HPLC控制参附注射液及附子中3种双酯型生物碱

参附注射液是古方参附汤经剂型改变而来,由人参、附子2味药组成,具有回阳救逆,益气固脱的作用;主要用于阳气暴脱的厥脱证(感染性、失血性、失液性休克等),也可用于阳虚(气虚)所致的惊悸、怔忡、喘咳、胃疼、泄泻、痹证等。虽然附子是由乌头加工炮制并经过了减毒处理,但是附子中仍含有双酯型剧毒生物碱,即乌头碱、新乌头碱和次乌头碱,所以在参附注射液的生产过程中对其又进行了减毒处理,双酯型乌头碱水解成毒性较小的单酯型乌头     

参附注射液对免疫功能的影响

用RP－HPLC测定包乌头碱的含量,用Ⅳ型变态反应、环磷酰胺致免疫功能低下模型观察免疫活性,结果表明,参附注射液中的乌头碱比其原料黑附片低3倍。参附注射液大剂量给药,能增强机体细胞免疫功能,对于环磷酰胺所致免疫功能低下的小鼠有升高白细胞及红细胞作用,并能增加脾重指数。     

参附注射液药理作用的研究进展

参附注射液源于参附汤,是由人参(红参)、附片(黑附子)等中药提取制成的中成药注射剂。人参含有多种不同结构的人参皂苷和人参三醇类物质,主要有效成分是人参皂苷。而附片含有双酯类二萜生物碱(新乌头碱、乌头碱、次乌头碱)和单酯类二萜生物碱,主要有效成分是     

参附注射液中附子成分分析

我们在实际工作中对参附注射液中所含附子成分做了一些探讨性研究工作,以了解参附注射液中附子毒性成分的情况。1 附子的成分与炮制多年来,对中药附子的成分研究多有文献资料报道。附子生块根含生物碱,如乌头碱、次乌头碱、新乌头碱等成分,从所含生物碱分类来看,主要有双酯类生物碱、单酯类生物碱和胺基醇类生物碱。其中以双酯类生物碱毒性大,属于难溶于水的脂溶性成分;以单酯类生物碱毒性小,仅为双酯类生物碱的1/     

生脉注射液治疗乌头碱中毒16例报道

目的：观察生脉注射液在乌头碱中毒中的临床效应。方法：对16例乌头碱中毒患者静滴生脉注射液80ml，每6～8h 1次。结果：经生脉注射液治疗16例，3d内痊愈出院。结论：生脉注射液治疗乌头碱中毒具有较好的、多方面的药理作用。     

生脉复律汤对乌头碱及氯化钙诱发大鼠心律失常的影响

目的观察生脉复律汤对乌头碱及氯化钙诱发大鼠各种心律失常的影响。方法选取雄性SD大鼠,分别用乌头碱及氯化钙诱发心律失常,观察生脉复律汤对心律失常出现的时间、特性的影响。结果生脉复律汤能明显延长乌头碱诱发的室性早搏及室性心动过速的发生时间,并有降低心室颤动发生率的趋势,但无统计学意义;生脉复律汤对氯化钙诱发心律失常无明显作用。结论生脉复律汤能够改善乌头碱诱发的室性心律失常。     

参附注射液治疗心血管疾病的研究进展

参附注射液源自《校注妇人良方.卷九》之参附汤,是根据古方参附汤用红参、黑附子经科学加工提炼而成.现代药理研究表明,人参皂苷具有抑制心肌肥厚、抑制血管内皮细胞凋亡、扩张冠状动脉及周围血管,减轻心脏前后负荷等作用[1-2];而附子含有乌头碱、异飞燕草碱、新乌宁碱、乌胺及尿嘧啶等多种生物成分,能改善心肌供血,增强心肌收缩力,改善血液循环[3].本文拟就参附注射液治疗心血管疾病的研究综述如下.     

中药制剂乌头碱含量测定

目的:观察超高效液相色谱-质谱法测定中药制剂乌头碱的含量。方法:以参附注射液为例,采用超高效液相色谱-质谱法测定乌头碱含量,确定样品溶液p H值等最佳提取时间。精确程度定量乌头碱对照品储备液,制备成1μg·L~(-1)乌头碱、新乌头碱和次乌头碱,然后依次稀释,将乌头碱浓度分别稀释到100 ng·L~(-1)、10 ng·L~(-1)、2.5 ng·L~(-1)、1.0 ng·L~(-1)、0.25 ng·L~(-1)、0.1 ng·L~(-1)。按照设定色谱参数条件进行检测,记录峰值面积。结果:在0.1~100 ng·L~(-1)内,乌头碱线性回归方程为y=492.1x+122.3(r=0.999 2),线性关系良好;新乌头碱线性回归方程为y=117.1x+218.3(r=0.999 2),线性关系良好;次乌头碱线性回归方程为y=355.9x+98.34(r=0.999 6),线性关系良好。乌头碱、新乌头碱、次乌头碱加样回收率分别为100.3%、97.7%、97.4%,乌头碱峰面积RSD为1.6%,新乌头碱峰面积RSD为1.6%,次乌头碱峰面积RSD为2.9%。结论:超高效液相色谱-质谱法测定中药制剂乌头碱含量稳定性好,能够保证用药安全,为正确评价药学作用提供科学依据。     

附子及其几种制剂中剧毒性生物碱的含量测定

本文应用改良异羟肟酸铁法,以乌头碱为标准品,测定了黑附片、附子注射液、参附注射液、金匮肾气丸、附子理中丸中的双酯型毒性生物碱的含量。实验结果表明,本法稳定性,重现性均较好;测得数据对于临床用药具有一定的参考价值。     

泰癌注射液中乌头生物碱的薄层层析

应用薄层层析方法检测了泰癌注射液中有毒成分乌头碱、美沙乌头碱和海帕乌头碱。实验结果表明,有毒成分在加工过程中基本已水解为毒性小的成分,仅美沙乌头碱在相同R_f值处有隐约可见的斑点。经对14批样品检测,薄层色谱图基本一致,说明泰癌注射液工艺可靠,检测方法可行。     

瓣膜置换术前应用999参附注射液疗效观察

参附注射液药物组成为红参、黑附子提取物 ,主要含人参皂甙、乌头类生物碱。现代药理研究证实 ,参附注射液可促进前列环素合成及释放 ,升高ＰＧＩ2与ＴＸＡ2 比值 ,扩张冠状动脉 ;其所含去甲乌头碱是β受体激动剂 ,能增强心肌收缩力 ,增加心输出量 ,改善心脏功能。我院心脏外科从 2 0 0 0年起应用参附注射液改善瓣膜置换术前心功能不全 18例 ,取得满意疗效。1　临床资料我院从 2 0 0 0年 1月— 2 0 0 1年 4月共收治风湿性心脏病 18例 ,其中男 8例 ,女 10例 ;年龄 4 8～ 69岁 ,平均 5 3岁 ;其中单纯二尖瓣病变 15例 ,二尖瓣合并主动脉瓣病变 …     

参附注射液质量标准研究

目的 提高参附注射液质量标准。方法 建立高效凝胶渗透色谱法对大分子物质进行检测,采用TSK-Gel G4000 PWXL(7.8 mm×300 mm,10μm)凝胶色谱柱,50 mmol/L乙酸铵溶液,流速为0.5 mL/min,柱温为40℃,蒸发光散射检测器（漂移管温度115℃,氮气流速3.2 L/min）;建立HPLC方法对参附注射液中单酯型生物碱进行含量测定,采用Thermo Hypersil BDS C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以流动相甲醇-0.2%三乙胺（冰乙酸调pH5.3）进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;柱温为30℃,检测波长为235 nm。结果 参附注射液中未检出相对分子质量大于10 000的大分子物质;苯甲酰新乌头原碱在0.102～2.038μg范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为95.60%(RSD为2.41%);苯甲酰乌头原碱在0.102～2.031μg范围内线性关系良好（r=0.9996）,平均回收率为88.88%(RSD为2.44%);苯甲酰次乌头原碱在0.101～2.016μg范围内线性关系良好（r=0.999...     

参附注射液中3种痕量成分乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的测定

该文建立了参附注射液中3种痕量附子指标成分的含量测定方法,为评价君药附子的药效学作用提供了依据.样品经中空纤维液相微萃取(HF-LPME)进行纯化富集,采用ACQUITY UPLC BEH C1s色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm),流动相乙腈-10 mmol·L-1碳酸氢铵溶液(pH 10),流速0.45 mL·min-1,梯度洗脱.电喷雾电离(ESI)、多反应监测(MRM)方式进行含量测定.结果表明,乌头碱、次乌头碱、新乌头碱在0.1 ～100 ng·L-1线性关系良好,r＞0.999,检测限分别为0.03,0.03,0.02ng-L-1,平均加样回收率分别为100.1％,97.4％,97.5％,RSD分别为1.2％,1.1％,1.5％.该方法保证了参附注射液的用药安全,为正确评价附子的君药药效学作用提供了科学依据,为含有附子的中药制剂的质量控制提供了可靠方便而实用的检测手段.     

益气复脉合剂抗乌头碱致大鼠心肌细胞动作电位异常的研究

目的:利用膜片钳技术阐述益气复脉合剂抗心律失常的作用机制。方法:采用酶解法分离大鼠心肌细胞,利用膜片钳方法考察益气复脉合剂抗乌头碱致大鼠心肌细胞动作电位异常的作用。结果:益气复脉合剂可显著缩短乌头碱所致动作电位时程APD、APD_(50)、APD_(90)的延长,对静息电位、超射、幅度及最大上升速率并无明显改变。结论:益气复脉合剂抗乌头碱致室性心律失常的作用机制可能与抑制心室肌细胞的Ca~(2+)内流以及K~+外流有关。     

调脉饮注射液抗心律失常的实验研究

目的:研究调脉饮注射液的抗实验性心律失常作用,并初步探讨其作用机制。方法:动物随机分为空白对照组、阳性药对照组和调脉饮注射液大、小剂量组,观察:对小鼠吸入氯仿所致室颤的保护作用;大鼠经20%乌拉坦6 mL.kg-1静脉麻醉后开胸,从颈静脉匀速滴入1.0μg.mL^-1.min^-1乌头碱溶液,豚鼠麻醉后从颈静脉匀速滴入10μg.mL^-1.min^-1哇巴因溶液,观察出现室性期前收缩、室性心动过速、室颤和心搏停止的时间,然后换算为乌头碱和哇巴因的累积量;大鼠麻醉后开胸,结扎冠状动脉5 min后恢复冠脉供血,造成缺血再灌注,观察心律失常持续时间。实验结束后取心脏制成10%匀浆,测定超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果:调脉饮注射液可以提高室颤阴性率,降低小鼠室颤的发生率(P<0.01);推迟大鼠室性早搏、室速及室颤的发生时间,提高乌头碱的累积用量,具有抗乌头碱心律失常(P<0.05)的作用;推迟豚鼠室性早搏的发生时间,提高哇巴因的累积用量,具有抗哇巴因心律失常(P<0.05)的作用;对心肌缺血再灌注所致心律失常有保护作用,能够缩短心律失常的持续时间,并能明显提高心肌SOD的活性。结论:调脉饮注射液能对抗实验性心律失常,对心肌缺血再灌注所致心律失常有保护作用,其作用机制可能与抑制脂质过氧化,减少自由基损伤有关。     

柴胡三参胶囊对实验性心律失常保护作用的研究

目的观察柴胡三参胶囊对氯仿、氯化钙、乌头碱致实验性心律失常模型的保护作用。方法将小鼠和大鼠分别随机分为生理盐水组和柴胡三参胶囊小、中、大剂量组,按造模药物的不同予以普萘洛尔、维拉帕米和普罗帕酮作为对照药物。小鼠每组20只,大鼠每组10只,各组预防性给药7 d,末次给药后30 min,分别吸入氯仿、注射氯化钙及乌头碱,记录每组出现室性早搏、室性心动过速、室颤时间及死亡的时间。结果柴胡三参胶囊对氯仿、乌头碱、氯化钙致实验性心律失常模型有很好的保护作用。结论柴胡三参胶囊具有较好的抗实验性心律失常的作用,且有一定的量效关系。     

参附强心丸中人参、大黄、桑白皮的薄层色谱鉴别及乌头碱限度检查

目的：完善参附强心丸的质量控制方法。方法：采用薄层色谱法对制剂中人参、大黄、桑白皮进行鉴别,并对乌头碱进行限量检查。结果：薄层色谱中斑点清晰、阴性对照无干扰,乌头碱含量在规定范围之内。结论：本方法可行、专属性强、重复性好,可用于参附强心丸的质量控制。     

丹参注射液合参脉注射液治疗心悸78例临床分析

目的：研究丹参注射液和参脉注射液对心悸的治疗效果。方法：以丹参注射液和参脉注射液对门诊78例心悸进行治疗观察。结果：患者治愈54例,好转21例,无效3例。结论：丹参注射液和参脉注射液对心悸病人治疗有效,值得推广。     

芪珀生脉颗粒抗乌头碱诱发心律失常作用的研究

[目的]评价芪珀生脉颗粒抗大鼠心律失常作用的整体疗效。[方法]采用尾静脉恒速泵入乌头碱溶液[10μg/m L,0.5 m L/(min·kg)]致大鼠心律失常动物模型,观察心电图的相关指标,观察芪珀生脉颗粒对心律失常的影响。[结果]芪珀生脉颗粒高、中、低剂量组均可明显延迟大鼠室性早搏和室性心动过速出现时间(P0.05或P0.01),其中芪珀生脉颗粒中剂量组和高剂量组还可显著延迟心脏停搏出现时间(P0.05或P0.01)及增加心脏停搏时乌头碱耐受量(P0.01)。[结论]芪珀生脉颗粒具有抗乌头碱致心律失常作用。     

养心复脉口服液抗实验性心律失常的作用

目的 :观察养心复脉口服液抗实验性心律失常的作用。方法 :采用乌头碱、氯化钡和冠状动脉结扎致大鼠心律失常的方法 ,探讨养心复脉口服液的抗心律失常的作用。结果 :养心复脉口服液 (19g· kg- 1 · d- 1 × 7d,38g· kg- 1 · d- 1 × 7d,ig)可明显对抗乌头碱、氯化钡、冠状动脉结扎诱发的大鼠心律失常 ,其特点是提高乌头碱致大鼠室性早搏 (VPB)、室性心动过速 (VT)和心室颤动 (VF)的剂量 ,推迟氯化钡致大鼠 VPB和 VT的发生时间及缩短大鼠心律失常的持续时间 ,降低冠状动脉结扎所致大鼠 VPB的发生率。结论 :养心复脉口服液具有较好的抗心律失常作用。