红霉素明胶微球最佳制备工艺的筛选*

背景：红霉素有效治疗浓度维持时间短，毒副作用较大，有必要将其制成靶向缓释制剂。 目的：筛选制备肺靶向红霉素明胶微球的最佳工艺。 设计、时间及地点：正交设计对比观察实验，2005-06/12在广东药学院药剂实验室完成。 材料：红霉素，明胶。 方法：根据乳化缩聚法原理，将适量红霉素分散于明胶溶液中，首先与油相形成W/O型乳剂，再经固化等处理后形成微球。在预试验的基础上，选取影响微球性质较显著的4个因素为考察对象，即明胶的浓度、乳化剂的用量、固化时间和搅拌速度，以平均粒径、载药量、包封率为考察指标，根据L9（34）正交设计试验结果优选出最佳处方工艺条件，通过微球的平均粒径、包封率、载药量等指标的加权求和值来衡量，加权求和值越大，质量越好。 主要观察指标：正交设计实验结果，微球的平均粒径、载药量、包封率。 结果：红霉素明胶微球最佳实验方案为明胶浓度为15％，乳化剂用量为3.0 mL，固化时间为0.5 h，搅拌速度为1 000 r/min。最佳方案制得的红霉素明胶微球形态圆整，且药物确已包裹在微球中，微球的平均粒径为(14.15±0.20）μm，载药量为(5.83±0.38)％，包封率为（65.70±0.56）％。肺靶向微球粒径7~ 25 μm的范围占总数的90.16%以上，最佳工艺条件重现性良好。 结论：通过L9(34)正交实验设计获得了制备红霉素明胶微球的最佳工艺技术，所制得的微球符合肺靶向微粒的尺寸要求。     

重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球的制备及体外细胞毒性*☆

背景：通过各种微球负载骨生长因子使骨形态发生蛋白达到缓释效果逐渐成为研究热点,但关于载药壳聚糖纳米微球的生物相容性特别是细胞毒性的报道较少。 目的：对重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球进行细胞毒性检测,评估应用壳聚糖纳米微球作为重组人骨形态发生蛋白2缓释载体的生物安全性。 方法：通过离子交联法制备空白壳聚糖纳米微球,应用透视电镜观察微球的形态,激光粒径分析其粒径分布;通过重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球体外细胞毒性试验评估微球的生物安全性。 结果与结论：离子交联法制备的壳聚糖微球,球形规整,分散均匀,微球平均粒径为230 nm,分布较集中。载药及空白微球的反应分级为0或1级,均为合格。提示,离子交联法制备可成功制备出负载重组人骨形态发生蛋2的纳米微球,且微球细胞毒性检测合格,为进一步的骨组织工程研究提供理论实验基础。     

聚乳酸-羟基乙酸包载眼镜蛇毒细胞毒素缓释微球的表征及体外释放行为

背景：眼镜蛇毒细胞毒素具有强烈的细胞毒活性,但缺乏特异性,全身用药可导致严重毒副作用,而采用缓释载体包载进行间质化疗可达到提高肿瘤局部治疗效应,并且减轻全身毒性。 目的：制备眼镜蛇毒细胞毒素-聚乳酸-羟基乙酸微球,观察其一般性质和体外释药特性。 设计、时间及地点：观察性实验,于2007-12/2008-05在福建医科大学医药生物工程中心完成。 材料：聚乳酸-羟基乙酸、聚乙烯醇由中国科学院成都有机化学有限公司提供,广东产中华眼镜蛇毒。 方法：采用分子筛、离子交换分离,反相疏水高效液相色谱方法纯化细胞毒素,MTT法检测细胞毒活性,复乳-溶剂挥发法制备载药微球。 主要观察指标：扫描电镜观察载药微球的表面形态,激光粒径仪测微球粒径,计算包封率、载药量、体外释放周期。 结果：纯化的眼镜蛇细胞毒素具有明显的细胞毒作用,对HepG2细胞12,24 h的IC50分别为1.43,1.12 mg/L。复乳法制备微球表面光滑圆整,粒径2~8 μm,包封率和载药率分别为(74.10±9.92)%和(0.72±0.09)%,21 d药物累积释放63.3％,释放细胞毒素保持较好的生物学活性。 结论：采用复乳-溶剂挥发法可制备具有较高包封率、良好缓释效果、保持完整生物学活性的眼镜蛇毒细胞毒素-聚乳酸-羟基乙酸微球。     

重组人骨形态发生蛋白2缓释微球的制备与评价*☆

目的：针对重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)在体内半衰期短、易被稀释代谢的问题，探讨利用聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制备载rhBMP-2微球的可行性和制备工艺，并观察其载药、释药特性。 方法：①采用W/O/W型复乳化-溶剂挥发技术制备rhBMP-2/PLGA缓释微球，并对微球的粒径和形态、包封率和载药量，体外释放性质进行测定。②异位成骨实验：昆明小鼠12只，在右侧大腿股内侧肌袋内植入含rhBMP-2的50 mg PLGA微球，4周后取材，观察成骨情况以初步检测微球中的蛋白质活性。 结果：①rhBMP-2/PLGA缓释微球形态良好，粒径主要集中在50~60 μm，包封率为（37.52±4.31）%，载药率为（5.12±1.32）%。②微球的释放存在突释，7 d内释放的药物量超过40%，大约90%的药物量于42 d内释放完全。③载药微球植入鼠股部肌袋4周，材料周围有明显的骨形成。 结论:制备的rhBMP-2/PLGA微球可以缓慢释放有活性的rhBMP-2，具有临床应用的可行性。     

Oct-4在激素非依赖性前列腺癌干细胞中的表达及意义

背景：干细胞特异性基因Oct-4在维持干细胞功能和调节干细胞的分化过程中起着关键性作用,了解前列腺癌干细胞中Oct-4的表达,对前列腺癌的预后、复发和耐药的评估具有重要意义。 目的：观察Oct-4在激素非依赖性前列腺癌干细胞中的表达。 设计、时间及地点：观察性实验,于2008-02/10在南昌大学第一附属医院中心实验室完成。 材料：取12例前列腺癌患者手术后组织标本,其中6例在手术前没有经过化疗和激素治疗,另外6例患者经过激素治疗出现抵抗而手术。 方法：制备前列腺癌组织单细胞悬液,流式细胞仪分选未经治疗前列腺癌和治疗后出现耐药的前列腺癌干细胞,RT-PCR和Western blot检测激素非依赖性前列腺癌Oct-4基因和蛋白的表达。 主要观察指标：激素依赖和非依赖性前列腺癌CD133+/CD44+以及CD133-/CD44-细胞的比例;Oct-4基因和蛋白在激素非依赖性前列腺癌CD133+/CD44+、CD133+/CD44-、CD133-/CD44+、CD133-/CD44-细胞的表达。 结果：流式细胞仪检测显示未经过治疗的前列腺癌CD133+/CD44+细胞占(0.83±0.21)%,而CD133-/CD44-细胞多达(95.62±1.35)%;治疗出现激素抵抗的前列腺癌CD133+/CD44+细胞为(54.62±0.86)%,而CD133-/CD44-细胞为(9.56±0.47)%;与其他亚群细胞相比,激素非依赖性前列腺癌CD133-/CD44-细胞Oct-4基因和蛋白显著降低(P < 0.01);CD133+/CD44+细胞Oct-4基因和蛋白表达显著升高(P < 0.01);而CD133+/CD44-和CD133-/CD44+细胞之间Oct-4基因和蛋白表达无显著差异(P > 0.05)。 结论：Oct-4在激素非依赖性前列腺癌干细胞中高表达,可能与前列腺癌的预后和耐药有关。     

表柔比星壳聚糖微球联合微波消融治疗小鼠肝移植瘤

背景：原发性肝癌的手术切除率较低，肝癌的局部治疗成为重要手段。经皮微波消融治疗能达到原位灭活的目的，但不能彻底杀灭瘤细胞。缓释剂型化疗药物可形成局部较高药物浓度及发挥较持久作用，目前已多被应用于原发性肝癌的治疗。 目的：观察负载表柔比星的壳聚糖微球联合微波消融局部治疗荷肝癌小鼠皮下移植瘤的效果。 方法：采用W/O型乳化-固化法制备表柔比星-壳聚糖微球，扫描电镜观察壳聚糖微球的表面形态，粒径大小。紫外分光光度计分析载药微球的包封率、载药量及药物累积释放率。将24只H22皮下肝癌荷瘤小鼠分成4组，各组皮下肝癌肿瘤分给予以下治疗：单纯微波治疗；微波治疗后第2天给予瘤内注射生理盐水；微波治疗后给予瘤内注射表柔比星；微波治疗后联合瘤内注射载药微球，监测荷瘤小鼠肿瘤体积变化并计算抑瘤率。 结果与结论：壳聚糖微球平均粒径约为105 μm，粒径大小较一致，包封率约为80%，载药率约为11%，2周的累积缓释率为84%。微波联合瘤内注射生理盐水、表柔比星、载药微球的抑瘤率分别为8%，20%，47%。表明壳聚糖微球是一种有效的表柔比星局部缓释剂型，联合微波消融治疗有较强的抑瘤作用。 关键词: 表柔比星；壳聚糖；载药缓释微球；微波；小鼠皮下肝癌；控制释放载体材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.08.013     

成骨生长肽缓释微球促成骨细胞的增殖

背景：采用生物可降解聚合物聚乳酸-羟基乙酸共聚物(Polylactide-co-glycolide，PLGA)为支架材料，包裹多肽、蛋白质药物制成缓释微球，使在体内达到缓释目的，是近10多年来各国学者大力研究的新领域。 目的：观察成骨生长肽（osteogenic growth peptide，OGP）缓释微球对成骨细胞的促分裂增殖作用。 设计、时间及地点：对比观察，于2006-06/11在西安交通大学生命科学院完成。 材料：新西兰兔，用于制备成骨细胞；PLGA由山东医疗器械研究所提供。 方法：以PLGA为载体材料，采用复乳法制备OGP-PLGA缓释微球，并对微球的形态学、粒径分布、载药量和包裹率及体外释药情况进行观察。实验分为2组，OGP组：培养液为含体积分数0.1小牛血清+含50 μg/L OGP的DMEM；OGP缓释微球组：培养液为含体积分数0.1小牛血清+含50 μg/L OGP-PLGA缓释微球的DMEM，分别测定成骨细胞的增殖数量。 主要观察指标：①微球的形态、粒径分布、载药量、包裹率及体外释药性。②OGP缓释微球对成骨细胞增殖的影响。 结果：①复乳法制备的OGP-PLGA缓释微球表面光滑圆整，球体均匀度好；微球粒径为(19.6±4.47) μm，载药量和包裹率分别为（83.9±4.21）%，（72.9±5.13）%；微球的体外释药过程较为稳定，56 d 释药率为85.43%。②培养1，2 d 时，OGP组的A值高于OGP缓释微球组，差异有显著性意义(P < 0.05)；培养3，4 d 时，OGP组和OGP缓释微球组间A值差异无显著性(P > 0.05)；培养6，8 d时，OGP缓释微球组的A值高于OGP组，差异有显著性意义 (P < 0.05)。 结论：采用复乳法制备OGP-PLGA缓释微球的工艺可行，微球中OGP的生物活性保存良好，能缓慢持续释放活性OGP，促进成骨细胞的体外分裂增殖。     

整合素αvβ3受体靶向载药脂质体的制备及体外靶向性

摘要 背景：含RGD序列的多肽是多种整合素的识别位点,以其相对分子质量小、稳定、易于制备,且无免疫原性等优点被广泛用于纳米靶向药物传递系统的设计。 目的：制备以RGD环五肽为配基的整合素αvβ3载药脂质体,通过体外细胞学实验证实其受体靶向性。 方法：使用人工合成的RGD环五肽作为靶向分子探针,通过高压均质法制备靶向整合素αvβ3载药脂质体,采用扫描电镜和激光粒度分析仪检测纳米颗粒形态和粒径;以流式细胞分析观察其对血管平滑肌细胞的特异性标记,并考察荷载药物的离体缓释能力以及体外靶向能力。 结果与结论：合成的靶向载药脂质体粒径为(175±6) nm,包封率为(96.33±1.02)%,体外溶出时间超过5 d。靶向载药脂质体对整合素αvβ3具有较高的特异性亲和力,可通过受体介导的内吞作用进入细胞内。提示制备的靶向整合素αvβ3载药脂质体,具有较高的药物包封率及缓释性,能与整合素αvβ3受体特异性结合,是一种新型的受体介导靶向制剂。 关键词：整合素αvβ3;RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸); 醋酸地塞米松;靶向载药脂质体;生物材料与药物控释 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.47.015     

bFGF-PLGA微球促进兔静脉皮瓣成活实验研究

摘要: 目的　应用W/O/W复乳-干燥法制备碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物（bFGF-PLGA）微球,考察其对新西兰大白兔静脉皮瓣成活的影响。方法　应用正交设计试验进一步优化bFGF微球的制备工艺,采用优化处方制备bFGF-PLGA微球,并考察其外观形态和粒径分布,检测其载药量和包封率,研究其体外释药的性质;以新西兰大白兔为实验模型制作侧腹壁静脉皮瓣,并术前5天分别皮内注入bFGF-PLGA（缓释微球组）和bFGF浸渍/固化PLGA(空微球组)生理盐水(生理盐水组) 。术后, ①计算术后7天皮瓣的成活面积; ②取兔皮肤标本行CD34+免疫组化染色,检测CD34+表达情况及平均血管数。结果　所制微球表面光滑圆整,球体均匀度好,无黏连现象。微球粒径的98%分布在12.50～43.49μm之间,平均粒径为26.93μm,径距0.611±6.60。载药量为[(23.11±0.44 )×10-3]%,包封率为(86.51±0.83) %。突释期内微球的体外释放度为27.78% , 30d后体外累积释放度高达81.56% ,微球的体外释药规律符合Higuichi方程( r =0.997)。缓释微球组、空白微球组和生理盐水组术后7天的皮瓣平均面积分别为72.031±1.813、51.034±1.771、50.498±2.359%( P < 0.05) ,平均血管数目分别为34.01±2.30、23.81±3.03、22.56±2.26个/cm2 ( P < 0.05)。结论　所制备的bFGF - PLGA微球表征良好,载药量和包封率高;微球通过较长时间地持续释放活性bFGF,可明显促进兔静脉皮瓣的存活。 关键词:碱性成纤维细胞生长因子;聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物;微球;缓释;静脉皮瓣     

纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合微球的制备及性能

背景：羟基磷灰石与高分子复合材料作为组织工程材料的报道很多,但多为粉体材料或块状材料,用于修复治疗时均存在一定的局限性。 目的：制备纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合缓释微球,观察其体外释药特性。 设计、时间及地点：重复测量设计,于2008-01/10 在北京工业大学材料科学与工程学院生物功能高分子实验室完成。 材料：纳米羟基磷灰石、壳聚糖、明胶、庆大霉素。 方法：利用微波辅助法,在pH=7的条件下,制备了针状羟基磷灰石。采用W/O型复乳化-交联技术制备纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球。 主要观察指标：①纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合微球的表面形貌、粒径分布。②载药复合微球的载药量、包封率及药物累积释放率。 结果：①纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球形态均匀,其粒径主要集中在10~30μm,壳聚糖-明胶对羟基磷灰石形成了很好的包覆。②复合微球平均载药量32.97%,平均包封率49.20%,在3 d内对庆大霉素的释放达到88%左右。 结论：所制备的纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球形态均匀,粒径分布窄,再分散性好,3 d内能维持有效的药物浓度。     

结直肠癌组织中CD44+肿瘤细胞与S期标志物增殖细胞核抗原的关系*◆

背景：目前尚未找到结直肠癌干细胞理想的标志物,结合周期蛋白能更精确的找到GO/G1期癌干细胞。 目的：了解结直肠癌组织中CD44和增殖细胞核抗原PCNA的表达及CD44+肿瘤细胞与S期标志物增殖细胞核抗原PCNA的关系。 方法：采用组织芯片检测、免疫组织化学和双重免疫组织化学染色技术检测61例结直肠癌组织、10例正常肠黏膜组织中增殖细胞核抗原PCNA和CD44表达情况。 结果与结论：在结直肠癌组织中,PCNA+细胞数远多于CD44+细胞数,CD44+癌细胞形态有两种,一种核较大,染色质边集,呈空泡状,核膜核仁清晰,这些细胞大多数呈PCNA阳性;另一种核较小,染色质致密,呈小圆形,部分表达PCNA。在大多数病例中,CD44+细胞中90%以上的瘤细胞同时为PCNA阳性,只有(3.38±2.08)%细胞为单纯PCNA阳性。说明结直肠癌组织中大多数CD44+细胞呈现S期标志物PCNA阳性,处于S期;只有极少数CD44+/PCNA-处于G0/G1期的细胞可能为肿瘤干细胞。     

非小细胞肺癌中CD44v6的表达及与其脑转移的关系

目的:研究非小细胞肺癌中CD44v6的表达及与其分型、颅内转移的关系。方法:应用免疫组化法检测30例非小细胞肺癌组织标本中CD44v6的表达,并分析其临床意义。结果:CD44v6高表达与非小细胞肺癌的淋巴结转移及颅内转移有关(P<0.05),是非小细胞肺癌颅内转移的主要风险因子。结论:检测CD44v6蛋白的表达,有可能为判断非小细胞肺癌淋巴结转移、颅内转移的发展以及评估预后提供依据。     

CD98 immunoreactivity in multinucleated giant cells of glioblastomas: An immunohistochemical double labeling study

CD98, which is identical to fusion regulatory protein‐1 (FRP‐1), has been reported to induce and regulate cell fusion and multinucleated giant cell formation. To investigate the association between CD98 and multinucleated giant cells (MNGCs) in glioblastomas, we investigate the CD98 immunoreactivity of MNGCs and the proliferative potential in CD98 immunoreactive MNGCs in paraffin‐embedded sections obtained from patients with glioblastomas. Double immunohistochemical staining for CD98 and Ki67 as a mitotic marker were performed in formalin‐fixed and paraffin‐embedded specimens obtained from 16 patients with primary glioblastomas including MNGCs. Most CD98 immunoreactive (CD98+) tumor cells were negative for Ki67. CD98+ MNGCs were identified in 15 cases. CD98+ Ki67– MNGCs were identified in 14 cases and ranged in number from one to 48 (6.7 ± 11.5). CD98– Ki67+ MNGCs were identified in 15 cases and ranged in number from one to 32 (11.1 ± 9.6). Mitotic index (MI) of CD98+ MNGCs (4.8 ± 2.7%) was significantly lower than that of CD98– MNGCs (91.1 ± 24.6%) (P < 0001). These results suggest that multinucleated giant cell formation may be developed by fusion among CD98– producing cells in glioblastomas.     

细胞因子诱导杀伤细胞/自然杀伤细胞培养过程中CD16及CD11a的表达变化

背景：由于细胞因子诱导杀伤细胞、自然杀伤细胞上表达的CD16和CD11a均与其介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用和直接接触杀伤的抗肿瘤效应密切相关,因此了解两种细胞扩增过程中这两种分子表达的强弱,对根据免疫效应细胞的最终用途决定两种细胞的最佳收获时机具有重要意义。 目的: 了解细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞在培养过程中的CD16和CD11a表达的变化规律。 设计、时间及地点：细胞移植免疫学动态观察,于2006-09/2008-03在中山大学附属第二医院完成。 材料：脐血来自本院健康足月妊娠产妇。 方法：采用Ficoll-Hypaque法分离脐血单个核细胞,接种于含体积分数为0.15胎牛血清的IMDM,双抗生素青、链霉素各1×105 U/L 24孔培养板中,在培养体系中加入白细胞介素2、白细胞介素7、白细胞介素15、干细胞因子及FLT3L制备细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞,每隔3天半量换液及全量补充上述细胞因子。 主要观察指标：流式细胞仪检测CD3+CD56+细胞因子诱导杀伤细胞以及CD3-CD56+自然杀伤细胞在4周培养过程中CD16和CD11a表达的变化。 结果: CD16在细胞因子诱导杀伤细胞、自然杀伤细胞上的表达随着培养时间的延长逐渐增加,在两类细胞上均在培养的第4周达到最高峰,分别为（55.99±3.90）%和（7.86±1.66）%,但CD16在自然杀伤细胞上表达比例较低,整个培养过程中自然杀伤细胞上CD16的均数表达没有超过8%。CD11a在细胞因子诱导杀伤细胞培养的第3周,自然杀伤细胞培养的第2 周达到最高峰,分别为（49.32±6.32）%和（82.31±11.33）%,之后逐渐出现下降,到培养第4周几乎消失。 结论:CD16和CD11a在细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞上的表达随培养时间呈动态变化,使用单克隆抗体联合细胞因子诱导杀伤细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用效应时,细胞的收获期可在细胞培养的第4周,利用细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞的直接杀伤效应进行细胞过继免疫,那么收获细胞的时间以细胞培养的第3周为宜。     

载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜的制备及体外释药评价

背景：纤维蛋白胶胶联羊膜作为一种无需缝合生物移植材料还无法有效地在局部长时间缓释药物,特别是对于一些不稳定的生物活性蛋白药物。 目的：构建新型的能有效缓释蛋白药物的载表皮生长因子壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶羊膜复合体。 方法：制备表皮生长因子/壳聚糖载药纳米粒并考察其表征,然后将载药纳米粒掺入纤维蛋白胶,再将载纳米粒的纤维蛋白胶和羊膜胶联黏合,制备出负载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜,并进行形态学和体外释药观察,检测释放出的表皮生长因子生物活性。 结果与结论：表皮生长因子/壳聚糖纳米粒的粒径为(275.7±6.8) nm,Zeta电位为(32.7±0.6) mV,包封率为(67.03±1.22)%,多分散指数为0.23±0.04,形态圆形均一,载纳米粒纤维蛋白胶能够很好地与羊膜胶联黏合,表面呈网状结构,纳米粒充斥其中。载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜体外释药可达14 d,释放的表皮生长因子生物活性可保持7 d以上。说明制备的载重组人表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜作为一种无缝合生物移植材料可在局部缓慢释放表皮生长因子。     

乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒的制备及体外释药性

摘要 背景：医用纳米粒作为药物传递的新型载体,目前已经成为医药领域研究的重点。 目的：构建以生物可降解材料乳酸-羟基乙酸共聚物为载体,负载抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶的载药纳米粒。 方法：利用复乳-溶剂挥发法制备乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒。场发射扫描电子显微镜观察纳米粒表面形态;激光粒度分析仪测定粒径分布并计算成球率;紫外分光光度计测定5-氟尿嘧啶载药量、包封率,并对体外释药进行评估。 结果与结论：纳米粒呈球性,平均粒径为(186±14) nm,成球率、载药量和包封率分别为70.8%、6.6%、28.1%,体外释药有突释现象,24 h内5-氟尿嘧啶累积释药量达36.2%,10 d达83.6%。提示成功制备乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒,其具有缓释效应。 关键词：乳酸-羟基乙酸共聚物;5-氟尿嘧啶;纳米粒;体外释药;缓释 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.16.017     

鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及质量考察*★

目的：纳米脂质载体是近年来继固体脂质纳米粒发展起来的第2代亚微粒载药系统，具有较高的载药量和物理稳定性。探讨鬼臼毒素-脂质纳米粒（podophyllotoxin-loaded nanostructured lipid carrier，PPT-NLC）的制备方法及理化性质。 方法：实验于2006-08/2007-10在南方医科大学药学部实验室完成。选择固体脂质硬脂酸、单硬脂酸甘油脂和液态脂质油酸，采用改良的乳化蒸发-低温固化法制备PPT-NLC，用同法制备不含油酸的PPT-固体脂质纳米粒(Solid lipid nanoparticles，SLN)纳米粒混悬液。用透射电镜、Zeta电位仪、高效液相色谱法、pH计考察PPT-NLC理化性质，并比较SLN与NLC的包封率和稳定性。 结果：透射电镜下PPT-NLC外形呈圆形或椭圆形，平均粒径为（88.2±8.4）nm，多分散指数为0.190±0.085，Zeta电位为（-33.2±3.1）mV，包封率为86.6%。PPT-SLN分别为（75.3±16.2）nm，0.300±0.072，（-25.2±3.4）mV，包封率为76.5%。 结论：PPT-NLC制备工艺简单，分布均匀，稳定性较SLN好，包封率高。     

Plasma catecholamines and blood volume in native Andeans during hypoxia and normoxia

Abstract Plasma catechols and blood volume were measured in 20 male, native high-altitude residents of Cerro de Pasco, Peru (4338 m), while hypoxic and subsequently while normoxic at sea level. Ten subjects were healthy controls,with hematocrits lower than 61%, and ten had chronic mountain sickness (CMS), a syndrome of maladaptation to altitude, characterized by polycythemia (hematocrit > 61%), profound hypoxemia, and neurologic symptoms. The main aim of the study was to evaluate the chronic effects of hypoxia on plasma catechols and on blood volume, by studying these parameters during hypoxia at high altitude (HA) and shortly after exposure to normoxia at sea level (SL). Subjects were first studied at HA in their habitual hypoxic environment, and measurements were repeated within 4 hours of arrival at SL (Lima, Peru, 150 m). All subjects had higher plasma norepinephrine (NE), dopamine (DA), and dihydroxyphenylglycol (DHPG) levels in HA (NE in controls and CMS: 414±47 and 514±35 pg/mL; DA: 9±1 and 13±1 pg/mL, DHPG: 817±48 and 972±77 pg/mL) than at SL (NE: 164±9 and 243±28 pg/mL; DA: 4±0.5 and 5±1 pg/mL DHPG: 502±23 and 649±39 pg/mL). Group differences were statistically significant only for NE in the CMS group. Plasma volume was higher in HA in both groups (p<0.05); red cell volume was higher in HA only in the CMS group. The results indicate sympathetic nervous stimulation by chronic ambient hypoxia at altitude in Andean natives, independent of maladaptation to their native environment.     

Clinical and neuroimaging features of good and poor seizure control patients with mesial temporal lobe epilepsy and hippocampal atrophy

Summary: Purpose: Hippocampal atrophy (HA) and signal changes, detected at magnetic resonance imaging, have been associated with intractable seizures. Such a relation has been established by tertiary centers, where the prevalence of more severe cases tends to be higher. We evaluated the clinical and imaging variables that may have relevance to seizure control in patients with mesial temporal lobe epilepsy (MTLE) and HA. Methods: MTLE patients from the outpatient clinic of University of São Paulo School of Medicine at Ribeirão Preto were evaluated with protocols for the temporal lobe. Patients were considered to have good seizure control (GC; n = 42 ) if they had three of fewer seizures per year. Patients with pharmacoresistance and who did not fit the criteria for GC were considered to have poor seizure control (PC; n = 44 ). We made group comparisons and correlations of clinical data and hippocampal volume (HV) with seizure frequency. Results: No statistical differences were observed between the GC and PC groups in the following parameters: age at the time of study, age at the time of the initial precipitating injury (IPI) or first epileptic seizure, epilepsy duration and follow‐up, and family history of epilepsy. No differences were found in HV between GC (male, 2.04 ± 0.60 cc ; female, 2.00 ± 0.70 cc ) and PC (male, 2.26 ± 0.47 cc ; female, 2.15 ± 0.48 cc ) groups. Regression analysis indicated no correlation between seizure frequency and HV (p = 0.33) . Conclusions:These findings suggest that the intensity of HA does not have a direct correlation with seizure frequency in patients with MTLE with HA and that the detection of HA in MTLE patients does not mean an unequivocal indication of intractability.