胃癌相关基因GCRG123的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的:利用硫氧还蛋白融合表达系统表达胃癌相关基因 GCRG123.方法:采用PCR技术从pGEM-T质粒上扩增出含完整ORF的GCRG123 cDNA序列,将其克隆至硫氧还蛋白融合表达栽体pET102/D-TOPO中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达重组融合蛋白,SDS-PAGE分析表达产物.结果:工程菌经IPTG诱导后,高效表达出相对分子质量约18700的重组融合蛋白.薄层凝胶扫描显示,其表达量占菌体总蛋白质的23.6%.结论:在大肠杆菌中成功表达了GCRG123重组融合蛋白.     

CA242,CEA,CA19-9在胃癌及癌前病变组织中表达的相关研究

目的研究胃癌及癌前病变组织中肿瘤相关抗原表达的临床意义。方法对所有病例均行电子胃境检查，经胃镜取3块病变组织（直径约0．5cm）送病理。经病理诊断分为胃癌组32例．癌前病变组33例，对照组（浅表胃炎组）30例，同时取病变组织2块放入5％EDTA二纳液1ml中消化分离细胞，测3组病人病变组织中CA242、CEA、CA19-9的含量，同时测血清中CA242、CEA、CA19-9的含量：对3组病人组织及血清中CA242、CEA、CA19-9的含量及组织／血清比值分别进行比较。结果（1）CA242、CEA、CA19-9在胃癌及癌前病变组织中的表达明显高于血清中的表达（P〈0，01）。（2）CA242、CEA、CA19-9。在癌前病变组织中的表达明显高于对照组（P〈0.01），且在重度癌前病变组织中的表达明显高于在 中度癌前病变组织中的表达（P〈0．01），而血清中癌前病变组肿瘤相关抗原的含量与对照组差异无显著性（P〉0．05），（3）组织中CA242、CEA，CA19-9检测对胃癌诊断的灵敏度分别是84．3％、90．63％、87．50％；特异性分别是66．67％、63．49%、69．84%。结论对组织CA232、CEA、CA19-9表达的检测可预测癌前病变的危险程度，能提高早期胃癌诊断率，而血清CA242、CEA、CA19-9。检测对癌前病变的危险程度及早期胃癌的诊断价值不大。     

rasP21,GST—π在胃癌及癌前病变组织中的表达

ｒａｓＰ2 1是ｒａｓ基因共同编码的一种分子量为 2 1ＫＤ的蛋白质 ,ｒａｓ癌基因激活致Ｐ2 1过量表达[1] ,人胎盘型谷胱苷肽Ｓ 转移酶 (ＧＳＴ π)是一种重要的肿瘤标志[1] ,本研究应用免疫组化技术 (Ｓ Ｐ法 )对ｒａｓＰ2 1、ＧＳＴ π进行检测 ,观察其在胃癌及癌前病变组织中的表达 ,观察其分布和量的变化 ,探讨胃粘膜癌变过程中两种标记物复合表达的内在联系及意义。材料和方法一、材料选择我院病理科 1993年 6月至 2 0 0 0年 9月期间胃镜活检或手术切除标本共 168例 ,其中肠上皮化生4 0例 ,不典型增生 76例 (轻度 2 0例 ,中度 34例 ,重…     

胃癌及癌前病变组织中MUCl基因的表达及其意义

目的：揭示胃癌及肠化组织中的MUCl基因的表达与临床病理行为之间的联系。方法：用BCl抗体和免疫组织化学SP法检测人正常胃肠遭粘膜、肠化粘膜以及胃癌组织中MUCl基因核心蛋白的表达。结果：人正常胃粘骥组织中广泛分布MUCl基因产物(100％)、而肠化组织及胃癌组织的表达阳性率分别为759%、63．0%；胃癌组织中MUCl基因表达与癌组织大小(P<001)、淋巴结转移（P<0．05)和临床分期(P<0．01)有明显的相关；胃癌组织中MUCl基因表达程度与淋巴结转移及临床分期相关(P<0．05)．随着MUCl基因表达的增强，淋巴结转移减少，临床Ⅰ-Ⅱ期的比例增多。不同类型肠化中MUCl基因表达无差异(P>O、05)。结论：上述结论强烈提示用BCl抗体检测的MUCl基因是胃癌进展有用标志、与胃癌的嵇床病理行为密切相关，而与肠化分型无关。     

BCL—2,Fas基因蛋白在胃癌及癌前病变组织中的表达

探讨基因蛋白ｂｃｌ－２,Ｆａｓ的表达变化与胃癌及癌前病变之间的关系。方法采用免疫组化ＳＰ法,分别检测浅表性胃炎组织２０例,萎缩性胃炎３２例,肠化生３２例,胃癌３６例基因蛋白ｂｅｌ－２,Ｆａｓ的表达变化。结果Ｆａｓ基因蛋白的表达,浅表性胃炎组６５％（１３／２０）较肠化生组２１．８％（７／３２）及胃癌组１９．６％７／３６）明显增高（Ｐ＜０．００５）;ｂｃｌ－２基因蛋白表达,胃癌组织３３．３％（１２／３６）,其中高一中分化腺癌阳性表达５６．２５％（９／１６）较低分化腺癌１６．６％（２／１２）及未分化癌１２．５％（１／８）明显增高（Ｐ＜０．０５）,浅表性胃炎组无回例表达;胃炎与胃癌组之间Ｆａｓ和ｂｃｌ－２表达呈负相关,两者比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ｂｃｌ－２基因的异常表达对胃癌及癌前病变的形成发挥一定作用;Ｆａｓ基因的过度表达诱导胃炎发生,而弱表达又为胃粘膜细胞癌变提供了条件;ｂｃｌ－２与Ｆａｓ基因的表达失衡可能与胃癌的发生有关。     

生存素在胃癌及其癌前病变中的表达和临床意义

背景:生存素(survivin)是凋亡抑制蛋白家族的成员,在胃癌和癌前病变中可能有一定程度的表达,对胃癌和癌前病变的诊断有相当重要的意义。目的:探讨生存素在不同胃黏膜病变中的表达,以及胃癌组织中生存素的表达与胃癌临床病理参数的关系,以阐明生存素在胃癌发生中的作用和临床意义。方法:分别应用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)和免疫组化法检测生存素mRNA和蛋白在慢性非萎缩性胃炎、胃癌前病变和胃癌组织中的表达,分析胃癌组织中生存素的表达与胃癌临床病理参数的关系。结果:慢性非萎缩性胃炎、胃癌前病变和胃癌组织中生存素mRNA的表达率分别为2.5%、25.0%和59.6%,生存素蛋白的表达率分别为0%、15.0%和51.9%,三组间差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤累及浆膜层、有局部淋巴结转移和TNM分期Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者癌组织中生存素mRNA和蛋白的表达率分别显著高于肿瘤未累及浆膜层、无淋巴结转移和TNM分期Ⅰ～Ⅱ期者(P<0.05)。结论:生存素在胃癌中有较高的表达率,其表达与胃癌的浸润深度、局部淋巴结转移和TNM分期相关。生存素基因可能参与了正常胃黏膜、癌前病变至胃癌的转化过程,可作为胃癌的独立预后指标。     

胃癌癌前病变多基因改变研究进展

本综述了胃粘膜癌变过程中表型和基因型变化的关系，以有助于加对胃癌发病机制分子生物学变化的认识。     

细胞连接蛋白基因在胃癌中的表达、诱导及突变研究

目的 研究人胃癌基因组中Ｃｘ基因的表达、探讨诱导剂作用后Ｃｘ基因的表达变化及Ｃｘ４３编码序列有无突变。方法 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、ＲＴ－ＰＣＲ和ＰＣＲ－单链构象多肽分析。结果 １．发现了在人正常胃黏膜上皮、癌旁组织及胃癌中Ｃｘ基因的表达规律,明确了Ｃｘ基因在人胃癌基因组中的表达谱。２．维甲酸（ＲＡ）、二甲基亚砚（ＤＭＳＯ）对胃癌细胞基因组中Ｃｘ４３基因有诱导表达作用,而其本身表达的Ｃｘ４６在ＲＡ及     

幽门螺杆菌vac A基因型与胃癌及癌前病变的相关性

目的　分析胃癌高发的西安地区幽门螺杆菌 (Hp)分离株空泡形成毒素基因 (vacA)的基因型与胃癌及癌前病变的相关性。方法　建立Hp菌株库并采用聚合酶链反应 (PCR)技术进行vacA基因s、m分型。结果　 192株菌株中 ,s1型 174株 ,占 90 6 % ;s2型 18株 ,占 9 4%。m1型 99株(5 1 6 % ) ;m2型 93株 (4 8 4% )。所有菌株的PCR产物均为s1或s2 ,m1或m2。s1在胃癌分离株中表达占 94 5 % ,其中s1a型明显多于s1b(P <0 0 5 ) ;但m1和m2表达差异不显著。在胃炎组 ,仍是s1型表达占多数 (89 8% ) ,但s1a和s1b、m1和m2表达的差异无显著性。结论　无论胃癌还是胃炎均以s1型为主 ,且在胃癌组s1a型表达显著高于s1b型 ,它是否是促进胃黏膜恶性变的指标 ,尚需进一步研究。但可肯定西安地区vacA基因型以致病性较强的产毒型为主。     

胃癌相关基因GCRG213正反义真核表达载体的构建及鉴定

目的:构建胃癌相关基因GCRG213正、反义真核表达载体．方法:从pGEM-T质粒上扩增出的胃癌相关基因GCRG213的DNA片段,两端分别引入限制性内切酶KpnI,BamHI和EcoRI, BamHI识别位点．按正向、反向克隆入真核表达载体pcDNA3．1( )．测序正确的重组子pcDNA3．1-a(含GCRG213正向克隆), pcDNA3．1-b(含GCRG213反向克隆)和空载体经脂质体转染人胃癌细胞系MKN45细胞, G418筛选获得稳定转染的细胞株,采用半定量RT-PCR及Wlestern blot比较转染不同质粒的 MKN45细胞中GCRG213在mRNA和蛋白质水平上的表达差异．结果:经测序证实,GCRG213正向克隆和反向克隆正确插入真核表达载体 pcDNA3．1( ),组成重组子pcDNA3．1-a(含正向克隆),pcDNA3．1-b(含反向克隆)．重组子 pcDNA3．1-a,pcDNA3．1-b和空载体经脂质体转染人胃癌细胞系MKN45细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞株．与对应的空载体比较,RT-PCR结果显示转染pcDNA3．1-a的 MKN45细胞中其mRNA的表达上调35．4％,而转染pcDNA3．1-b的MKN45细胞中其mRNA 的表达下调32．1％;Western blot结果显示转染 pcDNA3．1-a的MKN45细胞中其蛋白的表达上调49．4％,而转染pcDNA3．1-b的MKN45细胞中其蛋白的表达下调50．3％．结论:成功构建胃癌相关基因GCRG213正、反义真核表达载体．     

KLF6在胃癌和癌前病变中的表达及其意义

目的:探讨KLF6(krüppel-like factor 6)在胃癌和癌前病变中的表达及其意义.方法:收集郑州大学第二附属医院手术切除32例胃癌组织及其配对的正常胃黏膜组织新鲜标本,采用RT-PCR检测组织中KLF6 mRNA的表达.同期收集20例正常胃黏膜、45例肠上皮化生、16例异型增生及30例胃癌组织存档蜡块,采用免疫组织化学SP法检测组织中KLF6蛋白的表达,并结合临床资料进行分析.结果:正常胃黏膜与Ⅲ型肠上皮化生、异型增生及胃癌组间KLF6蛋白的表达差异有统计学意义(均P<0.05);KLF6蛋白的表达与肿瘤分化程度、肿瘤大小相关,差异有统计学意义(均P<0.05).正常胃黏膜与胃癌组织KLF6 mRNA表达差异无统计学意义(P=0.357).结论:KLF6蛋白的表达异常与Ⅲ型肠化、异型增生、胃癌的发生发展密切相关,其在监测癌前病变的进展及早期胃癌的发现中有一定价值.     

Immunotherapy for gastric premalignant lesions and cancer

Chronic atrophic gastritis, a precancerous change for gastric cancer, shows a loss of appropriate glands, Helicobacter pylori infection and autoimmune gastritis being the two main etiologic factors. While H. pylori eradication is the mandatory treatment for the former, no etiologic treatment is available for the latter, in which a Th1-type response, modulated by Tregs and Th17 cells, is involved. H. pylori-related atrophic gastritis is a risk factor for gastric adenocarcinoma, while autoimmune atrophic gastritis is also linked to a substantial risk of gastric type I carcinoid, related to the chronic stimulus exerted by hypergastrinemia on enterochromaffin-like cells. Several studies have been published on gastric cancer treatment through an active specific immunotherapy, aimed at improving the immunoregulatory response and increasing the circulating tumor-specific T cells. No study on immunotherapy of carcinoids is available but, in our experience, the administration of an antigastrin 17 vaccine induced carcinoid regression in two out of three patients treated.     

放大色素内镜在胃黏膜癌前病变诊断中的价值

目的:探讨放大色素内镜在胃黏膜癌前病变诊断中的应用价值.方法:应用电子放大内镜,结合美蓝染色,对180例患者的胃黏膜糜烂灶进行细微结构形态学观察,将胃黏膜小凹的形态分为:A型(圆点状)、B型(短小棒状)、C型(稀疏而粗大的线状)、D型(斑块状)、E型(绒毛状)和F型(小凹结构模糊不清、消失或伴异常增生毛细血管)6型,并与观察部位活检所得的病理组织学改变进行比较分析.结果:A,B型胃小凹主要见于正常胃黏膜,而C,D,E和F型分别见于活动性、萎缩性炎症和肠上皮化生及轻、重度异型增生的胃黏膜.E型黏膜约81.8%(99/121)为肠上皮化生.F型黏膜常提示病灶已出现不同程度的异型增生86.3%(69/80),F型黏膜伴异常增生毛细血管,89.9%出现异型增生.结论:放大色素内镜能准确识别胃小凹的形态,尤其是准确识别E和F型,有助于对肠上皮化生及异型增生等胃黏膜癌前病变的镜下诊断.     

Expression of gastric cancer—associated MG7 antigen in gastric cancer,precancerous lesions and H.pylori—associated gastric diseases

AIM: To investigate the relationship between the antigen MG7 antigen expression and gastric cancer as well as precancerous condition; to study the relationship between the MG7 antigen expression and H. pyloriinfection in benign gastric lesions in order to find out the effect of H. pylori infection on the process of gastric cancer development.METHODS: The level of MG7 antigen expression was determined by immunohistochemical method in 383 gastric biopsied materials. The intestinal metaplasia was determined by histochemistry method. The H. pyloriinfection was determined by HE stain, PCR and ELISA in 291 specimens, among which only 34 cases of H. pylori-associated gastric lesions were followed up.RESULTS: The positive rate of MG7 expression in normal gastric mucosa, intestinal metaplasia, dysplasia and gastric cancer increased gradually in ascending order (P＜0.01). The positive rate of MG7 antigen expression in type Ⅲ intestinal metaplasia of gastric mucosa was higher than that of type Ⅰand Ⅱ intestinal metaplasia, being highly significant (P＜0.05).The positive rate of MG7 antigen expression in superficial gastritis, atrophic gastritis and gastric cancer increased gradually (11.9 %, 64.8 %, 91.2 %, P＜0.01). There was no significant difference between H.pylori-negative and H. pyloripositive intestinal metaplasia, atrophic gastritis and dysplasia of gastric epithelium in the positive rate of MG7 antigen expression. There was no expression of MG7 antigen in H. pylori-negative superficial gastritis. The positive rate of MG7 expression in H. pylori-positive superficial gastritis was 20.5 %, and the difference between them was significant (P＜0.05). During following up, one of the three H. pylori negative cases turned positive again, and its MG7 antigen expression turned to be stronger correspondingly. 3 of 31 H. pyloripositive cases were detected as early gastric cancer, among which one with "+++" MG7 antigen expression was diminished after H. pylori eradication.CONCLUSION: MG7 antigen expression is highly specific in gastric cancer and can be used as a good marker for screening of gastric cancer; type Ⅲ intestinal metaplasia, atrophic gastritis and dysplasia should be followed up and MG7 antigen expression has high clinical value in the dynamic follow-up study; although the positive -MG7 in positiveH. pylorisuperficial gastritis show benign morphology in features, there is still the potential risk of developing into gastric cancer, hence special attention should be paid to those showing increasing MG7 antigen expression.     

ESD在治疗早期胃癌及癌前病变中的应用

内镜黏膜下剥离术（ESD）是一种安全有效的内镜下微创治疗新技术。ESD技术具有可完整切除较大病灶、切除溃疡型病灶、提供完整病理诊断材料及预防复发等优点,为早期胃癌及胃癌前病变的诊疗开辟了新的途径。本文通过详细介绍ESD的发展、ESD的适应证、操作中所需的特殊器械及其并发症的处理,结合大量临床资料,明确ESD技术在早期胃癌和癌前病变中的应用价值。     

胃癌和癌前病变中错配修复基因hMLH1的表达及意义

目的：探讨DNA错配修复基因hMLH1在胃癌和癌前病变中的表达及临床意义．方法：应用免疫组织化学技术PV-6000二步法检测20例慢性浅表性胃炎、20例慢性萎缩性胃炎伴肠化生、8例胃腺瘤性息肉、58例胃癌患者癌组织及其癌旁组织的hMLH1基因蛋白表达．结果：hMLH1基因蛋白主要表达于黏膜上皮的细胞质内,少量表达于细胞核．在慢性浅表性胃炎上皮细胞和慢性萎缩性胃炎伴肠化生的阳性表达率(均为90%)明显高于胃腺瘤性息肉及胃癌旁组织上皮细胞的阳性表达率(分别为62．5%和62．1%),差别有统计学意义(X~2= 9．741,P=0．02)．hMLH1基因蛋白在胃癌细胞的表达率为72．41%,与前四者之间差别无统计学意义．在58例癌旁组织中,21例(36．2%)为慢性浅表性胃炎,37例(63．8%)为慢性萎缩性胃炎伴肠化生,二者hMLH1蛋白阳性表达率相近,但明显低于非胃癌患者慢性浅表性胃炎和慢性萎缩性胃炎伴肠化生的阳性表达率,差别具有统计学意义(X~2=9．885,P=0．02)．结论：hMLH1表达缺失可能是胃癌的早期分子事件,对hMLH1蛋白表达缺失的慢性胃炎患者进行随访、监测,可能有利于胃癌的早期诊断．     

胃癌癌前病变相关分子研究若干进展

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,胃黏膜上皮细胞癌变是一个渐进的过程,其主要癌前病变为胃黏膜上皮异型增生和肠上皮化生.近年来国内外学者在胃癌癌前病变的分子水平上,蛋白类、酶类、基因类等多种相关分子的表达研究取得了一定进展,筛选具有高度特异性、敏感性的标志物是今后研究的方向.