链霉菌的大型线性质粒和抗生素产生

虽然人们认为质粒参与链霉菌产生抗生素的遗传控制,但除了紫红链霉菌SANK95570的pSV1外,尚未检测到含有结构基因和/或调节基因的质粒。特别是天蓝色链霉菌A3(2)的SCP1质粒,通过遗传和克隆的研究揭示次甲基霉素生物合成(mmy)及其抗性(mmr)基因在SCP1上形成一个至少有17kb的基因簇,从而证明它控制着次甲基霉素产生。尽管有这些累积的资料,还是没有检测到SCP1本身。一个被普遍接受的想法是这个共价闭环(CCC)DNA质粒可能太大,以至于不能将它以其完整形式分离出来。没有考虑到会牵涉到大型线性DNA质粒的问     

链霉菌高拷贝质粒pIJ101衍生物之间的“强不相容性”（上）

前言pIJ101是一个8.9kb的高拷贝质粒,可在许多链霉菌中复制。它具有自我转移的功能,至少在部分宿主中可促进染色体的重组(致育性)。从这个质粒中已经衍生了许多有用的克隆载体。在pIJ101的限制图谱上已经定位了基本复制功能,致育性决定子,两个kil功能以及相对应的kor功能。已经发现,许多成对标记的pIJ101的衍生质粒之间可在同一个变青链霉菌66寄主中共存。一个衍生质粒(如pIJ303)的转化频率并不因寄主中另一个衍生质粒(如pIJ211)的存在而大大降低。两个衍生质粒之间的重组很容易发生,说明两个质粒进入了同一个“细胞室”,然而,与拷贝数相当的两个亲本质粒相对而言,这种重组分子出现的很稀少。     

链霉菌属中含有ermE基因的质粒DNA转导及对红霉素抗性的表达

在变铅青链霉菌中质粒pIJ702是一个对链霉菌属基因和哺乳动物基因克隆和表达的有效载体。pIJ702或其衍生质粒的宿主范围很广,能在许多链霉菌中及其它放线菌中复制。我们对使pIJ702具有转导性来扩大其利用很感兴趣,现已将一段细菌噬菌体FP43DNA(hft)克隆进入pIJ702的SphI位点,形成质粒(pRHB101)可通过FP43从灰褐链霉菌ATCC23916转导到许多链霉菌属中,传递转导的hft区含有一个为头部包装或pac位点的起点。为将此转导性质粒用于遗传操作的链霉菌属中,我们必须很好了解DNA是否插入pRHB101而没有破坏转导即质粒稳定性。为了证实这一点,我们将Sacc haro polysporaerythraea的ermE基因插入pRHB101的     

吸水链霉菌应城变种质粒的分离研究

采用蔗糖浓度为13％的YEME培养基培养吸水链霉菌应城变种10-22菌株,能获得生长量较高且分散状况良好的菌丝体。在探索链霉菌质粒DNA的分离方法时,以T.Kieser的方法为基础,提高国产溶菌酶的用量和延长酶解时间,首次从吸水链霉菌应城变种中分离到一种质粒DNA分子,将它命名为pSH_(47)。同时,通过pock形成能力的检测。进一步证实这个质粒的存在。吸水链霉菌应城变种10-22菌株经吖啶橙处理后获得的部分或全部丧失5102抗生素生物合成能力的几个阻遏突变株的质粒检测结果表明,它们都有与10-22菌株相同的质粒带。     

链霉菌FM41产生的克拉维烷类新化合物—β—内酰胺酶抑制剂FM41

自福州土壤分离的β—内酰胺酶抑制剂ＦＭ４１产生菌，链霉菌ＦＭ４１经形态、培养特征和生理特性与克拉维酸产生菌俸状链霉菌直接对照比较，证明链霉菌ＦＭ４１与棒状链霉菌十分相似。链霉菌ＦＭ４１的代谢产物ＦＭ４１经理化性质和体外生物学活性研究，表明它与克技维酸和已知的克拉维烷类化合物不同，可能是克拉维烷类中的新成员，其化学结构正在研究中。     

万古霉素和D-丙氨酰-D-丙氨酸肽酶与细胞壁肽结合方式的不同,以及耐万古霉素蛋白的作用

在治疗革兰氏阳性细菌,特别是耐β-内酰胺抗生素细菌的感染上,糖肽类抗生素万古霉素的应用大大增加了。与β-内酰胺抗生素相似,糖肽类抗生素能抑制细菌细胞壁粘肽的合成,不过其抑制合成并非通过使合成酶丧失活性,而是借助与细胞壁前体五肽的D-丙氨酰-D-丙氨酸末端非共价结合,但有关细节还没有弄清。现在利用核磁共振谱技术已能探测出万古霉素与三肽末端复合的结构,并进行复合动力学的研究。另一方面链霉菌 sp·R61菌株的裂解 D-丙氨酰-D-丙氨酸肽酶的三维结构已用 X-射线技术确定,因之成为一种细胞壁合成酶的代表物。在这个基础上,作者设计了将细菌细胞壁的前体     

聚乙二醇诱导染色体DNA转化链霉菌原生质体

Bibb 等已发展一种有效的链霉菌菌株的转化系统,在含有聚乙二醇(PEG)时,原生质体吸收链霉菌共价密环 DNA。作者和 Sua-rez 与 Charter 报道把 PEG 诱导细胞外 DNA的吸收,成功地应用于转染放线菌噬菌体     

药物小分子与DNA相互作用分析方法概述

DNA是生命活动中最基本的遗传物质,是基因表达和遗传变异的物质基础。DNA由平行堆积的碱基,聚合的阴离子磷酸骨架以及两条由核苷酸链形成的大沟、小沟共同组成了药物分子和蛋白质相互识别的位点。药物小分子与DNA相互作用的方式主要有三种：非共价结合、共价结合和剪切作用。非共价结合又以3种不同的方式进行：     

质粒PIJ702转化天蓝淡红链霉菌SIPI1482菌种的条件研究

天蓝淡红链霉菌ＳＩＰＩ１４８２是一株蒽环类抗生素柔红霉素的产生菌，在建立该菌种基因工程研究所需的载体宿主系统的研究中，发现从变青链霉菌分离的质粒ＰＩＪ７０２不能直接转化ＳＩＰＩ１４８２菌种，经排除ＳＩＰＩ１４８２菌种自身内含质粒，试验了热休克衰减ＤＮＡ酶活性，不同时间培养的菌丝体制备的原生质体，ＰＥＧ１０００的浓度以及硫链丝菌素选择时间等因素对ＰＩＪ７０２转化ＳＩＰＩ１４８２菌种的影响，证实上述绪     

端粒,端粒酶和癌症

端粒是真核生物线性染色体末端,含有许多简单重复的DNA序列及相关蛋白质,其中DNA序列在进化中是高度保守的。脊椎动物的端粒由数百个到数千个串联重复的DNA序列(TTAGGG)组成。端粒除保证DNA完整复制外,在维持染色体结构稳定(保护染色体不分解和重排以及末端不相互融合等)、染色体在细胞中的定位和防止细胞衰老等方面起着重要作用。端粒酶是一种核酸蛋白质复合物,起着合成端     

樟脑胺氯乙酸铂对DNA模板的影响

本文报道樟脑胺氯乙酸铂(camphoramine chloroacetic platinum,CCP)对DNA模扳的影响。采用同位素、紫外光谱,粘度测定等技术,分析和讨论了CCP与DNA结合方式和对DNA二级结构的影响。结果表明,CCP可能以顺式双配位基形式与DNA发生共价结合,产生链内及链间交联,从而损伤了DNA模板,使DNA对碱及温度的敏感性增加,分子变短,粘度下降,最终抑制了DNA复制。     

一种新的抗革兰阳性菌药物:达托霉素

达托霉素(Daptomycin)是从一株发酵的链霉菌属玫瑰色孢子中提取出来的具有独特环状结构的脂肽类抗生素.它由一个十碳烷侧链与一个环状β-氨基酸肽链N-末端的色氨酸连接而成.     

链霉素抗元结构的探讨

纯链霉素、纯双氢链霉素与福氏完全佐剂免疫家兔可以产生抗链霉素及抗双氢链霉素抗体。我们用间接血凝抑制试验方法研究了链霉素和双氢链霉素的抗元结构,以链霉素、双氢链霉素、二链霉胺及链霉素降解物;链霉胍、麦芽酚,链霉二醣胺、链霉素酸、链霉肟等为抑制剂进行间接血凝抑制试验的结果表明二链霉胺抑制量最小,为0.15μg。推测其结构与链霉素抗元决定簇结构相似。链霉素的抗体是链霉素的醛基与蛋白质氨基共价结合形成的抗元产生的。双氢链霉素产生两种抗体,一为相应于链霉素抗体,另一种可能为双氢链霉素的胍基与蛋白质、多肽等物质作用形成抗元产生的。     

链霉素抗元结构的探讨

纯链霉素、纯双氢链霉素与福氏完全佐剂免疫家兔可以产生抗链霉素及抗双氢链霉素抗体。我们用间接血凝抑制试验方法研究了链霉素和双氢链霉素的抗元结构,以链霉素、双氢链霉素、二链霉胺及链霉素降解物;链霉胍、麦芽酚,链霉二醣胺、链霉素酸、链霉肟等为抑制剂进行间接血凝抑制试验的结果表明二链霉胺抑制量最小,为0.15μg。推测其结构与链霉素抗元决定簇结构相似。链霉素的抗体是链霉素的醛基与蛋白质氨基共价结合形成的抗元产生的。双氢链霉素产生两种抗体,一为相应于链霉素抗体,另一种可能为双氢链霉素的胍基与蛋白质、多肽等物质作用形成抗元产生的。     

克隆的HBV DNA引起黑猩猩肝炎

用分子病毒学方法对 HBV 的 DNA 序列进行分析证明,克隆的 HBV DNA 与 HBV粒子的 DNA 不同。克隆的 HBV DNA 没有缺口结构和共价连结的蛋白质,因而有人提出关于克隆的 HBV DNA 能否在体内外复制的问题。     

链霉素低拷贝质粒SCP2的分子生物学

ＳＣＰ２是一个３１ｋｂ的低拷贝链霉菌质粒，ＳＣＰ＾２＊作为ＳＣＰ２的天然突变体在载体的构建和应用方面得到了广泛的应用。用ＳＣＰ２相比，ＳＣＰ＾２＊诱动染色体的能力提高了约１０００倍，具有清晰的“麻点”形成特征并在接合时的供受体双方均携带有野生型ＳＣＰ２时没有“进入不利”的属性。通过缺失分析，已确定了与接合转移、麻点形成及质粒稳定性等功能区，对ＳＣＰ＾２＊的复制功能也进行了深入的研究。本文对ＳＣＰ２     

免疫抑制剂子囊霉素及其衍生物

子囊霉素（ａｓｃｏｍｙｃｉｎ）为２３碳的大环内酯类结构， ３０多年前从含有吸水链霉菌（ＫＫ３１７）的土壤中 分得。以往只知道它具有抗真菌和抗生素活性；直到１９８７年发现了类似物他克莫司（ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ，ＦＫ５０６，１），才推动了对子囊霉素性质和生物活性的认识。Ｆｕjｉｓａｗａ及Ａｂｂｏｔｔ公司从吸水链霉菌变种的发酵液中发现了ＦＲ·９００５２０和ＡＴＣＣ１４８９１，它们在光谱、色谱、化学结构上与子囊霉素相同，也类似于化学性质不同的环孢素Ａ（２）。子囊霉素及其类似物结合到细胞内结合蛋白亲免素（ｉm…     

吸水链霉菌FC-904发酵代谢产物29-O-去甲基雷帕霉素的分离和结构鉴定

目的 从西罗莫司产生菌吸水链霉菌FC904的发酵液中分离纯化代谢产物FIM-R85，鉴定其化学结构。方法 采用硅胶柱层析和制备液相分离纯化获得FIM-R85，进行理化性质以及NMR、UV、IR和HRMS等波谱分析，鉴定其化学结构。 结果 纯化获得HPLC纯度为98.7%的FIM-R85，其为西罗莫司类似物，与29-O-去甲基雷帕霉素同质。结论 29-O-去甲基雷帕霉素为西罗莫司产生菌吸水链霉菌FC904的发酵代谢产物之一。     

螺旋链霉菌转化的研究

以细菌质粒pBR322、pBR325、pPS108、pSS31、RP4等对螺旋链霉菌(Streptomycesspiramyceticus n.sp.298-36)成功地进行了质粒DNA的转化,转化效率达10~4转化子/μgDNA。研究了菌龄、菌丝分散状况、两价阳离子等因素对转化的影响,建立了螺旋链霉菌的转化系统。     

噻唑肽类抗生素研究进展

多数噻唑肽类抗生素能与细菌的50s核糖体亚基相结合抑制其蛋白质的合成，有些还能抑制肾素-血管紧张素系统。产生抗性的链霉菌可以合成一种甲基转移酶，将自身的23SrRNA1067位点上的腺苷2＇-OH转化成2＇-CH3，阻碍噻唑肽类抗生素与50s核糖体亚基结合。通过研究噻唑肽类化合物生物合成基因发现，产生该类抗生素的劳伦链霉菌和活力链霉菌中均含有编码非核糖体合成酶的基因．因此噻唑肽类化合物极可能是由非核糖体肽合成酶（NRPS）根据巯基模板机制装配而成。本文重点就噻唑肽类化合物的作用机制、抗性机制以及合成途径的研究进展进行综述。