骨蚀灵胶囊对糖皮质激素性骨质疏松症Ⅰ型胶原mRNA表达影响的实验研究

目的观察中药骨蚀灵胶囊对糖皮质激素性骨质疏松模型家兔左侧股骨上端Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法取成年雄性大耳白家兔40只,随机分为空白对照组、激素模型组、肾骨胶囊组和骨蚀灵胶囊组。采用家兔臀肌注射醋酸泼尼松龙造成家兔糖皮质激素性骨质疏松症实验动物模型,骨蚀灵胶囊组予以骨蚀灵胶囊粉末空腹灌胃,治疗8周后处死,通过原位杂交技术检测家兔左侧股骨上端Ⅰ型胶原mRNA的表达,观察骨蚀灵胶囊对Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。结果原位杂交结果显示运用中药骨蚀灵胶囊治疗后家兔左侧股骨上端Ⅰ型胶原mRNA表达与激素模型组相比,具有显著差异(P<0.01)。结论中药骨蚀灵胶囊治疗能够提高家兔左侧股骨上端Ⅰ型胶原mRNA的表达水平,具有明显的成骨作用。     

黄芪三仙汤干预成骨细胞护骨素及护骨素配体的表达

背景：长期临床研究表明黄芪三仙汤对骨质疏松症有一定的治疗作用,基础实验研究也表明黄芪三仙汤能改善实验动物的生物力学指标。在此基础上实验拟从细胞分子水平上探讨黄芪三仙汤对成骨细胞的相关作用。目的：观察黄芪三仙汤对体外培养成骨细胞护骨素、护骨素配体基因调节的作用,探讨黄芪三仙汤治疗骨质疏松的作用机制。方法：制备黄芪三仙汤和仙灵骨葆胶囊含药血清及空白血清,对体外培养新生SD大鼠成骨细胞进行干预,应用细胞形态观察、MTT、Westernblot分析法及蛋白浓度测定法,观察各含药血清对体外培养成骨细胞的增殖及成骨细胞护骨素、护骨素配体表达的影响。结果与结论：经药物干预后成骨细胞变为长梭形、条索状,融合成片,分界较为模糊,细胞生长较密集。黄芪三仙汤可明显促进成骨细胞护骨素蛋白浓度的提高（P〈0．01）,同时也提高了护骨素配体蛋白浓度（P〈0．01）,而护骨素,护骨素配体浓度比例水平明显升高（P〈0．01）。结果可见黄芪三仙汤可能是通过调节成骨细胞分化调控因子护骨素、护骨素配体的表达来调节成骨细胞的增长,从而实现其对骨质疏松症的治疗作用。     

U6启动子引导双链RNA特异性抑制骨保护素配体的表达

目的：构建能生成与骨保护素配体(osteoprotegerin ligand，OPGL)同源的发卡结构小双链RNA的载体并验证其对OPGLmRNA的抑制效应。方法：根据大鼠的OPGL的基因序列，参考OPGLmRNA的空间结构，设计发卡结构小干预RNA(short-interfering RNA，siRNA)模版，并构建由U6启动子引导产生siRNA的质粒载体。转染大鼠骨髓基质细胞，48h后提取细胞总RNA，Northern blot，以OPGL与内参β-actin自显影产物的灰度比值来反映OPGLmRNA的表达情况，结果进行统计学分析。结果：成功获得U6启动子引导产生siRNA的质粒载体，转染骨髓基质细胞后细胞中OPGLmRNA的表达量随着质粒载体量的增加而减少。结论：U6启动子引导产生siRNA的质粒载体能有效的减低OPGLmR-NA的表达量从而抑制OPGL的表达。     

U6启动子引导双链RNA特异性抑制骨保护素配体的表达

目的:构建能生成与骨保护素配体(osteoprotegerinligand,OPGL)同源的发卡结构小双链RNA的载体并验证其对OPGLmRNA的抑制效应。方法:根据大鼠的OPGL的基因序列,参考OPGLmRNA的空间结构,设计发卡结构小干预RNA(short-interferingRNA,siRNA)模版,并构建由U6启动子引导产生siRNA的质粒载体。转染大鼠骨髓基质细胞,48h后提取细胞总RNA,Northernblot,以OPGL与内参β-actin自显影产物的灰度比值来反映OPGLmRNA的表达情况,结果进行统计学分析。结果:成功获得U6启动子引导产生siRNA的质粒载体,转染骨髓基质细胞后细胞中OPGLmRNA的表达量随着质粒载体量的增加而减少。结论:U6启动子引导产生siRNA的质粒载体能有效的减低OPGLmR-NA的表达量从而抑制OPGL的表达。     

阿仑磷酸钠对人成骨细胞增殖和护骨素／核因子KB受体活化因子配体mRNA表达的影响

背景：阿仑磷酸钠是新一代的二磷酸盐,属第2代骨质疏松药,临床上广泛用于治疗骨吸收增加类疾病。目的：观察阿仑磷酸钠对人成骨细胞增殖和核因子KB受体活化因子配体（RANKL）及护骨素（OPG）mRNA表达的影响。设计、时间及地点：单一样本观察,于2007-11／2008-03在重庆医科大学基础研究所完成。材料：成骨细胞来源于手术中取得的松质骨骨块;阿仑磷酸钠为杭州默沙东制药有限公司生产,批号：06130。方法：在含1&#215;10^-9,1&#215;10^-8,1&#215;10^-7,1&#215;10^-6,1&#215;10^-5,1&#215;10^-4mol／L不同浓度的阿仑磷酸钠培养液中培养成骨细胞,以不加阿仑磷酸钠培养为对照。主要观察指标：①成骨细胞观察。②以四甲基偶氮唑盐检测阿仑磷酸钠对成骨细胞的增殖的影响。③以半定量反转录一聚合酶链反应方法观察不同浓度阿仑磷酸钠对成骨细胞表达OPG,RANKLmRNA的影响。结果：1&#215;10^-5,1&#215;10^-4mol／L的阿仑磷酸钠抑制成骨细胞增殖,1&#215;10^-8～10^-6mol／L的阿仑磷酸钠促进成骨细胞增殖,其中1&#215;10^-8mol／L的阿仑磷酸钠对成骨细胞的增殖作用最强。阿仑磷酸钠呈浓度依赖性降低RANKLmRNA表达,干预72h,1&#215;10^-5mol／L抑制作用最大（P〈0．01）。阿仑磷酸钠呈浓度依赖性增加护骨素mRNA表达,干预72h,1&#215;10^-6mol／L增加作用最明显（P〈0．01）,而1&#215;10^-5mol／L时又减低。结论：阿仑磷酸钠能使成骨细胞增殖,1&#215;10^-8mol／L浓度增殖作用最强,其可能通过调节OPG／RANK LmRNA表达而影响骨代谢。     

胎鼠成骨细胞骨保护素及其配体mRNA表达与阿胶强骨口服液含药血清的影响

背景：阿胶强骨口服液治疗骨质疏松疗效肯定,但其确切作用机制有待探讨.目的：观察阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中骨保护素及保护素配体表达的影响,探讨阿胶强骨胶囊治疗骨质疏松的分子水平作用.设计：完全随机分组,对照实验.材料：实验于2003-06/2004-10在华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合骨代谢实验室完成.选用3月龄Wistar大鼠（雌雄各半）30只,随机分为3组,阿胶强骨口服液组和雌激素组及对照组,每组10只.选用清洁级新生SD大鼠12只用于成骨细胞的分离和培养.方法：①各组Wistar大鼠灌胃7 d后,制备各组的含药血清.②将清洁级新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞,制成单细胞悬液,消化传代,取二代培养的成骨细胞,制成细胞悬液.培养细胞被分为5组,分别加同体积药液.阿胶强骨口服液组分别加入用培养液稀释为100和500及1 000 g/L浓度的阿胶强骨口服液含药血清;雌激素组分别加入100及1 000 g/L替勃龙含药血清;对照组仅加培养液.同时各组再加入含100g/L小牛血清的培养液,继续培养.③采用四甲基偶氮唑盐比色分析法、3H-胸腺嘧啶核苷掺入法测定成骨细胞增殖,用放免法测定细胞内骨钙素含量,反转录聚合酶链反应测定胎鼠成骨细胞中骨保护素及保护素配体mRNA的表达.④组间比较采用单因素方差分析.主要观察指标：胎鼠成骨细胞经阿胶强骨口服液或利维爱含药血清干预后,细胞中骨保护素及保护素配体mRNA的表达.结果：①成骨细胞增殖四甲基偶氮唑盐比色分析法及3H-胸腺嘧啶核苷测定结果：阿胶强骨口服液组和替勃龙组各药物血清组明显高于对照组（P＜0.05～0.01）,并在500g/L时达到最大效应（P＜0.01）,当浓度大于500g/L时,其作用趋于饱和.各浓度阿胶强骨口服液及替勃龙含药血清均可增加成骨细胞骨钙素含量（P均＜0.05）.②骨保护素基因mRNA表达：阿胶强骨口服液组含药血清1000g/L时最强,明显高于100和500g/L（P＜0 05）,阿胶强骨口服液组含药血清1000g/L及雌激素组含药血清100和1 000g/L明显高于对照组（P＜0 01）.③RANKL基因表达：阿胶强骨口服液组含药血清1 000g/L时最强,明显低于100和500 g/L（P＜O 05）,阿胶强骨口服液组含药血清1000g/L及雌激素组含药血清100和1 000g/L明显低于对照组（P＜0.01）.结论：①阿胶强骨口服液对成骨细胞的增殖有明显的促进作用,并且这种作用呈现剂量依赖性和可饱和性,与替勃龙相近.②阿胶强骨口服液治疗骨质疏松疗效机制之一可能与其促进成骨细胞的增殖,调节OPG/RANKL表达有关.     

阿仑磷酸钠对人成骨细胞增殖和护骨素/核因子κB受体活化因子配体mRNA表达的影响

背景:阿仑磷酸钠足新一代的二磷酸盐,属第2代骨质疏松药,临床上广泛用于治疗骨吸收增加类疾病.目的:观察阿仑磷酸钠对人成骨细胞增殖和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)及护骨素(OPG)mRNA表达的影响.设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-11/2008-03在重庆医科大学基础研究所完成.材料:成骨细胞来源于手术中取得的松质骨骨块;阿仑磷酸钠为杭州默沙东制药有限公司生产,批号:06130.方法:在含1×10-9,1×10-8,1×10-7,1×10-6,1×10-5,1×10-4mol/L不同浓度的阿仑磷酸钠培养液中培养成骨细胞,以不加阿仑磷酸钠培养为对照.主要观察指标:①成骨细胞观察.②以四甲基偶氮唑盐检测阿仑磷酸钠对成骨细胞的增殖的影响.③以半定量反转录-聚合酶链反应方法观察不同浓度阿仑磷酸钠对成骨细胞表达OPG/RANKL mRNA的影响.结果:1×10-5,1 ×10-4mol/L的阿仑磷酸钠抑制成骨细胞增殖,1×109～10-6mol/L的阿仑磷酸钠促进成骨细胞增殖,其中1 ×108mol/L的阿仑磷酸钠对成骨细胞的增殖作用最强.阿仑磷酸钠呈浓度依赖性降低RANKL mRNA表达,干预72 h,1 ×10-5mol/L抑制作用最大(P<0.01).阿仑磷酸钠呈浓度依赖性增加护骨素mRNA表达,干预72 h,1×10-6mol/L增加作用最明显(P<0.01),而1×10-5mol/L时又减低.结论:阿仑磷酸钠能使成骨细胞增殖,1×10-8mol/L浓度增殖作用最强,其可能通过调节OPG/RANKL mRNA表达而影响骨代谢.     

胎鼠成骨细胞骨保护素及其配体mRNA表达与阿胶强骨口服液含药血清的影响

背景阿胶强骨口服液治疗骨质疏松疗效肯定,但其确切作用机制有待探讨.目的观察阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中骨保护素及保护素配体表达的影响,探讨阿胶强骨胶囊治疗骨质疏松的分子水平作用.设计完全随机分组,对照实验.材料实验于2003-06/2004-10在华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合骨代谢实验室完成.选用3月龄Wistar大鼠(雌雄各半)30只,随机分为3组,阿胶强骨口服液组和雌激素组及对照组,每组10只.选用清洁级新生SD大鼠12只用于成骨细胞的分离和培养.方法①各组Wistar大鼠灌胃7 d后,制备各组的含药血清.②将清洁级新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞,制成单细胞悬液,消化传代,取二代培养的成骨细胞,制成细胞悬液.培养细胞被分为5组,分别加同体积药液.阿胶强骨口服液组分别加入用培养液稀释为100和500及1 000 g/L浓度的阿胶强骨口服液含药血清;雌激素组分别加入100及1 000 g/L替勃龙含药血清;对照组仅加培养液.同时各组再加入含100g/L小牛血清的培养液,继续培养.③采用四甲基偶氮唑盐比色分析法、3H-胸腺嘧啶核苷掺入法测定成骨细胞增殖,用放免法测定细胞内骨钙素含量,反转录聚合酶链反应测定胎鼠成骨细胞中骨保护素及保护素配体mRNA的表达.④组间比较采用单因素方差分析.主要观察指标胎鼠成骨细胞经阿胶强骨口服液或利维爱含药血清干预后,细胞中骨保护素及保护素配体mRNA的表达.结果①成骨细胞增殖四甲基偶氮唑盐比色分析法及3H-胸腺嘧啶核苷测定结果阿胶强骨口服液组和替勃龙组各药物血清组明显高于对照组(P＜0.05～0.01),并在500g/L时达到最大效应(P＜0.01),当浓度大于500g/L时,其作用趋于饱和.各浓度阿胶强骨口服液及替勃龙含药血清均可增加成骨细胞骨钙素含量(P均＜0.05).②骨保护素基因mRNA表达阿胶强骨口服液组含药血清1000g/L时最强,明显高于100和500g/L(P＜0 05),阿胶强骨口服液组含药血清1000g/L及雌激素组含药血清100和1 000g/L明显高于对照组(P＜0 01).③RANKL基因表达阿胶强骨口服液组含药血清1 000g/L时最强,明显低于100和500 g/L(P＜O 05),阿胶强骨口服液组含药血清1000g/L及雌激素组含药血清100和1 000g/L明显低于对照组(P＜0 01).结论①阿胶强骨口服液对成骨细胞的增殖有明显的促进作用,并且这种作用呈现剂量依赖性和可饱和性,与替勃龙相近.②阿胶强骨口服液治疗骨质疏松疗效机制之一可能与其促进成骨细胞的增殖,调节OPG/RANKL表达有关.     

儿童白血病FHIT的mRNA表达研究

【目的】了解脆性组氨酸三联体（fragile histidine triad,FHIT）基因在儿童白血病中的表达,分析FHIT基因与儿童白血病的关系;探讨FHIT基因在儿童白血病中的发病机制。【方法】收集本院2009年1月至2011年3月白血病的儿童51例作为白血病组,同期本院非白血病儿童10例作为对照组,检测两组儿童骨髓单个核细胞（Bone marrow mononuclear cells,BMMCs）中FHIT基因的mRNA表达。【结果】白血病组FHITmRNA表达阳性率明显低于对照组（54．90％VS100．00％,P〈0．05）;白血病缓解组FHITInRNA表达阳性率为66．67％,对照组FHITmRNA表达阳性率为100．00％,两组间无明显差异（P〉0．05）;白血病组FHITmRNA表达阳性率在不同性别、年龄、白血病类型、治疗阶段组别间无显著差异（P〉0．05）;高肿瘤负荷组FHITmRNA表达阳性率明显低于低肿瘤负荷组（33．33％VS66．67％,P〈0．05）。【结论】FHITmRNA在儿童白血病中低表达;FHITmRNA表达阳性率在不同性别、年龄、白血病类型、治疗阶段的白血病儿童间无差异;高肿瘤负荷的白血病患儿FHITmRNA表达阳性率低于低肿瘤负荷患儿。     

雌激素受体β基因沉默对成骨样MG63细胞骨保护素和RANKL表达的影响

背景：目前对雌激素B受体基因如何参与骨代谢的研究较少。目的：研究雌激素受体β对人成骨样细胞骨保护素、核因子kB受体活化因子配体（receptor activator of NF-κB ligand,RANKL）表达的影响。方法：将先前含有最有效干扰序列及非特异性shRNA的反转录病毒分别感染人成骨样MG63细胞株后,筛选稳定克隆并扩大培养,以空白及非特异性shRNA作为对照,检测稳定抑制雌激素受体β的效率。分别向3组细胞即MG63细胞、雌激素受体βshRNA反转录病毒感染的MG63细胞、阴性对照shRNAnc反转录病毒感染的MG63细胞加入17β-雌二醇（E2）干预,检测人成骨样细胞株MG63的骨保护素、RANKLmRNA和蛋白表达隋况。结果与结论：用pRNAT-H1．4／Retro-雌激素受体β-shRNA3进一步稳转人成骨样MG63细胞株,与空白及阴性病毒对照组相比,筛选出雌激素受体β表达稳定抑制的人成骨样细胞株,雌激素受体βmRNA抑制率为（88．17±1．17）％（P〈0．05）,蛋白抑制率为（89．01±1．22）％（P〈0．05）,证实实验成功建立了人成骨样细胞ERβ亚型基因敲低细胞模型。雌激素干预48h后,显示雌激素受体β稳定抑制的MG63细胞较空白组及阴性对照组骨保护素mRNA及蛋白表达上调（P〈0．05）,RANKLmRNA和蛋白表达下调（P〈0．05）,骨保护素RANKL表达上调（P〈0．05）,提示雌激素受体β可能通过调节骨保护素／RANKL在骨代谢中发挥作用。     

核干细胞因子mRNA在原代白血病细胞中的表达

【目的】探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（BMNC）核干细胞因子（NS）基因的表达水平。【方法】采用半定量RT—PCR方法检测52例AL患者及20例骨髓正常的非恶性血液病（对照）的BMNCNS基因的表达水平。【结果】在52例AL患者的BMNC中均存在NS基因的表达,20例非恶性血液病对照的BMNC极低表达或不表达NS基因。急性淋巴细胞白血病患者和急性非淋巴细胞白血病患者NSmRNA的相对表达量均明显高于对照组（P〈0．01）。但在AL各亚型之间NSmRNA的表达无明显差异（P=0．253）,NSmRNA的表达水平与患者初诊时骨髓原始细胞数呈正相关,与外周血白细胞数及血小板数无关。【结论】Ns基因在AI。原代细胞中表达上调,但NSmRNA表达水平与AL患者某些临床特征无相关性。     

外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA水平与乙肝病毒慢性感染关系的研究

[目的]探讨外周血单个核细胞（PBMC）APOBEC3G mRNA水平与乙肝病毒（HBV）慢性感染的关系。[方法]用实时荧光相对定量RT—PCR的方法检测27例慢性乙肝患者以及16名健康人PBMC中APOBEC3G mRNA的水平,同时检测乙肝患者外周血HBV病毒载量及丙氨酸氨基转移酶（ALT）。[结果]慢性乙肝患者PBMC中APOBEC3G mRNA的表达水平高于健康对照组,差异具有显著性（P〈0．01）,且与外周血HBV病毒载量成正相关（r=0．73,P〈0．01）,与ALT水平无明显相关性（P〉0．05）。[结论]APOBEC3G在人体内对HBV复制的影响可能不是直接的抑制作用。     

食管癌Survivin mRNA、Caspase-3的表达及其分子机制

【目的】探讨survivin mRNA、caspase-3蛋白在食管鳞癌中的表达及其分子机制。【方法】采用RT—PCR和免疫组化技术检测38例食管鳞癌及其对应的正常组织中survivin mRNA和caspase-3蛋白的表达。【结果】73．68％食管鳞癌组织呈survivin mRNA阳性表达,显著高于正常组织,并与食管鳞癌的分化程度、临床分期有关,与年龄、性别、淋巴结转移无关。caspase-3蛋白在食管鳞癌和正常组织中的阳性表达率分别为26．32％和89．47％,差异有显著性意义,并与食管鳞癌的分化程度有关,与年龄、性别、淋巴结转移和临床分期无关。在食管鳞癌组织中,survivin mRNA和Caspase-3蛋白表达呈负相关。【结论】survivin、caspase-3参与了食管鳞癌的发生、发展,可以作为食管鳞癌预后的指标,survivin通过抑制caspase-3的活性而发挥其抑制细胞凋亡的作用可能是其主要的分子机制。     

环氧化酶-2抑制剂Celebrex对膀胱癌T24细胞株COX-2mRNA和PGE2表达的影响

【目的】探讨选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂Celebrex对膀胱癌T24细胞株COX-2mRNA和前列腺素E2（PGE2）表达的影响。【方法】体外培养人膀胱癌细胞株T24细胞，应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，检测选择性COX-2抑制剂Celebrex与膀胱癌T24细胞株COX-2mRNA和PGE2表达的时间-效应关系和剂量-效应关系。【结果】Celebrex在一定时间和剂量范围内可明显抑制膀胱癌T24细胞株PGE2的表达，但Celebrex无论在时间-效应或剂量-效应关系上均不影响人膀胱癌T24细胞株COX-2 mRNA的表达。【结论】Celebrex对COX-2mRNA的表达无明显影响，主要是通过抑制COX-2酶及其主要代谢产物PGE2的表达而发挥抗肿瘤效应。     

高糖、胰岛素影响肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白4 mRNA表达的研究

目的:探讨高糖、胰岛素对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白4 mRNA表达的影响,进一步研究GluT4在糖尿病肾病发病中的作用。方法:将培养的鼠1097系膜细胞分为8组:正常对照组,生理浓度胰岛素组(10-9M),低浓度胰岛素组(10-8M),高浓度胰岛素组(10-6M),高糖组(30mM),甘露醇组,高糖加高浓度胰岛素组,高糖加生理浓度胰岛素组。采用RT-PCR法检测GluT4 mRNA含量。结果:①正常系膜细胞可检测到GluT4mRNA。②高糖组GluT4 mRNA表达为对照组的58.7%(p<0.05);10-8M胰岛素组、10-6M胰岛素组分别为对照组的230.2%和297.2%(P<0.01);高糖加10-6M胰岛素组,高糖加10-9M胰岛素组分别为高糖组的170.6%和140.3%(p<0.05)。结论:①正常系膜细胞有GluT4 mRNA表达。②高糖可抑制GluT4 mRNA表达,胰岛素有一定拮抗作用,且呈剂量依赖性。③GluT4是糖尿病肾病发生发展中的重要因子。     

膀胱癌肿瘤组织中bcl-x基因mRNA的表达及其临床意义

【目的】研究凋亡调控基因bcl-x在膀胱癌患者肿瘤组织中的表达情况,探索bcl-x基因的异常表达与膀胱癌的发病、演进和复发的关系。【方法】应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测30例膀胱癌患者新鲜肿瘤组织和10例膀胱正常组织标本中bcl-x基因mRNA的表达情况。【结果】21例膀胱癌组织标本表达bcl-xl(70％),12例表达bcl-xs(40％),bcl-xl基因mRNA平均表达量明显高于bcl-xs基因,膀胱癌组织中bcl-xs基因与bcl-xl基因在表达上呈正相关;2例膀胱正常组织标本表达bcl-xl(20％),无表达bcl-xs者。不同病理分级和病理分期的膀胱癌组织中bcl-x基因表达无显著性差异。【结论】膀胱癌组织普遍表达bcl-xl基因,部分表达bcl-xs基因,bcl-xl基因的表达处于优势地位。膀胱癌的发病与bcl-xs无关．而与凋亡抑制基因bcl-xl的高表达有关。bcl-xl基因与膀胱癌的演进和复发有关,可作为预计其术后复发风险的一项重要指标。     

不同负载温度下红细胞内海藻糖和葡萄糖含量比较

目的探索适合海藻糖和葡萄糖联合负载红细胞的温度,为冷冻干燥红细胞提供基础。方法分别采用0mol／L、0．125mol／L、0．25mol／L、0．5mol／L和1mol／L的海藻糖联合葡萄糖在4℃、25℃和37℃负载红细胞6h。然后检测负载红细胞内海藻糖和葡萄糖的浓度。结果4℃和25℃下,海藻糖和葡萄糖联合负载红细胞后,进入红细胞的海藻糖和葡萄糖含量相差不大。37℃下负载红细胞后,负载入红细胞的海藻糖和葡萄糖含量均较4℃组明显增高。结论37℃下负载红细胞,更有利于海藻糖和葡萄糖进入细胞内,能够满足冰冻干燥红细胞的负载要求。     

针刺对过敏性哮喘大鼠肺肠组织SP-AmRNA表达的影响

目的探讨针刺对过敏性哮喘(哮喘)大鼠肺肠组织表面蛋白A(SP-A)mRNA表达的影响。方法将40只SD大鼠随机分为空白组、哮喘模型组、针刺肺组、针刺肠组、针刺肺肠组,每组各8只。除空白组外,余4组采用腹腔注射卵蛋白致敏,2周后尾静脉注射卵蛋白激发哮喘发作进行造模。空白组、哮喘模型组不针刺,针刺肺组针刺尺泽、孔最、列缺、肺俞穴,针刺肠组针刺曲池、合谷、天枢、上巨虚穴,针刺肺肠组针刺孔最、列缺、曲池、天枢穴。检测并比较各组大鼠针刺后肺肠等组织中SP-A mRNA的表达。结果哮喘模型组肺、大肠及小肠组织中SP-A mRNA的表达均较空白组高(P0.01);针刺肺组、针刺肠组、针刺肺肠组的肺、大肠及针刺肺肠组小肠组织中SP-A mRNA的表达均较哮喘模型组高(P0.05);针刺肺组、针刺肠组的小肠组织中SP-A mRNA的表达与哮喘模型组比较无明显差异(P均0.05)。结论哮喘大鼠肺肠组织SP-A mRNA表达均发生异常,其中肺与大肠生物学相关性最为密切。     

诊断超声辐照后大鼠睾丸生精细胞P53 mRNA、Bcl-2 mRNA表达改变

目的　检测诊断超声与细胞凋亡相关基因P53和Bcl-2mRNA的关系。方法　32只SD雄性大鼠随机分为4组对照组、10min组、20min组和30min组,应用HP8500彩色血流显像仪,探头频率7.5MHz,超声输出功率6.8mW,空间平均时间平均声强3.4mW/cm     

犬上腔静脉肌袖与右心房心肌If电流mRNA表达的研究

【目的】观察犬上腔静脉肌袖和右心房游离壁心肌细胞If电流mRNA的表达水平,从分子水平探讨其在生理状态和心律失常发生中的作用。【方法】8只健康杂种犬,取上腔静脉肌袖及右心房游离壁,采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)的方法测定两部位If电流通道亚单位HCN4mRNA的表达水平并进行半定量分析。【结果】If通道亚单位HCN4在上腔静脉肌袖及右心房游离壁中mRNA表达水平分别为(0.207±0.067)和(0.173±0.058),两者差异无显著性(P>0.05)。【结论】不仅右心房中有If通道亚单位HCN4mRNA的表达,上腔静脉肌袖中也有该基因表达,但If通道mRNA在肌袖中的表达量与右心房比并无显著差异,说明生理状态下If电流在上腔静脉肌袖自发活动中可能不起关键作用。