再与罗丹明B形成磷钼杂多酸-罗丹明B三元离子缔合物后共振瑞利散射急剧增加,并于370nm处有最大散射峰,唑来膦酸在6.25～100ng/ml浓度范围内线性关系良好,检测限为1.55ng/ml。     

A highly sensitive resonance Rayleigh scattering method for the determination of bleomycinA5 and bleomycinA2 with some halofluorescein dyes

In a weak acidic medium, bleomycinA(5) (BLMA(5)) and bleomycinA(2) (BLMA(2)) can react with halofluorescein dyes such as erythrosine (Ery), eosin Y (EY), eosin B (EB) and Rose Bengal (RB) by virtue of electrostatic attraction and hydrophobic force to form ion-association complexes, which can result in the large-scale enhancement of resonance Rayleigh scattering (RRS) and the appearance of new RRS spectra. The increments of scattering intensity (Delta I) were directly proportional to the concentrations of bleomycin (BLM) in certain ranges. The detection limits for BLMA(5) and BLMA(2) ranged from 0.017 to 0.062 microg ml(-1). The Ery system had the highest sensitivity and its detection limit (3sigma) was 0.017 microg ml(-1) for BLMA(5) and 0.018 microg ml(-1) for BLMA(2), respectively. Using Ery as a RRS probe, a new highly sensitive method for the determination of BLM anticancer drugs has been developed. It was applied in the determination of BLMA(5) and BLMA(2) in serum and urine samples. The recovery was from 99.0% to 103.0%. In this work, the RRS spectral characteristics of the binding products and the optimum conditions of the reaction were investigated. The mechanism of ion-association reaction and the reasons of enhancement of resonance light scattering were discussed.     

A sensitive and simple method for the determination of chondroitin sulfate a with crystal violet by resonance rayleigh scattering technique

Resonance Rayleigh scattering (RRS) spectra resulting from interaction between chondroitin sulfate A (CSA) and crystal violet (CV) have been investigated and applied to the determination of CSA. Though the intensity of RRS has proved very weak for CSA and CV, respectively, it can be greatly enhanced when both interact and form a supramolecular complex. A new RRS spectrum appears with a maximum scattering peak at 328 nm. In this paper, the optimum conditions of the interaction, influencing factors, and the relationship between the relative intensity of RRS (DeltaI) and the concentration of CSA have been thoroughly investigated. A new method of determination for the trace amount of CSA has been developed, which combines a simple procedure, high sensitivity, and a low detection limit of 4.8 ng/mL. It has been applied with satisfactory results to the determination of CSA in CSA injection samples and synthetic samples.     

共振瑞利散射光谱法测定片剂、人体尿液和血浆中培氟沙星的含量

目的 建立测定片剂、人体尿液和血浆中的培氟沙星含量的共振瑞利散射光谱方法.方法 在pH4.8～5.9 Britton-Robinson缓冲溶液中,培氟沙星(PEFX)可与钴(Ⅱ)反应形成配阳离子,其共振瑞利散射(RRS)十分微弱,但当该配阳离子进一步与酸性染料刚果红(CR)阴离子反应形成三元离子缔合物时,RRS显著增强,3个散射峰别位于278、380和560nm,以380nm为测定波长.结果 线性范围为0.133～3.33μg/mL(r=0.9993),检出限(3σ)为26.4ng/mL.结论 方法简单、快速、并有良好的选择性,可用于片剂、人体尿液和血清中培氟沙星的测定.     

聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖自组装纳米球的制备*

目的:合成聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖(monomethoxy poly(ethylene glycol)-grafted-chitosan,mPEG-g- CS),并制备自组装纳米球。方法:利用甲醛连接法将聚乙二醇单甲醚(monomethoxy poly(ethylene glycol),mPEG)接枝干壳聚糖(ehitosan,CS)分子,得到聚乙二醇(poly(ethylene glycol),PEG)改性的壳聚糖衍生物,并通过傅立叶红外光谱仪(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR),核磁共振仪(proton nuclear magnetic resonance,~1H-NMR)对产物进行结构表征;采用超声透析法制备自组装纳米球,并通过透射电镜(transmission electron microscopy,TEM),动态激光粒度分析仪(dynamic laser light scattering,DLLS)表征了纳米球的形态和粒径;以芘为荧光探针,通过荧光检测分析测定了mPEG-g-CS的临界胶束浓度(critical micellar concentration,CMC)。结果:通过FT-IR,~1H- NMR确证了接枝产物的存在;mPEG-g-CS在水溶液中能够自组装形成球状纳米胶束,平均粒径为250 nm。结论:通过甲醛连接法制备mPEG-g-CS,具有制备方法简捷、反应周期短、易操作的优点。利用该产物制备的纳米球有望成为长循环纳米药物载体。     

Development and characterization of sub-micron poly(D,L-lactide-co-glycolide) particles loaded with magnetite/maghemite nanoparticles

PURPOSE: The objective of this study is to develop biodegradable sub-micron poly(lactide-co-glycolide) particles loaded with magnetite/maghemite nanoparticles for intravenous drug targeting. METHOD: Sub-micron magnetite/PLGA particles (also called composite nanoparticles) were prepared by a modified double emulsion method (w/o/w) or by an emulsion-evaporation process (o/w). To optimize the composite nanoparticles formulation, the influence of some experimental parameters, such as types of magnetite/maghemite nanoparticles, volume of magnetite suspension and amount of polymer were investigated. The morphology, size and zeta potential of the magnetite/PLGA nanoparticles were determined. The magnetite entrapment efficiency and magnetite content were assessed by dosing iron in the composite nanoparticles. RESULTS: TEM photomicrographs showed that the composite nanoparticles were almost spherical in shape with a rather monomodal distribution in size. All composite nanoparticle formulations were found to have the mean diameter within the range of 268-327 nm with polydispersity index within the range of 0.02-0.15. Magnetite nanoparticles coated with oleic acid showed more efficient entrapment (60%) as compared to uncoated magnetite nanoparticles (48%). In both cases, when the volume of magnetite suspension increased, the magnetite entrapment efficiency decreased but the magnetite content increased. In addition, the two-fold rise in the amount of polymer did not significantly affect the composite nanoparticle characteristics except the magnetite content. Finally, none modification of the mean diameter of the composite nanoparticles was observed after storage for 3 months at 4 degrees C. CONCLUSIONS: Magnetite/PLGA nanoparticles were prepared and the influence of some process parameters have been assessed. Improvement of the magnetite entrapment efficiency are in progress and the magnetization properties of the composite nanoparticles will subsequently be tested.     

采用星点设计-效应面法优化及制备阿霉素白蛋白纳米粒

目的采用星点设计-效应面法优化阿霉素白蛋白纳米粒的制备工艺。方法采用去溶剂化-固化交联法制备阿霉素白蛋白纳米粒。以白蛋白质量浓度(X1:1ρ,g.L-1)、阿霉素的质量浓度(X2:2ρ,g.L-1)、pH值(X3)及白蛋白理论交联度(X4,%)为考察对象,以纳米粒平均粒径(Y1:d,nm)、zeta电位(Y2:V,mV)、载药量(Y3:w1,%)和包封率(Y4:w2,%)为评价指标,以四因素五水平的星点设计-效应面法筛选出最佳制备工艺;并采用透射电镜观察制得纳米粒的形态。结果优化后的处方工艺为:白蛋白质量浓度为17 g.L-1、阿霉素质量浓度为2 g.L-1、pH值为9、白蛋白理论交联度为125%。以此条件制得的纳米粒平均粒径为(151±0.43)nm,zeta电位为-(18.8±0.21)mV,载药量为(21.4±0.70)%,包封率为(76.9±0.21)%,均与预测值偏差较小。结论阿霉素白蛋白纳米粒的制备采用星点设计-效应面法设计并优化是可行的。