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1.
目的建立一种快速、简便、灵敏的蛋白质含量测定的新方法。方法含有巯基或二硫基的蛋白质与0.5 mol·L-1氢氧化钠、1.5×10-4 mol·L-1 Pb2+和0.02%四丁基碘化铵的混合溶液在沸水浴中反应5 min,采用单扫描极谱法,测定-0.66 V(vs SCE)处一价导数波高。结果牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)的浓度在7.5×10-10~3.0×10-7 mol·L-1与其波高呈线性关系,BSA和HSA检测限均为3.0×10-10 mol·L-1;溶菌酶(Lyso)的浓度在1.4×10-8~1.3×10-6 mol·L-1与其波高呈线性关系,Lyso的检测限为7.0×10-9 mol·L-1。结论该方法取样量少、体系简单、灵敏度高,可用于人血清样品中蛋白质含量的测定。  相似文献   

2.
水溶性金属卟啉的合成、表征及其清除有毒活性氧的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的合成并结构表征了4种水溶性金属卟啉配合物[5,10,15,20-四[4-(4′-吡啶-1)丁氧基苯基]金属卟啉溴化盐[锌卟啉(I)、铜卟啉(II)、锰卟啉(III)和钴卟啉(IV)],作为抗活性氧(O-2,H2O2,HO·)模拟酶。方法 核黄素-蛋氨酸光照测其清除O-2作用,H2O2氧化Vit C法测其催化H2O2的分解,Fenton-苯甲酸钠荧光法测其对HO·清除作用,小鼠肝匀浆法测其抗脂质过氧化作用。结果1.0×10-5~1.0×10-6 mol·L-1均具有良好的清除O-2作用;1.5×10-6~1.0×10-6 mol·L-1均具有分解H2O2作用;2.0×10-8~1.0×10-8 mol·L-1均具有清除HO·的功能;1.0×10-7 mol·L-1均可使脂质过氧化产物明显减少。结论合成4种水溶性金属卟啉配合物可作为抗多种活性氧(O-2,H2O2,HO·)模拟酶。  相似文献   

3.
张志洁  壮亚峰  鞠熀先 《药学学报》2004,39(11):925-928
目的研究阿西美辛对高锰酸钾-亚硫酸钠化学发光体系的增敏作用,建立阿西美辛的简便、快速测定新方法。 方法利用阿西美辛对高锰酸钾-亚硫酸钠化学发光体系的增敏作用,结合流动注射技术对其含量进行定量测定。 结果在1.0×10-2 mol·L-1 H3PO4 - 5.0×10-5 mol·L-1 KMnO4 - 4.0×10-4 mol·L-1 Na2SO3体系中,化学发光强度与阿西美辛浓度在1.0×10-7-1.0×10-5 mol·L-1呈线性关系,在3倍信噪比,阿西美辛的检出限为6.9×10-8 mol·L-1,对2.5×10-6 mol·L-1阿西美辛测定获得满意结果。结论该方法快速、简便、准确度好、灵敏度高、选择性好,对临床医学研究具有实际意义。  相似文献   

4.
西红花苷对牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
何书英  钱之玉  唐富天 《药学学报》2004,39(10):778-781
目的研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法以Fluo-3/AM作为Ca2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10-8,1×10-7,1×10-6 mol·L-1)均能明显抑制1×10-2 mol·L-1 H2O2引起的细胞内钙离子浓度的升高,其抑制率含钙条件下分别为34.1%, 57.1%和74.3%(P<0.01),无钙条件下分别为26.2%,32.1%和50.0%(P<0.01);在胞外无钙的条件下,西红花苷 (1×10-8,1×10-7,1×10-6 mol·L-1)能抑制70 mmol·L-1 CHCl3导致雷洛丁敏感钙池的释放,其抑制率分别为27.8%, 27.8%和50.0% (P<0.01)。结论西红花苷能抑制胞外钙离子的内流及内质网上钙离子的释放。  相似文献   

5.
目的 观察尼索地平(nifedipine,NIS)对KCl和去氧肾上腺素(phenylephrine,PHE)所致离体大鼠肺动脉收缩的作用,同时研究其对野百合碱诱导的肺动脉高压(pulmonary hypertention,PH)大鼠的影响。方法 ①采用离体血管实验法,以KCl和PHE在含钙离子和不含钙离子的K-H液中预收缩离体大鼠肺动脉环,观察NIS对血管收缩的影响。②取40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、NIS组和硝苯地平(NIF)组,每组10只,采用野百合碱(50 mg·kg-1)皮下注射建立大鼠PH模型,连续灌胃给药21 d。采用右心导管法测定mPAP、mRVP、maxPAP和maxRVP,并计算各组大鼠的RVHI和LI。结果 ①在含钙离子的K-H液中,NIS抑制KCl(20,40,60 mmol·L-1)和PHE(1×10-7,5×10-7,1×10-6 mol·L-1)所致血管收缩的IC50分别为0.87×10-8,1.41×10-8,8.32×10-8 mol·L-1和0.56×10-7,4.27×10-7,1.28×10-6 mol·L-1。在无钙离子K-H液中,NIS无抑制离体血管收缩的作用。②模型组大鼠mPAP、mRVP、maxPAP、maxRVP、RVHI和LI均显著高于正常组(P<0.01),NIS组和NIF组大鼠的上述指标均显著低于模型组(P<0.05)。结论 NIS有抑制大鼠肺动脉收缩的作用,对野百合碱诱导的大鼠PH有治疗作用。  相似文献   

6.
目的制作碳纳米管修饰电极,并研究己烯雌酚在该电极上的电化学行为。方法循环伏安法及线性扫描伏安法。结果与裸玻碳电极(GCE)比较,多壁碳纳米管修饰电极能显著提高己烯雌酚的氧化峰电流并降低其氧化电位。峰电流与己烯雌酚浓度在1×10-8~2×10-6 mol·L-1有良好的线性关系,检测限为2.5×10-9 mol·L-1。1×10-6 mol·L-1己烯雌酚溶液的相对标准偏差为2.9%。结论多壁碳纳米管对己烯雌酚的电化学氧化有明显的催化作用。  相似文献   

7.
大环内酯类抗生素麦迪霉素的电化学特性   总被引:3,自引:0,他引:3  
在K2HPO4,NH4Cl+NH3和NaOH的10%(v/v)乙醇水溶液中,除0.01mol·L-1以上NaOH液作为支持电解质外,麦迪霉素的伏安波皆为两个峰。峰A相当于它的甲醛基还原波,峰B为催化吸附氢波。溶液pH对两峰有强烈的影响。实验表明伏安波有吸附特性,且不可逆。两峰的ip与麦迪霉素的浓度成正比,线性范围分别为3×10-6~3×10-5mol·L-1和1×10-7~4×10-5mol·L-1,检测限为:1×10-6mol·L-1和5×10-8mol·L-1。可应用于麦迪霉素的定量测定。研究了两峰的特性和电极机理,测定了有关的物理常数。  相似文献   

8.
钾通道阻断剂部分抑制三氧化二砷诱导的HeLa细胞死亡   总被引:2,自引:1,他引:2  
目的研究钾通道阻滞剂对三氧化二砷诱导的HeLa细胞死亡的作用。方法采用MTT法评价HeLa细胞的存活情况,采用膜片钳技术记录HeLa细胞的电压依赖性钾电流。结果As2O3(5 μmol·L-1)孵育24 h引起显著的HeLa细胞死亡,As2O3(5 μmol·L-1)孵育24 h后存活的细胞表现明显的电压依赖性钾电流密度增加。+80 mV电压下,As2O3(5 μmol·L-1)孵育组电流密度(61±18) pA/10 pF(n=8)明显高于对照组(38±10) pA/10 pF(n=8,P<005)。As2O3诱导的HeLa细胞死亡可被共同孵育钾通道阻滞剂四氨基吡啶(3 mmol·L-1)或四乙基铵(5 mmol·L-1)所部分抑制。3 mmol·L-1四氨基吡啶或5 mmol·L-1四乙基铵对HeLa细胞无明显细胞毒作用。结论As2O3长期处理增加HeLa细胞的电压依赖性钾电流。As2O3诱导的HeLa细胞死亡可被钾通道阻滞剂四氨基吡啶或四乙基铵部分抑制。  相似文献   

9.
浮石修饰碳糊电极差示脉冲吸附伏安法测定盐酸普鲁卡因   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:建立一种新型化学修饰电极吸附伏安法测定盐酸普鲁卡因的分析方法。方法:在1-25 ×10-3mol·L-1 KH2PO4 和1-25×10-3mol·L-1 Na2HPO4 混合缓冲溶液(pH6-88,25 ℃) 中,用6% 浮石修饰碳糊电极,差示脉冲吸附伏安法测定盐酸普鲁卡因。结果:盐酸普鲁卡因的阳极峰电位为+ 0-98 V(vs.SCE),峰电流与盐酸普鲁卡因浓度在9-1×10- 7 ~2-6 ×10-5mol·L-1 范围内呈良好的线性关系,检测下限为5-0 ×10-8mol·L-1 ,回收率为95-2%~104-8% ,RSD为3-2% 。结论:本法快速、简便、准确、灵敏度高,直接用于盐酸普鲁卡因注射液的测定,得到满意的结果。  相似文献   

10.
熊中奎  王思本  郎娟 《中国药师》2014,(11):1793-1796
摘 要 目的: 研究鱼藤素对小鼠神经母细胞瘤细胞Neuro-2A (N2A)存活率及凋亡的影响。方法: N2A细胞以5×104·ml-1密度接种到细胞培养板中,1×10-8 mol·L-1鱼藤素处理后6,12,24,48,72 h等5个时间点上测定细胞存活率;加入鱼藤素0,1×10-11,1×10-10,1×10-9,1×10-8,1×10-7,1×10-6 mol·L-1等7个不同浓度干预48 h后测定细胞存活率。2×10-8 mol·L-1鱼藤素干预24 h,测定细胞匀浆中caspase 3活力。结果:5×104·ml-1 N2A细胞以含10%胎牛血清DMEM培养基培养,第48 h达到细胞生长曲线的峰值。1×10-8 mol·L-1鱼藤素干预24~72 h,时间依赖性显著降低N2A细胞存活率(P<0.05);在鱼藤素干预48 h时间点上,1×10-8~1×10-6·mol·L-1浓度范围内剂量依赖性可显著降低N2A细胞存活率(P<0.05),其IC50=1.6×10-8 mol·L-1。鱼藤素作用于N2A细胞24 h可显著提高caspase 3活力,约达到对照组的5.6倍。结论: 鱼藤素可时间依赖性且剂量依赖性降低N2A细胞存活率,可能与增加caspase 3活力有关。  相似文献   

11.
目的探讨注射用丹参总酚酸(冻干)(SLI)对人CYP450酶和P-糖蛋白体外抑制作用以及对大鼠CYP1A2和CYP3A体内诱导作用。方法①应用P450-GloTMCYP450检测试剂盒,通过化学发光法测定SLI和经典抑制剂对细胞色素P4501A2(CYP1A2),CYP2D6,CYP3A4,CYP2C19和CYP2C9的IC50值,通过比较SLI和经典抑制剂对相应细胞色素P450亚型的IC50值来判断SLI对人CYP450酶的体外抑制作用。②Wistar大鼠分别iv给予SLI 3,10和30 mg·kg-1和诱导剂苯巴比妥钠20 mg·kg-1,采用探针底物法,通过比较代谢产物的生成速率来评价SLI对大鼠CYP1A2和CYP3A的诱导作用。③应用ATP酶检测试剂盒,通过化学发光法测定ATP酶活性来评价SLI是否为P-gp的底物或抑制剂。结果①CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6和CYP3A4抑制剂的IC50与SLI对其的IC50进行比较(CYP1A2:0.12μmol·L-1vs 840μmol·L-1;CYP2C9:3.362μmol·L-1vs 704μmol·L-1;CYP2C19:3.236μmol·L-1vs 306μmol·L-1;CYP2D6:0.117μmol·L-1vs 2660μmol·L-1;CYP3A4:0.078μmol·L-1vs 1780μmol·L-1)。②与空白对照组(86.4±6.3)nmol·g-1.min-1相比,SLI 3,10和30 mg·kg-1组CYP1A2活性分别为83.4±6.6,82.5±4.0和(83.4±6.6)nmol·g-1.min-1。与空白对照组(16.1±0.9)nmol·g-1.min-1比较,SLI 3,10和30 mg·kg-1组CYP3A活性分别为15.7±0.6,15.9±0.7和(15.9±1.0)nmol·g-1.min-1,无显著性差异。③以临床血药浓度为依据设计的一系列浓度的SLI 0.0002,0.0006,0.002,0.006,0.017,0.052,0.156和0.468 g.L-1的ATP酶活性分别与空白对照组进行比较(5.8,5.3,5.8,5.5,5.8,5.2,,5.8,5.3,vs 5.75μmol·g-1.min-1),无显著性差异。结论SLI临床给药剂量既不能体外抑制人CYP1A2,CYP2D6,CYP3A4,CYP2C19和CYP2C9酶活性,也不能诱导大鼠CYP1A2和CYP3A,同时也不是P-gp的体外抑制剂或底物。  相似文献   

12.
中国人肝微粒体体外代谢奥美拉唑的酶促反应动力学   总被引:7,自引:0,他引:7  
赵莉  楼雅卿 《药学学报》1996,31(5):352-357
采用中国成人肝微粒体建立了体外孵育代谢奥美拉唑的酶促反应,应用反相HPLC法测定孵育体系中奥美拉唑的两种主要代谢物羟奥美拉唑和奥美拉唑砜的含量。该方法灵敏度高、简便、快速、可靠。实验结果表明,人肝微粒体主要通过羟化和S原子氧化代谢奥美拉唑。其羟化反应的最大反应速率(Vmax)和米氏常数(Km)分别为42.90 nmol·min-1·mg-1和6.49μmol·L-1,而S原子氧化代谢为6.63nmol·min-1·mg-1和11.80μmol·L-1。消旋美芬妥英、地西泮、去甲西泮及罂粟碱对奥美拉唑体外代谢的实验结果表明,上述药物对奥美拉唑的羟化代谢均有不同程度的抑制作用,其中美芬妥英、地西泮、去甲西泮为奥美拉唑羟化代谢的竞争性抑制剂,罂粟碱为反竞争性抑制剂。同时,这4种药物对奥美拉唑的S原子氧化代谢亦有一定的影响。  相似文献   

13.
以荧光染料DPH负载脑皮层突触体或细胞, 用MPF-4荧光分光光度计检测膜流动性; TBA比色法测定丙二醛(MDA)含量,观察褪黑激素(MT)对小鼠脑细胞膜流动性和MDA含量的影响. 结果显示MT(1或20 mg·L-1饮水中口服3个月,最后1个月再ip MT 0.5或2.0 mg·kg-1·d-1)能够提高老年小鼠脑细胞膜的流动性,MT 0.01-1.0 μmol·L-1拮抗氧化剂诱发的分离新生小鼠脑细胞膜流动性下降及部分拮抗其MDA含量增加. 结果说明,作为一种体内抗氧化激素, MT提高脑细胞膜流动性,降低脑细胞内MDA含量, 从而对神经元有保护作用,是其重要的抗衰老机理之一.  相似文献   

14.
通过测定[3H]胸腺嘧啶核苷([3H]TdR)参入和结晶紫染色法测定平滑肌细胞增殖,研究了溶血磷脂酰胆碱(LPC)刺激牛脑微血管平滑肌细胞(BCMSMC)增殖的细胞内信号转导途径. 结果显示,LPC能浓度依赖性(1 nmol·L-1-10 μmol·L-1)诱导BCMSMC摄取[3H]TdR,在LPC的浓度为10 μmol·L-1时作用达最大,cpm由366±142升至1761±296(P<0.01);LPC亦能浓度依赖性(1 nmol·L-1-10 μmol·L-1)诱导BCMSMC增殖,在LPC浓度为1 μmol·L-1时促增殖作用达坪值,A595 nm由0.060±0.009增至0.100±0.015(P<0.01). 丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂PD 98059(2-50 μmol·L-1),血小板衍生生长因子受体抑制剂酪氨酸磷酸化抑制剂AG 1296(2-50 μmol·L-1)以及蛋白质酪氨酸激酶抑制剂除莠霉素A(2-10 μmol· L-1)能浓度依赖性地抑制LPC的上述作用. 表明LPC能促进BCMSMC增殖,其细胞内信号转导与MAPK途径有关.  相似文献   

15.
目的研究六肽对兔血小板聚集活性的影响。方法采集健康家兔颈动脉血,以枸橼酸钠抗凝,用比浊法测其血小板在不同诱导剂诱导下聚集率。结果 1×10 5mol.L 1六肽,对兔ADP、花生四烯酸(AA)和凝血酶诱导的血小板聚集的抑制率分别为(66.22±1.40)%,(67.94±2.32)%和(58.18±4.67)%。六肽抑制兔ADP、AA和凝血酶诱导的血小板聚集的IC50分别为3.24×10 6mol.L 1,1.32×10 6mol.L 1和7.24×10 6mol.L 1。结论六肽在体外具有抑制兔血小板聚集的作用。  相似文献   

16.
二甲基阿米洛利对大鼠油酸性急性肺损伤的保护作用   总被引:1,自引:0,他引:1  
The effect of Na+/H+ exchange inhibitor dimethyl amiloride(DMA) on rat acute lung injury induced by oleic acid was studied. Five hours after administration (iv) of oleic acid (10 mL·kg-1), pulmonary coefficient, lung wet/dry weight ratio and protein content, lactic acid dehydrogenase(LDH) activity, total white blood cell(WBC) and polymorphonuclear leukocyte(PMN) in bronchoalveolar lavage(BAL) of rat were increased significantly. However, after pretreatment with DMA(0.2 mg·kg-1 iv) for 10 min, the pulmonary coefficient and lung wet/dry weight ratio were decreased from 1.12±0.06 to 0.87±0.05 and 5.8±0.5 to 4.5±0.3, respectively. The protein content, LDH activity, total WBC and PMN in BAL were also reduced from (1.69±0.15) g·L-1 to (1.05±0.13) g·L-1, (3.37±0.25) μmol·min-1·L-1 to (0.81±0.08) μmol·min-1·L-1, (4.3±0.9) ×106·L-1 to (2.4±0.8) ×106·L-1 and (2.4±0.4) ×106·L-1 to (1.6±0.4) ×106·L-1, respectively. These results suggest that activation of Na+/H+ exchange be involved in the acute rat lung injury induced by oleic acid and that inhibitor of sodium-hydrogen exchange prevent the rat lungs from this injury.  相似文献   

17.
赵宁  朱秀媛  程桂芳 《药学学报》1996,31(11):875-877
白三烯B_4放射受体结合测定方法的建立及其特性的分析赵宁,朱秀媛,程桂芳(中国医学科学院,中国协和医科大学药物研究所,北京100050)白三烯B4(leukotrieneB4,LTB4)是花生四烯酸(arachidonicacid)5-脂氧酶代谢产物...  相似文献   

18.
以自制的涂碳空白PVC膜电极为指示电极、四苯硼钠标准溶液为滴定剂,测试了26种药物的电位滴定曲线,进行了回收率和方法对比实验,获良好结果。本文还用三参数法处理了所有的电位滴定曲线,评价了不同滴定体系的灵敏度及其优劣次序。  相似文献   

19.
目的观察番荔枝总内酯对大鼠的毒性作用,初步探讨其毒性机制。方法将雄性SD大鼠随机分为溶剂对照、番荔枝总内酯7和14 mg·kg-1组,分别ig给药,每天1次,连续4周,末次给药1h后取血,处死大鼠。HE染色观察大鼠心、肝和肾组织病理变化;全自动生化分析仪检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和肌酸激酶(CK)水平;BCA法、分光光度法和荧光素法分别测定心、肝和肾线粒体中蛋白质浓度、线粒体复合物Ⅰ活性和ATP含量;荧光探针法检测组织中Ca2+和活性氧类(ROS)浓度。结果番荔枝总内酯14mg·kg-1组大鼠肝组织中央静脉周围细胞轻微肿胀;与溶剂对照组比较,血清ALT,AST,BUN和CK水平显著升高,分别由溶剂对照组的(50.0±1.4)U.L-1,(126±11)U.L-1,(6.13±0.15)mmol·L-1和(293±13)U.L-1升高到(59.0±2.6)U.L-1(P<0.05),(176±12)U.L-1(P<0.05),(12.9±2.05)mmol·L-1(P<0.01)和(480±97)U.L-1(P<0.05),血清Cr水平无明显变化。心、肝和肾组织线粒体复合物Ⅰ活性分别由溶剂对照组的(22.6±4.9),(72±10)和(34±4)μmo.lg-1蛋白.min-1降低到(7.5±1.7),(54±10)和(26±6)μmo.lg-1蛋白.min-1(P<0.05,P<0.01);心、肝和肾组织ATP含量由溶剂对照组的(10.4±2.1),(6.8±1.6)和(12.5±3.4)nmo.l L-1降低至(2.2±3.4),(3.4±1.2)和(5.5±1.1)nmol·L-1(P<0.05,P<0.01);心肌细胞中Ca2+和ROS浓度增加,荧光强度分别由7.37±0.64和14.8±4.1增加到9.06±0.08和110.0±19.0(P<0.05,P<0.01),肝和肾细胞内Ca2+和ROS浓度无明显变化。番荔枝总内酯7mg·kg-1组上述指标无明显变化。结论番荔枝总内酯对大鼠心、肝和肾具有一定的毒性,其作用机制可能是降低心、肝和肾组织中线粒体复合物I的活性和ATP含量,升高组织细胞内Ca2+和ROS浓度,引起组织细胞损伤。  相似文献   

20.
目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对鱼藤酮诱导的嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法将培养的大鼠PC12细胞分别加入EGCG1,5和10μmol.L-1预处理30 min后加入鱼藤酮250 nmol.L-1继续作用24 h。MTT比色法检测细胞存活率,Hoechst33258染色观察细胞核形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,JC-1染色检测线粒体膜电位变化。结果与鱼藤酮模型组存活率(77.0±1.3)%相比,EGCG1,5和10μmol.L-1组细胞存活率显著增加(P<0.05),分别为(79.8±2.3)%,(82.4±2.2)%和(88.3±2.0)%。Hoechst33258染色发现,EGCG组细胞核形态明显改善。与正常对照组比较,模型组细胞凋亡率增加8.2倍;与鱼藤酮模型组比较,EGCG组细胞凋亡率分别下降46%,25%和63%,差异具有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测鱼藤酮组凋亡率为33.8%,EGCG 1,5和10μmo.lL-1组的凋亡率下降至30.6%,14%和15.7%。与模型组相比,EGCG1,5和10μmol.L-1组线粒体膜分别增高了2.48,3.96和4.04倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 EGCG具有抑制鱼藤酮诱导的细胞凋亡作用,其机制可能与其稳定线粒体膜电位有关。  相似文献   

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