FasL基因治疗移植于裸鼠的人脑胶质母细胞瘤的实验研究

目的 :探讨FasL基因在体内诱导胶质瘤细胞凋亡和抑制增殖的作用。方法 :在裸鼠皮下种植Fas表达阳性的人脑胶质母细胞瘤细胞系TJ90 5 ,成瘤后 ,利用脂质体介导FasL基因瘤内治疗 ,在 3 9d观察期间 ,用千分尺测量肿瘤生长 ,最终取出肿瘤 ,用原位杂交 ,免疫组化鉴定FasL基因和蛋白的表达 ,应用TUNEL法检测细胞凋亡 ,Ki 67免疫组化检测细胞增殖。结果 :FasL基因瘤内注射观察 3 9d后 ,治疗组瘤体积明显小于对照组 (P <0 0 1) ,肿瘤组织细胞内FasL基因表达增加 ,凋亡细胞数增多 ,细胞增殖率降低。结论 :FasL基因对Fas表达阳性胶质瘤有治疗作用。     

姜黄素通过Fas/FasL信号通路调控胶质瘤细胞增殖和凋亡

目的 探讨姜黄素通过Fas/FasL信号通路对胶质瘤细胞的增殖及凋亡产生影响.方法 以人胶质细胞瘤U87细胞为研究对象,采用细胞毒性试验检测姜黄素对U87胶质瘤细胞的细胞毒性作用.四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、平板克隆实验(colony formation assay)观察姜黄素对胶质瘤增殖能力的影响;流式细胞术(FCM)及Caspase-3活性检测细胞凋亡;流式细胞术检测胶质瘤细胞周期;实时定量PCR、Western blot法检测细胞内Fas、FasL mRNA和蛋白的表达水平.结果 随着姜黄素浓度增加,胶质瘤细胞系的细胞毒性作用也增强(P＜0.05),24 h的IC50为14.28 μmol/L.流式细胞术检测姜黄素阻滞胶质瘤细胞周期于G舢压期.姜黄素作用胶质瘤后Fas和FasL在mRNA和蛋白表达水平上升(P＜0.05).姜黄索对胶质瘤细胞的增殖及细胞集落形成有抑制作用,并呈浓度和时间依赖性(P＜0.05).结论 姜黄素可能通过上调Fas/FasL通路抑制胶质瘤细胞增殖并促进凋亡.     

人脑胶质瘤中Fas及FasL的表达

目的　探讨Fas及FasL基因在人脑胶质瘤中的表达 ,与肿瘤的病理类型及恶性程度的关系。方法　应用Fas及FasL多抗和Ki 6 7单抗免疫组化染色检测 6例正常脑组织及 6 4例人脑胶质瘤。结果　Fas和FasL在胶质瘤中的总表达率分别为 83%和 75 % ,并随WHO分级升高而升高 ,与Ki 6 7LI呈正相关。Fas、FasL共同阳性率 (共表达率 )为 71% ,与肿瘤级别呈正相关。结论　脑胶质瘤中Fas及FasL表达与肿瘤病理类型及恶性程度密切相关     

FasL基因诱导胶质瘤细胞凋亡和抑制增殖作用的研究

目的 :探讨FasL基因诱导胶质瘤细胞凋亡和抑制增殖的作用。方法 :脂质体介导FasL基因转染TJ90 5胶质瘤细胞系 ,原位杂交 ,FasL免疫组化鉴定转染成功 ,应用MTT法、Ki 67免疫组化检测TJ90 5细胞的增殖变化 ,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 :FasL基因转染成功后 ,肿瘤细胞内FasL表达增加 ,细胞增殖率降低 ,而凋亡细胞数增多。结论 :FasL基因诱导的细胞凋亡可能成为胶质瘤治疗的新途径之一     

FasL基因诱导胶质瘤细胞凋亡和抑制作用的研究

目的：探讨FasL基因诱导胶质瘤细胞凋亡和抑制增殖的作用。方法：脂质体介导FasL基因转染TJ905胶质瘤细胞系，原位杂交，FasL免疫组化鉴定转染成功,应用MTT法、Ki-67免疫组化检测TJ905细胞的增殖变化，TUNEL法检测细胞凋亡。结果：FasL基因转染成功后，肿瘤细胞内FasL表达增加，细胞增殖率降低，而凋亡细胞数增多。结论；FasL基因诱导的细胞凋亡可能成为胶质瘤治疗的新途径之一。     

人脑胶质瘤中Fas系统与其患者外周血中MDSC表达的相关性

目的探讨Fas、Fas配体(FasL)在人脑胶质瘤中和髓系衍生抑制细胞(MDSC)在胶质瘤患者外周血中的表达及它们与脑胶质瘤恶性程度的关系。方法采用免疫组织化学方法检测22例人脑胶质瘤组织和6例正常脑组织中Fas和FasL的表达,采用流式细胞分析术检测上述22例胶质瘤患者手术前和6例正常成人外周血中MDSC的表达。结果①高级别(Ⅲ、Ⅳ级)胶质瘤中Fas和FasL的表达水平明显高于低级别(Ⅰ、Ⅱ级)胶质瘤中的表达(P<0.05);而在后者中的表达水平又明显高于正常脑组织中的表达(P<0.05)。②高级别胶质瘤患者外周血中MDSC表达较正常人和低级别胶质瘤患者明显增加(P<0.05)。③Fas、FasL的表达与MDSC的表达呈正相关(P<0.05)。结论脑胶质瘤中Fas、FasL的表达及其患者外周血MDSC表达均与胶质瘤恶性程度正相关。     

FasL基因转染NIH3T3细胞诱导BT325胶质瘤细胞凋亡作用的研究

目的探讨FasL基因诱导胶质瘤细胞凋亡的作用。方法以脂质体将FasL基因转染NIH3T3纤维母细胞,采用免疫组化染色法和RT-PCR法检测NIH3T3/FasL细胞中目的基因的表达和转录,Hochest33342荧光染色法和TUNEL法检测共培养条件下观察其对胶质瘤细胞BT325诱导凋亡的作用。结果NIH3T3/FasL细胞能有效表达FasL,与NIH3T3细胞(对照组)相比,有显著诱导BT325细胞凋亡的作用(P﹤0.05)。结论转染了FasL基因的NIH3T3细胞可诱导胶质瘤细胞凋亡。     

中华眼镜蛇毒C组分对U251胶质瘤细胞的增殖抑制作用和Fas/FasL表达

目的探讨中华眼镜蛇毒C组分(FC)对胶质瘤U251细胞株的抑制作用及原癌基因Fas/FasL表达的影响。方法用MTT比色法检测不同浓度FC对U25l细胞的增殖抑制,免疫组织化学和RT-PCR技术观察Fas/FasL表达的变化。结果随着FC浓度的增加,对U251细胞的增殖抑制作用逐渐增强,呈剂量依赖性。免疫组化和RT-PCR结果显示,随着FC作用剂量的增加,Fas/FasL表达无明显改变。结论FC对人胶质瘤细胞系U251的增殖具有明显的抑制作用,但对原癌基因Fas/FasL的表达无影响。     

Fas/FasL系统和中枢神经系统疾病

Fas/ FasL抗原系统是重要的细胞凋亡信号传导系统,目前认为它也是重要的细胞凋亡和免疫调节系统,涉及到中枢神经系统(CNS)细胞的发生、再生、增殖、病理性退化.近年来,对Fas/ FasL抗原系统及其在中枢神经系统疾病过程中的作用有了进一步的认识,现综述如下.……     

大鼠脑胶质瘤伽玛刀治疗后细胞凋亡的机制研究

目的:研究大鼠脑胶质瘤伽玛刀治疗后早期Caspase—3和Fas的表达变化及其对肿瘤细胞凋亡的影响。方法:通过建立C6大鼠脑胶质瘤模型,对其进行伽玛刀治疗,于治疗后早期的不同时间点行流式细胞学检查,对比不同时间点胶质瘤细胞的凋亡率与其表达的Caspase—3和Fas是否相关。结果:伽玛刀治疗后肿瘤细胞的凋亡率明显增高,Caspase—3和Fas的表达也明显提高,二者与细胞凋亡率呈正相关(r_1=0.9684,r_2=0.9778)。结论:伽玛刀治疗后存在细胞凋亡,Caspase—3和Fas基因可能介导了凋亡的发生。     

海葵毒素对神经胶质瘤细胞的凋亡诱导作用

目的 研究从海葵组织中提取的海葵毒素(Phyllodiscus semonii toxin,PsTX)对人神经胶质瘤细胞(U251)凋亡的诱导作用及其可能机制.方法 MTT法检测PsTX对肿瘤细胞的增殖抑制率;原位末端脱氧核糖苷肽转移酶分析法(TUNEL)及DNA Ladder法检测PsTX对肿瘤细胞的凋亡诱导作用;免疫组织化学染色显示Fas蛋白在U251细胞中的表达.结果 PsTX对人神经胶质瘤细胞具有明显的生长抑制及促凋亡作用,PsTX诱导Fas在人神经胶质瘤细胞膜上表达增高.结论 PsTX可能通过Fas途径诱导人神经胶质瘤细胞凋亡.     

Fas及FasL和Caspase-3在青蒿琥酯诱导人胚肺成纤维细胞凋亡中的表达*☆

背景: 青蒿琥酯具有减轻肺纤维化的作用，但相关机制的研究罕见报道。 目的：探讨青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞凋亡的作用及其与Fas，FasL，Caspase-3表达的关系。 方法：用1，10，100 mg/L青蒿琥酯分别干预体外培养的人胚肺成纤维细胞。采用CCK-8法检测青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞增殖的影响，流式细胞术测定细胞凋亡率，RT-PCR法测定Fas，FasL，Caspase-3 的mRNA的表达。 结果与结论：青蒿琥酯呈浓度依赖性抑制人胚肺成纤维细胞增殖，细胞经青蒿琥酯作用后凋亡率明显增加(P < 0.05或P < 0.01)，Fas，FasL，Caspase-3 mRNA的表达显著高于对照组(P < 0.05)。结果证实，青蒿琥酯可通过上调Fas，FasL，Caspase-3 mRNA的表达抑制人胚肺成纤维细胞增殖、并促进细胞凋亡，发挥抗肺纤维化作用。     

Fas/FasL在神经系统疾病作用的研究进展

Fas/FasL系统在介导细胞凋亡过程中起着重要的信号传递作用.在许多神经系统疾病中,凋亡在疾病的发生、发展中起重要作用,如在脑缺血、多发性硬化(MS)、阿尔茨海默病(AD)以及神经肌肉病中,均发现有Fas/FasL系统表达水平的变化,提示该系统可能参与了神经系统疾病的病理生理过程.     

脑胶质瘤中细胞凋亡及相关基因Fas、Survivin表达研究

目的探讨脑胶质瘤中细胞凋亡及Fas、Survivin在凋亡中的意义.方法应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated-deoxy uridine-5'- triphosphate-X nick end labeling, TUNEL)检测细胞凋亡,免疫组化链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物 (strept avidin-biotin peroxidase complex, SABC)法检测Fas、Survivin和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA).结果凋亡指数(apoptosis index, AI)随胶质瘤的恶性程度增高而增高(P<0.001).AI/PI则随着胶质瘤级别增高而减小(P<0.001).Fas阳性组的AI较Fas阴性组显著增高(P<0.01).Survivin阳性组的AI较Survivin阴性组显著减低(P<0.05).低AI(<0.94)组与高AI(>0.94)组的术后1年生存率的差异有显著意义(P<0.05).死亡组与存活组的AI差异无显著意义(P=0.34),而两组的AI/PI有显著差异(P<0.001).多因素Logistic回归模型分析显示,病理、Fas、Survivin、AI、AI/PI和手术与预后相关(P<0.01).结论 AI可作提示预后的指标,对脑胶质瘤的生物学行为及肿瘤分级有指导意义.肿瘤级别较低、Fas 阳性、Survivin阴性、AI<0.94%、AI/PI较大、手术全切的患者预后较好.     

瘤内注射树突状细胞对C6胶质瘤抑制作用的实验研究

目的通过构建SD大鼠脑胶质瘤模型,成瘤后瘤内注射树突状细胞,探讨树突状细胞对C6胶质瘤的抑制和诱导凋亡作用。方法 30只SD大鼠脑内注射C6细胞,成瘤后随机分3组。A组:沿原注射部位瘤内注入10μL培养液。B组:同法注入10μL含106个未成熟DC的培养液。C组:同法注入10μL含106个成熟DC的培养液。分析3组大鼠的生存时间;取不同组大鼠的脑内肿瘤,制作冰冻病理切片,染色后镜下观察;肿瘤组织制成细胞悬液后细胞爬片,免疫组化检测Fas在C6胶质瘤细胞中的表达,计算积分光密度值。结果 (1)生存时间:C组载瘤大鼠生存时间长于A、B 2组,差异具有统计学意义(P0.05)。(2)肿瘤病理结果:C组肿瘤组织大片坏死区,B组小片坏死区,A组无明显坏死区。(3)免疫组化:Fas表达,细胞积分光密度值(IOD),C组明显高于A、B组。结论成熟DC可诱导C6胶质瘤细胞凋亡,途径之一可能是增强抗原提呈,提高细胞Fas的表达。     

多发性硬化患者外周血T细胞Fas表达及血清sFas水平

多发性硬化（multiple sclerosis，MS）的发病与针对自身抗原的自身反应性T细胞凋亡异常关系密切。Fas／FasL促发的免疫细胞凋亡异常在MS的发病中起重要作用。为探讨其在MS发病机制中的作用，我们于2002年1月至2004年5月对29例MS患者以及20例对照组的外周血T细胞Fas表达及血清sFas水平进行了检测。     

脑胶质瘤中细胞凋亡与相关基因Fas、survivin表达的相关性及预后意义

目的　探讨脑胶质瘤中细胞凋亡与相关基因Fas、survivin表达的关系及其预后意义。方法　应用TUNEL法检测细胞凋亡 ,免疫组化SABC法检测Fas、survivin和PCNA ,实验数据用SPSS 10 0软件包进行统计。结果　Fas阳性组的AI较Fas阴性组显著增高 (P =0 0 0 1)。Fas的加权计分和AI之间呈明显线性相关 (r=0 65 8,P <0 0 0 1)。Survivin阳性组的AI较survivin阴性组显著减小 (P<0 0 1)。Survivin表达的加权计分和AI之间呈明显负线性相关 (r=-0 3 77,P <0 0 0 1)。低AI( <0 96)组与高AI(≥ 0 96)组的术后 1年生存率的差异有显著意义 (P <0 0 5 )。死亡组与存活组的AI差异无显著意义 (P =0 2 4) ,而两组的AI/PI有显著差异 (P <0 0 0 1)。多因素Logistic回归模型分析显示 ,病理、Fas、survivin、AI、AI/PI和手术与预后相关 (P <0 0 5 )。结论　细胞凋亡受多种基因的网络式调控。AI的高低与其相关基因Fas、survivin的表达有关。AI可作提示预后的指标 ,对脑胶质瘤的生物学行为及肿瘤分级有指导意义。肿瘤级别较低、Fas阳性、survivin阴性、AI<0 96%、AI/PI较大、手术全切除的患者预后较好。     

帕金森患者外周血液淋巴细胞Fas/FasL的表达

目的:本文旨在通过检测帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者外周血液淋巴细胞Fas/FasL的表达,探讨淋巴细胞减少的原因,以及与PD患者脑内多巴胺能神经元的死亡是否存在关联。方法:以13例健康查体者为对照,用流式细胞术检测了16例PD患者外周血液Fas/FasL的表达。结果:与正常对照组相比,PD患者外周血液Fas/FasL的表达明显增高(P分别<0.01);而按照Webster量表评分及病程将PD患者分组后进行比较,Fas/FasL的表达无明显差别(P分别>0.05)。结论:PD患者外周血液淋巴细胞Fas/FasL的高表达可能是其数目减少的原因之一,也可能是免疫平衡失代偿的结果;Fas/FasL的高表达可能通过某种机制影响了脑组织,导致脑内神经元及胶质细胞Fas/FasL的信号的异常表达,其发生机制有待于进一步深入研究。     

NF-κB在胶质瘤细胞凋亡中的作用

NF-κB蛋白家族作为转录调控因子,参与细胞的增殖、抑制细胞的凋亡,并被证实和许多肿瘤的形成有关,在肿瘤发生发展过程中具有重要作用.近年来研究发现NF-κB与胶质瘤的恶性程度、侵袭性、血管生成密切相关,NF-κB通路介导了肿瘤相关基因的异常表达,从而抑制胶质瘤细胞凋亡,促进胶质瘤血管形成和转移等,直接影响胶质瘤的发生和发展,而降低胶质瘤中NF-κB的活性有可能成为治疗胶质瘤的新方向.     

膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人骨髓基质干细胞对脑胶质瘤细胞的体外靶向抗肿瘤作用

目的：探索经膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）修饰的人骨髓基质干细胞（hMSCs）对脑胶质瘤的靶向抗肿瘤作用。方法：通过体外Transwell系统研究hMSCs向胶质瘤的迁徙能力。采用经全长人TRAIL（hTRAIL）重组的腺相关病毒（rAAV）载体（rAAV hTRAIL）对骨髓基质干细胞（MSCs）进行修饰。将hTRAIL修饰的MSCs与人胶质瘤细胞（U87MG）在体外共同培养,分析其对脑胶质瘤的靶向抗肿瘤作用。结果：hMSCs向胶质瘤细胞的迁徙具有高度特异性。经TRAIL修饰的hMSCs不仅在MSCs表面表达全长TRAIL,且能在培养基中分泌可溶性TRAIL。经rAAV-hTRAIL转染后,hMSCs细胞凋亡作用无增加。将TRAIL修饰的hMSCs与U87MG细胞共培养,与采用可溶性TRAIL治疗后相比较,可明显提高U87MG细胞的凋亡率。结论：在体外实验中,hMSCs向胶质瘤细胞的迁徒具有高度特异性,且能诱导胶质瘤细胞凋亡,并提高对sTRAIL不敏感胶质瘤细胞的凋亡率。由此推测膜结合型TRAIL修饰的MSCs在肿瘤微环境中对脑胶质瘤具备靶向抗肿瘤效应。MSCs可能成为脑胶质瘤靶向治疗的有效载体。