AcSDKP对大鼠矽肺纤维化转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的抑制

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠肺内转化生长因子(TGF)-β1、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 将大鼠随机分为6组.每组10只.对照组大鼠支气管内灌注1.0 ml生理盐水,矽肺模型对照1组4周后处死,矽肺模型对照2组8周后处死;矽肺模型组大鼠予SiO2混悬液50 mg/ml,矽肺模型1组4周后处死,矽肺模型2组8周后处死;抗纤维化治疗组(治疗组):支气管内灌注SiO2混悬液50mg/ml,4周后给予AcSDKP 800 μg/(kg·d),至第8周处死;预防治疗组给予AcSDKP800μg(kg·d)48h后,支气管内灌注SiO2混悬液50mg/ml,8周后处死.HE染色进行形态学观察;采用免疫组织化学法检测TGF-β1与CTGF的蛋白表达;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TGF-β1与CTGF的mRNA表达.结果 治疗组TGF-β2及CTGF蛋白表达分别为0.244±0.016、0.241±0.017,明显低于矽肺模型1组和矽肺模型2组;治疗组TGF-β1 mRNA及CTGF mRNA表达水平明显低于矽肺模型1组和矽肺模型2组,差异均有统计学意义(P<0.05);预防治疗组TGF-β1和CTGF蛋白表达和mRNA表达水平明显低于矽肺模型2组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 AcSDKP能减轻实验性矽肺纤维化大鼠肺组织中的TGF-β1与CTGF表达水平.     

结缔组织生长因子、整合素αvβ3在子宫腺肌病中的表达及相关性研究

目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和整合素αvβ3在子宫腺肌病(adenomyosis,ADS)中的表达及相关性。方法选取2015年7月至2016年12月于首都医科大学附属北京妇产医院妇科微创中心因ADS行全子宫切除术的患者30例为ADS组,同期因宫颈上皮内瘤变Ⅲ级行全子宫切除术的患者28例为对照组,获取子宫内膜组织,应用免疫组化法检测两组子宫内膜组织中CTGF和整合素αvβ3表达。结果 (1)CTGF、整合素αvβ3在ADS组异位内膜的表达(0.24±0.04、0.22±0.07)高于在位内膜(0.16±0.03、0.11±0.04)及对照组子宫内膜(0.19±0.02、0.14±0.03)(P0.05);且两者在ADS组及对照组中均呈正相关(ADS组r=0.55,对照组r=0.59,P0.05);(2)CTGF、整合素αvβ3在ADS组异位内膜和在位内膜中的表达,增殖期(0.24±0.04、0.21±0.03和0.16±0.03、0.09±0.04)与分泌期(0.24±0.03、0.22±0.09和0.16±0.03、0.12±0.03)比较,差异无统计学意义(P0.05)结论 CTGF和整合素αvβ3在ADS表达失去月经周期性,异位内膜中表达异常增高且两者存在正相关,提示CTGF和整合素αvβ3可能共同参与了ADS的发生发展。     

TGF-β1、MMP-3及Collagen Ⅲ在POP患者子宫主韧带组织中的表达及意义

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及胶原蛋白Ⅲ型(Collagen Ⅲ)在盆腔器官脱垂(POP)患者子宫主韧带组织中的表达及意义。方法选取2017年1月至2018年5月治疗的POP患者45例(POP组),其中Ⅲ期25例,Ⅳ期20例,同时选取无POP患者50例作为对照组,采用免疫组化染色分析子宫主韧带组织中TGF-β1、MMP-3及Collagen Ⅲ表达情况,Western blot检测各指标表达的灰度值。结果 POP组TGF-β1和CollagenⅢ阳性表达率及平均灰度值均明显低于对照组(P<0.05),而MMP-3阳性表达率及平均灰度值明显高于对照组(P<0.05)。POP组绝经前后后患者TGF-β1、CollagenⅢ、MMP-3阳性表达率及平均灰度值差异具有统计学意义(P<0.05)。POP组Ⅲ期和Ⅳ期患者TGF-β1、Collagen Ⅲ、MMP-3阳性表达率及平均灰度值差异具有统计学意义(P<0.05)。POP患者TGF-β1、Collagen Ⅲ与MMP-3呈负相关(r=-0.563,-0.677,P<0.05),TGF-β1与Collagen Ⅲ呈正相关(r=0.441,P<0.05)。结论 POP患者子宫主韧带组织中MMP-3呈高表达,而TGF-β1与Collagen Ⅲ呈低表达,与绝经状况及病情程度可能有一定关系,且3者间表达有相关性。     

盆腔器官脱垂患者阴道壁核心蛋白聚糖和转化生长因子-β_1mRNA表达水平及胶原含量的研究

目的 探讨盆腔器官脱垂(POP)患者阴道前壁组织中核心蛋白聚糖(DCN)和转化生长因子(TGF)-β_1mRNA表达水平及Ⅰ型胶原含量的变化.方法 将48例绝经前后妇女根据是否存在POP分为POP组(27例)和对照组(21例).应用酶联免疫吸附法检测两组患者阴道前壁组织中Ⅰ型胶原含量;实时定量PCR法检测DCN和TGF-β_1mRNA ACt值.结果 绝经前后POP组患者阴道前壁组织中Ⅰ型胶原含量分别为(47.94±6.82)、(41.82±5.96)mg/g总蛋白,对照组分别为(62.33±6.57)、(61.21±4.84)mg/g总蛋白,两组比较差异均有统计学意义(P<0.01).绝经前POP组患者阴道前壁组织中DCN mRNA △Ct值1.61±0.10,明显低于对照组2.77±0.60,TGF-β_1 mRNA△Ct值10.86±0.23,高于对照组9.87±0.92,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);绝经后两组患者阴道前壁组织中DCN和TGF-β_1mRNA ACt值比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 绝经后POP的发生与多因素有关.绝经前后阴道前壁组织中的Ⅰ型胶原含量减少,胶原直径变细,支持力量减弱,从而引发POP.绝经前POP患者阴道前壁组织中DCN与TGF-β_1可能通过影响盆底结缔组织胶原的代谢,影响盆底支持组织的力量和弹性性能,参与POP的发生.     

转化生长因子β1小干扰RNA对肝星状细胞生物学特性的影响

目的 观察转化生长因子β1小干扰RNA（TGFβ1 siRNA）对肝星状细胞增殖、活化、胶原合成的影响.方法 利用脂质体将TGFβ1 siRNA表达质粒转入肝星状细胞中,培养72 h后,收集肝星状细胞和上清液,采用Western blotting和RT-PCR法分别检测细胞TGFβ1和a-SMA蛋白表达、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达;MTT法检测细胞增殖活性和放射免疫法检测培养上清液中IV型胶原和透明质酸含量.结果 与无关对照siRNA组相比,TGFβ1和a-SMA蛋白表达分别下调（79±5）%和（55±4）%（均P〈0.01）;细胞增殖活性降低（25±4）%（P〈0.01）;Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达分别下调（63±6）%和（57±4）%（均P〈0.01）;培养上清中IV型前胶原和透明质酸含量分别降低（53±8）%和（46±8）%（均P〈0.01）.结论 TGFβ1 siRNA能显著下调TGFβ1的表达,抑制肝星状细胞活化、增殖及细胞外基质的合成和分泌.     

血清IGF-1、TGF-β1在食管癌患者中的水平及意义

目的探讨血清胰岛素生长因子-1(IGF-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)在食管癌患者中的水平及意义。方法选取陆军军医大学第一附属医院2017年1月~2018年5月收疗的食管癌患者192例为观察组,同时选取健康志愿者200例作为健康对照组,检测两组血清IGF-1、TGF-β1水平。结果观察组血清IGF-1、TGF-β1分别为(290.02±89.28)μg/L和(56.60±14.87)ng/ml,明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤直径>5cm、Ⅲ~Ⅳ期和中低分化患者血清IGF-1分别为(300.21±91.12)μg/L、(310.55±95.55)μg/L和(300.11±90.43)μg/L,明显高于肿瘤大小≤5cm、Ⅰ~Ⅱ期和高分化患者;Ⅲ~Ⅳ期患者血清TGF-β1分别为(60.95±16.04)ng/L,明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者;临床分期Ⅰ~Ⅱ患者血清IGF-1、TGF-β1明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后3个月IGF-1、TGF-β1分别为(189.14±43.29)μg/L和(30.12±9.81)ng/ml,明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论食管癌患者血清IGF-1、TGF-β1明显升高,与临床病理特征有一定关系。     

RAS拮抗剂调节血管平滑肌细胞增殖、凋亡因子表达

目的探讨血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂氯沙坦对AngⅡ诱导的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的干预作用。方法体外原代培养Wistar大鼠主动脉平滑肌细胞,收集不同AngⅡ浓度和作用时间下的细胞和卡托普利组、氯沙坦组和二者联合作用组的细胞,以逆转录(RT)-PCR检测细胞中TNF-α和TGF-β1 mRNA的表达。结果 TNF-αmRNA表达量随AngⅡ浓度和作用时间增加而增加,AngⅡ浓度为10-7、10-6、10-5、10-4 mol/L时表达量分别为(0.43±0.05)、(0.81±0.13)、(0.97±0.17)、(1.09±0.19),与对照组(0.11±0.03)比较,差异有统计学意义(P<0.05或0.01);一定浓度卡托普利(5×10-6mmol/L)、氯沙坦(5×10-6 mmol/L)可明显抑制AngⅡ这一作用;TGF-β1 mRNA表达量随AngⅡ浓度和作用时间增加而明显增加,具有浓度依赖性;在AngⅡ10-7、10-6、10-5和10-4 mol/L时,卡托普利组mRNA表达量分别为(0.19±0.03)、(0.23±0.05)、(0.38±0.14)、(0.34±0.07),较AngⅡ组分别降低了59.57%、73.26%、54.44%和66.67%,差异均有统计学意义(P<0.05或0.01),氯沙坦组分别为(0.17±0.03)、(0.39±0.11)、(0.41±0.12)和(0.39±0.08),较AngⅡ组分别下降了63.82%、54.65%、54.44%和61.76%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 AngⅡ可促进血管平滑肌细胞TNF-α、TGF-β1 mRNA表达,且有时间和浓度依赖关系;卡托普利、氯沙坦对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞TNF-α、TGF-β1 mRNA表达均有抑制作用,二者联合作用时抑制作用最明显。     

2,3,7,8-四氯二苯二■英诱导胎鼠腭裂过程中转化生长因子β受体基因表达变化

目的 探讨转化生长因子β受体(TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲ)基因变化与2,3,7,8-四氯二苯二■恶(TCDD)所致胎鼠腭发育障碍的相关性。方法 将24只C57BL/6 J孕鼠随机分为TCDD组和对照组,每组再根据怀孕时间分成3个亚组,每组4只孕鼠。在妊娠第10日(GD10)一次性分别灌胃20μg/kg TCDD(TCDD组)和等量玉米油(对照组)。在GD13、GD14和GD15分别剖腹取各组胎鼠腭组织,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用q-PCR技术检测各组胎鼠腭组织中TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲ mRNA表达变化。结果 对照组TβR-Ⅰ mRNA相对表达量在GD13、GD14和GD15分别为(2.06±0.21)、(1.38±0.12)和(0.78±0.17);TCDD组分别为(0.98±0.26)、(0.75±0.14)和(1.22±0.05)。对照组TβR-Ⅱ mRNA相对表达量在GD13～GD15分别为(1.84±0.08)、(1.14±0.09)、(0.81±0.13);TCDD组分别为(0.91±0.22)、(0.96±0.06)、(1.30±0.13)。TβR-Ⅲ mRNA在对照组的相对表达量分别为(1.86±0.10)、(1.11±0.11)、(0.67±0.15);TCDD组分别为(0.85±0.05)、(0.93±0.09)、(1.17±0.16)。TCDD组的TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲ mRNA在GD13和GD14相对表达量均低于对照组(P0.05);而在GD15,TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲ mRNA高于对照组(P0.05)。结论 TCDD诱导的胎鼠在腭发育关键时期GD13与GD14,TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲ mRNA的低表达很可能参与了TCDD诱发胎鼠腭部融合障碍的过程。     

宫颈组织中增殖细胞抗原和微血管密度的表达及相关性分析

目的 研究增殖细胞抗原(PCNA)和微血管密度(MVD)在宫颈组织中的表达特点,探讨二者联合应用的诊断价值。方法 选取2018年12月—2020年12月在杭州市第三人民医院行宫颈液基薄层细胞学检查和高危型人乳头瘤病毒(HPV)检测的患者为研究对象,根据国际癌症协会对宫颈/阴道细胞学的诊断标准,对宫颈液基薄层细胞学筛查异常或筛查正常且HPV16或18阳性的患者行阴道镜下宫颈组织活检,经病理诊断证实为宫颈上皮内瘤变(CIN)行宫颈环形电切除术或宫颈冷刀锥切术的患者63例为观察组,其中CINⅠ级28例,CINⅡ/Ⅲ级35例,另选取同期在该院因子宫肌瘤行子宫切除术,同时病理诊断为正常宫颈组织的患者25例作为对照组。对所有患者的石蜡标本进行观察,取病变最严重区域行PCNA和MVD免疫组化染色。结果 对照组PCNA的阳性表达率为64.00%;CINⅠ级组PCNA的阳性表达率为96.43%;CINⅡ/Ⅲ级组中PCNA的阳性表达率为100.00%。对照组PCNA阳性过表达率为4.00%,CINⅠ级组PCNA阳性过表达率为32.14%,CINⅡ/Ⅲ级组PCNA阳性过表达率为91.43%。对照组与CINⅠ级组、对照组与CINⅡ/Ⅲ级组PCNA阳性表达率比较,差异均有统计学意义(χ2=18.15、23.60,均P<0.05);CINⅠ级组与CINⅡ/Ⅲ级组PCNA阳性表达率比较,差异无统计学意义(χ2=0.01,P>0.05);但CINⅡ/Ⅲ级组与CINⅠ级组PCNA阳性过表达率比较,差异有统计学意义(χ2=22.97,P<0.05)。MVD在对照组、CINⅠ级组及CINⅡ/Ⅲ级组中的表达水平分别为(12.92±4.01)、(21.36±6.14)及(29.79±5.68);CINⅠ级组与CINⅡ/Ⅲ级组MVD表达均明显高于对照组,差异均有统计学意义(t=5.883、12.727,均P<0.05);CINⅡ/Ⅲ级组MVD表达明显高于CINⅠ级组,差异有统计学意义(t=5.645,P<0.05);MVD表达随宫颈病变级别升高而呈增加趋势。Pearson相关性分析显示,PCNA阳性表达与MVD值呈正相关关系(r=0.595,P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示,应用PCNA和MVD联合诊断CINⅡ/Ⅲ级的价值明显高于二者单独诊断,PCNA与MVD诊断CINⅡ/Ⅲ级的最佳截点分别为≥2.94和≥21.50。结论 宫颈组织中PCNA阳性表达与MVD计数随着宫颈病变程度的增加而增加,CIN患者宫颈组织中的PCNA和MVD呈正相关关系,且二者联合检测对于CINⅡ/Ⅲ级具有较高的诊断价值,可发现高度病变倾向的存在,提高宫颈病变的诊断率,并指导临床治疗,避免治疗不足和过度治疗。     

宫颈癌转化生长因子-β1的表达及其临床意义

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测TGF-β1蛋白在50例宫颈癌、25例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和25例正常宫颈组织中的表达情况。结果:TGF-β1蛋白在宫颈癌组、CIN组和正常宫颈组中的阳性表达率分别为86%、44%、12%。宫颈癌组与CIN组、正常宫颈组比较差异均有统计学意义(P<0.01),CIN组与正常宫颈组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1与宫颈癌发生有关,为宫颈癌的治疗提供一种新的潜在的靶分子。     

转化生长因子β1在BorrmannⅣ型胃癌侵袭、转移中的作用

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)与BorrmannⅣ型胃癌侵袭、转移等方面的关联.方法通过免疫组织化学染色方法,分析了109例胃癌患者原发灶中TGF-β1的表达.结果 TGF-β1表达分级在Borrmann分型各型间比较差异有统计学意义(P<0.005);TGF-β1表达在BorrmannⅣ型胃癌中与组织学分型(P=0.003)、浸润深度(P=0.003)及腹膜播散(P<0.025)中比较差异有统计学意义,而与淋巴结转移无关(P=0.23);TGF-β1表达阳性组预后与TGF-β1表达阴性组差异有统计学意义(P=0.040).结论TGF-β1在BorrmannⅣ型胃癌的浸润性生长方式及腹膜播散过程中扮演了重要角色,可作为判定预后的重要指标.     

TGFβRⅡ-siRNA表达质粒构建及干扰效应鉴定

目的 通过构建转化生长因子βⅡ型受体小干扰RNA（TGFβRⅡ-siRNA）的表达质粒,观察其在肝星状细胞中对TGFβRⅡ的表达抑制效果,为研究其阻断肝纤维化作准备.方法 根据Ambion公司网上设计软件设计二个siRNA作用靶点,体外合成的相应双链DNA被插入pSilenc er2.1-U6质粒中,以脂质体Metafectene 2000转染HSC-T6细胞,利用RT-PCR法和western-blot分别检测对TGFβRⅡ mRNA和蛋白干扰效果.结果 表达针对TGFβRⅡ-siRNA的siRNA-a和siRNA-b二个质粒是成功构建;与对照组相比,其对TGFβRⅡ mRNA表达分别下调到0.89±0.06和0.25±0.03,对TGFβRⅡ蛋白表达分别下调到0.86±0.05和0.23±0.02,转染siRNA-b质粒组显著抑制TGFβRⅡ mRNA和蛋白表达（均P〈0.01）,siRNA-a质粒组无统计学意义（均P〉0.05）.结论 TGFβRⅡ-siRNA能明显抑制TGFβRⅡ的表达.     

Prolift盆底重建术治疗重度盆腔器官脱垂患者预后影响因素分析

目的探讨Prolift盆底重建术治疗重度盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse,POP)的临床效果及其术后复发的危险因素。方法选取2013年6月至2015年6月在深圳市人民医院行Prolift盆底重建术治疗的168例POP患者,分别于术前、术后1年应用POP-Q分度法及POP生活质量问卷(P-QOL)对患者POP程度及生活质量进行评价,观察其术后1年复发情况,并应用Cox风险模型分析Prolift盆底重建术治疗POP术后复发的危险因素。结果 168例患者治愈率为94.05%(158/168),术后1年复发率为12.50%(20/160)。POP患者术后1年POP-Q分度为Ⅲ~Ⅳ°比例较治疗前显著下降(P0.05)。POP患者术后1年脱垂严重程度、个人关系、健康状况、生活状况、角色、体力、社交、情绪、睡眠等方面评分较术前均显著下降(P0.05)。经Cox风险模型分析显示,疾病严重程度为Ⅲ~Ⅳ°、脱垂部位为前盆腔、术后阴道壁长度5 cm是Prolift盆底重建术治疗POP术后复发的独立危险因素。结论 Prolift盆底重建术治疗POP可获得较高的治愈率,能有效改善患者术后生活质量。疾病严重程度为Ⅲ~Ⅳ°、脱垂部位为前盆腔、术后阴道壁长度5 cm是Prolift盆底重建术治疗POP术后复发的独立危险因素,对于具备危险因素的患者术后应加强随访,以降低POP复发率。     

染料木黄酮对成骨细胞I型胶原表达及转化生长因子β_1的影响

目的染料木黄酮(genistein,GEN)与新生SD大鼠颅骨成骨细胞(osteoblast,OB)共同孵育,研究GEN对OBI型胶原表达及转化生长因子β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)的影响。方法采用第二继代OB进行实验,实验分为对照组,GEN各浓度组(10-8,10-7,10-6,10-5mol/L),雌激素组(17-βestradiol,E2,10-10mol/L)。测定指标包括四甲基偶氮唑盐(methythiazolyltetrazoliumbromide,MTT)、胞浆内蛋白、碱性磷酸酶活性(activityofalkalinephosphatase,ALP)、以及I型胶原与TGFβ1表达。结果体外培养48h及72h,GEN各剂量组和E2组的MTT(OD)值均有显著性增高。与培养48h相比,对照组、10-8、10-7、10-6mol/LGEN剂量组72h后细胞增殖有所增加,差异有显著性。10-6、10-5mol/LGEN剂量组和E2组可增高OB内蛋白含量,差别有显著性。GEN各组和E2组均可增高OB内ALP活性,差别有显著性。上述指标与GEN剂量呈显著相关。10-7、10-6、10-5mol/LGEN组和E2组OB内I型胶原的表达及TGFβ-1的合成高于对照组。I型胶原表达和GEN剂量呈显著相关。结论GEN可刺激OB增殖、分化,增加OB内I型胶原的表达及TGFβ-1的分泌,在10-8M～10-5M范围内与剂量相关;高浓度GEN与E2相比作用相似。     

五味子乙素对染矽尘大鼠肺组织转化生长因子β1信号转导通路分子mRNA表达的影响

目的 观察五味子乙素(sehisandrin B,Sch-B)对染矽尘大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)信号通路分子mRNA表达的影响,探讨其防治矽肺纤维化的作用及机制.方法 将96只Wistar大鼠随机分为对照组、染矽尘组、Sch-B干预组,每组32只,气管暴露法一次性染尘建立大鼠矽肺模型,染矽尘组和Sch-B干预组每只大鼠气管内注入1 ml(50 mg/ml)SiO2混悬液,对照组注入1 ml灭菌生理盐水.染尘后第1天开始灌胃干预,Sch-B组给予Sch-B(80mg·kg-1/d-1),染矽尘组和对照组给予等体积的橄榄油.不同处理3、7、14和28 d后,各组处死8只大鼠,对肺组织HE染色观察病理改变;用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定大鼠肺组织中TGF-β1、转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)和Smad4基因表达.结果 染矽尘组肺损伤明显,在3和7 d时表现为明显的肺泡炎,可见肺泡间隔水肿,大量炎性细胞浸润,在14d时,肺泡间隔明显增宽,成纤维细胞和胶原基质明显增多;在28 d时,肺泡结构破坏,肺泡壁明显增厚,肺组织以胶原沉积和肺纤维化改变为主.Sch-B组肺泡炎和肺纤维化程度均较染矽尘组明显减轻.染矽尘组3、7、14、28 d时大鼠肺内TGF-β1、TGF-βRⅡ和Smad4的mRNA表达(TGF-β1:1.03±0.31、1.33±0.39、1.08±0.26、0.82±0.16,TGF-βRⅡ:0.65±0.11、0.80±0.16、0.83±0.24、0.62±0.15,Smad4:0.87±0.15、0.68±0.11、0.78±0.19、0.30±0.08)均明显高于对照组(TGF-β1:0.59±0.22、0.55±0.25、0.56±0.20、0.55±0.12,TGR-βRⅡ:0.28±0.13、0.31 ±0.15、0.34±0.15、0.27±0.09,Smad4:0.23±0.11、0.40±0.12、0.39±0.12、0.18±0.06),差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05),其中TGF-β1在第7天时达高峰后开始下降.Sch-B干预组各时间点TGF-β1和Smad4(TGF-β1:0.68±0.28、0.88±0.25、0.75±0.11、0.61±0.14,Smad4:0.25±0.12、0.45±0.09、0.44±0.07、0.21±0.04)均低于染矽尘组,差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).与染矽尘组相比,Sch-B干预组TGF-βRⅡmRNA表达无明显改变,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Sch-B能减轻染矽尘大鼠肺组织的纤维化程度,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1和Smad4的mRNA表达上调,从而干扰TGF-β1/Smad4信号通路对靶基因的激活来实现的.

Abstract：

Objective To investigate the effects of schisandrin B (Sch-B) on expression of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) and signal transduction molecule mRNA in rat lungs exposed to SiO2,and explore the intervention mechanism of Sch-B on pulmonary fibrosis induced by SiO2. Methods Ninety six Wistar rats were randomly divided into control (normal saline) group, SiO2 group and SiO2 plus Sch-B group.The rats were exposed to SiO2 by direct tracheal instillation to establish the silicotic animal models. SiO2 group and SiO2 plus Sch-B group were treated with 1ml SiO2 (50 mg/ml) for each rat From the first day after model establishment, SiO2 plus Sch-B group were orally given Sch-B (80 mg/kg) a day, control group and silica group were orally given olive oil. On the 3rd, 7th,14th and 28th days after treatment, 8 rats in each group were sacrificed and samples were collected. The histo-pathological examination of lung was performed by HE staining. The expression levels of TGF-β1 、TGFβR Ⅱ and Smad4 mRNA in the lung tissues were detected by RT-PCR. Results The results of histo-pathological examination showed that in SiO2 group, lung tissues were injured obviously; the alveolar inflammation with alveolus interval edema and inflammation cell infiltration appeared on the 3rd and 7th days; the alveolus interval became thicker, became thicker, fibroblast and collagen matiix increased markedly on 14th day; the alveolar structure was damaged, alveolar wall thickened obviously,collagen aggradation and pulmonary fibrosis displayed on 28th day. The alveolar inflammation and pulmonary fibrosis in SiO2 plus Sch-B group were significantly less than those in SiO2 group. The expressions levels of TGF-β1、TGFβR Ⅱ and Smad4 mRNA (TGF-β1: 1.03±0.31 、1.33±0.39、1.08±0.26、0.82±0.16,TGF-βR Ⅱ:0.65 ±0.11、0.80 ±0.16、0.83 ±0.24、0.62 ±0.15, Smad4: 0.87 ±0. 15、0.68 ±0.11、0.78 ±0.19、0.30 ±0.08) in SiO2group were significantly higher than those in the control group (TGF-β1:0.59±0.22、0.55 ±0.25、0.56±0.20、0.55 ±0.12,TGR-βR Ⅱ:0.28 ±0.13、0.31 ±0. 15、0.34 ±0.15、0.27 ±0.09,Smad4:0.23 ±0.11、0.40 ±0. 12、0.39 ±0.12、0.18±0.06)(P＜0.01 or P＜0.05), but the expression level of TGF-β1 mRNA was the highest on the 7th day. The expression levels of TGF-β1 and Smad4 mRNA (TGF-β1: 0.68 ±0.28、0.88 ±0.25、0.75 ±0.11、0.61 ±0. 14,Smad4:0.25 ±0.12、0.45 ±0.09、0.44 ±0.07、0.21 ±0.04) in SiO2 plus Sch-B group were significantly lower than those in SiO2 group (P＜0.01 or P＜0.05),but there were no significant differences of the TGFβR Ⅱ mRNA expression levels between SiO2 group and SiO2 plus Sch-B group. Conclusion Sch-B can reduce the pulmonary fibrosis induced by SiO2 through inhibition of the mRNA express of TGF-β1 and Smad4 in the lung tissue, modulating the TGF-β1/Smad4 signal transduction pathway and inhibiting the target gene activation.     

1p31杂合性丢失及ARHI抑癌基因在宫颈腺癌中的作用

目的:研究宫颈腺癌1p31杂合性丢失的发生率,探讨在此位点的ARHI基因在宫颈腺癌发生发展中的作用。方法:采用PCR银染技术检测30例宫颈腺癌中1p31杂合性丢失的发生率,其中Ⅰ,Ⅱ期18例,Ⅲ、Ⅳ期12例,免疫组化方法检测在此位点的ARHI蛋白的表达。结果:30例宫颈腺癌组织中LOH阳性的比例为63.33%(19/30),Ⅲ期、Ⅳ期LOH阳性率明显高于Ⅰ,Ⅱ期,差异有统计学意义(χ2=5.98,P<0.05)。在高、中、低分化癌中无统计学差异(χ2=4.88,P>0.05),ARHI蛋白的阳性表达率与淋巴结转移无关,差异无统计学意义(χ2=2.16,P>0.05)。宫颈腺癌组织中ARHI表达(46.67%,14/30)低于正常宫颈组织(90.0%,27/30),差异具有统计学意义(χ2=13.02,P<0.05)。结论:1p31位点可能存在宫颈腺癌相关抑癌基因,ARHI基因在宫颈腺癌发生发展过程中起重要作用。     

积雪草苷对心肌梗死大鼠TGF-β1、ColⅠ和Col Ⅲ表达的影响

目的研究积雪草苷对心肌梗死(心梗)大鼠左室心肌纤维化和心肌组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、胶原Ⅰ(collagenⅠ,ColⅠ)和胶原Ⅲ(collagenⅢ,ColⅢ)表达的影响。方法结扎雄性SD大鼠左冠状动脉前降支建立心梗模型,随机分为假手术组(Sham组)、假手术+积雪草苷组(Sham+Asiaticoside组)、心梗模型组(MI组)和心梗模型+积雪草苷组(MI+Asiaticoside组)。造模当天给药,早晚各1次,2周后分别测定各组大鼠心脏左室重量与体重之比、左室梗死面积;免疫组织化学(免疫组化)检测心肌组织非梗死区TGF-β1、ColⅠ、ColⅢ的表达。计量资料采用t检验,P0.05为差异有统计学意义。结果 MI组左室梗死面积为(24.37±5.69)%,MI+Asiaticoside组左室梗死面积为(25.89±6.27)%,差异无统计学意义(P0.05);MI组左室重/体重为(3.46±0.26)mg/g,MI+Asiaticoside组左室重/体重为(2.53±0.35)mg/g,差异有统计学意义(P0.05);免疫组化染色结果显示,与MI组相比[(8.34±0.62)、(37.66±2.21)、(12.39±1.37)μm2],MI+Asiaticoside组非梗死区心肌TGF-β1、ColⅠ、ColⅢ的表达[(5.97±0.78)、(17.90±1.36)、(8.14±1.23)μm2]明显降低,差异均有统计学意义(均P0.05)。心梗大鼠非梗死区心肌组织ColⅠ、ColⅢ表达与心肌组织TGF-β1的表达正相关。结论积雪草苷可减少心梗大鼠非梗死区TGF-β1的表达,从而减弱非梗死区心肌组织ColⅠ、ColⅢ异常合成与沉积,减轻心梗后左室心肌纤维化程度,延缓左室重构的发展。     

霉酚酸酯对UUO大鼠肾间质TGF-β1和CTGF表达的影响

目的 通过动态观察霉酚酸酯(MMF)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾间质转化生长因子-β1(TGF-β1)、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨MMF延缓肾间质纤维化进展的可能机制.方法 54只雄性SD大鼠随机分为假手术组(SOR组)、UUO组和MMF组,各组分别于术后第7、14、21天处死6只.HE、PAS和Masson染色观察肾间质损伤指数的变化,免疫组织化学染色观察TGF-β1、p-Smad2/3、CTGF和Ⅳ型胶原在肾间质中的蛋白表达,RT-PCR观察TGF-β1和CTGF在肾组织中的mRNA表达.结果 UUO组肾间质损伤指数均显著高于SOR组(P＜0.01),MMF组与UUO组比均显著降低(第7、14天P＜0.01;第21天P＜0.05);UUO组Ⅳ型胶原、TGF-β1蛋白和mRNA、p-Smad2/3、CTGF蛋白和mRNA的表迭均显著高于SOR组(P＜0.01),MMF组与UUO组比均显著降低(P＜0.01).结论 在UUO模型中,MMF可通过下调TGF-β1、CTGF在肾间质中的表达抑制肾间质纤维化;MMF对TGF-β1依赖性Smad信号通路的抑制可能参与了下调CTGF的表达.     

2,3,7,8-四氯二苯并二噁英对人芳香烃受体和转化生长因子α mRNA表达的影响

目的 研究2,3,7,8-四氯二苯并二嗯英(TCDD)染毒对表皮细胞芳香烃受体(AhR)和转化生长因子(TGF-α)表达的影响.方法 利用半定量逆转录PCR技术(RT-PCR)对24 h TCDD染毒组进行AhR和TGF-α基因表达的测定,并分析两者之间的相互关系.结果 以β-actin为内参照,测定细胞中AhR和TGF-α mRNA表达的相对含量.结果 显示随着TCDD浓度的增高,细胞中AhR mRNA的相对表达量呈现下降的趋势,r=-0.548,各染毒组与对照组相比差异有统计学意义(F=4.124,P=0.021),两两比较7×10-10 mol/L组(0.0620±0.0085)和7×10-9 mol/L组(0.0518±0.0194)与对照组(0.1138±0.9227)之间的差别有统计学意义(t=-3.48,P＜0.05;t=-4.17,P＜0.01),且其相对表达量分别为对照组的55%和45%.TGF-α mRNA的相对表达量随浓度的增加则呈现上升的趋势,相关系数r=0.695(P＜0.01),各组之间差异有统计学意义(F=15.789,P=0.000),在7×10-10 mol/L组(0.1474±0.0390)和7×10-9 mol/L组(0.2133±0.0364)相对表达量与对照组(0.0561±0.0100)的差别具有统计学意义(t=4.49,P＜0.01;t=7.74,P＜0.01),且其相对表达量是对照组的2.6倍和3.8倍.同时对AhR与TGF-α mRNA相对表达水平进行相关分析,两者呈负相关,r=-0.561(P＜0.05).结论 TCDD对细胞增殖过程中可影响基因表达,AhR表现为下调,TGF-α表现为上调,且两基因表达量之间存在负相关关系.     

川芎嗪对高体积分数氧肺损伤新生大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的 探讨高氧性肺损伤新生大鼠肺损伤过程中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达情况,并观察川芎嗪对高氧性肺损伤的干预作用。方法 96只出生12 h内的清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠作为研究对象。随机分成4组(每组24只):Ⅰ组:空气对照组;Ⅱ组:空气+川芎嗪组;Ⅲ组:高氧组;Ⅳ组:高氧+川芎嗪组。Ⅲ组、Ⅳ组新生大鼠高氧暴露(氧体积分数850 mL/L),Ⅱ组、Ⅳ组予每日腹腔注射溶于9 g/L盐水的川芎嗪30 mg/kg,Ⅰ组、Ⅲ组予等量9 g/L盐水注射。在实验3、7 d和14 d每组随机选取8只处死,取其肺组织,采用HE染色观察其肺组织病理改变,免疫组织化学方法检测其血小板内皮细胞表面黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1)及VEGF水平的表达,以PECAM-1阳性染色的内皮细胞面积与肺实质细胞总面积的百分比代表肺微血管密度。结果 第3,7,14天Ⅲ组RAC值及微血管密度较Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅳ组均减少(P<0.05)。Ⅲ组新生大鼠第3,7,14 d时肺组织PECAM-1及VEGF蛋白表达明显低于Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅳ组。Ⅳ组新生大鼠第3,7,14 d时肺组织RAC值、肺微血管密度、PECAM-1及 VEGF蛋白表达和Ⅰ组、Ⅱ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 高氧暴露抑制新生鼠肺VEGF的表达,川芎嗪可改善肺发育,作用机制可能与上调VEGF的表达有关。