褪黑素对阿尔茨海默病模型大鼠NOS、Ca~(2+)和神经元凋亡的影响

目的研究褪黑素(melatonin,MT)对阿茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的NOS、Ca2+及神经元凋亡的影响。方法Wistar大鼠48只随机分为AD组、AD-MT大剂量干预组、AD-MT小剂量干预组和假AD组。应用β-淀粉样蛋白(Aβ)注入大鼠海马CA1区,建立大鼠AD模型。AD-MT干预组以MT灌胃,每日一次直至试验结束。应用电迷宫检测大鼠学习记忆情况,用比色法,硝酸还原法和Tunel法检测海马钙离子(Ca2+),一氧化氮合酶(NOS)含量以及海马神经元凋亡情况。结果MT可以明显改善AD大鼠的学习记忆能力,同时可不同程度的抑制因Aβ在脑内的沉积所导致海马的Ca2+超载,NOS的异常增高以及海马神经元的凋亡。结论MT对AD有显著的脑保护作用。     

粉防己碱对喹啉酸损伤海马神经元MDA、NOS及ATP的影响

目的 探讨粉防己碱（Tet）对喹啉酸（QA）诱导损伤的原代海马神经元丙二醛（MDA）、一氧化氮合酶（NOS）及Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的影响。方法 采用海马神经元原代培养，生化法检测QA损伤后海马神经元MDA含量、NOS及Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性并观察Tet对损伤后海马神经元上述指标的影响。结果 与模型组相比，Tet（10^-6和10^-7mol／L）能明显降低QA损伤后原代海马神经元MDA含量及NOS活性，增加Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性（P〈0．01或0．05）。结论 Tet能浓度依赖性地明显降低QA损伤后原代海马神经元MDA含量及NOS活性，增加Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性，可能参与了其对兴奋毒导致的海马神经元损伤的保护作用。     

电针对老年性痴呆模型大鼠海马线粒体酶活性的影响

目的研究电针对老年性痴呆（AD）模型大鼠海码神经元线粒体酶活性的影响，从能量代谢的角度探讨电针治疗AD的部分作用机制。方法以D-半乳糖腹腔注射和Aβ1-40海马注射诱导形成的AD模型大鼠为研究对象，电针“百会”、“涌泉”穴，每日1次，连续20d。以通道式水迷宫测试学习记忆能力的变化，评价电针对AD的治疗效庸；以生化方法检测海马神经元线粒体琥珀酸脱氢酶、Na^＋ -K^＋ -ATP酶、Ca^2＋ -Mg^2＋ -ATP酶的活性。结果电针能有效改善AD模型大鼠学习记忆能力，提高线粒体琥珀酸脱氢酶、Na^＋ -K^＋ -ATP酶、Ca^2＋ -Mg^2＋ -ATP酶活性。结论电针可促进ATP的合成与分解利用，调节线粒体功能，改善AD能量代谢障碍。     

2%氢气生理盐水对阿尔茨海默病大鼠海马神经细胞的保护作用

目的探讨2%氢气生理盐水治疗的阿尔茨海默病(AD)大鼠学习、记忆能力以及海马神经元及神经胶质细胞的形态学变化的影响。方法雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、生理盐水治疗组及2%氢气生理盐水治疗组,每组各10只。按6 mg/kg腹腔注射三甲基锡(TMT)诱导AD大鼠模型。按10 ml/kg腹腔注射2%氢气生理盐水进行治疗,生理盐水治疗组按同样剂量进行注射。Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习、记忆能力,尼氏染色观察大鼠海马神经元数量及尼氏小体的变化,免疫组织化学检测caspase-3在海马神经元的表达,电镜观察海马神经元及胶质细胞超微结构的变化。结果 2%氢气生理盐水能显著改善AD大鼠空间学习、记忆能力障碍,抑制caspase-3的表达活性,降低海马神经元的凋亡,保护神经元,同时电镜检测显示海马神经元及胶质细胞的超微结构得到改善。结论 2%氢气生理盐水能够改善海马神经元及胶质细胞的超微结构,抑制细胞凋亡,保护神经组织,从而提示2%氢气生理盐水对AD有保护治疗作用,其深层机制有待进一步探讨。     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠模型学习记忆及PSD-95表达的影响

目的观察银杏叶提取物对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力和海马组织PSD-95蛋白的影响。方法将大鼠随机分为模型组,银杏叶提取物干预组,假手术组和正常组,造模14 d后用水迷宫测定各组大鼠的学习、记忆功能,将大鼠断头取脑后,用TUNEL法检测海马组织神经元情况,并用蛋白印迹方法观察大鼠海马PSD-95蛋白表达。结果模型组大鼠存在记忆障碍,而银杏叶提取物干预组大鼠学习记忆能力明显改善,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠海马组织有大量凋亡神经元,与假手术组及正常组相比有明显统计学意义(P<0.01),与银杏叶提取物干预组相比也有显著差异(P<0.05)。银杏叶提取物干预组海马CA1及CA3区PSD-95蛋白明显增加,与模型组比较有统计学意义(P<0.01)。结论银杏叶提取物明显促进VD大鼠海马组织PSD-95蛋白表达,抑制海马神经元凋亡,改善VD大鼠学习记忆能力,对VD大鼠有显著的治疗作用。     

脑室内移植嗅成鞘细胞改善大鼠阿尔茨海默病的症状

目的探讨嗅成鞘细胞（olfactory ensheathing cells,OECs）脑室内注射对大鼠阿尔茨海默病的影响。方法sD大鼠双侧海马注射ABl．40,建立AD大鼠模型。实验动物分为四组：正常对照组、AD模型组、OECs移植组、MCSF注射组,每组10只。体外原代培养嗅成鞘细胞并将其移植至AD大鼠侧脑室。运用行为学测试、组织化学、原位杂交结合图像分析以及电镜等技术,观察、比较各组大鼠学习记忆能力、海马CA1区线粒体细胞色素氧化酶（cytochrome oxidase,COX）活性、细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基（COⅡ）mRNA表达、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）阳性神经元数,以及CA1区神经元线粒体超微结构等指标的变化。结果与正常对照组比较,AD模型组大鼠空间学习记忆能力、海马CA1区线粒体COX活性及CO II mRNA表达、NOS阳性神经元数明显降低或减少俨〈0．05）,线粒体数肇减少,结构不清、肿胀、空泡样变、嵴断裂;嗅成鞘细胞移植明显上调上述指标俨〈0．05）,并对神经元线粒体超微结构有明显的保护作用。结论嗅成鞘细胞移植通过改善AD大鼠学习记忆能力、提高海马COX活性和CO1ImRNA、NOS阳性神经元表达以及保护神经元线粒体等作用,对大鼠阿尔茨海默病具有明显的治疗作用。     

补肾健脾方对AD大鼠AchE、ChAT及海马神经元凋亡的影响

目的研究中药补肾健脾方对阿尔茨海默(AD)大鼠血清及海马组织中乙酰胆碱酯酶(AchE)、胆碱转移酶(ChAT)及神经细胞凋亡的影响。方法雄性SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组、假手术组及补肾健脾复方制剂小剂量、大剂量干预组。采用鹅膏蕈氨酸毁损大鼠脑Meynert基底核制备AD动物模型,中药补肾健脾方分别以3.6g/(kg.d)、7.2g/(kg.d)灌胃。30d后以水迷宫测试大鼠学习及记忆能力,对各组大鼠血清及脑海马匀浆中AchE、ChAT的活性进行测定,运用电镜技术及免疫组化检测海马中神经细胞的凋亡及Bax、Bcl-2的表达。结果与模型组比较,补肾健脾复方制剂大、小剂量干预组大鼠的平均逃避潜伏期明显缩短(P0.05),血清及匀浆中AchE的活性下降(P0.05),ChAT活性增高(P0.05),脑皮质的细胞凋亡显著减少(P0.05),脑皮质中Bax阳性神经元数量明显降低(P0.05),Bcl-2阳性神经元的数量显著增加(P0.05)。结论补肾健脾方可在抑制AchE活性的同时增加ChAT的活性,并可通过调节Bax/Bcl-2的表达减少海马组织中神经细胞的凋亡。     

脑缺血对AD模型大鼠脑组织Aβ1-40表达的影响

目的 探讨脑缺血与阿尔茨海默病（AD）的相关性。方法 将40只大鼠随机分为假手术组、AD模型组（AD组）、脑缺血组（CI组）、AD脑缺血组（AD＋CI组），每组10只。AD组、AD＋CI组行AD造模，其后CI组、AD＋CI组行脑缺氧造模。分别于实验前、AD造模后14、21d（即脑缺血后1周）行学习记忆功能测试，采用免疫组化法检测大鼠脑组织β-淀粉样肽（Aβ1-40）阳性细胞数。结果 AD＋CI组在21d时学习记忆功能较假手术组、CI组、AD组明显下降；脑内Aβ1-40阳性细胞数明显增加。结论 脑缺血可加重AD病情，其可能机制为增加AB的神经毒性作用。     

中药调心方对氧化损伤型类Alzheimer病大鼠线粒体呼吸链酶活性和钙稳态的影响

目的 观察调心方对氧化损伤型类A1zheimer病(AD)大鼠线粒体呼吸链酶活性和钙稳态的影响。方法 采用二羟延胡索酸(DHF） FeCl3 ADP左侧脑室注射法建立氧化损伤型类AD大鼠模型。Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力；C1ark氧电极法观察脑皮层线粒体呼吸链氧化酶活性；原位杂交法观察脑皮层线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基(COⅡ)mRNA表达；Fura 2／AM—荧光法测定脑皮层和海马Ca^2 含量以及调心方对AD大鼠上述各项指标变化的影响。结果 与正常对照组比较,AD模型大鼠空间学习记忆能力、脑线粒体细胞色素氧化酶活性和皮层COⅡ mRNA表达明显降低，皮层和海马神经元内Ca^2 含量显著增高；调心方对上述各项指标有不同程度的改善作用.结论 调心方具有改善AD大鼠空间学习记忆能力、脑线粒体细胞色素氧化酶活性、皮层COⅡ mRNA表达和钙稳态失衡的作用。     

雌激素对Aβ1-40诱导大鼠星形胶质细胞和NOS阳性细胞变化的影响

目的 探讨雌激素对淀粉样β蛋白诱导大鼠星形胶质细胞及NOS阳性细胞变化的影响.方法 于雄性SD大鼠双侧海马注射Aβ1～40,制作AD大鼠病理模型,颈部皮下植入E2,60 d后取脑行冻切片.采用组化和免疫组化方法,观察大鼠海马GFAP与NOS阳性细胞表达的变化,以及雌激素对上述指标的影响.结果 AD大鼠出现海马星形胶质细胞增生、肥大,数量明显多于正常对照组（P＜0.05）,并出现一氧化氮阳性星形胶质细胞;海马一氧化氮神经元数量较正常对照组显著减少（P＜0.05）.E2处理组星形胶质细胞增生不明显,数量明显少于AD模型组（P＜0.05）,且未见一氧化氮阳性星形胶质细胞;海马一氧化氮神经元数量较AD模型组显著增加（P＜0.05）.结论雌激素可减轻神经系统的损伤,对AD有一定防治作用,但其作用机制尚需进一步探讨.     

黄精对阿尔茨海默病模型大鼠海马组织中Caspase-3表达的影响

目的 观察黄精对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织Caspase-3的表达影响.方法 本实验用D-半乳糖皮下注射致AD大鼠模型,同时用黄精水煎剂进行干预.6 w后进行Morris水迷宫,检测大鼠学习记忆能力及空间探索能力,通过免疫组化法观察大鼠海马CA1区Caspase-3蛋白的表达情况.结果 黄精能明显地改善AD大鼠的学习记忆能力,显著降低AD大鼠海马组织Caspase-3的表达,改善AD大鼠海马CA1区神经元的退行性变化.结论 黄精能抑制海马组织Caspase-3的表达,改善海马CA1区神经元的退行性变化,对AD大鼠学习记忆能力可能有提高作用.     

阿托伐他汀对Aβ_1-42诱导AD模型抗凋亡作用的研究

目的 探讨阿托伐他汀对Aβ1-42诱导阿尔茨海默病(AD)大鼠模型学习记忆功能及神经细胞凋亡的影响.方法 采用侧脑室注射Aβ1-42的方法制备大鼠痴呆模型,阿托伐他汀5 mg·kg-1·d-1灌胃为治疗组,并设假手术组作为对照组.水迷宫实验观测大鼠的行为学变化,免疫组织化学方法测定海马区caspase-3的表达,尼氏染色观察海马区神经元凋亡情况,透射电镜观察海马区神经元超微结构的变化.结果 模型组大鼠的学习记忆成绩下降,半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)生成增多(P＜0.01),凋亡神经元增多;阿托伐他汀治疗组与模型组大鼠相比较,学习和记忆成绩有所改善,海马区caspase-3生成减少(P＜0.01),凋亡神经元减少.细胞形态学观察显示,与模型组相比,阿托伐他汀治疗组模型海马区神经细胞损伤减轻.结论 阿托伐他汀可以减少AD大鼠模型海马区caspase-3的生成,减少神经元的凋亡,减轻神经细胞损伤,改善其学习和记忆能力.     

依达拉奉对AD模型大鼠行为学和脑部NOS1阳性神经元的影响

目的 观察依达拉奉注射液对老年性痴呆(AD)模型大鼠学习记忆功能和神经元性一氧化氮合酶(NOS1)阳性神经元的影响.方法 用腹腔注射(ip)D-半乳糖和灌胃注射(ig)AlCl3法建立AD模型,Morris水迷宫实验检测学习记忆能力,以免疫组化法观察大鼠脑部的NOS1变化.结果 依达拉奉能显著改善AD模型大鼠的学习记忆障碍(P＜0.05),并明显增强大脑皮质和海马NOS1活性及其神经元密度(P＜0.05),其作用呈现出一定的量效关系.结论 中枢NOS1活性与学习记忆成绩显著相关;依达拉奉注射液对AD模型的学习记忆障碍有明显的改善作用.     

软脉灵口服液对拟血管性痴呆大鼠学习记忆和海马CA1区神经元凋亡的影响

目的观察软脉灵口服液对实验性血管性痴呆（VaD）大鼠空间学习记忆能力和海马CA1区神经元凋亡的影响。方法选用永久性结扎双侧颈总动脉（2VO）制作VaD模型,用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马CA1区的形态学变化,TUNEI．染色观察大鼠海马CA1区的神经元凋亡情况。结果与模型组比较,软脉灵高剂量组逃避潜伏期缩短（P〈0．001）、1min穿越原平台所在位置次数增加（P〈0．001）;软脉灵高剂量组与低剂量组大鼠海马CA1区的凋亡细胞比模型组减少（P〈0．01）;与软脉灵低剂量组比较．高剂量组大鼠海马CA1区的凋亡细胞更少（P〈0．01）。结论软脉灵口服液能改善拟VaD尢鼠的空间学习记忆能力,减少拟VaD大鼠海马CA1区的凋亡细胞。这些作用呈一定的量效关系。     

脑舒胶囊对Aβ_(25～35)诱导的AD大鼠海马神经元氧化应激的保护作用

目的研究脑舒胶囊对Aβ25～35诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠海马神经元氧化应激的保护作用。方法双侧脑室注射Aβ25～35复制大鼠AD模型;Morris水迷宫观察大鼠学习记忆能力;化学比色法检测海马组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;HE染色,光镜观察海马CA3区神经元损伤情况。结果与对照组比较,AD模型大鼠学习记忆能力明显下降(P0.05),海马组织GSH-Px、SOD活性明显下降(P0.05,P0.01),MDA含量明显增加(P0.05,P0.01);与模型组比较,脑舒胶囊治疗组大鼠学习记忆力明显改善,海马组织GSH-Px、SOD活性明显升高(P0.05,P0.01),MDA含量明显下降(P0.05,P0.01);光镜观察发现,模型组大鼠海马CA3区神经元排列紊乱,细胞数量减少;细胞体积变小,胞体形状不规则,胞浆浓缩,胞核固缩深染,结构不清,脑舒胶囊治疗组大鼠海马CA3区神经元上述情况明显改善。结论脑舒胶囊对Aβ25～35所致AD大鼠海马神经元氧化应激具有较好的保护作用。     

益智防呆方对Aβ1—40诱导大鼠海马神经元凋亡相关基因表达的影响

目的观察益智防呆方对Apl-40诱导大鼠海马神经元凋亡相关基因表达的影响。方法大鼠随机分为空白组、模型组、中药小、中、大剂量组及安理申组,双侧侧脑室注射Aβ1-40复制AD大鼠模型。给药4w后提取脑内海马神经元总RNA,RT—PCR测定Caspase-3、Bcl-2、Bax及p53表达。结果与空白组比较,模型组海马神经元Bcl-2表达明显减少妒〈0．01）,Caspase-3、Bax、p53表达明显增加俨〈0．01）;与模型组比较,益智防呆方能上调海马神经元Bcl-2表达俨〈0．01）,下调Caspase-3、Bax、p53表达俨〈0．01）。结论益智防呆方对改善学习记忆障碍的机制可能与上调海马神经元Bcl-2基因表达,下调Caspase-3、Bax、p53基因表达有关。     

聪脑汤对实验性阿尔茨海默病大鼠单胺类神经递质的影响

目的探讨聪脑汤对实验性阿尔茨海默病（AD）大鼠模型学习记忆能力的影响及作用机制。方法60只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、聪脑汤大、中、小剂量组。采用D-半乳糖合并鹅膏覃氨酸损毁大脑基底核神经元的方法复制模型。各组动物以通道式水迷宫游出时间和错误次数为学习记忆评价指标，水迷宫试验结束后各组测定脑海马单胺类神经递质含量的变化。结果与正常组与假手术组相比，模型组动物水迷宫游出时间和错误次数显著升高，海马多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）含量水平明显下降。与模型组相比，聪脑汤大、中、小剂量组游出时间和错误次数均显著降低，同时能明显升高海马DA、NE、5-HT水平．其中以高剂量组作用更明显。结论聪脑汤能改善模型大鼠的学习记忆功能，其作用机制与提高AD模型大鼠海马DA、NE、5-HT含量有关。     

金属硫蛋白对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆的影响

目的 观察不同剂量金属硫蛋白(MT)对D-半乳糖致衰老大鼠模型的学习记忆的改善作用.方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、MT剂量组(低0.46、中1.4和高4.2 mg/kg),每组10只.采用跳台法和Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆功能,HE染色观察大鼠海马神经元形态变化,生化酶学法检测AChE、MAO-B、ChAT活性,黄嘌呤氧化酶法测定SOD,TBA法测定MDA.结果 D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力明显下降,海马神经元核固缩;海马AChE、MAO-B活性明显增加(P＜0.01),ChAT活性明显降低(P＜0.01),给予外源性MT能以剂量依赖性的方式改善D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力的损害、海马神经元损伤,并能明显阻遏D-半乳糖致衰老大鼠的海马AChE与MAO-B活性增加(低剂量组P＜0.05,中、高剂组P＜0.01),以及ChAT活性的降低(低剂量组P＜0.05,中、高剂量组P＜0.01).结论 MT能够改善D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆功能,延缓脑组织的衰老.     

喂饲绞股蓝皂苷对Aβ1～40注射海马后大鼠脑内COX活性和线粒体超微结构变化的影响

目的 探讨β淀粉样蛋白（Aβl。柏）海马注射后大鼠脑内细胞色素氧化酶（cytochrome oxidase，COX）活性和线粒体超微结构变化及绞股蓝（GP）对其影响。方法 动物随机分为GP组、模型组、对照组。运用Aβ双侧海马注射，模拟阿尔茨海默病（AD）脑内Aβ对神经系统的损害。Y型迷宫测试大鼠学习记忆能力，组织化学、原位杂交法结合图像分析检测海马CA1区线粒体COX活性及细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基（COⅡ）mRNA表达，电镜观察CA1区神经细胞线粒体超微结构。并对AD模型大鼠给予GP灌胃，观察其对AD模型大鼠上述各项指标变化的影响。结果 与对照组比较，AD模型大鼠空间学习记忆能力、海马CA1区线粒体COX活性及COⅡ mRNA表达明显降低，线粒体数量减少，结构不清、肿胀、空泡样变、嵴断裂；GP对上述各项指标有不同程度的改善。结论 GP具有改善AD模型大鼠学习记忆能力、海马COX活性和COⅡ mRNA表达及线粒体超微结构的作用，对AD模型大鼠有一定治疗和保护作用。     

高浓度Ca2+对大鼠脑线粒体呼吸功能的影响

应用分离的大鼠脑线粒体,给予外源性高浓度Ca^2＋及一氧化氮合酶（NOS）抑制剂-L-硝基-精氨酸甲酯（L—NAME）,检测一氧化氮（NO）含量及线粒体呼吸功能。结果显示高浓度Ca^2＋引起NO含量升高,线粒体呼吸功能降低,L—NAME通过抑制NOS活性使NO合成减少,对线粒体呼吸功能有保护作用。认为,外源性高浓度Ca^2＋可激活线粒体NOS,使NO合成增多,导致线粒体呼吸功能降低。