Fas/FasL、Bcl-2/Bax、Caspase-8在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用机制

目的:探讨肝细胞凋亡及其相关因素Fas/FasL、Bcl-2/Bax蛋白及Caspase-8 mRNA的表达在大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的作用.方法:采用改良高脂饮食建立大鼠NAFLD模型,以正常饮食设立对照组.HE染色观察肝脏脂肪变、炎症活动和纤维化程度,采用流式细胞仪法测肝细胞凋亡百分数;免疫组织化学法检测Fas、FasL、Bcl-2及Bax在肝组织中表达情况;实时荧光定量PCR法检测肝脏Caspase-8 mRNA的表达.结果:NAFLD模型组脂肪变性明显,纤维化和炎症活动度记分均显著高于正常对照组.流式细胞仪检测显示,与对照组比较,实验组大鼠肝细胞凋亡百分数增加,随造模时间延长凋亡率增加更明显(均P<0.01);免疫组织化学染色显示随着肝脏脂肪变加重,Fas、FasL蛋白染色加深,阳性细胞数增加;Bcl-2、Bax在对照组的表达均为散在弱阳性,实验组4、8、12wk阳性细胞数渐增加,并在脂肪变明显的部位着色深且随着脂肪肝的进展,Bcl-2/Bax比率进行性下降.实时荧光定量PCR法显示Caspase-8 mRNA表达量在高脂组中显著高于对照组(均P<0.01),且随肝脏脂肪变及炎症加重呈进行性上升.结论:在NAFLD发生过程中,肝细胞凋亡促进NAFLD大鼠病情进展;Fas、FasL、Caspase-8 mRNA相关调控蛋白的活化是引起NAFLD脂肪变性、炎症及纤维化的重要因素.细胞凋亡调节蛋白Bax、Bcl-2表达上调,二者表达的相对比例发生异常,这可能是NAFLD中肝细胞发生凋亡的重要原因之一.     

非酒精性脂肪性肝病伴胆石症的临床与病理学研究

目的分析非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）伴胆石症（GD）患者的临床特点;初步探讨NAFLD伴GD患者血液生化指标与肝脏病理学改变的关系。方法应用影像学和肝脏病理学检查将50例研究对象分为NAFLD伴GD组、单纯GD组和正常对照组。检测体重指数（BMI）、血压及肝、肾功能、血脂、血糖等血清生化指标;肝组织病理作HE和Masson染色。统计分析各组患者临床特征的差异,并对NAFLD伴GD患者血液生化指标与肝脏病理学检测作相关性分析。结果NAFLD伴GD患者具有较明显的代谢紊乱状况,将其血液生化指标与肝脏病理学改变作相关性分析后显示,TG与肝脏脂肪变呈正相关（P〈0.05）,LDL-C与肝纤维化程度呈正相关（P〈0.01）,HDL-C与肝内脂肪变程度呈负相关（P〈0.05）,与炎症程度呈负相关（P〈0.05）并与纤维化程度呈负相关（P〈0.01）。结论NAFLD伴GD患者具有较明显的脂代谢紊乱状况,并具有心血管事件的高危因素。血浆胆固醇相关指标可能为NAFLD伴GD患者肝内炎症及纤维化的预测因子。     

DKK3在非酒精性脂肪性肝病的作用研究

目的探讨Dickkopf-3(DKK3)在小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)形成中的意义。方法采用高脂饮食喂养C57BL/6雄性小鼠来构建NAFLD模型,通过检测肝功能、糖代谢变化、肝脏组织中脂质含量及肝脏病理学变化评估NAFLD模型是否成功;并用Western印迹方法检测肝脏组织中DKK3蛋白变化情况。结果高脂饮食组小鼠NAFLD相关指标均较对照组升高,差异有统计学意义(P0.05)。高脂饮食组小鼠肝脏中DKK3蛋白表达量较对照组明显下降,定量分析比较差异有统计学意义(P0.05)。结论DKK3在NAFLD小鼠肝组织中表达明显下降,提示DKK3涉及NAFLD的发生发展过程,并可能发挥一定的作用。     

合并非酒精性脂肪性肝病的HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者临床特征和肝组织中脂联素的表达

目的：研究合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的HBeAg阴性慢性乙型肝炎（CHB）患者临床特点及脂变对肝组织中脂联素表达的影响。方法：以组织学检查证实存在肝细胞脂肪变性的39例HBeAg阴性的CHB患者为脂变纽,同期接受肝组织学检查不伴有肝细胞脂肪变性的54例HBeAg阴性CHB患者为对照组,比较其临床特征的差异并通过多因素分析判断HBeAg阴性CHB患者合并NAFLD的有关因素。结果：单因素分析显示,脂变组男性比例、肥胖者比例、BMI、血清ALT、总胆固醇（TCh）、甘油三酯（TG）水平均高于对照组,两组比较差异有显著性意义（P=0．026,0．048,0．045,0．022,0．047和〈0．001）;多因素分析显示,男性及高血清TG水平是与对脂变有意义的影响因素,比值比OR（95％CI）分别为6．105（1．185,31．448）和17．364（3．060,98．536）,P=0．031,0．001。两组患者脂联素表达水平的差异无显著性意义;对照组患者肝脏炎症分级G1及G1以下者脂联素表达强于G2及G2以上者,P=0．026。结论：HBeAg阴性CHB合并NAFLD的发生是宿主代谢因素所致而非病毒因素影响的结果,脂联素可能是肝损伤的防护性因子。     

慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病动物模型的建立

目的 探索建立慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病动物模型的方法.方法 筛选16只先天感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的雏麻鸭饲养至3周龄,随机分为对照组和模型组,每组8只,分别予普通饲料及填饲高糖高脂饲料3周,并在造模前、造模2周、造模3周分别观察鸭体质量,血糖、血脂、转氨酶等生化指标,DHBV DNA载量的变化,同时造模结束后观察肝脏病理形态学变化和肝指数.结果 模型组鸭血糖(Glu)、血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、ALT、AST均高于对照组(P＜0.01),且造模后各项指标明显高于造模前(P＜0.01),模型组肝组织病理可见大量肝细胞脂肪变性;造模后2周、3周模型组DHBV载量比造模前有所下降,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 通过高糖高脂饲料填饲法成功建立乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病动物模型.     

高脂饮食性非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏PPAR-γ表达增强

目的　探讨过氧化物酶体增值物活化受体γ(PPAR-γ)及其亚型在高脂饮食所致非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脏的表达及其意义。方法　模型组SD大鼠给予高脂肪高胆固醇饮食饲养 ,分批于实验第 8、12、2 6、2 4周处死 ,同期设普通饮食饲养大鼠作对照。免疫组织化学和RT-PCR分别检测大鼠肝脏PPAR-γ的表达。结果　模型组大鼠第 8周呈现单纯性脂肪肝 ,第 12～ 2 4周从脂肪性肝炎进展为脂肪性肝炎伴肝纤维化。免疫组织化学和RT PCR显示 ,随着造模时间延长 ,肝脏PPAR-γ的表达逐渐增强。模型组肝脏PPAR-γ1mRNA表达于第 2 4周达到高峰 (与对照组相比升高 3 .5倍 ,P <0 .0 1) ,PPAR-γ2 mRNA表达于造模第 16周时达高峰 (较对照组升高 5 .8倍 ,P <0 .0 1)。相关分析显示 ,仅PPAR-γ2 mRNA与肝脂变程度之间关系密切 (r =0 .89,P <0 .0 5 )。结论　持续 2 4周的高脂饮食可以成功复制大鼠NAFLD模型 ,模型大鼠肝脏PPAR-γ表达增强 ,NAFLD大鼠肝细胞可能部分具有脂肪细胞的特征 ,即脂肪变的肝细胞发生成脂性改变     

乳清蛋白对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脂肪变的防治作用

目的观察乳清蛋白(WP)对大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的防治作用。方法将35只SD大鼠随机分成对照组、模型组和治疗组,后者是在给予高脂饲料喂养的同时加用WP液灌胃干预,6周后观察各组大鼠体重、肝重、肝指数、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)以及肝组织学改变。结果模型组大鼠肝组织病理学检查显示明显脂肪变,脂肪变积分为2.8±0.4,NAFLD活动度积分(NAS)为6.2±0.9,均明显高于对照组(0.8±0.5,P<0.01及0.9±0.7,P<0.01);动物体重、肝重、肝指数和生化指标均高于对照组,其中肝指数为3.5±0.2,ALT为42.4±7.5u/l,差别有统计学意义(P<0.01);与模型组比,治疗组动物体重和生化指标均有改善,其中ALT为34.8±5.6U/l和TG为0.2±0.1mmol/l,明显低于模型组(分别为42.4±7.5U/l,P<0.01和0.6±0.5mmol/l,P<0.05);肝细胞脂肪变积分为1.6±0.9,NAS为2.9±1.4,也明显下降(P<0.01)。结论 WP对NAFLD大鼠肝脂肪变有防治作用,可能与改善血脂代谢,减少肝脏脂质沉积以及抑制肝脏炎症反应有关。     

果糖诱导非酒精性脂肪性肝病小鼠动物模型的构建和评价

目的建立果糖诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠模型并评价其特征。方法给予C57BL/6小鼠30%(w/v)果糖水饲养8周,正常组给予蒸馏水饲养。记录小鼠的体质量,分别于第2、4、6和8周处死部分动物后测定肝脏重量并计算肝脏指数。采用试剂盒测定血清中葡萄糖、胰岛素并计算空腹胰岛素抵抗指数(FI-IR),同时测定血清脂质代谢相关生化指标。取小鼠肝脏,行油红O染色和HE染色进行组织病理学观察。结果与正常组相比,30%果糖可使小鼠的体质量、肝重量和肝脏指数显著增加(P0.05)。模型组小鼠的FI-IR持续升高,至第8周时为正常组的4.7倍,差异有统计学意义(P0.05)。高果糖促使小鼠血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)和游离脂肪酸(FFA)的含量较正常组显著增加(P0.05),血清中高密度脂蛋白(HDL-C)含量显著降低(P0.05)。组织病理学结果发现,模型组小鼠肝脏第2周即出现小脂滴,随着造模时间延长逐步扩大并在第8周肝脏出现明显的弥漫性大脂滴和脂肪变性。结论 30%高果糖饮食可以建立小鼠NAFLD模型,该模型在病理学表现、生化指标等方面与人类的发病特征相似,可用于单纯性果糖诱导NAFLD发病机制和药物治疗的研究。     

慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病患者临床及病理特征

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的临床病理特点。方法检测CHB合并NAFLD患者及CHB患者的体质指数、三酰甘油、ALT、AST、乙肝病毒标志物等检查结果,分析比较CHB合并NAFLD患者的临床及病理特征。结果 CHB并NAFLD患者腰围、胆固醇、低密度脂蛋白均显著高于单纯CHB患者（P=0.02;P=0.044;P=0.009）;而转氨酶水平及乙肝病毒载量无明显差异（P〉0.05）。病理结果显示慢性HBV感染者中约64%（32/50）伴随不同程度的肝脏脂肪变,其中体质指数高于24（肥胖数值）者占43.75%（14/32）。结论慢性HBV感染患者的肝脏脂变有较高比例,合并NAFLD的患者多数肥胖、血脂升高。应根据不同类型制定不同治疗方案。     

Bcl-2、Bax蛋白表达在非酒精性脂肪性肝病中的作用

目的: 探讨凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax表达在大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的作用.方法: 采用高脂饮食建立大鼠NAFLD模型, 以正常饮食设立对照组. HE染色观察肝脏脂肪变、炎症活动和纤维化程度, 采用Western blot检测Bcl-2、Bax在肝脏组织中的表达.结果: 实验组大鼠4 wk可见轻度脂肪变, 8 wk呈单纯性脂肪肝改变, 至12 wk肝小叶内肝细胞弥漫性脂肪变, 伴大量炎性细胞浸润, 个别出现肝纤维化. Western blot结果显示, 实验组大鼠4、8、12 wk肝组织Bax蛋白表达显著高于对照组(0.61±0.03, 0.78±0.03, 1.02±0.03vs 0.51±0.03, 均P <0.01), Bcl-2蛋白随着造模时间的延长, 表达逐渐下降(0.39±0.01, 0.28±0.01, 0.15±0.01 vs 0.52±0.01, 均P <0.01),Bcl-2、Bax两者比率逐渐降低, 尤以12 wk降低明显.结论: 在NAFLD发生过程中, 细胞凋亡调节蛋白Bax表达上调, Bcl-2表达减少, 二者表达的相对比例发生异常. 这可能是NAFLD中肝细胞发生凋亡的重要原因之一.     

丹泽降脂方防治大鼠非酒精性脂肪肝的实验研究

目的:研究丹泽降脂方对模型大鼠非酒精性脂肪肝的干预作用。方法:41只雄性W istar大鼠随机分成正常组、模型组和丹泽降脂方防治组、模型组和防治组给予高胆固醇高脂肪饮食喂养共8周以复制非酒精性脂肪肝模型,防治组同时给予丹泽降脂方灌胃。8周后处死大鼠收集标本,检测外周血ALT、AST、TB il、ALP、GGT活性,肝组织TG和血清TC含量,对肝脏组织进行HE染色、油红O染色。结果:丹泽降脂方能有效地减轻大鼠体重和肝重,明显减轻模型大鼠肝内脂肪沉积,改善肝细胞的脂肪性病理改变。结论:丹泽降脂方能够有效防治非酒精性脂肪肝的病理损伤。     

Correlation of liver biochemistry with liver stiffness in chronic hepatitis B and development of a predictive model for liver fibrosis

Aim: To correlate liver stiffness with demographical factors and routine liver biochemistry and to assess the predictive value of these as potential markers of fibrosis. Methods: Transient elastography was performed in 1268 chronic hepatitis B (CHB) patients. According to a previous validated study for CHB, liver stiffness of >8.1 and >10.3 kPa were used as cut‐off values for defining severe fibrosis and cirrhosis respectively. Results: Liver stiffness correlated positively with bilirubin, alkaline phosphatase (ALP), γ‐glutamyl transpeptidase (GGT), aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), globulin, α‐fetoprotein (AFP) and HBV DNA levels and negatively with albumin and platelet levels (P<0.05 for all correlations). From 13 parameters (age, sex, platelet, AST, ALT, GGT, AFP, albumin, globulin, bilirubin, ALP, HBV DNA and hepatitis B e‐antigen), four best parameters (AST, platelet, GGT and AFP) were used to derive a liver stiffness model. Using log (index)=1.44+0.1490(GGT)+0.3308 log (AST)−0.5846 log (platelets)+0.1148 log (AFP+1) to predict both severe fibrosis and cirrhosis had area under the receiver operating characteristics curve of 0.85. Conclusion: Routine liver biochemistry correlated well with liver stiffness in Asian CHB patients. A model using simple serum markers can predict liver stiffness, and further studies are required to validate the usefulness of these simple tests as non‐invasive markers of fibrosis in CHB.     

Characteristics of peripheral blood Gamma-glutamyl transferase in different liver diseases

Gamma-glutamyl transferase (GGT) is a marker of oxidative stress and cholestasis. Because of its low specificity, clinicians usually ignore its diagnostic value.To compare and analyze the clinical features of GGT in primary biliary cholangitis (PBC), drug-induced liver injury (DILI), alcoholic liver disease (ALD), and non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) from the perspective of different causes instead of the severity of the disease.We observed the distribution characteristics and the rate of abnormality of GGT in the above 4 diseases. The relationship between GGT and alanine aminotransferase (ALT), aspartate transaminase (AST), alkaline phosphatase (ALP), total serum bilirubin, triglyceride (TG), total cholesterol (TC), low-density lipoprotein cholesterol, high-density lipoprotein cholesterol was analyzed using Spearman correlation.The highest level of GGT was up to 1000.00 to 2000.00 U/L in PBC and DILI, and the highest level of GGT was more than 2000.00 U/L in ALD, yet the difference was not statistically significant (P > .05). The highest level of GGT was only about 200.00 U/L in NAFLD and was the lowest in 4 liver diseases. Also, GGT was positively correlated with ALP, TC in PBC and DILI. Also, in ALD, GGT was positively correlated with ALT, AST, ALP, TG, and TC. In NAFLD, GGT was positively correlated with ALT, AST, and TG.The abnormal GGT in PBC and cholestasis DILI was associated with cholestasis; in ALD, it was associated with oxidative stress and cholestasis, and in NAFLD, it was associated with oxidative stress. GGT levels had different characteristics in different liver diseases, which were closely related to the pathogenesis of liver diseases.     

代谢综合征与慢性乙型病毒性肝炎及非酒精性脂肪性肝病患者肝纤维化程度的相关性研究

目的 比较慢性乙型病毒性肝炎患者和非酒精性脂肪性肝病患者代谢综合征患病率,以及代谢综合征对慢性乙型病毒性肝炎患者和非酒精性脂肪性肝病患者肝纤维化进展的影响.方法 对2008年1月至2009年6月在我院就诊的136例慢性乙型病毒性肝炎患者和110例非酒精性脂肪性肝病患者进行回顾性分析,调查其代谢综合征的患病率,测定肝功能及病毒学指标,进行肝脏病理学检查.采用t检验和X~2检验进行统计学分析.结果 代谢综合征总的患病率为28.5%,非酒精性脂肪性肝病患者代谢综合征患病率显著高于慢性乙型病毒性肝炎患者(分别为49.1%和11.8%).肝纤维化分期为S_(0～1)、S_(2～4)的慢性乙型病毒性肝炎患者代谢综合征的患病率分别为3.1%和19.7%(P＜0.01),代谢综合征、体重指数、天门冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶及炎症程度均与其肝纤维化程度相关.在非酒精性脂肪性肝病患者中,非酒精性脂肪性肝炎患者代谢综合征患者率高于非酒精性脂肪肝(分别为55.4%和40.0%);纤维化分期为S_(0～1)、S_(2～4)的患者代谢综合征的患病率分别为36.2%和70.7%(P＜0.01);代谢综合征、丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶及明显炎症均与其肝纤维化严重程度相关.结论 非酒精性脂肪性肝病患者代谢综合征的患病率高于慢性乙型病毒性肝炎患者,这两类患者代谢综合征与肝纤维化程度相关.     

体外循环心脏不停搏心内手术对肝功能的影响

目的研究体外循环心脏不停搏及停跳手术对肝功能影响的差异。方法检测体外循环心脏不停搏心内直视手术患者及体外循环心脏停搏心内直视手术患者各50例手术前,转机30min,术后2h,1d,3d和7d的丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase,AST)、AST/ALT、碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)、γ谷氨酰转移酶(gammaglutamyltransferase,GGT)变化。结果体外循环心脏手术后患者的ALT、AST、AST/ALT、ALP、GGT均升高,不停搏手术患者的恢复较快。结论体外循环心脏手术对肝功能有影响,不停搏手术的影响较小。     

大鼠非酒精性脂肪性肝病与内质网应激关系的研究

目的 通过建立大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型,探讨内质网应激(ERS)在NAFLD中的作用.方法 36只雄性SD大鼠分为对照1组(n=8)、对照2组(n=8)、模型1组(n=10)和模型2组(n=10).对照组大鼠给予普通饲料,模型组大鼠则喂饲高脂饲料.分别于第12周末处死对照1组和模型1组,第20周末处死对照2组和模型2组大鼠.测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氮酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)水平.H-E和Masson染色观察肝组织脂肪变、炎症和纤维化的变化.实时定量PCR测定肝组织内GRP78、CHOP及proeaspase-12 mRNA表达情况.Western印迹法检测肝组织内procaspase-12和caspase-12蛋白的变化.结果 第12周末.模型1组大鼠ALT、AST、ALP、TC及LDL水平均较对照1组显著增高(P<0.01),而HDL水平显著降低(P<0.01);第20周末模型2组大鼠TC和LDL水平较模型1组显著增加(P<0.05).与对照1组相比,模型1组肝组织的脂肪变和炎症程度均明显增加(P值均<0.01);模型2组肝组织的脂肪变、炎症程度和纤维化分期较对照2组均明显增加(P值均<0.01),炎症程度和纤维化分期较模型1组明显加重(P值分别<0.05和0.01).模型组大鼠肝组织GRP78、CHOP及procaspase-12 mRNA水平在第12周末及第20周末时与对照组比较差异均无统计学意义(P值均>0.05).模型组caspase-12及其前体蛋白水平与对照组相比也无显著变化(P值均>0.05).结论 成功建立高脂饮食大鼠NAFLD模型.研究中未发现ERS,提示此模型中ERS诱导的肝脏损伤可能未参与NAFLD的发病机制.     

高压水动力法建立表面抗原表达缺失的乙型肝炎转染小鼠模型及初步评估

目的探讨HBsAg在小鼠体内模型中对宿主免疫应答调节及病毒感染慢性化中的作用。方法在已有高压水动力法转染pAAV-HBV1.2质粒建立乙肝小鼠模型的基础上,通过点突变技术引入终止密码子至pAAV-HBV1.2质粒上的HBsAg读码框,构建HBsAg无法转录的突变质粒,再利用该质粒构建HBsAg表达缺失的乙肝小鼠模型。通过比较原始质粒建立的乙肝模型小鼠,检测分析外周血中HBV抗原与DNA等病毒感染指标,比较肝脏病变和免疫细胞浸润情况。结果成功构建了HBsAg缺失的乙肝模型小鼠:在乙肝模型小鼠和HBsAg缺失突变的模型小鼠外周血中均能检测到4 COI/mL水平的HBeAg,两组小鼠没有差异,但只有乙肝小鼠体内能检测到102 COI/mL以上的HBsAg和103至106拷贝/mL的HBV DNA,HBsAg缺失的小鼠中无法检测到HBsAg和HBV DNA;动态监测显示HBeAg在乙肝和HBsAg缺失突变的两组小鼠中的阳性率均逐步降低,在HBsAg缺失突变组中降低的更明显,第8周时仅有20%的小鼠为HBeAg阳性,而此时未突变乙肝组的阳性率为60%;免疫组织化学结果显示:在阴性对照小鼠的肝脏结构较完整,未见聚集的浸润免疫细胞,而乙肝和HBsAg缺失的乙肝小鼠肝小叶结构均松散,乙肝小鼠肝脏中有聚集的浸润性免疫细胞,HBsAg缺失的小鼠肝脏缺少免疫细胞的聚集,却存在严重的肝细胞毛玻璃样变性。结论成功构建了HBsAg缺失的乙肝转染小鼠模型;并发现HBsAg在HBV完整病毒颗粒包装和出胞,以及肝脏病变和免疫细胞浸润过程中发挥了重要的作用。     

Saturated Fatty Acid Inhibits Viral Replication in Chronic Hepatitis B Virus Infection With Nonalcoholic Fatty Liver Disease by Toll-Like Receptor 4-Mediated Innate Immune Response

Background:

Chronic Hepatitis B (CHB) infection is common in patients with Non-Alcoholic Fatty Liver Disease (NAFLD). The replication level of Hepatitis B Virus (HBV) was inversely correlated with hepatic steatosis. Toll-Like Receptor (TLR) 4-mediated innate immunity plays a pivotal role in the occurrence of NAFLD and controls HBV replication.

Objectives:

This study aimed to investigate whether the TLR4-mediated innate immunity stimulates the pathogenesis of CHB in patients with NAFLD and to determine whether TLR4 plays a role in inhibiting HBV replication.

Materials and Methods:

The HBV transgenic mice were randomized into the HBV and HBV/NAFLD groups. HepG2.2.15 cells were treated with different concentrations (0 – 200 μM) of Stearic Acid (SA) to induce steatosis. The total RNA of the liver tissue was extracted for Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) detection, and immunohistochemistry or western blot was conducted for further validation. The Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) analysis was applied to evaluate the production of Interleukin 6 (IL-6), Tumor necrosis factor α (TNF-α) and Interferon β (IFN-β). Moreover, viral dynamics were analyzed using HBV DNA and HBV-related antigens (HBsAg and HBeAg).

Results:

Non-alcoholic fatty liver disease was induced in HBV-transgenic mice fed with High Fat Diet (HFD) for 8 - 24 weeks. Oil red-O staining positive droplets and the content of Triglyceride (TG) were increased in HepG2.2.15 cells treated with SA. TLR4, Myeloid differentiation factor 88 (MyD88), IL-6 and TNF-α expression levels were significantly higher in the HBV/NAFLD group and the steatotic HepG2.2.15 cells than those in their respective controls. Compared to the HBV group, significant reductions in serum levels of HBsAg, HBeAg, and HBV DNA titers occurred in the HBV/NAFLD group at 24 weeks, but the IFN-β level was remarkably increased. Similar data were also obtained from the steatoric HepG2.2.15 cells.

Conclusions:

Saturated Fatty Acids (SFAs) served as a potential ligand for TLR4 and activated TLR4 signaling pathway, which might be involved in the pathogenesis. Thus, SFAs can accelerate the mechanism of inhibiting HBV replication in CHB with NAFLD.     

慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病患者抗病毒治疗的疗效探讨

目的对慢性乙型肝炎（CHB）合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者抗病毒治疗疗效进行回顾性分析,探讨肝细胞脂肪变是否影响CHB患者抗病毒的疗效。方法收集2004年1月至2011年12月在本院进行抗病毒治疗的110例CHB患者,CHB合并NAFLD患者99例,采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA水平,用化学发光法检测血清乙型肝炎两对半定量,采用全自动生物化学分析仪检测肝功能。计数资料采用χ2检验,计量资料采用t检验。结果 （1）干扰素抗病毒治疗时,24周单纯CHB患者较合并脂肪肝患者生化学应答率更高（χ2=4.069,P=0.044）;48周HBV DNA阴转率明显优于后者（χ2=17.327,P=0.000）。对于HBeAg阳性患者,单纯CHB患者在24周的生化学应答率、24和48周时的HBV DNA阴转率、HBeAg阴转率均显著优于合并脂肪肝患者,两者比较差异具有统计学意义（P〈0.05）,48周时两组的生化学应答差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）核苷和核苷酸类药物抗病毒治疗时,48周单纯CHB患者的生化学应答率较高（χ2=7.620,P=0.006）,24和48周的HBV DNA阴转率差异无统计学意义。对于HBeAg阳性患者,24周时合并脂肪肝组患者的HBeAg转阴率高于单纯CHB患者,48周时ALT/AST复常率低于单纯CHB患者,差异均具有统计学意义（P〈0.05）,24周ALT/AST复常率、HBV DNA转阴率、48周HBV DNA转阴率、HBeAg转阴率差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论肝细胞脂肪变对CHB患者的抗病毒治疗效果存在一定的影响。     

Relationship between serum adiponectin concentration, pulse wave velocity and nonalcoholic fatty liver disease

OBJECTIVES: We aimed to investigate the relationship between nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD), serum adiponectin concentration and brachial-ankle pulse wave velocity (baPWV) as a risk marker for atherosclerosis. METHODS: A total of 213 nonalcoholic subjects (67 males, 146 females) participated in this study. Division of subjects into the NAFLD group or the normal group was based on the existence of fatty liver detected by sonography. RESULTS: Serum adiponectin levels in the NAFLD group were significantly lower than those in the normal group. After adjusting for age, body-mass index (BMI) and the homeostasis model of assessment (HOMA), there was a significant negative correlation between NAFLD and serum adiponectin level only in females (r = -0.22, P = 0.008). Multiple logistic regression analysis showed a tendency of inverse correlation between NAFLD and serum adiponectin level in females (P = 0.055). After adjustment for age, BMI and HOMA value, serum adiponectin levels were inversely correlated with serum alanine aminotransferase (ALT) and gamma-glutamyltranspeptidase (GGT) levels (r = -0.199 (P = 0.004) and r = -0.282 (P < 0.001)). On the other hand, baPWV in the NAFLD group was also significantly higher than that in the normal group in females (P = 0.005). Individual levels of serum ALT, aspatate aminotransferase (AST), alkaline phosphatase (ALP) and GGT were positively correlated with baPWV after adjusting for age, sex, BMI, HOMA and systolic blood pressure (P < 0.05). CONCLUSION: Serum adiponectin level and baPWV were significantly associated with NAFLD and various liver enzymes, especially in females.