洛铂诱导顺铂耐药卵巢癌SKOV3/ DDP细胞的凋亡

 目的 探讨洛铂体外诱导人卵巢癌顺铂耐药SKOV3／DDP细胞凋亡及其机制。方法 采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定不同浓度和时间洛铂对SKOV3／DDP细胞的生长抑制作用，并与其亲本细胞SKOV3（敏感株）相比较；进一步通过光镜及透射电镜观察SKOV3／DDP细胞的形态学改变；并采用流式细胞仪检测细胞周期变化。结果 洛铂作用SK0V3／DDP细胞的增殖呈时间剂量依赖模式受到抑制，与SKOV3细胞相比，差异无统计学意义（P〉0．05）；一定浓度的SKOV3／DDP作用一定时间，可诱导SKOV3／DDP细胞发生凋亡；光镜和透射电镜下可见典型的凋亡细胞形态学改变；流式细胞技术分析发现洛铂作用首先引起细胞周期分布的改变，随用药时间的延长，凋亡率逐渐升高。结论 洛铂通过诱导凋亡而抑制体外培养的SKOV3／DDP细胞生长，其机制可能与细胞G0／G1期阻滞有关。     

姜黄素逆转卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP耐药性及机制的研究

目的：探讨姜黄素对耐药卵巢癌细胞增殖、凋亡及对顺铂敏感性的影响并探讨其机制。方法：采用MTT法检测顺铂、姜黄素、顺铂与姜黄素合用对COC1/DDP细胞的生长抑制作用;用流式细胞仪检测2.5μg/ml顺铂、20μmol/L姜黄素、2.5μg/ml顺铂与20μmol/L姜黄素合用作用于COC1/DDP细胞48h后的细胞凋亡率;RT-PCR法检测上述各组细胞凋亡相关基因Bcl-2、Caspase-3、Survivin的表达。结果：姜黄素浓度在（15-35）μmol/L以内时对COC1/DDP有明显的增殖抑制作用,且呈一定的剂量-效应关系。顺铂的浓度在（1.25-5）μg/ml时加入姜黄素20μmol/L后耐药细胞生存率下降明显（P〈0.05）,尤以顺铂2.5μg/ml和姜黄素20μmol/L联合作用时,耐药细胞生存率下降最明显;COC1/DDP中顺铂与姜黄素联合用药与单独用顺铂相比,凋亡率明显增加（P〈0.05）;顺铂与姜黄素联合用药与单独用顺铂相比Bcl-2、Sur-vivin mRNA的表达明显降低（P〈0.05）,Caspase-3 mRNA的表达明显增高（P〈0.05）。结论：姜黄素能够显著抑制COC1/DDP增殖,并能增强该细胞系对顺铂的敏感性,其机制可能与降低Bcl-2、Survivin基因的表达,增加Caspase-3基因的表达有关。     

奈达铂体外诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞凋亡的机制

目的探讨研究奈达铂（NDP）体外对人卵巢癌顺铂原发耐药细胞株SKOV3和继发耐药株SKOV3/DDP的抑制作用及其机制。方法采用MTT法检测体外不同时间不同浓度的NDP对SKOV3及SKOV3/DDP细胞的杀伤作用,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞术(FCM)测定给药前后细胞凋亡率及周期分布变化;半定量PCR分析凋亡基因Bcl-2,Bax,caspase-3,caspase-9及反应肿瘤细胞侵袭力的基因MMP-2的表达变化。结果NDP能明显抑制SKOV3及SKOV3/DDP生长,呈时间-剂量依赖性;流式结果显示随时间、浓度增加,SKOV3和SKOV3/DDP细胞凋亡明显增加,S期细胞的比例增加,差异均有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,Bcl-2、MMP-2表达减少,Bax,caspase-3,caspase-9表达增加。结论NDP可抑制SKOV3和SKOV3/DDP细胞增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡,细胞S期阻滞,下调Bcl-2及上调Bax,caspase-3,caspase-9的表达有关;同时可下调MMP-2的表达,有利于降低卵巢癌细胞的侵袭力。     

伊马替尼对人卵巢癌细胞SKOV-3增殖及顺铂、紫杉醇敏感性的影响

目的：探讨伊马替尼对人卵巢癌细胞SKOV-3增殖和对顺铂、紫杉醇敏感性的影响及其作用机制。方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）快速比色法检测细胞增殖率、Hoechst33342染色检测细胞凋亡;采用免疫荧光测定伊马替尼处理前后人卵巢癌细胞株SKOV-3 p-PDGFRβ的表达情况。结果：伊马替尼可以诱导SKOV-3细胞凋亡,对其增殖抑制作用与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）,并显著提高了SKOV-3细胞对顺铂、紫杉醇的敏感性（P〈0.05）;PDGF-BB可促进PDGFRβ发生磷酸化,伊马替尼在体外阻断了SKOV-3细胞p-PDGFRβ的表达,p-PDGFRβ可能是伊马替尼的主要作用靶点。结论：伊马替尼对SKOV-3细胞有明显杀伤作用,并显著增强该细胞株对顺铂、紫杉醇的敏感性;伊马替尼可在体外阻断SKOV-3细胞PDGFRβ的磷酸化,这可能是其影响细胞增殖的主要途径之一。     

曲古抑素A对耐顺铂人肺腺癌细胞株凋亡影响及其机制的探讨

目的:探讨曲古抑素A(TSA)诱导耐顺铂(DDP)人肺腺癌A549/DDP细胞株凋亡的作用及机制。方法:荧光染色检测细胞凋亡,蛋白质印迹法分析cFLIP、Caspase-8、Caspase-3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)蛋白表达的变化,同时比色法测定Caspase-8活性。结果:曲古抑素A能诱导凋亡A549/DDP细胞株凋亡,随着浓度增加,其凋亡率逐渐增加。蛋白质印迹法结果显示,TSA处理细胞后,cFLIP蛋白水平下降,Pro-caspase-8减少,提示该酶被激活,促使Bid蛋白切割。Procaspase-3减少,提示酶被激活。PARP蛋白减少,切割的条带逐渐增加,提示PARP活性增加,促进细胞凋亡。比色法结果显示TSA对Caspase-8活性和cFLIP的影响具有浓度和时间依赖性。结论:TSA可以通过降低cFLIP水平激活Caspase-8诱导A549/DDP细胞凋亡。     

苯丁酸调控对顺铂抑制人肺腺癌A549/DDP耐药细胞株增殖与侵袭协同作用研究

目的肺癌已成为威胁人类生存的重要杀手,且随着环境恶化,其发病率和死亡率有逐年升高趋势。本研究分析4-苯丁酸对顺铂作用下人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP细胞增殖和侵袭影响,为临床治疗提供参考。方法体外培养人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP至生长状态良好,分析顺铂及4-苯丁酸联合顺铂对A549/DDP细胞株增殖作用,酶联免疫吸附测定法分析细胞凋亡相关蛋白表达变化,Transwell实验分析细胞侵袭力变化,蛋白质印迹法和免疫细胞化学分析细胞中JAK/STAT信号通路蛋白表达变化。结果随着时间延长,各组对A549/DDP细胞株增殖抑制率呈上升趋势,且高剂量4-苯丁酸联合顺铂组对A549/DDP细胞株增殖抑制率较高,差异有统计学意义,F药物=110.342,P<0.001;F时间=34.527,P<0.001;F药物×时间=58.321,P<0.001。与对照组相比,低剂量4-苯丁酸联合顺铂组和高剂量4-苯丁酸联合顺铂组细胞凋亡蛋白Bcl-2水平降低,Bax、Caspase-3和Caspase-6水平升高,均P<0.001。对照组、顺铂组、低剂量4-苯丁酸联合顺铂组和高剂量4-苯丁酸联合顺铂组细胞侵袭力分别为423.3±35.6、389.3±24.7、375.6±35.2和285.6±23.9,F=44.458,P<0.001;蛋白质印迹法检测发现对照组、顺铂组、低剂量4-苯丁酸联合顺铂组和高剂量4-苯丁酸联合顺铂组JAK2水平分别为1.32±0.26、1.01±0.24、0.90±0.12和0.74±0.13,F=18.633,P<0.001;STAT2水平分别为0.78±0.13、0.70±0.15、0.62±0.09和0.54±0.09,F=18.996,P<0.001;STAT3水平分别为1.01±0.23、0.89±0.14、0.74±0.10和0.40±0.10,F=19.687,P<0.001。免疫细胞化学法检测发现对照组、顺铂组、低剂量4-苯丁酸联合顺铂组和高剂量4-苯丁酸联合顺铂组JAK2水平分别为0.85±0.14、0.78±0.11、0.62±0.17和0.52±0.09,F=21.854,P<0.001;STAT2水平分别为0.85±0.20、0.77±0.14、0.69±0.08和0.52±0.13,F=17.852,P<0.001;STAT3水平分别为0.63±0.14、0.57±0.11、0.50±0.09和0.42±0.08,F=29.754,P<0.001。结论4-苯丁酸调控对顺铂作用下人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP细胞增殖、侵袭有明显抑制作用,且其作用可能与影响JAK/STAT信号通路蛋白表达有关。     

CIK分泌的细胞因子对逆转耐顺铂肺腺癌细胞系A549/DDP耐药性的研究

  目的   探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer, CIK) 分泌的细胞因子在逆转耐顺铂(DDP) 人肺腺癌细胞系A549/DDP顺铂耐药性中的可能作用。   方法  采用transwell非接触共培养CIK与A549/DDP细胞, 收集不同时间点的共培养上清, 酶联免疫试剂方法(ELISA) 检测IFN-γ、TNF-α、IL-2的分泌情况, 四氮甲唑兰比色法(MTT法) 检测DDP耐药性的变化, 实时定量PCR检测GST-π基因表达水平的变化。   结果  分析发现A549/DDP细胞的耐药逆转与IFN-γ的分泌水平显著相关, 与TNF-α、IL-2的分泌量无显著相关。给予anti-IFN-γ中和抗体后, 共培养20h A549/DDP的DDP耐药性显著上升(P < 0.05), GST-π基因水平的表达量较未加中和抗体组也显著增加(P < 0.05)。而加入anti-TNF-α、anti-IL-2中和抗体组, A549/DDP细胞的DDP耐药性及GST-π基因水平的表达量较未加入中和抗体组无明显变化(P > 0.05)。   结论  CIK通过分泌IFN-γ下调A549/DDP细胞中GST-γ的表达来实现其逆转DDP耐药的作用。      

细胞因子诱导的杀伤细胞逆转耐顺铂肺腺癌细胞系A549/DDP耐药性的研究

  目的  观察细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer, CIK)对耐顺铂(DDP)人肺腺癌细胞系A549/DDP的耐药逆转作用及其逆转A549/DDP耐药的可能机制。  方法  A549/DDP与CIK细胞采用Transwell非接触共培养。四氮甲唑兰比色法(MTT法)验证A549/DDP的DDP耐药性及检测共培养前后A549/DDP对DDP耐药性的变化。RT-PCR法筛选A549与A549/DDP有差异表达的基因作为检测耐药性变化的观察指标, 并检测共培养前后A549/DDP中基因表达水平的变化; Western blot检测A549及共培养前后A549/DDP中基因蛋白水平的变化。  结果  A549/DDP的耐药系数为14.5, 具有较强的DDP耐药性。RT-PCR筛选出A549与A549/DDP表达有差异的耐药相关基因为谷胱甘肽转移酶(glutathione-S-transferase, GST-π)基因、人类铜离子转运蛋白(human copper transporter1, hCTR1)基因, A549/DDP中GST-π表达量明显增加, hCTR1表达量明显降低。与CIK细胞共培养后, A549/DDP对DDP的耐药性明显下降, 共培养20h后耐药逆转倍数约为4.93倍, 细胞内GST-π基因及蛋白水平的表达明显降低(P < 0.05)。  结论  CIK细胞对A549/DDP有逆转DDP耐药的作用, 其机制可能与下调GST-π基因及蛋白水平的表达有关。      

淫羊藿苷通过IL-6/STAT3通路逆转肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药的作用机制研究

目的 探讨淫羊藿苷(ICA)对A549/DDP细胞顺铂耐药的逆转作用及对白细胞介素-6(IL-6)和信号传导子及转录激活子3(STAT3)信号通路的调节。方法 第4代对数生长期的A549/DDP细胞随机分为A549/DDP组和ICA组,MTT法检测不同浓度ICA对细胞增殖率的影响。采用不同浓度DDP及50、100μmol/L ICA处理A549/DDP细胞,MTT法检测ICA对A549/DDP细胞化疗敏感性的影响。采用4μg/mL DDP和50、100μmol/L ICA处理A549/DDP细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell试验检测细胞侵袭能力,qRT-PCR检测细胞中肺耐药蛋白(LRP)和多药耐药蛋白(MRP) mRNA相对表达量,蛋白印迹法检测IL-6、STAT3、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量。结果 细胞增殖率随ICA浓度的增加而降低(P<0.05)。与单独使用不同浓度DDP处理A549/DDP细胞比较,50和100μmol/L ICA处理提高细胞对DDP的敏感性,降低DDP对细胞的半数抑制浓度(IC50)(P&...     

β-榄香烯增强奥沙利铂抑制人胃癌细胞的增殖及其机制

目的:探讨β-榄香烯联合奥沙利铂对人胃癌SGC7901细胞增殖的影响,并进一步探讨其机制。方法:MTT法检测细胞的药物敏感性,流式细胞术PI染色检测细胞凋亡,Western Blot检测蛋白表达,应用SPSS(13.0软件包)进行统计学分析。结果:奥沙利铂以剂量依赖的方式抑制SGC7901细胞增殖,24h的IC50为(28.29±3.67)mg/L;低毒剂量(5μg/ml)的β-榄香烯联合奥沙利铂组细胞IC50明显降低至(14.04±0.71)mg/L,且明显增强了奥沙利铂诱导的细胞凋亡(P<0.05);进一步检测了β-榄香烯作用后GST-π蛋白的表达情况,结果显示β-榄香烯以剂量依赖的方式下调GST-π蛋白表达。结论:β-榄香烯增强奥沙利铂抑制人胃癌细胞的细胞毒作用,其机制可能与降低GST-π蛋白的表达有关。     

Effect of Diallyl Trisulfide on Human Ovarian Cancer SKOV-3/DDP Cell Apoptosis

Aim: To investigate the effects of diallyl trisulfide (DT) on apoptosis of cisplatin (DDP)-resistant humanepithelial ovarian cancer SKOV-3 cells (SKOV-3/DDP), and the role of p53 upregulated modulator of apoptosis(PUMA). Methods: SKOV-3/DDP cells were randomly divided into control, DT, DPP and DPP+DT groups,which were treated with DT or combined DT and DDP. All cells were incubated for 48 h. and apoptosis rateswere assessed by flow cytometry. mRNA and protein expression of PUMA, Bax and Bcl-2 was determined byRT-PCR and Western blot assays, respectively. Results: Compared with control group, the apoptosis rates ofSKOV-3/DDP cells in DT groups were obviously increased, with dose-dependence (P < 0.05), the mRNA andprotein expressions of PUMA, Bax also being up-regulated (P < 0.05), while those of Bcl-2 were down-regulated(P < 0.05). Compared with DT groups, the apoptosis rate in the DDP+DT group was significantly increased (P< 0.05). After knockdown of PUMA with specific siRNA, the apoptosis rate of SKOV-3/DDP cells was obviouslydecreased (P < 0.05). Conclusion: DT can promote the apoptosis of SKOV-3/DDP cells with PUMA playing acritical role.     

拓扑替康诱导卵巢癌COC1/ DDP 细胞凋亡的分子机制初步探讨

  目的 探讨拓扑替康(TPT)对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1／DDP的杀伤和诱导凋亡活性及其作用机制。方法 MTT比色法与软琼脂克隆形成测定TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1／DDP的杀伤效应；TUNEL法和流式细胞仪研究TPT对靶细胞的凋亡诱导作用；Western blot检测TPT对COC1／DDP细胞内bcl-2、bax和caspase-3基因表达的影响以及caspase-3活性的改变。结果 TPT对COC1／DDP细胞有明显细胞毒性作用，不仅有剂量依赖性，也存在明显的时间依赖性；COC1／DDP细胞在TPT作用后出现特征性凋亡形态特征，且凋亡率由8．54％上升为23．16％(P<0．05)。TPT不影响COC1／DDP细胞内bcl-2蛋白表达，却明显增加19ax蛋白和caspase-3蛋白表达，并提高caspase-3活性。结论 TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1／DDP有明显的杀伤和促凋亡作用，其机制可能依赖于细胞内bax蛋白表达增高和caspase-3的活化。     

顺铂诱导卵巢癌耐药细胞系A2780/DDP凋亡的时间和剂量依从性

目的探讨不同浓度顺铂作用不同时间诱导敏感和耐药卵巢癌细胞系发生凋亡变化规律和凋亡途径相关蛋白的表达。方法选择卵巢癌顺铂耐药细胞系A2780/DDP和敏感细胞系A2780为研究对象。在细胞培养基础上,运用MTT比色法、原位标记法、常规免疫组化和蛋白印迹等方法,观察不同剂量的顺铂(5、10、20、40μmol/L)和作用不同时间(24、48、72h)对A2780和A2780/DDP细胞凋亡的影响和此动态变化过程中半胱天冬氨酸蛋白酶2(Caspase2)和3(Caspase3)表达。结果顺铂对A2780和A2780/DDP细胞系凋亡的诱导呈时间和剂量依从性。细胞凋亡蛋白Caspase2和Caspase3的活化促进顺铂诱导的凋亡,其表达呈现出对顺铂作用时间和剂量的依从性。结论(1)在顺铂耐药机理中,药物在体内分布和代谢,对血药有效浓度的影响和细胞对药物排斥引起顺铂进入细胞存在一定的阻碍可能是降低顺铂敏感性的因素。(2)Caspase2和caspase3蛋白活化延后和活性降低可能是影响耐药A2780/DDP细胞凋亡的原因。     

抗精子蛋白17单克隆抗体对人卵巢癌细胞SKOV-3的抑制作用

目的观察抗精子蛋白17单克隆抗体(anti-Sperm protein 17 monoclonal antibody,anti-Sp17 mAb)对卵巢癌细胞系SKOV-3的体外抗肿瘤活性和机制。方法采用MTT法观察抗anti-Sp17 mAb对肿瘤细胞SKOV-3的细胞毒作用;以外周血单个核细胞PBMCs为效应细胞,SKOV-3为靶细胞,在效靶比分别为80∶1、40∶1和20∶1的条件下,观察anti-Sp17 mAb的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用;以SKOV-3为靶细胞,加入浓度为2.5%、5%、10%和20%的健康人新鲜血清作为补体,观察单抗的补体依赖性细胞毒性。结果anti-Sp17 mAb对SKOV-3无明显细胞毒作用;与对照组相比,单抗对SKOV-3的ADCC作用呈剂量依赖关系,在效靶比为80∶1,孵育24 h后,细胞生长抑制率约为22%;补体的加入也可显著提高单抗对SKOV-3细胞生长的抑制率,在血清浓度为5%,单抗浓度为10 μg/ml时抑制率达到了40%。结论anti-Sp17 mAb对表达Sp17蛋白的卵巢癌细胞株SKOV-3具有明显的ADCC和CDC效应。     

去甲斑蝥酸钠对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用

[目的]探讨去甲斑蝥酸钠(SNCTD)对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及其对耐药细胞周期的影响。[方法]⑴采用CCK法筛选出SNCTD对A549/DDP的无毒浓度(即对细胞抑制率<10%的药物浓度),并检测出顺铂及与无毒浓度SNCTD联合对耐药细胞株的IC50。⑵光学显微镜下观察无毒浓度SNCTD组、单纯DDP处理组及联合用药组用药48h细胞形态的变化。⑶采用流式细胞仪观察用药48h后正常细胞组、无毒浓度SNCTD组、DDP组及DDP+SNCTD组对A549/DDP细胞周期的影响。[结果]⑴SNCTD对A549/DDP的无毒浓度为5μg/ml,与DDP联合用药降低A549/DDP的耐药逆转倍数为1.97。⑵无毒浓度SNCTD处理耐药细胞组光学显微镜下细胞形态未见明显改变,而联合用药组比单纯DDP作用后细胞形态明显变差。⑶无毒浓度SNCTD处理耐药细胞后细胞周期未见明显改变,单纯DDP处理后细胞阻滞在S期,联合用药后S期减少,G0/G1期细胞增多。[结论]SNCTD对A549/DDP具有耐药逆转作用,与DDP联用对耐药细胞有协同杀伤作用。     

索拉非尼对人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的影响

目的探讨索拉非尼对人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的影响。方法采用MTT法,检测不同浓度索拉非尼(1.5、3.0、6.0、12.0、24.0μmol/L)作用人卵巢癌SKOV-3细胞24、48、72 h的抑制率;Hoechst染色法观察药物处理后细胞凋亡情况;应用索拉非尼与紫杉醇不同给药方式作用于SKOV-3细胞,流式细胞仪检测药物处理后细胞周期和凋亡率变化。结果索拉非尼对SKOV-3细胞增殖具有明显抑制作用,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),并且呈剂量和时间依赖性;索拉非尼主要使SKOV-3细胞周期阻滞在S期,与紫杉醇联合给药后S期及G2/M期均有延长,且凋亡率较高(P<0.05)。结论索拉非尼对SKOV-3细胞增殖有显著抑制作用,且呈剂量和时间依赖性,紫杉醇序于索拉非尼给药时细胞凋亡率更高。     

雌激素对卵巢癌细胞体外生长的影响

目的　探讨 17-β雌二醇对人卵巢癌细胞体外生长的影响。 方法　采用MTT比色法观察 17-β雌二醇对卵巢癌细胞株HO -8910体外生长的影响 ;免疫组化法观察 17-β雌二醇作用后HO -8910雌激素受体、孕激素受体及雄激素受体的变化 ;采用DNA降解分析法、TUNEL法测雌激素对卵巢癌细胞凋亡的影响。结果　 1× 10 -6 ～ 1× 10 -5mol/L的 17-β雌二醇作用48h和 72h对HO -8910细胞生长有抑制 ;1× 10 -5mol/L的 17-β雌二醇作用 2 1天后出现明显的抑制 ;但是雌激素不影响HO -8910雌激素受体、孕激素受体及雄激素受体蛋白的表达 ,也不诱导细胞凋亡。结论　雌激素对卵巢癌细胞的影响与细胞的病理类型及激素受体有关 ,不会改变细胞的激素受体表达 ,不会诱导细胞凋亡     

Vasohibin-1重组腺病毒对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖的影响

[目的]研究内源性血管生成抑制因子vasobihin．1对人卵巢癌SKO~．3细胞体外增殖能力的影响。[方法]体外培养SKOV-3细胞,用vasohibin-1重组腺病毒感染SKOV．3细胞,采用蛋白质印迹法检测SKOV．3细胞中vasohibin．1蛋白的表达水平,应用CCK-8法检测不同时间点vasohibin-1重组腺病毒对SKOV．3细胞增殖的抑制能力。[结果]感染48h后,在SKOV-3细胞中vasohibin．1蛋白表达量与对照组相比显著性增加（P〈0．05）：25MOIvasohibin-1重组腺病毒感染SKOV．3细胞24h时．过表达组与阴性对照相比,两者之间没有统计学差异（P10．065）;余各组间相比差异均具有统计学意义（P〈0．05）,且抑制能力随MOI增大而增加（P〈0．05）,随时间的延长而增加（P〈0．05）。[结论]Vasohibin．1过表达能够抑制SKOV-3细胞的增殖能力。并具有浓度和时间依赖性,可为卵巢癌的治疗提供新思路。