莪术不同品种含药血清对人肝癌细胞SMMC7721增殖、凋亡、细胞周期及核质比的影响

目的探讨莪术3个不同品种蓬莪术、广莪术和温莪术含药血清对人肝癌细胞SMMC7721增殖、凋亡、细胞周期及核质比的影响,为临床治疗肝癌及中药抗肿瘤复方中莪术药材的品种选择提供实验依据。方法体外培养人肝癌细胞SMMC7721,加入高、中、低剂量莪术不同品种含药血清,倒置相差显微镜下观察各组细胞形态,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪分析技术及核质比研究了各药物含药血清对肝癌细胞SMMC7721的作用。结果与阴性血清对照组比较,3个品种莪术含药血清的中、大剂量组对SMMC7721细胞生长都有抑制作用(P0.05),抑制率以温莪术中剂量最高。3个品种莪术含药血清都对SMMC7721细胞周期有影响,肝癌细胞进入S期的数量较阴性对照组减少,并且都能使G0-G1期增多,使细胞增殖减缓。温莪术中剂量含药血清组对SMMC7721细胞核质比的作用较大(P0.05),细胞出现核固缩,核质比较阴性血清对照组明显变小。结论蓬莪术、广莪术和温莪术含药血清对人肝癌细胞SMMC7721增殖、凋亡及细胞周期均有影响,温莪术中剂量含药血清组的抑制率最高,对肝癌细胞SMMC7721核质比的作用较大。莪术品种用于治疗肝癌时建议选用温莪术。     

不同中药体外不同给药对人肝癌细胞恶性增殖的影响实验

目的：观察肝癌治疗清热解毒方、行气活血方水提取物及大鼠含药血清细胞给药对人肝癌SMMC7721细胞恶性增殖的影响与差异。方法：常规方法制备清热解毒方和行气活血方水提取物（2.0 g生药/mL）,及其大鼠含药血清;采用MTT法观察不同中药体外不同给药对人肝癌SMMC7721细胞恶性增殖的影响。结果：与正常细胞（3 d）相比,清热解毒方或行气活血方水提取物对人肝癌SMMC7721细胞恶性增殖均具有抑制作用（P〈0.01）,存在量效关系。与正常细胞（3 d）相比,清热解毒方或行气活血方含药血清对人肝癌SMMC7721细胞恶性增殖亦均具有抑制作用（P〈0.01）,存在量效关系的趋势。行气活血方直接给药的药效较其含药血清更显著。结论：清热解毒方与行气活血方对人肝癌SMMC7721细胞的恶性增殖均具有抑制作用;行气活血方含药血清的药效较直接给药有下降趋势。     

塔斯品碱衍生物对人肝癌SMMC7721细胞生长的抑制作用研究

目的:分析探讨塔斯品碱衍生物对人肝癌SMMC7721细胞的生长抑制作用,研究其作用机制。方法:采用MTT法测定5种塔斯品碱衍生物对肝癌SMMC7721细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测Tas-D1对肝癌SMMC7721细胞周期的影响,ELISA法测定Tas-D1对肝癌SMMC7721细胞EGF和VEGF蛋白的影响,PCR法测定Tas-D1对EGF和VEGF的mRNA水平的影响。结果:塔斯品碱衍生物Tas-D1对SMMC7721细胞生长具有明显的抑制作用,使细胞阻滞在S期,呈现出良好的剂量依赖性。ELISA法和RT-PCR法结果表明Tas-D1对SMMC7721细胞的EGF和VEGF蛋白质的表达和mRNA的表达有一定的抑制作用(P<0.05)。结论:塔斯品碱衍生物Tas-D1能抑制人肝癌SMMC7721细胞的生长,转换细胞周期,初步作用机制主要为Tas-D1抑制SMMC7721细胞EGF和VEGF的表达。     

活性氧在红花多糖抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖中的作用

目的:研究活性氧(reactive oxygen species,ROS)在抑制人肝癌细胞增殖中的作用.方法:采用MTT法测定SPS对人肝癌SMMC - 7721细胞增殖的影响;倒置显微镜观察不同浓度的SPS作用肝癌细胞后,细胞的形态学变化;流式细胞仪检测不同剂量组细胞ROS的变化.结论:SPS可以抑制SMMC -7721细胞增殖,对其形态影响很大,可能与其促进ROS的增加有关.     

健脾益气方含药血清对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与侵袭能力的影响

目的:观察健脾益气方含药血清对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与侵袭能力的影响。方法:以TGF-β1诱导人肝癌细胞SMMC-7721上皮-间质转化(EMT)模型,制备健脾益气方大鼠含药血清,分别以0%、5%、10%、15%、20%、30%含药血清浓度干预人肝癌细胞SMMC-7721 12 h、24 h、48 h、72 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞的增殖能力,采用Transwell细胞体外侵袭实验观察细胞的侵袭能力。结果:健脾益气方对SMMC-7721 EMT细胞的增殖有抑制作用,且随含药血清浓度增高而递增,呈时间依赖性;12 h 10%含药血清,24 h 15%、20%、30%含药血清,48 h 15%含药血清与相对应浓度空白血清比较,均具有显著性差异(P0.01),其中以48 h 15%含药血清浓度对细胞增殖的抑制效果最明显。健脾益气方含药血清各个浓度组与对照组相比,细胞侵袭能力均有不同程度的下降,其中10%、15%、20%、30%浓度的含药血清都具有显著性差异(P0.01);而与空白血清组相比,15%、20%、30%浓度的含药血清均具有显著性差异(P0.01),其中以15%浓度的含药血清对细胞侵袭的抑制作用最明显。结论:15%健脾益气方含药血清作用48 h,对人肝癌细胞SMMC-7721EMT模型增殖与侵袭的抑制效果最好。     

健脾化瘀中药逆转人肝癌细胞恶性表型作用研究

目的:研究健脾化瘀中药960复方(960)对人肝癌细胞恶性表型的逆转作用及机理.方法:用960大鼠灌胃后采集的含药血清体外处理人肝癌SMMC7721细胞,MTT法检测细胞活力,ELISA法检测AFP和白蛋白(Alb),放免法检测环核苷酸水平,PCR-ELISA法检测端粒酶活性.结果:中药血清处理组,细胞活力显著减弱,Alb生成明显增多,以作用6天组作用最为明显,AFP显著降低,端粒酶活性显著低于对照组,与DDP组相近.细胞内cAMP明显高于对照组,DDP组无明显变化.结论:中药960复方具有逆转人肝癌SMMC7721细胞恶性表型作用,作用机理与升高细胞内环核苷酸水平和降低端粒酶活性有关.     

告达庭诱导人肝癌细胞SMMC7721凋亡的作用

目的：观察Caudatin体外对人肝癌细胞SMMC7721的作用。方法：采用MTT法测定不同浓度的Caudatin作用于SMMC7721细胞24，48和72h对其生长的抑制作用。用流式细胞仪以PI单染检测细胞周期、以Annexin V／PI双染检测细胞凋亡，比色法测定Caspase-3酶活力。结果：Caudatin体外能抑制人肝癌细胞SMMC7721的增殖并呈明显的时间和剂量依赖性。Caudatin体外能诱导SMMC7721细胞凋亡，并使细胞周期阻滞于G0／G1期。Caspase-3的酶活力随着Caudatin体外作用时间的延长先升高并于8h达到最大，再随时间的变化而降低。结论：Caudatin体外能显著抑制人肝癌细胞SMMC7721的生长，其抗肿瘤作用可能与其抑制肿瘤细胞增殖、阻滞细胞周期于G0／G1期，并通过激活Caspase-3诱导肿癌细胞凋亡有关。     

含雄黄血清对星形胶质细胞GLAST、GLT-1和GS蛋白表达的影响

目的:探讨含雄黄血清对星形胶质细胞(AC)兴奋性氨基酸转运体1(GLAST)、兴奋性氨基酸转运体2(GLT-1)和谷氨酰胺合成酶(GS)蛋白表达的影响。方法:以雄黄灌胃大鼠的血清为含药血清,以原代培养AC为实验对象,在总砷浓度分别为0、5、10、15、20、25μmol/L的含药血清培养基中培养48 h。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活力,Western blot法检测蛋白表达。结果:与对照组相比,AC活力、GLAST和GLT-1蛋白的表达随含雄黄血清中砷浓度的升高而逐渐降低。其中,25μmol/L含雄黄血清暴露组与对照组比较显著降低。结论:含雄黄血清暴露可对AC活力产生损伤作用,对GLAST和GLT-1蛋白表达均有明显抑制作用。     

柴胡含药血清的体外抗肿瘤作用的实验研究

目的：研究柴胡含药血清对体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721和乳腺癌瘤细胞MCF-7生长的影响。用血清药理学的方法探讨柴胡的抗肿瘤作用。方法：小鼠腹腔给以柴胡提取物后1、2、3、4h取血,制备含药血清。SMMC-7721、MCF-7细胞经不同时间点及浓度的柴胡舍药血清处理48h,MTT法检测各实验组和对照组的细胞增殖,计算抑制率。结果：柴胡提取物给药后1、2h后采集的血清对SMMC-7721及MCF-7细胞均有明显的抑制作用,与相同血清浓度的细胞对照组相比均有显著性差异（P〈0．05）,其中尤以1h含药血清作用最强。此外。柴胡含药血清的这种抑制作用随着血清浓度的增加而显著增强,表现出明确的浓度依赖性。结论：柴胡含药血清体外显示了一定的细胞毒活性。     

Survivin在槲皮素诱导肝癌细胞SMMC7721凋亡中的调节作用研究

目的研究槲皮素诱导肝癌细胞SMMC7721凋亡,探讨其诱导SMMC7721细胞凋亡与survivin蛋白表达和caspase-3活性的关系。方法采用MTT法检测槲皮素对肝癌SMMC7721细胞生长的抑制作用,Hoechst 33258荧光染色对细胞凋亡进行形态学检测,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫细胞化学检测survivin蛋白表达,分光光度法检测caspase-3的活性变化。结果槲皮素抑制肝癌SMMC7721细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性,槲皮素处理48 h的IC50为84.24μmol.L-1。形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,流式细胞仪检测表明经槲皮素处理,肝癌SMMC7721细胞周期阻滞于G0/G1期,且SMMC7721细胞survivin蛋白表达下降,caspase-3活性升高。结论槲皮素能诱导SMMC7721细胞凋亡,其机制可能是使肝癌SMMC7721细胞周期阻滞于G0/G1期,并下调survivin蛋白的表达,直接激活caspase-3而诱导SMMC7721细胞凋亡。     

丹参对肝癌转移复发防治作用的研究

目的：观察丹参对ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞株（７７２１细胞）侵袭粘附能力和对裸鼠人肝癌切除术后转移复发的影响。方法：以流式细胞仪测量丹参对７７２１细胞表面细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ）－１）的表达的影响。经细胞侵袭实验观察央参地ＳＭＶＣ－７７２１细胞侵袭运动能力及对己与纤维连接蛋白（ＦＮ）粘附的７７２１细胞脱落的影响。以ＭＴＴ法测量丹参对７７２１细胞与ＦＮ粘附的影响。以细胞粘附实验观察丹在对７７２     

参麦注射液对血管生成影响的研究

目的：探讨参麦注射液（简称参麦）对血管生成的影响。方法：采用MTT法检测参麦对牛血清促进的牛内皮细胞，人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响；琼脂糖刮除法检测参麦对牛血清促进的牛内皮细胞迁移的影响。利用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型。观察参麦对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。结果：参麦能明显抑制牛内皮细胞增殖，与SMMC-7721比较，差异有显著性；参麦能抑制牛内皮细胞迁移；并可抑制鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成。结论：参麦能抑制血管生成；抑制内皮细胞增殖和迁移可能是参麦抗血管生成的机理之一。同时也说明参麦是一种特异性血管生成抑制剂。     

蜂毒素对肝癌细胞系SMMC7721增殖的影响

目的 了解蜂毒素对肝癌细胞生长，增殖的影响。方法 采用台盼蓝排染法测定细胞的生长曲线，MTT法测定细胞增殖的抑制率，流式细胞仪检测细胞周期和细胞PCNA的表达。结果 蜂毒素可明显抑制肝癌细胞SMMC7721的生长，增殖，PCNA阳性细胞表达率随着蜂毒素剂量的增加而降低。对细胞周期的影响表现为S期细胞增加，G2/M期细胞减少。结论 蜂毒素可抑制肝癌细胞的生长。增殖，并且减少PCNA阳性细胞的表达。影响细胞周期的比率。     

清疡宁抗实验性胃溃疡作用的研究

清疡宁是含有党参、黄芪、白术等成分的新的中药复方制剂 ,具有健脾益气、理气止痛的功效 ,临床上主要用于胃及十二指肠溃疡的治疗。为了验证该制剂的药理作用并探讨其作用机制 ,本实验对该方的抗实验性胃溃疡作用进行了研究。1　材料1 .1　药物 :清疡宁 ( Qingyangning,QYN) ,浅棕色干粉 ,批号 2 0 0 1 0 32。每克干粉含有 4.65 g生药 ,由天津市现代医药开发研究所提供。临用前用蒸馏水配制成不同浓度的溶液 ,备用。西米替丁片 ,批号990 5 0 1 ,天津太平洋制药有限公司生产。1 .2　动物 :昆明种小鼠 ,购自中国医学科学院实验动物研究所繁…     

红豆杉细胞提取物抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

目的 研究红豆杉细胞提取物对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用及其机制。方法 运用台盼蓝拒染法测定肿瘤细胞生长曲线，流式细胞仪和Giemsa染色分析肿瘤细胞周期和细胞凋亡。结果 红豆杉细胞二氯甲烷提取物对肝癌细胞SMMC-7721的生长有明显的抑制作用，流式细胞仪分析发现G2／M期肿瘤细胞数量增多，经Giemsa染色发现肿瘤细胞有凋亡发生。结论 红豆杉细胞提取物可以通过诱导细胞发生凋亡而抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长。     

不同中医治法对不同肝癌细胞株的作用比较

目的 :比较不同中医治法对不同肝癌细胞株增殖的抑制作用。方法 :将不同治法的中药常规水煎醇沉后 ,采用不同浓度中药制剂直接加入培养液的给药方式 ,以MTT法测定人原发性肝癌SMMC772 1细胞株、Bel74 0 2细胞株细胞的增殖情况。结果 :①清热解毒法对两种不同人肝癌细胞株增殖的抑制作用都很明显 ,且随用药剂量的增大 ,呈量效关系 ;②活血化瘀法对SMMC772 1细胞株增殖也有较好抑制作用 ,而对Bel74 0 2细胞株增殖却作用不明显 ;③健脾理气法对SMMC772 1细胞株增殖无抑制作用 ,而对Bel74 0 2细胞株增殖却有较好作用 ;④清热解毒法与其它两治法配伍后 ,其对SMMC772 1细胞株增殖的抑制作用都不如单一清热解毒法。结论 :清热解毒法对不同肝癌细胞株增殖具有较强的抑制作用 ,支持临床大剂量使用这类中药 ,活血化瘀法与健脾理气法具有选择性的抑制作用 ,说明临床辨证论治的重要性     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用的实验研究

目的:评定熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721的增殖作用,流式细胞术研究对肝癌细胞凋亡的影响。方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞的增殖作用,流式细胞术研究其对肝癌细胞的凋亡。结果:熊果酸对SMMC-7721细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),呈时间-剂量依赖关系,24 h和72 h半数抑制浓度(IC50)分别为12.59,8.32μg·mL-1;对肝癌细胞凋亡率为14.07%,药物浓度与凋亡率呈正相关。结论:熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显抑制作用,该抑制作用可能与诱导肝癌细胞凋亡有关。