p73和p51基因及其在消化系统肿瘤中的作用

p73和p51基因是肿瘤抑制基因p53家族新成员.研究发现p73和p51基因的异常与许多肿瘤的发生发展有关.在各种消化道肿瘤中,p73和p51基因的异常表达平均可达到60%.通过对其深入的研究将有助于人们进一步认识肿瘤的本质,从而为肿瘤的基因治疗提供新的靶点.     

大鼠肺鳞癌中p16INK4a和p19ARF基因的缺失研究

目的研究p16INK4a和p19ARF基因的缺失与大鼠肺鳞癌发生发展的关系.方法利用显微切割和聚合酶链反应(PCR)技术,在10例正常大鼠支气管黏膜上皮细胞、16例癌前病变细胞和34例肺鳞癌组织分别检测p16INK4aE1α和p19ARFE1β的缺失.结果10例大鼠正常支气管黏膜上皮细胞均未发现有p16INK4aE1α和p19ARFE1β的缺失.在16例癌前病变中发现p16INK4aE1α和p19ARFE1β缺失的检出率分别为12.50%(2/16)和6.25%(1/16);p16INK4aE1α或(和)p19ARFE1β总缺失率为18.75%(3/16).34例大鼠肺鳞癌中p16INK4aE1α和p19ARFE1β缺失的检出率分别为32.35%(11/34)和41.18%(14/34),其中有9例两者同时缺失,p16INK4aE1α或(和)p19ARFE1β总缺失率为47.06%(16/34).肺鳞癌的p19ARFE1β的缺失率显著高于癌前病变,P=0.012.结论在诱发性大鼠肺鳞癌的发生发展中,p16INK4a基因的缺失可能在早期已起作用,p19ARF的生物学活性可能强于p16INK4a.p16INK4a和p19ARF基因的同时缺失损伤了Rb和p53 2条肿瘤抑制途径,这可能有助于大鼠肺鳞癌的恶性进展.     

p16和p53在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨p16、p53在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义.方法应用PCR和PCR-SSCP法.结果 p16缺失率在食管鳞状细胞癌Ⅱa期与Ⅱb期、Ⅲ期中分别为45.0%与92.3%、100.0%,在高分化组与中、低分化组中分别为9.1%、52.2%和100.0%.p53突变率在鳞状细胞癌组织和正常黏膜组织中分别为46.7%和0,两者差异有显著性;在高、中分化组与低分化组中分别为20.0%、21.4%与90.9%,前两者与后者相比差异有显著性.结论食管鳞状细胞癌存在着显著的p16缺失和p53突变.p16的缺失与肿瘤的病程进展有关;p53的缺失突变与肿瘤的病程进展无关,是肿瘤发生的早期事件.     

宫颈癌前病变及宫颈癌组织Survivin和p16INK4A及p53表达的研究

目的:探讨Survivin、p16INK4A和p53与宫颈癌前病变及宫颈癌的关系及临床病理关系.方法:应用免疫组化EnVision法,检测107例宫颈癌、86例宫颈癌前病变(CIN)及35例宫颈炎组织中Survivin、p16INK4A和p53表达水平,并加以分析.结果:在35例宫颈炎、86例宫颈CIN、107例宫颈癌中,Survivin阳性表达率分别为0、48.8%(42/86)和88.9%(72/81);p53阳性表达率分别为2.8%(1/35)、40.7%(35/86)和83.9%(68/81),两者均呈增高趋势,而p16INK4A 的阳性表达率降低,分别为94.3%(33/35)、59.3%(51/86)和28.4%(23/81),三组间两两比较差异有统计学意义,P＜0.01.Survivin、p16INK4A表达在子宫颈癌的FIGO分期、间质浸润深度及淋巴结是否转移的表达,差异有统计学意义,P＜0.05;p16INK4A还在宫颈癌组织学分级间阳性表达,差异有统计学意义,P＜0.05;p53在组织学类型及分级中其阳性表达,差异有统计学意义,P＜0.05.结论:Survivin、p16INK4A和p53异常表达参与了宫颈癌的发生发展过程,其阳性表达可作为检测宫颈癌前病变的生物标志,并可用于判断宫颈癌患者的预后.     

新辅助化疗对乳腺癌p170、Ki67、p53的影响

目的了解乳腺癌对新辅助化疗的反应性以及与相关生物学标志物的关系并探讨其机制。方法37例新诊断为T2-3N0-1M0期的乳腺癌患者术前给予CTF(cyclophosphamide,环磷酰胺;pirarubicin,吡喃阿霉素;5-fluorouracil,氟尿嘧啶)方案化疗2个周期,在化疗前、后分别观察癌组织中p170、Ki67、p53的表达情况及与化疗疗效的关系。结果本组患者经2个周期化疗后,部分缓解和轻度缓解分别为27.0%和54.1%;化疗前p170的表达率为18.9%,经化疗后表达率升高至43.2%(P<0.05);Ki67在化疗前、后表达率分别为32.4%和10.8%(P<0.05);p53无明显变化。结论CTF方案新辅助化疗有一定疗效,经化疗后反映残留癌细胞多药耐药的p170表达呈增加趋势,而反映细胞增殖的Ki67表达呈下降趋势。     

p53、p16基因在口腔鳞癌组织中表达的研究进展

口腔鳞癌是头颈部肿瘤中最常见的肿瘤，在发达国家口腔癌占所有癌症的5％。每年全世界有30万的新发病例。尽管近年来治疗技术上的进展。口腔鳞癌发病率仍然很高而且5年生存率〈50％。目前对其病因、诊断、治疗和预后的研究越来越受到人们的重视。随着肿瘤分子生物学研究的发展，揭示了癌基因的激活和抗癌基因的失活参与了癌症发生发展过程的不同阶段。大量的研究都表明癌基因的表达水平和癌症的治疗效果和预后都有着密切关系，因此加强对癌基因的研究，对癌症的预防、诊断和治疗都有着极其重大的意义。     

肿瘤抑制基因 p16 在贲门癌变过程中的表达

目的探讨肿瘤抑制基因 p16 的表达在贲门癌发生发展中的作用.方法对来自贲门癌高发区的 135 例贲门各级病变组织采用免疫组织化学方法进行测定.结果贲门上皮各级病变组织均出现不同程度的 p16 蛋白免疫阳性反应.且随着贲门上皮病变的加重,p16 蛋白免疫阳性率呈下降趋势,异形增生上皮和腺癌与贲门炎症上皮比较差异有显著意义.高、中分化腺癌的表达率(50.0%)显著高于低分化腺癌(22.2%),P<0.05.结论p16 基因的失活与贲门癌发生有关,并与贲门癌的组织分化程度有关.     

人黑素瘤抗原MAGE-A4对p53转录活性的影响

目的:探讨人黑素瘤抗原-A(melanoma antigen-A,MAGE-A)对p53转录活性的影响.方法:选用p53缺失型人肺癌细胞系H1299,采用荧光素酶报告分析法、RT-PCR、Western印迹法、克隆形成实验和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase biotin-dUTP nick end labeling,TUNEL)等方法研究MAGE-A4对p53转录活性的影响.结果:荧光素酶报告分析结果显示,转染p53基因(25 ng)可以使p21WAF1启动子介导的荧光素酶表达增加(P＜0.01);共转染恒定量(25 ng)的p53基因和不同量的MAGE-A4基因(100、200和400 ng)后, p21WAF1启动子介导的荧光素酶表达均明显高于单独转染p53基因时的表达量(P＜0.01).RT-PCR和Western印迹法检测结果也显示,转染p53基因可以使p21WAF1mRNA和蛋白表达水平增加(P＜0.01),共转染MAGE-A4基因和p53基因后,p21WAF1mRNA和蛋白表达水平均明显高于单独转染p53基因时的表达水平(P＜0.01).克隆形成实验及TUNEL染色结果显示,转染p53基因可以使H1299细胞克隆形成数减少及凋亡细胞数增加(P＜0.01),共转染MAGE-A4基因和p53基因以后,H1299细胞克隆形成数与单独转染p53基因组相比减少,而凋亡细胞数与单独转染p53基因组比较增加(P＜0.01).结论:MAGE-A4可以增强p53的转录活性及功能发挥.     

胶体32p与p53基因治疗肺癌胸腔积液疗效的观察

目的:探讨胶体32P与p53基因治疗肺癌胸腔积液的近期疗效和毒副作用.方法:65例确诊为肺癌并发单侧癌性胸腔积液的患者,随机分为3组.A组用重组人p53腺病毒注射液联合胶体32P-磷酸铬(胶体32P)治疗,B组单用胶体32P,C组单用重组人p53腺病毒注射液治疗.各入组者均每月治疗1次,治疗2次后评价疗效.结果:A组总有效率为81.8％,B组总有效率为52.4％,C组总有效率为40.9％,B组与C组之间比较,差异无统计学意义,x2=0.57,P＞0.05;B、C组分别与A组比较,差异均有统计学意义,x2值分别为4.24和7.77,P值均＜0.05;3组患者恶心、呕吐和粒细胞减少差异无统计学意义,A和C组均有5例发热,与B组无发热比较,差异有统计学意义,P值均为0.048.结论:单独使用胶体32P或p53基因治疗肺癌胸腔积液疗效有限;胶体32P与p53基因联合治疗可以有效地控制肺癌胸腔积液.     

直肠癌survivin表达及其与p53,bax表达关系

[目的]探讨survivin在直肠癌的表达以及与p53,bax表达的关系。[方法]应用免疫组织化学SP法,检测60例直肠癌组织survivin,p53和bax表达以及相应癌旁正常直肠黏膜组织survivin表达。[结果]直肠癌组织survivin的表达(63.33%)显著高于正常直肠黏膜组织(0)(P<0.01),其表达与年龄、性别、大体病理类型、浸润深度、分化程度、Dukes分期无显著性相关,p53表达阳性直肠癌组织中survivin表达明显高于阴性组(P<0.05)。[结论]Survivin过度表达在直肠癌的发生发展过程中起重要作用,survivin表达与p53表达密切相关。     

p53和p21WAF1蛋白在肝细胞肝癌中表达的意义

 【摘要】　目的　探讨p53和p21WAF1蛋白在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及其意义。方法　应用免疫组织化学SP法检测41例HCC及相应30例癌旁肝组织中p53和p21WAF1蛋白的表达。结果　p53和p21WAF1蛋白在HCC中阳性表达率分别为43.9 ％和75.6 ％，明显高于癌旁组织，差异有统计学意义（P＜0.01）。HCC中p53蛋白表达与p21WAF1蛋白表达无明显相关性（P＞0.05）。p53蛋白表达在不同组织学分级、有无肝内或门静脉转移之间差异有统计学意义，而p21WAF1蛋白表达在不同临床病理特征间差异无统计学意义。结论　p53和p21WAF1蛋白高表达均在HCC发生、发展中起作用，但两者间并无相关性。p21WAF1的诱导存在着不依赖p53的途径。     

HCV C蛋白、p53、Mdm2、p14和p21在原发性肝癌中的表达及相关性

目的:研究原发性肝癌(HCC)组织中核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21的表达及其相关性,探讨HCV核心蛋白对突变p53、Mdm2、p14和p21表达影响及临床意义。方法:收集42例HCC石蜡组织,采用免疫组织化学EnVision法检测HCC组织中核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21的表达,用统计学方法及临床联系分析它们之间的关系。结果:核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21的阳性表达主要定位于细胞核中;HCC组织中核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21阳性率分别为40.5%、47.62%、75.57%、45.24%、19.05%;5组间的Kruskal-Wallis检验P=0.000,差异显著,核心蛋白与突变p53、Mdm2、p14和p21间的Mann-WhitneyU秩和检验P值分别为0.043、0.009、1.0、0.023;HCVC蛋白与突变p53、p14、p21阳性强度两者间相关性Spearman检验P值分别为0.000、0.000、0.43,相关系数rs分别为0.67、0.64、-0.29;p53和Mdm2、p21阳性强度间相关性Spearman检验p值为0.000、0.174,rs分别为0.72、-0.45。结论:在HCV感染的HCC中HCVC蛋白可能促进野生p53突变和表达,p14的表达与C蛋白有关联;突变p53和p14很可能促进Mdm2的表达;HCC中p21表达缺陷是十分常见的,HCV相关的HCC主要与p53通路改变有关,C蛋白可能下调p21的表达。因此,HCV相关的HCC中C蛋白、突变p53、Mdm2很可能促进肝细胞增生或恶性生长。     

Reduced p21(WAF1/CIP1) protein expression is predominantly related to altered p53 in hepatocellular carcinomas

To investigate the relationship between the expression of p21(WAF1/CIP1) protein and p53 status and the possible role of the two proteins in hepatocellular carcinomas (HCCs), we examined the expression of p21(WAF1/CIP1) and p53 immunohistochemically in 81 tumours from 65 patients with hepatocellular carcinoma. p21(WAF1/CIP1) protein was absent from 59 of 81 tumours (72.8%), and altered p53 expression was found in 43 (53.1%). p21(WAF1/CIP1) expression was significantly associated with p53 status (P = 0.0008); 38 of 59 tumours lacking p21(WAF1/CIP1) protein were accompanied by altered p53 expression. Further analyses showed that p21(WAF1/CIP1) expression was inversely correlated with p53 expression in hepatitis C virus (HCV)-related HCCs, but not in HBV-related hepatocellular carcinomas and hepatocellular carcinomas without viral infection. All 11 tumours with intrahepatic metastasis showed altered p21(WAF1/CIP1) or p53 expression. In contrast, no intrahepatic metastasis was found in any of the 17 tumours without abnormal expression of either of the two proteins. These results suggest that: (1) different modes of p21(WAF1/CIP1) regulation are involved in HCCs differing in their hepatitis viral infection status, and p21(WAF1/CIP1) expression appears to be predominantly related to altered p53 in HCV-related HCCs; (2) disruption of the p53-p21(WAF1/CIP1) cell-cycle-regulating pathway may contribute to malignant progression of HCC.     

原发性肝细胞癌p21WAF1和p16表达及意义

[目的]研究p21WAF1、p16在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及意义.[方法]利用免疫组织化学技术检测74例HCC中p21WAFI、p16蛋白表达.[结果]p16蛋白在HCC中表达的阳性率为51.35%,p21WAF1蛋白的表达率为43.24%,而正常肝组织中为100%,两组均有显著性差异(P＜0.05).p16蛋白在有转移的HCC中阳性率为23.08%,明显低于无转移HCC的阳性率(71.43%,P＜0.05).[结论]p16及p21WAF1蛋白的缺失与HCC的发生发展有关.p16蛋白的缺失与HCC转移有关.     

抑癌基因ING1、p21/WAF1、P53蛋白在胃癌中的表达

目的　研究ING1、p2 1 /WAF1、p53基因蛋白在胃癌组织中的表达意义及相互关系。方法　对 71例胃癌组织应用Envision免疫组化法 ,检测 p33ING1 、p2 1 /WAF1、p53的表达情况 ,分析其相关性 ,结合临床病理因素 ,探讨胃癌发生、进展及预后的关系。结果　p33ING1 与p2 1 /WAF1、p53表达有相关性 (P <0 .0 5) ,p33ING1 表达率为 62 .0 % (44/71 ) ,与正常组织相比呈低表达 ,与胃癌的浸润、淋巴结转移、远隔转移、分化程度有相关性 (P <0 .0 1 ) ;p2 1 /WAF1表达率为54 .9% (39/71 ) ,与胃癌浸润相关 (P <0 .0 5) ;p53表达为 63 .4 % (45/71 ) ,与浸润及淋巴结转移相关 (P <0 .0 1 )。结论　ING1是抑癌基因 ,其蛋白p33ING1 在胃癌中低表达 ,对胃癌的发生、发展可能起重要作用 ,p33ING1 、p2 1 /WAF1、p53表达可作为判断胃癌恶性程度及预后的重要指标     

应用组织芯片检测肝细胞癌组织中8种p53相关基因的表达

背景及目的:肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)的发生是一个多步骤、多基因参与的过程。目前已知与HCC相关的癌基因和抑癌基因有十余种,其中p53基因家族的功能变化是HCC发生发展过程中的重要分子事件。本研究利用组织芯片高通量的优点,探讨肝细胞癌及癌旁肝组织中p53基因家族及相关基因中8种癌基因及抑癌基因的表达差异。方法:应用Instrumedics公司生产的组织芯片制作仪,取样针直径2mm,制作成3个肝细胞癌组织芯片蜡块,包括273例肝细胞癌组织、144例癌旁肝组织及10例非肝病死亡的尸检正常肝组织。应用免疫组织化学方法检测了p16INK4a、p21WAF1、p33ING1b、p53、p57KIP2、p73、mdm2和ATM8种基因在HCC及癌旁肝组织中的表达率,同时观察乙肝病毒(hapatitisBvirus,HBV)感染与这8种基因表达间的关系。结果:3个肝癌组织芯片分别含有136、143和148个位点。8种基因在HCC和癌旁肝组织中的阳性表达率分别为p16INK4a35.9%和9.0%、p21WAF141.8%和11.1%、p33ING1b43.65%和14.6%、p5346.2%和12.5%、p57KIP239.2%和16.7%、p739.5%和2.8%、mdm241.4%、9.0%和ATM6.6%和1.4%。在癌组织中上述基因的表达强于癌旁肝组织(P<0.05);不同分化程度的HCC组织中8种基因的阳性表达率差异均不显著(P>0.05);除了p16INK4a、p21WAF1、     

p21WAF1/CIP1和p53蛋白表达在胃癌发生发展过程中的研究

目的研究p21WAF1/CIP1和p53蛋白在胃癌发生发展过程中的作用及表达的临床病理意义.方法采用免疫组化SP法对正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生、萎缩性胃炎伴不典型增生组织各20例和78例胃癌组织标本进行p21WAF1/CIP1和p53蛋白检测.结果胃癌组织中p53蛋白阳性表达率高于正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生和不典型增生组(P＜0.05),而p21WAF1/CIP1蛋白阳性表达低于正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生组(P＜0.01)p21WAF1/CIP1、p53蛋白表达与胃癌的分化程度相关(P＜0.05);有淋巴结转移组p21WAF1/CIP1蛋白表达率低于无淋巴结转移组(P＜0.05),而有淋巴结转移组p53蛋白表达率高于无淋巴结转移组(P＜0.05);p53蛋白表达与胃癌浸润深度有关.结论p53蛋白高表达与p21WAF1/CIP1蛋白失表达可能参与胃癌的发生发展过程;检测p53和p21WAF1/CIP1蛋白作为反映胃癌病理学特点的参考指标可能有一定意义;p21WAF1/CIP1蛋白表达在胃癌可能存在非p53诱导表达途径.     

p53 missense but not truncation mutations are associated with low levels of p21(CIP1/WAF1) mRNA expression in primary human sarcomas

Many growth-suppressing signals converge to control the levels of the CDK inhibitor p21(CIP1/WAF1). Some human cancers exhibit low levels of expression of p21(CIP1/WAF1) and mutations in p53 have been implicated in this down-regulation. To evaluate whether the presence of p53 mutations was related to the in vivo expression of p21(CIP1/WAF1) mRNA in sarcomas we measured the p21(CIP1/WAF1) mRNA levels for a group of 71 primary bone and soft tissue tumours with known p53 status. As expected, most tumours with p53 mutations expressed low levels of p21(CIP1/WAF1)mRNA. However, we identified a group of tumours with p53 gene mutations that exhibited normal or higher levels of p21(CIP1/WAF1) mRNA. The p53 mutations in the latter group were not the common missense mutations in exons 4-9, but were predominantly nonsense mutations predicted to result in truncation of the p53 protein. The results of this study suggest that different types of p53 mutations can have different effects on the expression of downstream genes such as p21(CIP1/WAF1) in human sarcomas.     

上皮性卵巢癌组织中p21WAF1表达及其与P53和PCNA的相关性

背景与目的:近年研究表明,p21WAF1下调与多种肿瘤发生、发展有关,但其与上皮性卵巢癌的关系研究甚少,本研究从mRNA和蛋白水平探讨p21WAF1基因在上皮性卵巢癌发生发展中的作用及其与P53和PCNA蛋白表达的相关性.方法:应用RT-PCR法检测55例上皮性卵巢癌、32例良性卵巢肿瘤和30例正常卵巢组织中p21WAF1 mRNA表达,免疫组化法检测P21WAF1、P53、PCNA蛋白表达,并结合其临床病理参数及预后进行分析.结果:上皮性卵巢癌、良性卵巢肿瘤、正常卵巢组织中p21WAF1 mRNA阳性率分别为40.00%、56.25%、73.33%(P=0.012),P21WAF1蛋白阳性率分别为36.36%、56.25%、80.00%(P=0.001).上皮性卵巢癌p21WAF1 mRNA及其蛋白表达均低于其它两组,而P53、PCNA蛋白表达阳性率显著高于其它两组(P＜0.05).上皮性卵巢癌中p21WAF1 mRNA表达与其蛋白表达呈显著性正相关,与PCNA表达呈负相关,与P53表达无显著性相关.P21WAF1蛋白表达与PCNA、P53表达均呈负相关.P21WAF1蛋白低表达与卵巢癌FIGO分期晚有显著性相关(P=0.032),与患者年龄、组织学类型、病理分级、残余肿瘤大小无显著性相关(P＞0.05),而p21WAF1 mRNA与上述各项临床病理参数均无显著性相关(P＞0.05).单因素分析显示p21WAF1 mRNA与P21WAF1蛋白低表达患者预后差(P＜0.05).结论:上皮性卵巢癌组织中P21WAF1表达下调.p21WAF1基因检测结果有可能作为预测上皮性卵巢癌预后的一种参考指标.     

p21/WAF1, p53 and PCNA expression and p53 mutation status in hepatocellular carcinoma

The cyclin-dependent kinase inhibitor p21/WAF1 is regulated by p53-dependent and p53-independent pathways. In addition, p21/WAF1 binds with proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and inhibits the action of PCNA. To investigate the possible role of p21/WAF1 in human hepatocellular carcinomas (HCCs), we examined the expression of p21/WAF1 and its relation with PCNA and p53 expression in 97 surgically resected HCCs by immunohistochemistry and with the mutation status of p53 in 26 HCCs. p53 mutation status was examined by direct DNA sequencing using 3 sets of primers covering exons 5–9. Six of the 26 tumors showed p53 point mutations and only 33% of these HCCs demonstrated p21/WAF1 expression. In contrast, 75% of HCCs without p53 mutations showed p21/WAF1 expression. Of all 97 HCCs, p21/WAF1 expression was significantly higher in the tumors than in corresponding non-tumorous liver. When the tumors were stratified into 2 groups by the median tumor p21/WAF1 score, those with higher expression were found to have a lower incidence of multiple tumor nodules (p = 0.008) and tumor microsatellite formation (p = 0.050). The tumor p21/WAF1 score was positively associated with tumor PCNA expression (p = 0.036) but not with tumor p53 expression. Thus, in HCC, expression of p21/WAF1 is in part dependent on p53 status, but a p53-independent pathway also plays a significant role in the regulation of p21/WAF1 expression. High p21/WAF1 expression is significantly associated with solitary tumor nodules and, to a lesser extent, tumor microsatellites but may not be enough to suppress tumor progression. Int. J. Cancer (Pred. Oncol.) 79:424–428, 1998. © 1998 Wiley-Liss, Inc.