联合接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位对流感病毒感染的防御作用

霍乱毒素B亚单位(CTB)是一种无毒性的霍乱毒素成分.CTB不仅是有效的肠道免疫原,也是一种肠粘膜佐剂.鼻内联合接种单剂流感病毒与CTB可诱导鼻分泌物中高水平IgA和血清中血凝抑制(HI)抗体.本文作者先给Balb/c小鼠鼻内联合接种甲型流感病毒HA疫苗和CTB,4周后再单独接种甲型流感病毒HA疫苗,观察接种后的免疫应答.小鼠接种两剂较高剂量(1.5μg)的A/PR/8/34(PR-8,H1N1)HA疫苗(第1剂与CTB联合接种)后,鼻洗液中的抗病毒IgA抗体和血清中的HI抗体应答都比第1次接种     

霍乱毒素B亚单位与流感疫苗鼻内合种可增强保护性抗体应答

最近,作者证明霍乱毒素B亚单位(CTB)用作流感病毒血凝素(HA)疫苗鼻内免疫的佐剂颇为理想.疫苗与CTB合用鼻内接种1次就可诱导抵御病毒攻击所需的高水平鼻内和血清抗病毒抗体.作者又探讨了流感病毒A/PR/8/34(PR-8)HA疫苗与CTB诱导保护性抗体水平所要的剂量、抗体应答持续时间、交叉保护性抗体程度以及CTB增加保护性抗体应答的机理.     

用呼吸道合胞病毒亚单位疫苗粘膜免疫接种小鼠

作者评价了用纯化的呼吸道合胞病毒（RSV）融合(F）蛋白和霍乱毒素（CT）佐剂疫苗粘膜免疫接种小鼠的保护效力。 取4周龄小鼠进行实验。用于鼻内接种的10μl疫苗中含CT2.5μg、F蛋白3μg;肌肉接种的0.1ml明矾疫苗中含F蛋白3μg,用PBS作安慰剂。活病毒疫苗为2.5μl中含2×10~6空斑形成单位（PFU）病毒。在0和4周各免疫1次,8周时用RSV Long株5×10~6PFU攻击。病毒攻击后4天杀死小鼠,取血清,用酶免疫试验测定抗F蛋白和CT的IgG抗体,并作微量中和试验。无菌取鼻洗液,一部分立刻用HEp-2细胞滴定病毒滴度,一部分测定IgA。 动物共分9组,每组6只。实验结果表明,鼻内接种活RSV组血清中有高滴度抗F特异IgG具有强的中和力,鼻洗液中有IgA,病毒攻击后,所有小鼠均未检出病毒。鼻内和肌肉同时接种PBS组,无抗体产生,不能阻止病毒复制,鼻内病毒滴度为log_210.1±0.2PFU。鼻内或肌肉接种F蛋白组,鼻洗液中均无IgA,不能阻止病毒复制,但后者有血清抗体。鼻内和肌肉同时接种F蛋白组亦有高滴度血清抗体但无鼻洗液IgA,病毒复制力比PBS组低。鼻内单独接种CT组,虽无抗F抗体,但能轻度抑制病毒复制,鼻洗液中病毒滴度为log_26.8±2.2 PFU,每只小鼠皆查到病毒说明与免疫接种无关。鼻内接种F+CT组,血清中有高滴度F和CT特异性IgG并     

鼻内接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位预防流感病毒感染

霍乱毒素(CT)与某种无关的抗原同时接种时,不但是有效的肠道免疫原,而且还是刺激对无关抗原的IgA和IgG抗体应答的免疫调节剂。本文作者将CT或霍乱毒素B亚单位(CTB)与流感疫苗同时接种小鼠,观察小鼠的免疫应答及流感病毒感染情况。流感HA疫苗由流感病毒A/山形/120/86(H1N1)株和A/PR/8/34(H1N1)株制成。对6～8周龄的雌性BALB/c小鼠鼻腔、腹腔或皮下接种HA疫苗和CTB或CT。4周后测定血清中血凝抑制(HI)抗体和鼻腔内流感特异性和CTB特异性IgA抗体。     

甲型流感减毒活疫苗感染儿童的分泌性和全身性免疫应答

作者用 ELISA 检测 A/Alaska/77(H3N2)或 A/Hong Kong/77(H1N1)冷适应重组株病毒感染的儿童血清和鼻洗液中的抗甲型流感病毒纯化血凝素(HA)的同型特异性抗体,结果表明,接种疫苗前儿童的血清和鼻洗液中均未测到 HA 抗体。17名儿童接种后全部有血清 IgG HA 抗体应答,16人有 IgM抗体应答。血清 IgG 抗体在4～6周达高峰。而 IgM 抗体在2周时达高峰,4～7周下降。     

微粒树脂对鼻内免疫流感HA疫苗免疫应答的增强作用

流感病毒通过上呼吸道感染,局部分泌型抗体与血清抗体的产生对诱导交叉保护很重要,因为粘膜IgA主要提供抗上呼吸道感染的保护作用,而血清IgG抗体主要保护下呼吸道,所以建立一种能刺激粘膜IgA抗体产生的免疫方法可能会提高目前灭活疫苗的保护效果。然而,单独鼻内接种灭活疫苗不能诱导足够的粘膜IgA应答,需要有效的佐剂来增强其效力。多聚微粒可能是首选的免疫佐剂,因为抗原可能会掺入这些微粒,或与这些微粒结合。作者比较了不同离子交换树脂微粒对流感病毒血凝素（HA）疫苗鼻内接种小鼠的效果的增强作用。     

优化口服菌苗:霍乱毒素作为佐剂可诱发对破伤风类毒素的全身和粘膜B细胞和抗体应答

霍乱毒素（CT）是一种有效的粘膜抗原,与不同抗原同时口服时,具有佐剂作用。作者用CT作佐剂,评估口服破伤风类毒素（TT）的B细胞抗原特异性应答,并检验CT和TT的免疫保护性。 取8～12周龄C57BL/6小鼠,分为4组,分别于0、7和14天给予口服免疫:第1组口服10μg TT和10μg CT;第2组口服100μg TT和10μg CT;第3组口服250μg TT和10μgCT;第4组仅口服250μgTT。 用ELISA检测小鼠粪便浸出物和血清中IgG、IgA、IgM抗TT,CT抗体水平。第2和第3组小鼠粪便浸出物中IgA抗TT抗体滴度分别为1:32和1:128,其余两组不产生抗TT抗体应答。口服CT后,小鼠粪便浸出物中均有IgA抗CT抗体应答。TT剂量不影响CT应答。第4组小鼠不产生抗CT抗体。仅在21天时诱发出弱血清IgG抗TT抗体应答。第2组小鼠,血清IgG抗TT抗体水平较高,第3组小鼠血清IgA抗TT抗体水平较高。血清抗CT应答IgG类最高,IgA类次之。第3组小鼠首剂免疫后,血清中无抗TT抗体,但2剂免疫后,可检出IgM和IgG抗     

口服可生物降解微球后唾液、肠道、阴道和鼻腔中的抗体应答

作者用聚丙交酯和乙交酯共聚物(PLG)制成微球包裹不同剂量的卵清蛋白(OVA).于0和4周用微球经口免疫雌性BALB/c 小鼠,初免和加强免疫均为连续口服3天.于初免后2、4、6和8周取小鼠唾液、肠道和阴道洗液及血清,用ELISA法测定IgA、IgG抗体.并于初免后1、5、9和13周取小鼠唾液腺和鼻粘膜组织.用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测抗体形成细胞(AFC).对照小鼠则口服可溶性抗原.结果显示,可溶性抗原初免或加强免疫后,血清中均未测得IgA抗体,IgG抗体可于第8周测得;初免含抗原微球后2周小鼠产生显著的血清IgA抗体应答,加强免疫后应答显著增强,8周时达最高峰,IgG抗体滴度也明显高于对照组.可溶性抗原初免后,可在小鼠唾液中检得IgA抗体,加强免疫后抗体滴度升高;而试验组小鼠2次免疫后的唾液IgA抗体均明显高于对照组.可溶性抗原免     

免疫活性肽FR48217对流感灭活疫苗免疫接种应答的增强作用

细菌细胞壁中的大分子肽聚糖是最有效的免疫刺激剂.FK156是从肽聚糖中分离出来的,它的衍生FR48217(FR)也显示出免疫刺激作用.作者用流感灭活疫苗与/不与FR合用接种小鼠,并在小鼠接种疫苗后28天用流感病毒A/PR/8/34进行攻击,通过检测血清和肺泡灌洗液中的流感病毒特异性IgA和IgG抗体滴度及肺泡灌洗液中的干扰素(IFN)活性,来研究FR增强免疫应答的机理.     

对呼吸道合胞病毒亚单位疫苗局部免疫的体液、粘膜和细胞免疫应答

本文用霍乱毒素B链(CTB)作为佐剂在小鼠体内评价了呼吸道合胞病毒(RSV)融合(F)蛋白局部免疫作用.免疫4周龄CD1小鼠、每组4～6只,亚单位疫苗鼻内接种(inl)10μl(含F蛋白2μg和CTB5～10μg),肌肉接种(im)100μl(只含F蛋白2μg),在0和4周各免疫1次,活病毒疫苗inl 50μl[含5×10~5蚀斑形成单位(pfu)],只免疫1次.最后一次免疫后4周用RSV10~6pfu inl攻击,取攻击前的血清检测抗体,攻击后5天的鼻洗液(NW)和支气管肺泡灌洗液(BAL)滴定病毒效价和抗体.     

脂质体的粘膜免疫佐剂活性

本文报告了小鼠鼻腔接种流感亚单位疫苗时脂质体的免疫佐剂活性.作者将流感亚单位疫苗掺入脂质体,采用鼻腔单剂接种或两剂接种(间隔4天)两种方案免疫Balb/c 小鼠.接种后,采集血清、肺及呼吸道粘膜洗液样品,用ELISA方法检测血清抗原持异性抗体(IgG和IgM)及粘膜分泌性IgA     

大肠杆菌LTB加痕量LT用作鼻腔接种流感疫苗的佐剂

本文讨论了大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)加痕量全毒素(LT)是否可作为鼻腔接种流感疫苗的有效佐剂.Balb/c小鼠鼻腔接种1.5μg流感血凝素(HA)灭活疫苗(以流感病毒明PR8株制备),分不加佐剂组、加2μg LTB组、加痕量LT组和同时加2μg LTB及痕量LT组(2～20ng),免疫后用ELISA方法检测小鼠的IgA和IgG抗体.结果发现,前三组诱导了临界水平的抗-HA IgG抗体应答,而最后一组诱导了较高水平的抗-HA IgG抗体应答.     

鼻腔免疫和口服霍乱毒素B亚单位菌苗后下呼吸道及男性泌尿道抗体应答

作者用霍乱毒素 B亚单位 (CTB)菌苗免疫 1 5名男性 (1 9～ 33岁 )志愿者 ,其中 9人采用鼻腔免疫法 ,接受 2 5 0μg CTB,间隔 2周免疫 2次 ;另 6人采用口服免疫法 ,接受1 .0 mg CTB和 1 0 1 1 个加热和福马林灭活的霍乱弧菌 ,间隔 2周免疫 2次。免疫前及末次免疫后 2周分别采集血清、支气管肺泡洗液(BAL)及尿液 ,采用 ELISA法测定特异性抗CTB抗体。结果表明 ,鼻腔免疫组 8人血清CTB特异性 Ig A和 Ig G抗体水平有明显增加 ,9人 BAL特异性 Ig G抗体水平均升高 8倍 ,6人 BAL 特异性 Ig A抗体增加 5倍。在口服组 ,4人血清 CTB特…     

重组西门利克森林病毒免疫小鼠可诱导抗流感病毒攻击的保护作用[英]

作者选用6～10周龄的C57Bl/6和Balb/c雌性小鼠于不同途径接种编码甲型流感病毒核蛋白（NP）、血凝素（HA）或大肠杆菌LacZ蛋白的重组西门利克森林病毒（rSFV）。结果表明,在静脉免疫后14天半数小鼠加强免疫rSFV-LacZ病毒。第1次注射后4周采血,ELISA结果显示所有接种10~6感染单位（I.U.）的小鼠都可检出特异性抗LacZ抗体,加强免疫小鼠IgG滴度明显提高;1次接种10~4I.U.测不到IgG,加强免疫后3/4 小鼠血清可检出IgG。除对Balb/c比小鼠与C57Bl/6小鼠静脉、鼻内和皮内接种10~6I.U.SFV-LacZ病毒外,还对C57Bl/6 小鼠进行     

蛋白体-SEB类毒素菌苗的免疫原性和效力

作者采用不同的抗原类型[葡萄球菌肠毒素B(SEB)类毒素或蛋白体-SEB类毒素]、接种途径(鼻内和胃肠道外)及免疫程序在小鼠中测定蛋白体-SEB类毒素菌苗的免疫原性和小鼠抵御致死性SEB攻击的能力.作者将由B群脑膜炎球菌制备的蛋白体与SEB类毒素结合制成菌苗,每剂菌苗的Al(OH)_3含量为4.34mg/ml.用聚丙烯酰胺凝胶电泳、体内脱毒试验和鼠脾淋巴细胞增殖试验进行类毒素鉴定和脱毒的确证.用ELISA法测定血清中抗-SEB IgG抗体和肺、肠洗液中IgA抗体.用SEB攻击试验测定菌苗在体内的效力.     

淋球菌NspA核酸疫苗小鼠体内诱生保护性抗体研究

目的进一步研究前期构建淋球菌NspA真核细胞表达质粒pcNspA作为淋病核酸疫苗的可行性。方法将pcNspA分别通过肌内注射(IM)、滴鼻(IN)和阴道接种(IVAG)等3种途径免疫BALB/c小鼠,对免疫鼠的血清、支气管肺泡和阴道洗液等样品分别用间接ELISA检测淋球菌特异性抗体的类型和效价,比较不同接种途径刺激小鼠体内特异性抗体水平的差异以及相应抗体的体外溶菌活性。结果 pcNspA质粒经滴鼻免疫和肌内注射均可在小鼠体内诱导产生较高的特异性体液免疫水平,尤其是滴鼻免疫途径不仅可诱生较高水平的血清IgG抗体(1∶1600),而且在支气管肺泡洗液和阴道洗液中均可检测到特异性sIgA的存在。而阴道接种pcNspA质粒仅能在阴道局部检测到较低水平的特异性sIgA。用pcNspA质粒诱生的血清IgG抗体做体外溶菌活性实验,证实滴鼻免疫小鼠血清具有溶菌活性。结论淋球菌NspA基因疫苗可在小鼠体内诱导产生特异性抗体,并对机体有免疫保护作用;滴鼻可能是淋球菌NspA核酸疫苗的一个有效接种途径。     

老年慢性气管炎和其他呼吸道感染535例病毒分离和部分病例局部抗体测定

为了研究老年慢性气管炎急性发作的病毒病因,我们从1972到1974年在南京地区采老年慢性气管炎、成年人感冒和幼婴儿急性呼吸道感染535例的咽洗液用人胚肾细胞进行病毒分离培养,结果如下: 老年慢性气管炎缓介期110例病毒分离全部阴性。老年慢性气管炎急性发作期78例中28例病毒分离阳性,阳性率为35.9％,这些毒株中已鉴定者有甲型流感病毒3株、乙型流感病毒4株、副流感病毒2株、鼻病毒8株、肠道病毒6株、腺病毒2株、泡疹病毒1株及未鉴定毒株2株。成年人感冒191例中79例病毒分离阳性,阳性率为40％,这些毒株中已鉴定者有甲型流感病毒17株、乙型流感病毒10株、鼻病毒18株、肠道病毒15株、腺病毒3株、泡疹病毒1株、及尚未鉴定的15株。幼婴儿急性呼吸道感染156例中63例病毒分离阳性,阳性率为40％,这些毒株中已鉴定者有甲型流感病毒9株、副流感8株、鼻病毒2株、肠道病毒4株、腺病毒21株、疱疹病毒5株及尚未鉴定的14株。老年慢性气管炎的急性发作和病毒感染有密切关系,引起老年慢性气管炎急性发作的病毒谱和成年人感冒的病毒谱基本上是一致的。为了观察老年慢性气管炎病人呼吸道局部抗体产生能力,任选病毒分离阳性的慢性气管炎12例和成年人感冒13例采恢复期血清、鼻咽洗液,部分病例同时采痰,用细胞培养中和法滴定抗体,结果如下:慢性气管炎组和成年感冒组的血清抗体滴度和局部抗体滴度没有明显差异。硫乙醇处理血清后,抗体滴度不变,硫乙醇处理鼻咽洗液后,抗体滴度平均下降4倍。据此,估计鼻咽洗液中抗体大部分为IgA,血清抗体大部为IgG。为了弄清慢性气管炎和感冒的病毒病因,从1972年到1974年共采集呼吸道感染535例咽洗标本进行病毒分离培养。这些病例包括老年慢性气管炎缓介期110份、老年慢性气管炎急性发作期78份、成年人感冒191份、婴幼儿急性呼吸道感染156例。共分离出病毒169株,这些毒株绝大部分已作了鉴定。老年慢性气管炎急性发作和成年人感冒分离出病毒的27例作了恢复期血清和鼻洗液中和抗体的测定,现将实验观察的内容和结果汇报如下。     

纯化的融合蛋白疫苗在RSV流行季节保护囊性纤维变性患儿抵抗下呼吸道疾病的效果

本文作者评价了经离子交换层析法纯化的呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白(PFP-2)疫苗在RSV血清阳性的囊性纤维变性(CF)患儿中的免疫原性和安全性,并评价了PFP-2免疫接种对RSV流行季节发生RSV感染和疾病的影响.流行开始时对34名1.6～8岁的RSV血清阳性CF患儿童接随机双百法分别肌肉接种1剂0.5ml PFP-2疫苗或生理盐水,每组各17人,平均年龄分别为4.5岁和5.8岁.每天记录接种后局部和全身反应,共7天.每周调查儿童急性呼吸道疾病并取患儿鼻咽洗液/咽拭子标本作RSV分离和快速抗原检测.取接种前、接种后1个月和RSV流行结束时的血清.测定RSV/A和RSV/B微量中和抗体效价.用ELISA测定血清抗F蛋     

由重组粘液瘤病毒产生的流感病毒血凝素诱导的抗体水平

粘液瘤病毒（MV）有免疫抑制的特性,为了确定它能否作为载体将抗原递呈给欧洲家兔,作者构建了表达流感病毒血凝素（HA）的重组MV株（Ur/HA）。 两只家兔皮内接种500空斑形成单位（pfu）的Ur/HA,另外两只接种5 pfu。这4只家兔仅在接种部位有轻微损害,而没有粘液瘤病的临床症状。在接种后20～34天,这些家兔均产生了抗HA抗体,抗体滴度达51200～102400。可见,接种剂量对抗体滴度没有影响。家兔的抗MV抗体滴度与抗HA抗体滴度是平行的。接种较大剂量病毒的家兔抗MA抗体出现较早,接种后34天抗体     

用复制缺陷性腺病毒重组体诱导粘膜免疫

作者将表达狂犬病病毒ＥＲＡ株糖蛋白的Ｅ１缺陷性腺病毒重组体在转染Ｅ１的２９３细胞上增殖３天后,取冻融上清液作为疫苗免疫小鼠,研究不同途径接种诱导全身和局部粘膜免疫应答的差异。 选６～１０周龄Ｃ３Ｈ／Ｈｅ雌性小鼠,分别于鼻内、皮下、直肠和阴道途径接种重组体,每鼠接种 ２ × １０６Ｐｆｕ。 １个月后,后眼窝穿刺收集血清,并取阴道灌洗液和新鲜粪便检测抗狂犬病病毒抗体,用ＥＬＩＳＡ鉴定其亚型。 结果表明,鼻内和皮下免疫组的血清抗狂犬病病毒抗体滴度较高,以ＩｇＧ２ａ为主;直肠或阴道接种组只有可检出的血清抗体。…