聚合酶链反应检测Kaposi肉瘤组织中类疱疹病毒DNA

近年来,国外许多研究结果认为Kaposi肉瘤与巨细胞病毒、疱疹病毒-6型、乙肝病毒、支原体等感染有关^[1].Chang等^[2]发现Kaposi肉瘤患者皮损有类疱疹病毒(HHV-8),并测定出其碱基排列顺序.为此,我们用一针对HHV-8基因的引物进行扩增,以研究HHV-8感染与Kaposi肉瘤发病的关系.     

Kaposi肉瘤组织内人类疱疹病毒8型的K15基因型研究

目的 了解Kaposi肉瘤组织中人类疱疹病毒8型(HHV-8)K15等位基因型分布情况,并初步探讨Kaposi肉瘤不同临床分型及临床表现与不同HHV-8 K15等位基因型的相关性.方法 采用酚-氯仿-异戊醇法对收集的27例Kaposi肉瘤石蜡包埋组织标本进行病毒DNA抽提,并使用巢式PCR扩增K15基因片段,然后测序并确定其等位基因型.结果 27例Kaposi肉瘤中有22例HHV-8感染为阳性,阳性率为81.48%,其中4例艾滋病-Kaposi肉瘤患者HHV-8感染均为阳性,感染率100%;在分析的22例HHV-8病毒株中,20例为P型,2例为M型;4例艾滋病-Kaposi肉瘤患者感染的均为P型HHV-8,2例M型感染者均为经典型Kaposi肉瘤患者.结论 Kaposi肉瘤组织内HHV-8的K15等位基因型主要是P型,也存在部分M型HHV-8感染者.4例艾滋病-Kaposi肉瘤患者感染的HHV-8均为P型.     

新疆Kaposi肉瘤组织中人类疱疹病毒8型潜伏期相关核抗原的检测

人类疱疹病毒8型(HHV-8)又称为Kaposi肉瘤相关疱疹病毒,与Kaposi肉瘤相关疾病的发生有密切关系^[1,2].HHV-8潜伏期相关核抗原(LANA)是HHV-8的开放阅读框73(ORF73)编码的一种病毒衣壳蛋白,潜伏感染状态病毒稳定表达LANA,它在病毒基因整合到宿主基因组的过程中起重要作用,而且可以抑制P53蛋白转录活性,因其较好的表达稳定性和特异性常用来检测HHV-8的感染状态.我们用免疫组化方法在43例新疆Kaposi肉瘤石蜡组织中检测了LANA的表达情况,并探讨了在Kaposi肉瘤发病中的作用.     

新疆Kaposi肉瘤组织内人类8型疱疹病毒DNA的检测

目的 了解Kaposi肉瘤组织内人类8型疱疹病毒(HHV-8)在Kaposi肉瘤发病中的作用。方法 应用荧光原位聚合酶链反应(PCR)方法对20例新疆Kaposi肉瘤组织进行HHV-8DNA检测,Kaposi肉瘤组织损害包括结节12份、斑块6份、斑片2份。同时和20份非Kaposi肉瘤组织,包括纤维瘤组织18份,血管瘤组织2份进行对照。结果 20例新疆Kaposi肉瘤组织中有17例检测到HHV-8DNA(阳性率为85%),而20例非Kaposi肉瘤组织HHV-8DNA均为阴性。两组阳性率经校正χ²检验,χ²=26.2,P<0.001.实验中HHV-8DNA片段主要集中于Kaposi肉瘤组织的梭形瘤细胞和血管内皮细胞。除此之外,在Kaposi肉瘤表皮角质形成细胞内也检测到HHV-8DNA片段,但DNA片段的荧光强度明显弱于梭形瘤细胞和血管内皮细胞中的荧光强度。结论 在新疆Kaposi肉瘤的发生中,HHV-8起着一定的作用,可能参与了Kaposi肉瘤的发病,但不是Kaposi肉瘤发生的唯一病因。     

蕈样肉芽肿皮损及外周血中人类疱疹病毒8型的研究

1994年Chang等^[1]采用代表性差异分析法从1例AIDS相关性Kaposi肉瘤(KS)患者的病损中发现一种新的疱疹病毒DNA序列,后正式命名为人类疱疹病毒8型(HHV-8)。蕈样肉芽肿为CD4⁺T淋巴细胞来源的原发性皮肤淋巴瘤,病因迄今不明。有认为慢性抗原刺激在本病发病中可能起作用,病毒被认为是可能的抗原之一。我们采用聚合酶链反应(PCR)检测了蕈样肉芽肿患者皮损和外周血中HHV-8特异性DNA序列。     

人疱疹病毒8型ORF75基因亚型与Kaposi肉瘤的相关性研究

目的 探讨人类疱疹病毒8型(HHV-8)ORF75基因亚型,与Kaposi肉瘤不同临床分型及侵袭性的相关性.方法 对25例新疆Kaposi肉瘤石蜡包埋组织进行HHV-8 DNA抽提、扩增及双向测序,使用Clustal W软件和PHYLIP软件包对测序结果进行发生学分析,从而确定HHV-8 ORF75基因哑型.结果 25例Kaposi肉瘤中,21例HHV-8阳性,阳性率为84%,其中7例AIDS相关型Kaposi肉瘤患者HHV-8均阳性.21例HHV-8阳性患者中,18例为HHV-8 ORF75 A亚型,3例为C亚型;不同亚型间Kaposi肉瘤患者有无黏膜损害及临床分型的分布差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 新疆Kaposi肉瘤患者感染HHV-8 ORF75亚型属于A亚型和C亚型,HHV-8 ORF75不同亚型可能与新疆Kaposi肉瘤黏膜损害及临床分型无关.     

新疆Kaposi肉瘤患者感染的人类疱疹病毒8型ORF75基因多态性研究

目的通过对人类疱疹病毒8型(HHV-8)ORF75基因多态性研究,初步探讨其与新疆Kaposi肉瘤的相关性。方法对25例新疆Kaposi肉瘤患者石蜡包埋组织进行HHV-8 DNA抽提、扩增及双向测序,使用CLUSTALW软件和PHYLIP软件包对ORF75基因进行核苷酸多态性分析。结果①25例新疆Kaposi肉瘤患者有21例HHV-8感染阳性,阳性率为84%,其中7例艾滋病相关型Kaposi肉瘤(AIDS-KS)患者HHV-8感染均为阳性。②新疆Kaposi肉瘤患者HHV-8 ORF75基因核苷酸具有多态性,存在462、618、647三个主要突变位点。结论人类疱疹病毒8型ORF75基因多态性与新疆Kaposi肉瘤具有相关性。     

人疱疹病毒8型ORF26单核苷酸多态性研究

目的 探讨人疱疹病毒8型(HHV-8)ORF26的单核苷酸多态性,分析其与Kaposi肉瘤不同临床分型及黏膜侵袭性的相关性.方法 Kaposi肉瘤患者32例,其中经典型26例,艾滋病相关型6例.使用酚-氯仿-异戊醇方法对Kaposi肉瘤石蜡包埋组织进行HHV-8 DNA抽提,采用巢式PCR方法扩增ORF26基因并双向测序,使用DNAStar软件和Clustal W软件分析ORF26基因的单核苷酸多态性.运用Fisher确切概率法对结果进行统计学分析.结果 ORF26基因研究发现,32例Kaposi肉瘤患者中HHV-8阳性30例,6例艾滋病相关型HHV-8均为阳性.30例患者的病毒株中,HHV-8 ORF26基因SNP主要集中在981T/C( 12例)、1086C/T(12例)、1139A/C(12例);HHV-8 ORF26基因单核苷酸多态性在不同临床分型或有无黏膜损害的Kaposi肉瘤之间的差异无统计学意义.结论 HHV-8 ORF26基因单核苷酸多态性可能与Kaposi肉瘤不同临床分型和黏膜侵袭性无关.     

抗人疱疹病毒8型抗体效价在不同类型Kaposi肉瘤患者中的初步调查

研究表明,新疆不但是Kaposi肉瘤的高发区,亦是人疱疹病毒8型(HHV-8)的流行区(不同人群中感染率介于12.5%～48%)~([1-2]).Sims等[3]提出高效价抗HHV-8抗体的产生是导致HHV-8感染者罹患Kaposi肉瘤的绝对危险因素.而Newton等[4]的研究表明,抗LANA(潜伏态核抗原)高效价抗体与Kaposi肉瘤侵害程度无关.     

Kaposi肉瘤患者血清人类疱疹病毒8型的检测

目的：了解干扰素治疗Kaposi肉瘤近期疗效及其对血清HHV-8 DNA检测的影响。方法：主要应用干扰素治疗4例无明显内脏损害的新疆经典型Kaposi肉瘤患者，同时在治疗前后采用PCR法检测血清HHV-8 DNA特异性片段。结果：4例患者经干扰素治疗45d后，均有不同程度的近期疗效，主要表现在皮损色泽变暗、结节和斑块变软、变平，部分小结节消退，且均无新皮损发生。但淋巴水肿无明显改观。血清HHV-8 DNA特异性片段经PCR检测，治疗后全部转阴。结论：干扰素治疗可有效地清除Kaposi肉瘤患者血清中HHV-8感染，能缓解病情，防止Kaposi肉瘤多灶病状的发生。     

新疆Kaposi肉瘤组织内人类8型疱疹病毒DNA的PCR检测

近年来人们在Kaposi肉瘤(KS)组织内发现一种新的疱疹病毒——人类8型疱疹病毒(HHV-8), 但国内目前尚未见到有关KSHHV-8的研究报道, 因此我们对新疆KS组织进行了HHV-8DNA的PCR检测, 特报道如下.     

90Sr敷贴治疗2例Kaposi肉瘤

Kaposi肉瘤在我国是少见病,有种族特性,新疆稍多^[1].我们近年又见到2例新病人,用⁹⁰Sr敷贴治疗有一定效果,报告如下.     

家族性Kaposi肉瘤中检测到人疱疹病毒8型

在艾滋病相关性、非洲地方性和经典散发性Kaposi肉瘤中均检测到人疱疹病毒8型(HHV-8),因而该病毒被看作Kaposi肉瘤发生的病因。家族性Kaposi肉瘤罕见,人们认为该病的发生主要由遗传因素决定,可能与HHV-8无关。作者采用巢式PCR和DNA测序方法,对2例家族性Kaposi肉瘤的病理活检组织作了HHV-8的特异性DNA序列(KS330 Bam序列)检测和分析。2例患者系同胞兄妹,在两个月内先后发病。结果2例患者均检测到HHV-8 KS330 Bam DNA 片断,序列分析表明其DNA     

Kaposi肉瘤组织内人疱疹病毒8型的K14.1基因型研究

目的:确定人疱疹病毒8 型K14.1基因等位基因型在Kaposi肉瘤中的分布,及与Kaposi肉瘤临床分型的关系.方法:使用酚-氯仿-异戊醇法对32例Kaposi肉瘤石蜡包埋组织进行病毒DNA提取,使用PCR法扩增K14.1基因片段,然后确定其等位基因型.结果:32 例中有27 例人疱疹病毒8型感染为阳性,阳性率为84.38%,其中5例艾滋病相关型KS患者HHV-8感染均为阳性,感染率100% ;在分析的27 例HHV-8病毒株中,24例为P等位基因型(包括5例艾滋病相关型KS患者皮损),3例为M等位基因型(均来自经典型KS).结论:本研究中,Kaposi肉瘤感染的人疱疹病毒8型的K14.1等位基因型以P等位基因型为主.     

D2-40在Kaposi肉瘤皮损中的表达

研究^[1,2]显示,Kaposi肉瘤为内皮细胞源性,但其究竟起源于血管内皮细胞还是淋巴管内皮细胞却尚未明了.我们应用D2-40淋巴管内皮标记性抗体,同时结合其他抗体,运用免疫组化方法对新疆地区皮肤Kaposi肉瘤组织进行研究,以探讨其组织发生.     

人类疱疹病毒8型ORF26基因亚型与Kaposi肉瘤的相关性研究

目的 明确Kaposi肉瘤患者感染的人类疱疹病毒8型（HHV-8）ORF26基因亚型分类，初步探讨其与Kaposi肉瘤不同临床分型及侵袭性的相关性。方法 对32例Kaposi肉瘤石蜡包埋组织进行HHV-8 DNA抽提、扩增、双向测序，使用DNAStar软件、Clustal W软件和PHYLIP软件包对测序结果进行系统发生学分析，从而确定HHV-8 ORF26基因亚型，最后运用Fisher确切概率法对结果进行统计学分析。结果 32例Kaposi肉瘤中有30例HHV-8阳性，阳性率为93.75%，其中6例艾滋病相关型患者HHV-8均阳性。30例HHV-8阳性患者中，17例为HHV-8 ORF26 A亚型，13例为C亚型。不同亚型间Kaposi肉瘤患者有无黏膜损害及临床分型的分布差异均无统计学意义（P > 0.05）。结论 Kaposi肉瘤患者感染HHV-8 ORF26亚型属于A亚型和C亚型，不同亚型与黏膜损害及临床分型无关。     

人类疱疹病毒8型基因型的研究进展

人类疱疹病毒8型广泛存在于各种临床表型的Kaposi肉瘤中,其基因型分布呈现种族与地域特异性.了解Kaposi肉瘤患者中HHV-8基因型特征及分布情况,探讨其与Kaposi肉瘤临床可能的相关性和演变及传播等具有重要意义.并对HHV-8病毒体及其基因组特征,K1和K15基因位点的生物学功能.HHV-8基因型演变呈现地域与种族特异性进行概述.     

新疆经典型Kaposi肉瘤38例临床及实验研究

目的 对1983—2003年新疆地区发现的38例Kaposi肉瘤进行临床报告，描述其临床表现、组织病理学改变以及超微结构特点等，进一步探讨新疆经典型Kaposi肉瘤的临床基病理诊断要点，Kaposi肉瘤的组织发生以及HIV—8在其发生发展中的作用。方法 对确诊住院的38例Kaposi肉瘤病例资料进行回顾性研究，对部分Kaposi肉瘤组织进行光镜和电镜观察。应用PCR和荧光原位PCR方法，对部分患者血和病理组织进行HHV—8的检测。结果 38例新疆经典型Kaposi肉瘤主要发生在新疆地区的维吾尔族和哈萨克族。血清HIV抗体检测均为阴性，内脏损害少，以皮肤损害为主，皮损主要发生在四肢末端，基本损害为斑片、斑块和结节。组织病理改变以梭型细胞和小血管增生为主，伴有红细胞外溢及含铁血黄素沉积，随皮损形态不同病理学改变有差异。电镜观察Kaposi肉瘤组织除含有分化不等的瘤血管外，肿瘤细胞大致分明、暗两大类，明细胞可能为内皮细胞起源，暗细胞可能起源于周细胞。HHV—8血阳性率为70％，组织阳性率85％。结论 新疆Kaposi肉瘤的临床表现类似于经典型，但又有一定的特点，其病理改变，随皮损的临床表现不同而有一定差异，超微结构表现支持Kaposi肉瘤起源于血管内皮细胞和周细胞的观点。HHV—8感染在新疆Kaposi肉瘤的发病机制中有重要的作用。     

免疫组化在Kaposi肉瘤中的应用

有关Kaposi肉瘤(KS)免疫组化的研究,国外文献已有较多报告,但主要是以探讨KS的组织发生为目的.为了解免疫组化在KS病理诊断中的意义,我们在既往研究的基础上^[1].应用第8因子相关抗原等4种免疫组化标记,对KS、皮肤纤维瘤、血管瘤进行了平行观察,报告如下.     

经典型Kaposi肉瘤CD164,c-myc的检测

目的探讨差异表达基因在经典型Kaposi肉瘤(KS)中的作用,为揭示KS的发病机制提供新的思路。方法采集经典型KS肿瘤组织、来源于同一患者的正常皮肤组织及血清。运用巢式PCR检测是否感染了人类8型疱疹病毒(HHV-8)。利用抑制性差减杂交(SSH)技术分析KS肿瘤组织差异基因表达谱。结果患者HHV-8检测阳性,在KS肿瘤组织中差异表达的基因28条,包括基因CD164,c-myc。结论基因CD164,c-myc在KS发病机制中可能发挥一定作用,此作用可能与HHV-8病毒感染存在一定的关系。