白细胞介素-33的测定及其与早期类风湿关节炎相关性的研究

目的 通过检测早期类风湿关节炎(RA)患者血清中的白细胞介素(IL)-33水平,分析其与早期RA之间的相关性.方法 收集病程<1年的早期RA患者100例,骨关节炎(OA)患者40例以及健康对照者70名.采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中的IL-33水平,并分析血清IL-33水平与RA各临床和实验室指标的相关性.计量资料的比较采用Kruskal-Wallis检验和(或)Mann-Whitney U检验,计数资料比较采用X2检验,相关性分析采用Spearman相关分析.结果 RA患者血清IL-33水平为(282±871)pg/ml,显著高于健康对照组[(7±38)pg/ml,P(0.01)和OA患者[(8±35)pg/ml,P<0.01].血清IL-33水平与类风湿因子(RF)、隐性类风湿因子IgG(HRF-IgG)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗突变型瓜氨酸化波形蛋白(MCV)抗体呈正相关(r分别为:0.312,0.277,0.213,0.302,P<0.01或P<0.05). IL-33阳性组患者的RF阳性率、HRF-IgG阳性率、抗CCP抗体阳性率、抗MCV抗体阳性率(86%、31%、86%、94%)较IL-33阴性组患者(54%、11%、42%、72%)显著升高(P均<0.05). 结论 IL-33在RA患者血清中显著升高,并与多种自身抗体(包括RF、抗CCP抗体、抗MCV抗体和HRF-IgG)显著相关,可能是RA预后不良的因素之一.     

老年类风湿关节炎患者血清CXCL-9及CXCL-10表达及临床意义

目的探讨血清CXC趋化因子配体(CXCL)-9及CXCL-10在老年类风湿关节炎(RA)患者中的表达及其临床意义。方法选取海南省人民医院收治108例老年RA患者,按照DAS28评分分为低活动组(n=41)和高活动组(n=67),Sharp评分分为非骨侵蚀组(n=48)和骨侵蚀组(n=60)。采用酶联免疫吸附试验检测各组血清CXCL-9、CXCL-10、类风湿因子(RF)及抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体水平。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗体诊断RA的价值。结果 RA组血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗体水平均明显高于对照组(P0.01)。高活动组血清CXCL-9[198.75±56.48)pg/ml vs(124.50±31.83)pg/ml]、CXCL-10[54.63±13.85)pg/ml vs(27.46±7.41)pg/ml]、RF[(15.36±4.68)IU/ml vs(10.40±2.26)IU/ml]及抗CCP抗体[(96.35±18.24)RU/ml vs(83.72±11.60)RU/ml]水平均明显高于低活动组(P0.01)。骨侵蚀组血清CXCL-9[(206.52±60.37)pg/ml vs(118.28±27.63)pg/ml]、CXCL-10[(60.74±16.13)pg/ml vs(21.60±6.24)pg/ml]、RF[(17.24±5.27)vs (8.52±1.93)IU/ml]及抗CCP抗体[(98.73±19.62)RU/ml vs(81.40±10.85)RU/ml]水平均明显高于非骨侵蚀组(P0.01)。ROC曲线分析显示,血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗体诊断RA的临界值分别为104.36 pg/ml、25.40 pg/ml、9.53 IU/ml、54.80 RU/ml,四项联合诊断RA的曲线下面积(AUC)(0.920,95%CI:0.862～0.975)最大,其敏感度和特异度为93.0%和86.4%。相关分析显示,RA患者血清CXCL-9、CXCL-10与RF、抗CCP抗体及DAS28评分均呈正相关(P0.01)。结论血清CXCL-9及CXCL-10高表达与老年人RA活动度和骨侵蚀程度相关,与RF及抗CCP抗体四项联合检测有助于提高老年RA诊断的价值。     

类风湿关节炎患者血清白细胞介素-33水平与疾病进程的相关性

目的通过检测类风湿关节炎(RA)患者血清中白细胞介素(IL)-33水平,分析血清IL-33水平与RA的临床及实验室指标之间的相关性,验证IL-33参与RA的发病过程,探讨IL-33对于RA的临床意义。方法采用ELISA方法测定70例RA患者和30例健康对照者血清IL-33水平。结果 RA组血清IL-33水平为(231±335)pg/ml,高于健康对照组(6±23)pg/ml,P<0.01。高疾病活动度组血清IL-33水平为(351±391)pg/ml,高于中低疾病活动度组(145±266)pg/ml,P<0.05。RA患者血清IL-33水平与类风湿因子(RF)及抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体呈正相关(P<0.01)。结论 IL-33参与了RA的发病过程,IL-33的升高可能提示RA预后不良。     

Ⅰ型胶原吡啶交联终肽及抗环瓜氨酸肽抗体等联合检测在类风湿关节炎诊断与病情监测中的应用

目的 探讨Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(Ⅰ CTP)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)检测在类风湿关节炎(RA)诊断与病情监测中的应用.方法 2006年4月至10月对南昌大学第一附属医院住院及门诊RA患者57例(RA组)、非RA的其他风湿免疫系统疾病患者25例(非RA对照组)及健康对照(健康对照组)30名,采用ELISA定量检测测定血清Ⅰ CTP、抗CCP抗体,采用免疫散射比浊法测定血清RF、CRP.结果 (1)RF、CRP、Ⅰ CTP及抗CCP抗体在健康对照组、非RA对照组、RA活动组及缓解稳定组间差异均有显著性意义(P＜0.01),其中抗CCP抗体、RF、CRP在RA活动组中的浓度均高于其他组,而在健康对照组、RA缓解稳定组及非RA对照组间差异均无显著性意义(P＞0.05);血清Ⅰ CTP在RA活动组中的浓度高于RA缓解稳定组与健康对照组,而RA缓解稳定组与健康对照组间差异无显著性意义(P＞0.05).(2)RA组RF、抗CCP抗体、Ⅰ CTP、CRP的阳性率分别为73.7%,52.6%,61.4%,56.1%.(3)Ⅰ CTP与抗CCP抗体、RF、CRP,抗CCP抗体与RF、CRP及RF与CRP在RA组中均呈正相关(rs=0.474,0.366,0.645,0.536,0.643,0.555,P均＜0.05),且定性结果相关性显著(P均＜0.01);在非RA对照组中无相关(P均＞0.05).(4)RF和抗CCP抗体的联合敏感度为87.5%,联合特异度为49.9%.结论 联合检测抗CCP抗体与RF可降低RA的漏诊率.动态联合测定ⅠCTP、抗CCP抗体、RF、CRP能更有效地及时监测RA的疾病进展,对指导临床诊治及干预有积极意义.     

类风湿关节炎患者血清中肿瘤坏死因子样配体1A的测定及临床意义

目的 检测类风湿关节炎(RA)患者血清中肿瘤坏死因子样配体1A(TL1A)的水平,分析 其在RA中的临床意义。方法 收集RA患者血清100例和健康对照者50名,采用双抗体夹心酶联免疫 吸附试验(ELISA)测定血清中TL1A水平,并分析血清TL1A水平与RA各临床和实验室指标的相关性, 计量资料,符合正态分布采用t检验,非正态分布采用Mann-Whitney U检验,计数资料比较采用x2检验, 相关性分析采用Spearman相关分析。结果 RA患者血清TL1A水平为(959±1146) pg/ml,显著高于健 康对照组[(529±154) pg/ml,t=3.683,P＜0.01];并且类风湿因子(RF)、隐性类风湿因子IgG( HRF-IgG)、抗 环瓜氨酸肽(CCP)抗体阳性组TL1A水平[分别为(962±1043)、(833±1104)、(908±1115) pg/ml]均高于阴 性组TLlA水平[分别为(628±343)、(576±134)、(628±4.01) pg/ml],差异有统计学意义(t=3.224,1.317,1.003; P均＜0.05)。另外,TLlA阳性组RA患者的RF、HRF-IgG以及抗CCP抗体阳性率(分别为90％、42％、 85％)均较TL1A阴性组患者（分别为56％、11％、33％）显著升高(x2=-0.372,-2.402,-2.774;P均＜0.05)。结 论TL1A在RA患者血清中表达增高,并与多种自身抗体（包括RF、HRF-IgG和抗CCP抗体）密切相关, 可能是RA预后不良因素之一。     

RF、AKA、APF、抗CCP抗体联合检测对老年类风湿关节炎的诊断价值

目的研究类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸(CCP)抗体、抗角蛋白抗体(AKA)、抗核周因子抗体(APF)对老年类风湿关节炎(RA)的诊断价值。方法 RA患者480例为RA组,非RA自身免疫病患者300例为非RA组,健康组300例,对受检者进行RF、抗CCP抗体、AKA、APF检测。结果 RA组分别与非RA组和健康组比较,4种检测标志物阳性检出率均有显著性差异(P0.05)。单项指标比较,RF有较高的灵敏度,但特异性明显低于其他3个指标(P0.05),AKA、APF虽有较高的特异度,但灵敏度低(P0.05),抗CCP抗体有较高的灵敏度和特异度。对RA组各指标联合检测,以上指标任意2个组合比3项(抗CCP抗体+RF+APF,抗CCP抗体+RF+AKA)、4项(抗CCP抗体+RF+APF+AKA)联合检测敏感度低(P0.05),而特异度均较高,但没有明显差异(P0.05)。4项联合检测灵敏度及特异度达到最高。结论单项指标比较,抗CCP抗体有较高的灵敏度和特异度。联合指标比较,以抗CCP抗体+RF+APF或抗CCP抗体+RF+AKA3项联合检测模式诊断RA具有较高的价值,便于临床医师早期确诊,减少漏诊误诊病例。     

血清抗角蛋白抗体抗环瓜氨酸肽抗体和类风湿因子在类风湿关节炎中的意义

目的 评价抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体和类风湿因子(RF)在类风湿关节炎(RA)中的意义.方法 收集82例RA患者及56例非RA患者,测定其抗CCP抗体、AKA和RF水平,评价对RA诊断的敏感性、特异性,比较RA患者中抗CCP抗体、AKA阳性组和阴性组的压痛关节数、肿胀关节数、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、疾病活动指数(DAS)、Ritchie's指数(RAI).结果 单独检测AKA、抗CCP抗体、RF及联合检测的曲线下面积都较高(P<0.05).抗CCP抗体、AKA的特异度分别为92.9%、91.1%,联合检测AKA、抗CCP抗体和RF有任何一种及以上阳性的灵敏度最高,为95.1%.抗CCP抗体阳性组与阴性组的关节肿胀数、关节压痛数、ESR、CRP、DAS、RAI差异有统计学意义(P<0.05);AKA阳性组与阴性组的关节肿胀数、ESR、DSA差异均有统计学意义(P<0.05).结论 联合检测抗CCP抗体、RF、AKA对诊断RA有意义,抗CCP抗体、AKA可能与RA的活动度相关.     

抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体在类风湿关节炎诊断中的意义

目的了解抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体在类风湿关节炎(RA)诊断中的意义,并比较抗MCV抗体与类风湿因子(RF)、抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体以及某些临床指标的相关性。方法对166例研究对象,包括74例RA患者(其中早期18例,中晚期56例),50例非RA的风湿性疾病患者,42名健康对照,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的抗MCV抗体,同时检测其他相关自身抗体,结合临床资料进行分析。结果74例RA中抗MCV抗体阳性58例,对RA诊断的敏感性为78％,特异性为95％,阳性预测值和阴性预测值分别为97％和71％。抗MCV抗体阳性的平均抗体浓度依次为(552±380)U/ml(RA组),(162±63)U/ml(非RA组),(63±46)U/ml (健康对照组)。RA组的平均抗体水平较高。抗MCV抗体和抗CCP抗体相关性最强(r=0．502,P=0．000),APF、AKA次之(r=0．369、0．408,P＜0．01)。抗MCV抗体与各项临床、实验室指标间的差异无统计学意义(P＞0．05)。结论抗MCV抗体在RA中具有较高的敏感性和特异性,且较APE、AKA与抗CCP抗体相关性强,可作为RA诊断的辅助指标。抗MCV抗体可能与病情活动度、功能状态无关。     

类风湿关节炎合并间质性肺病患者血清表面活性蛋白A和D水平及临床意义

目的 探讨类风湿关节炎(RA)合并间质性肺病(ILD)患者的血清表面活性蛋白A(SP-A)和D(SP-D)水平及临床意义.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测SP-A和SP-D,并比较单纯RA组、RA-ILD组、对照组血清样本SPA和SP-D水平的差异,分析其与RA合并ILD的相关性.计算3组血清SP-A和SP-D阳性检出率.分析SP-A和SP-D与年龄、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗核抗体、抗核周因子(APF)和抗角蛋白抗体(AKA)之间的相关性.多组间均数的比较采用方差分析,数据间的相关性分析采用Spearman等级相关.结果 ①RA-ILD组、单纯RA组、对照组的血清SP-A水平分别为(51.2±9.2)、(25.9±2.6)、(15.4±0.3)μg/L,SP-D水平分别为(42.5±8.1)、(20.8±1.5)、(16.6±0.8)μg/L.RA-ILD组患者血清SP-A和SP-D水平高于单纯RA组以及对照组(P＜0.05).单纯RA组患者血清SP-A和SP-D水平和健康对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).②RA-ILD组血清SP-A和SP-D的阳性率明显高于单纯RA组(x2=5.21,P=0.02;x2=4.79,P=0.01)和健康对照组(x2=4.96,P=0.03;x2=4.75,P=0.02),RA-ILD组血清SP-D的阳性检出率大于血清SP-A(x2=4.95,P=0.04).③RA-ILD患者血清SP-A、SP-D水平与年龄、CRP呈正相关(r=0.687,P=0.001;r=0.571,P=0.009).④RA-ILD患者血清SP-D水平与RF、抗CCP抗体和AKA呈正相关,而血清SP-A、SP-D水平与抗核抗体、APF、ESR无相关性.结论 ①SP-A和SP-D可作为RA合并ILD的血清学标志;②SP-A和SP-D在早期诊断RA合并ILD方面有一定价值,SP-D更有效地提示RA合并ILD存在,判断肺损伤程度,预测疾病转归情况.     

类风湿性关节炎早期患者IL-17水平与骨关节损害的相关性研究

目的研究类风湿性关节炎（RA）早期患者血清IL-17水平与骨关节损害的相关性。方法采用ELISA方法检测52例RA早期患者血清IL-17和抗环瓜氨酸多肽（抗CCP）抗体水平,用放射学方法评估关节损害程度,并与血沉、c-反应蛋白（CRP）、类风湿因子（RF）等指标进行相关性分析。结果RA早期患者血清IL-17高于健康对照者（P〈0．05）;IL-17随X线分期变化,x线分期越重,IL-17水平越高（P〈0．01或〈0．05）;RA早期抗CCP抗体阳性患者血清IL-17水平高于阴性患者（P〈0．05）,RF阳性与阴性患者血清IL-17比较无统计学意义（P〉0．05）;IL-17与晨僵、抗CCP抗体、CRP、RF呈正相关（P〈0．01或P〈0．05）,而与病程、关节痛数、血沉无相关性（P〉0．05）。结论IL-17与RA的骨关节损害有关,关节损害越重,IL-17越高。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清褪黑素的变化及其意义

目的 研究阻塞性睡眠暂停低通气患者血清褪黑素的变化及其临床意义.方法 选择在兰州大学第一医院就诊,经多导睡眠监测确诊的OSAHS患者30例和健康对照10名,并用Epworth嗜睡量表进行评估.用高效液相色谱法检测血清褪黑素浓度.分别在22:30时、02:00时和07:00时测OSAHS患者和健康对照者血清褪黑素浓度.结...     

血清白细胞介素-17检测在类风湿关节炎中的临床意义

目的 研究白细胞介素(IL)-17在活动期类风湿关节炎(RA)患者血清中水平变化及意义,探讨IL-17在RA的临床意义.方法 ①用酶联免疫吸附法(ELISA)检测51例活动期RA患者(RA组)血清IL-17水平,分析其IL-17水平与临床指标的关系.②检测30例活动期RA患者(治疗组)经来氟米特(LEF)治疗前后IL-17水平变化,分析其与lI缶床指标的关系.采用成组t检验,重复测量的方差分析,单因素方差分析及Spearman相关分析进行统计学处理.结果 ①RA组血清IL-17浓度为(365±63)pg/ml,高于健康对照组(86±13)pg/ml;治疗后较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.01);②RA组血清IL-17水平与晨僵时间、肿胀指数、压痛指数、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、类风湿因子(RF)、X线分期评分、疾病活动度积分(DAS28)呈正相关(r值分别为:0.423,0.213,0.252,0.276,0.346,0.251,0.412,0.398;P均<0.05);③RA组不同x线分期:I期[(296±79)ps/L]与Ⅱ期[(360±89)pg/L]、Ⅱ期与Ⅲ期[(464±74)ps/L]、Ⅲ期与Ⅳ期[(369±83)pg/L]IL-17水平比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 活动期RA患者血清IL-17的水平比健康人升高,血清IL-17水平可作为RA活动性参考指标之一;血清IL-17水平变化可为RA疗效提供参考;IL-17参与RA的发病和骨侵蚀,可能是治疗RA的重要靶标.     

不同浓度甲氨蝶呤对外周血单个核细胞表达和分泌白细胞介素-17的影响

目的 体外观察不同浓度的甲氨蝶呤(MTX)对外周血单个核细胞(PBMCs)表达和分泌白细胞介素(IL)-17的影响,探究MTX有效治疗类风湿关节炎(RA)的可能机制.方法 分离RA患者和健康人PBMCs,予不同浓度MTX预处理,抗人CD3和抗人CD28刺激后,37 ℃体积分数为0.05的CO2培养箱培养.分别于培养的不同阶段收集细胞或上清液,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析IL-17mRNA的表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养液中IL-17的浓度;荧光抗体标记细胞表面抗原CD4和胞内蛋白 IL-17,流式细胞仪分析CD4+IL-17+细胞的比例.结果 比较采用两两配对t检验或独立样本t检验.结果 浓度为0.1、1.0、5.0、25.0μg/ml MTX组IL-17mRNA/GAPDH比值分别为(0.58±0.09、0.48±0.11、0.50±0.09、0.51±0.14),与无药抗体组(0.76±0.08)组间两两比较差异有统计学意义(P＜0.01);IL-17分泌水平则分别为(121±54)、(104±45)、(90±36)、(115±41)pg/ml,与无药抗体组(370±187)pg/ml组间两两比较差异有统计学意义(P＜0.01);MTX处理组CD4+IL-17+细胞比例的平均值下降,但统计学检验差异无统计学意义(P＜0.05).结论 MTX可以有效抑制PBMCs合成和分泌IL-17,而且在一定的剂量下可发挥显著作用,加大剂量并不能增强该作用.     

Th17细胞和调节性T细胞在系统性红斑狼疮患者中的研究

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血Th17细胞、调节性T细胞及联系两者的细胞因子白细胞介素(IL)-6的变化及其与病情活动的相关性,探讨Th17细胞、调节性T细胞在SLE发病机制中的作用.方法 收集103例SLE患者及28名健康者,SLE活动性的判断采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分方法,其中非活动组(SLEDAI≤9分)患者37例,活动组(SLEDAI＞9分)患者66例.用四色分选流式细胞仪检测外周血Th17细胞、调节性T细胞百分数,用流式细胞仪微球捕获芯片技术(CBA)检测血清IL-6浓度,并分析其与病情活动的相关性.统计学处理采用t检验、秩和检验和Spearman相关分析.结果 ①SLE患者组Th17细胞[(1.2±1.1)%]、IL-6[(35±92)pg/ml]显著高于健康对照组[(0.6±0.4)%、(6±3)pg/ml],而调节性T细胞[(1.6±1.2)%]显著低于健康对照组[(2.6±1.8)%].②SLE活动组Th17细胞[(1.6±1.7)%]显著高于SLE非活动组[(1.0±0.7)%]与健康对照组(P均＜0.05),SLE活动组调节性T细胞[(1.5±1.3)%]显著低于SLE非活动组[(2.1±2.0)%]与健康对照组(P均＜0.05),SLE活动组Th17/调节性T细胞(0.68±0.34)显著高于SLE非活动组(0.24±0.20)与健康对照组(0.13±0.09,P均＜0.05),SLE活动组IL-6[(41±22) pg/ml]显著高于SLE非活动组[(32±28) pg/ml]与健康对照组(P均＜0.05);SLE非活动组与健康对照组之间Th17细胞、调节性T细胞、Th17/调节性T细胞、IL-6差异均无统计学意义(P＞0.05).③Th17细胞百分数与SLEDAI呈正相关,调节性T细胞百分数与SLEDAI呈负相关,Th17/调节性T细胞与SLEDAI呈正相关,IL-6浓度与SLEDAI评分之间呈正相关,Th17细胞与调节性T细胞呈负相关.结论 SLE患者外周血Th17细胞、调节性T细胞及IL-6浓度较健康对照组显著增高,并与疾病活动性密切相关,说明Th17细胞、调节性T细胞可能在SLE的发生、发展中起重要作用.

Abstract：

Objective To study the changes of Th17 cell, regulatory T cell (Treg) and interleukin (IL)-6 in the peripheral blood of patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and their relationship with disease activity. Methods Percentage of Th17 and Treg in the peripheral blood of 103 patients with SLE and 28 healthy volunteers were detected by flow cytometry. The concentration of IL-6 in SLE patients and healthy volunteers was detected by cytometric bead array (CBA). The disease activity of SLE was measured by SLEDAI. SLE patients were divided into two groups: stable SLE (SLEDAI≤ 9, n=37) and active SLE (SLEDAI＞9, n= 66). The change of Th17, Treg, IL -6 and their relationship with disease activity were analyzed. Nonparamentric tests, t -test and spearman correlation were used for statistical analysis. Results The percentage of Th17 cells and the concentration of IL-6 in the peripheral blood in patients with SLE was higher than that in normal controls [respectively for (1.2±1.1)%, (35±92) pg/ml and (0.6±0.4)%, (6±3) pg/ml, P＜0.05]. However, the percentage of Treg in patients with SLE was lower than that in normal controls [respectively for (1.6±1.2)%,(2.6±1.8)%, P＜0.05]. The percentage of Th17, Th17/Treg IL-6 level in active SLE patients was higher than those in inactive SLE and those in normal controls (P＜0.05). However, the percentage of Treg in active SLE was lower than that in stable SLE patients and that in normal controls (P＜ 0.05). The percentage of Th17, Th17/Treg and concentration of IL-6 was positively correlated to disease activity(P＜0.05). But the percentage of Treg had negative correlation with the percentage of Th17 and disease activity (P＜0.05). Conclusion Th17, Treg and serum IL-6 in SLE patients are abnormal and they maybe contribute to the pathogenesis of SLE.     

(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯对类风湿关节炎的免疫调节机制研究

目的 ①研究(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对类风湿关节炎(RA)患者外周血和滑液中T细胞增殖的影响及对RA相关细胞因子的免疫调节作用.②观察EGCG对RA滑膜成纤维细胞(FLS)增殖的影响.方法 ①取RA患者外周血(30份)、滑液(23份)分离单个核细胞,并分设空白对照组,阴性对照组,甲氨蝶呤阳性对照组,EGCG低、中、高剂量组,通过同位素(3H)掺入法,在体外研究EGCG对RA患者外周血及滑液中T细胞增殖的影响;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测EGCG对RA外周血及滑液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素-γ、白细胞介素(IL)-1、IL-6和IL-17A的影响.②取RA患者滑膜组织(8例)进行原代培养,并分设空白对照组,甲氨蝶呤组(阳性对照),EGCG低、中、高剂量组,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,在体外研究EGCG对RA患者FLS增殖的影响.统计学处理采用方差分析和SNK-q检验.结果 ①RA患者外周血及滑液中EGCG高剂量组每分钟脉冲数(cpm)值[分别是(15 136±2910),(11587±3135)],较阴性对照组(42 856±2127)(35 748±4512)下降,差异均有统计学意义(P均＜0.01);外周血中ECCG高剂量组TNF-α、干扰素-γ、IL-1、IL-6和IL-17A吸光度值分别是[(321±13)、(298±20)、(132±12)、(197±7)、(59±8)pg/ml],均较阴性对照组[(458±28)、(505±26)、(346±28)、(405±25)、(109±13)pg/ml]下降,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);滑液中EGCG高剂量组TNF-α、干扰素-γ、IL-1、IL-6和IL-17A吸光度值分别是[(41.4±2.9)、(182±16)、(56.3±11.0)、(34.2±1.9)、(44±8)pg/ml],均较阴性对照组[(388.3±19.3)、(469±20)、(104.2±17.8)、(114.5±4.8)、(104±11)pg/ml]下降,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).②EGCG高剂量组FLS吸光度值(0.080±0.017),较空白对照组(0.274±0.041)下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EGCG可体外抑制RA患者外周血和滑液中T细胞增殖,抑制TNF-α、干扰素-γ、IL-1、IL-6和IL-17A分泌;可体外抑制RA FLS增殖.     

类风湿关节炎患者程序化死亡基因5与肿瘤坏死因子-α的表达及其相关性分析

目的 检测类风湿关节炎(RA)及骨关节炎患者血清、滑液中程序化死亡基因(PDCD)5及肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平,并分析PDCD5与TNF-α表达的相关性,初步探讨PDCD5在RA发病机制中的作用.方法 选取2009年12月至2010年8月50例患者(其中RA 26例,骨关节炎24例),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清、滑液中PDCD5及TNF-α的含量,统计学分析采用t检验及Pearson直线相关分析.结果 血清中,RA患者的PDCD5含量显著高于骨关节炎患者[(37±33)与(13±14) pg/ml,P＝0.02];滑液中,RA患者的PDCD5含量也显著高于骨关节炎患者[(37±26)与(11±7)pg/ml,P＜0.01].TNF-α在RA患者血清中的含量与骨关节炎患者比较差异无统计学意义(P=0.122),但其在RA患者滑液中的含量显著高于骨关节炎患者(P=0.037).PDCD5与TNF-α在RA及骨关节炎患者的血清中均呈负相关(r=-0.55,P=0.004;r=-0.51,P=0.012),PDCD5与TNF-α在RA患者的滑液中也呈负相关(r=-0.49,P=0.012),但在骨关节炎患者的滑液中无相关(r=-0.353,P=0.09).结论 PDCD5与TNF-α是RA重要的凋亡调控因子,在RA的发生发展过程中发挥重要作用.     

调节性T细胞和辅助性T细胞17的平衡变化在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的 研究调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)的平衡变化在慢性HBV感染中的作用.方法 应用ELISA法和流式细胞术分别对34例慢性乙型肝炎(CHB)患者、20例HBV相关慢加急性肝功能衰竭(ACHBLF)患者和20例健康对照者外周血中Treg和Th17分化相关细胞因子及外周血Th17和Treg细胞水平进行检测.计数资料应用Fisher's确切概率法,计量资料应用单因素方差分析和Tukey's多重比较检验.结果 ACHBLF组Th17分化相关因子IL-1β为(3.97±2.85) pg/mL,IL-6为(12.75±8.87)pg/mL,IL-21为(360.0±335.7)pg/mL,比健康对照组的IL-1β[(1.87±0.94)pg/mL,q=4.559,P＜0.01)、IL-6[(5.28±o.72)pg/mL,q=7.309,P＜0.01)和IL-21[(46.68±20.17) pg/mL,q=6.946,P＜0.01)均明显上调.ACHBLF组外周血Th17细胞比例明显高于健康对照组(q=3.972,P＜0.05).与健康对照组和ACHBLF组相比,CHB组Treg细胞分化相关因子TGF-β明显升高(q=4.536、5.323,均P＜0.01),外周血Treg比例也明显升高.ACHBLF组Th17细胞效应因子IL-17A水平最高,ACHBLF患者外周血Th17细胞比例与血清TBil水平呈正相关(γ=0.74,P＜0.01).结论 慢性HBV感染中,宿主免疫存在Th17和Treg失衡,ACHBLF组以Th17细胞活动为主,CHB组以Treg细胞活动为主.