间期荧光原位杂交在儿童急性淋巴细胞白血病t(12;21)检测中的应用

目的　探讨双色间期荧光原位杂交(I -FISH)技术在儿童急性淋巴细胞白血病t(12 ;2 1)检测中的应用价值。方法　联合双色I -FISH和常规染色体核型分析技术(CCA)对5 1例儿童初治ALL的骨髓或外周血有核细胞进行t(12 ;2 1) /TEL- AML1融合基因检测。结果　11例患儿经I -FISH检测发现t(12 ;2 1) ,占总病例2 1 .6 % ;仅1例CCA检测发现有可疑的t(12 ;2 1)。结论　t(12 ;2 1)是儿童ALL最常见的染色体易位,常规染色体核型分析极难发现,需用FISH等分子检测方法加以证实。     

儿童B系急性淋巴细胞白血病TEL-AML1融合基因的研究

目的了解ＴＥＬＡＭＬ１融合基因在儿童Ｂ系急性淋巴细胞白血病（急淋）中的发生率及其与临床诊断和预后的关系,并比较巢式逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）和双标记荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）两种方法。方法采用巢式ＲＴＰＣＲ和双标记ＦＩＳＨ技术检测ＴＥＬＡＭＬ１融合基因。结果和结论ＲＴＰＣＲ检测发现儿童Ｂ系急淋中２２．５％（４０例中９例）的患者有ＴＥＬＡＭＬ１融合基因转录本,这类患者预后较好,完全缓解率达１００％。ＲＴＰＣＲ和ＦＩＳＨ技术是检测ＴＥＬＡＭＬ１的有效方法,并为临床诊断和预后估计提供了有一定价值的手段。     

双色荧光原位杂交技术在检测t(8;21)白血病中的应用

目的 探讨双色荧光原位杂交（FISH）技术在t（8；21）白血病诊断和治疗监测中的应用。方法 将2001年以来应用双色双融合AML1／ETO基因探针进行FISH检测的70例白血病患者，分为未治疗组和治疗组，回顾性分析核型、FISH及部分RT-PCR结果，对核型结果有疑问的患者再应用显带后连续进行中期FISH方法予以确定。结果 未治疗组共42例，经FISH补充检测确诊30例为t（8；21）患者，其中2例患者核型分析未检出t（8；21）和1例RT-PCR结果阴性患者FISH检测结果均为阳性；6例复杂易位患者通过显带后连续中期FISH检测不仅确定AML1／ETO融合基因的存在，同时精确定位。治疗组共28例，为已确诊的t（8；21）白血病患者。3例患者核型分析结果正常或非t（8；21），FISH检测结果阳性。2例通过FISH监测到复发。结论 双色FISH技术是一种敏感、精确的t（8；21）白血病的诊断和治疗监测工具，可精确定位复杂核型，因而是常规细胞遗传学检测的必要补充。     

儿童急性淋巴细胞白血病伴有TEL-AML1融合基因表达的免疫表型特点分析

为了探讨伴有TEL—AML1融合基因表达的儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）的免疫表型及其它临床特点，采用三色流式细胞术（FCM）检测免疫表型，用巢式逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测TEL—AML1融合基因的表达；同时在FAB分型基础之上进行形态学（M）、免疫学（I）、细胞遗传学（c）分型。结果显示：④儿童B系ALL中TEL—AML1^＋占18．5％（22／119），主要以L2亚型为主，糖原（PAS）染色阳性率和积分值均数分别为65％和121，均高于TEL—AML1^-组（P〈0．05）；②与儿童B系ALLTEL—AML1^-组相比，TEL—AML1^＋年龄、性别、白细胞计数、外周血中幼稚细胞数目均未见有统计学差异；③TEL/AML1^＋组中，普通淋巴细胞表型295．5％（21／22）；与TEL／AML1^-组比较，CD13表达率增高（59．1％，13／22），CD20表达率减低（22．7％，5／22）（P〈0．05）；CD10及HLA—DR的平均荧光指数（MFI值）增高，分别为92．80及53．61（P〈0．05）。结论：儿童伴TEL—AML1融合基因表达在儿童ALL中较常见，且具有特殊的免疫表型特点，该特点可作为儿童白血病微量残留病的辅助检测。     

t(12；21)儿童急性淋巴细胞白血病的研究现状

儿童急性淋巴细胞白血病 (急淋 )染色体易位有ｔ(9;2 2 ) ,ｔ(4;11) ,ｔ(1;19) ,但其总发病率不足 15 %。累及 12号染色体短臂的染色体易位有ｔ(6 ;12 ) ,ｔ(7;12 ) ,ｔ(8;12 ) ,ｔ(12 ;17) ,ｔ(12 ;18)及ｔ(12 ;2 1)等 ,其中ｔ(12 ;2 1)在儿童急淋中以其高的发病率、独特的生物学特征、良好的预后而受到广泛重视。现就近年来的ｔ(12 ;2 1)研究状况加以综述 ,以加深对ｔ(12 ;2 1)儿童急淋的认识。1　ｔ(12 ;2 1)儿童急淋的临床特征1.1　发病率 :ｔ(12 ;2 1)儿童急淋约占Ｂ 系儿童急淋的 11%～ 36 % [1 4 ] ,在成人急淋中 ,ｔ(12 ;2 1)的检出…     

t(12;21)儿童急性淋巴细胞白血病发病机制的研究进展

t(12;21)(p13;q22)是儿童急性淋巴细胞白血病最常见的染色体易位,易位形成的TEL-AML1融合基因在白血病发病中起重要作用。TEL-AML1融合蛋白能募集N-CoR、roSin3和SMRT等核辅助抑制因子,与TEL蛋白形成异二聚体而干扰野生型TEL蛋白的功能,并与野生型AML1竞争AML1结合位点而起显著负性抑制作用。t(12;21)可能是致白血病的必要的初始遗传事件之一,其他细胞遗传学异常、尤其是未易位的TEL等位基因缺失,对疾病的发生、发展起着重要的促进作用。     

TCF3-PBX1融合基因阳性成人急性淋巴细胞白血病的临床和实验研究

目的 探讨TCF3-PBX1融合基因阳性的成人急性淋巴细胞白血病(ALL)的形态学、免疫学、细胞遗传学和临床特点.方法采用R显带技术进行常规核型(CC)分析,间期荧光原位杂交(FISH)技术和RT-PCR技术检测TCF3-PBX1融合基因,流式细胞术(FCM)检测细胞免疫表型;分析19例TCF3-PBX1融合基因阳性成人ALL的临床和实验室特征并进行长期随访.结果本组19例TCF3-PBX1融合基因阳件ALL占同期成人ALL的3.13%;其中L_2 12例,L_2 7例.细胞遗传学检测7例为t(1;19)平衡易位,10例为der(19)t(1;19)不平衡易位,2例为正常核型.9例经RT-PCR检测的病例均有TCF3-PBX1融合基因转录本,17例经间期FISH检测TCF3-PBX1融合基因均为阳性.18例行FCM检测的患者中16例为B淋系抗原表达,2例为T淋系抗原表达.17例患者有不同程度的肝、脾、淋巴结等髓外浸润.本组患者经1个疗程诱导化疗后17例获得完全缓解(CR),CR率为94.7%,中位无复发生存时间为3.2个月,中位总生存期为7.2个月.结论 TCF3-PBX1融合基因阳件成人ALL有着独特的临床和实验室特点;治疗缓解率高,但短期内易复发,总生存期短,应该采取更积极的治疗以改善预后;间期双色FISH联合CC及RT-PCR可以提高TCF3-PBX1融合基因的检出率.     

儿童TEL-AML1阳性急性B系淋巴细胞白血病的临床特点及基因表达研究

目的 探讨儿童TEL-AML1阳性急性B系淋巴细胞白血病的临床特点和分子遗传学特征.方法 选取2016年1月至2017年12月我院收治的238例B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿的骨髓或外周血标本,采用核型分析和荧光原位杂交技术进行检测并随访.结果 238例B-ALL患儿中TEL-AML1阳性41例(17.2％)...     

急性混合细胞白血病伴t(12;22)一例报告--附文献复习

目的报道1例伴有t（12;22）（p13;q12）的急性混合细胞白血病.方法骨髓细胞经24h短期培养后按常规方法制备染色体,采用R显带技术进行细胞遗传学分析.应用抗生物素蛋白生物素复合物（ABC）法和单克隆抗体检测白血病细胞的表面抗原;12号和22号全染色体涂染探针分别以绿色和红色2种荧光素标记后进行双色荧光原位杂交（FISH）涂染检测.结果患者的临床表现和实验室检查均符合急性混合细胞白血病.免疫表型分析髓系和淋系标记均呈阳性;染色体核型为46,XX,t（12;22）（p13;q12）[6]/46,XX,idem,der（2）[2]/46,XX[12].骨髓中期细胞经双色FISH证实12号染色体短臂和22号染色体长臂之间发生了易位.结论t（12;22）（p13;q11-13）是恶性血液病中少见的染色体异常.t（12;22）患者具有独特的临床、细胞遗传学和分子生物学特点.该染色体异常对急性白血病的预后判断价值仍需进一步观察.     

二例伴有dic(9;20)(p11-13;q11)急性淋巴细胞白血病患者的临床和实验研究

目的探讨伴有dic（9;20）（p11-13;q11）的急性淋巴细胞白血病（ALL）的细胞形态学、免疫学、细胞遗传学特征和临床特点.方法骨髓细胞经直接法和24h短期培养后按常规方法制备染色体,采用R显带技术进行细胞遗传学分析.分别以9号和20号染色体着丝粒探针进行双色荧光原位杂交（FISH）检测.结果2例患者的临床和血液学改变符合ALL诊断,免疫表型分析B淋系标志阳性（CD10＋、HLA-DR＋）;染色体核型分析显示2例患者均为dic（9;20）：例1为45,XY,der（9）t（9;20）（p11;q11）,-20[20],例2为45,XX,der（9）t（9;20）（p13;q11）,t（9;22）（q34;q11）,-20[10]/46,idem,＋8[16]/47,idem,＋8,＋21[14];其中1例经双色FISH检测证实9号和20号染色体之间发生了相互易位,且形成双着丝粒染色体.结论dic（9;20）（p11-13;q11）是一种少见的重现性核型异常,可能和ALL有特殊的联系.FISH技术是检测该易位的可靠手段.     

伴有dic(7;9)的急性淋巴细胞白血病的临床和实验研究

目的分析具有d ic(7;9)的急性淋巴细胞白血病(ALL)的临床和实验室特点。方法采用骨髓细胞直接法或短期培养法制备染色体,用R显带技术进行核型分析;采用bcr/ab l双色探针和间期荧光原位杂交(FISH)技术对其中6例ALL患者进行bcr/ab l重排检测;分别应用绿色荧光标记的7号和红色荧光标记的9号着丝粒探针,以及由生物素及地高辛分别标记的7号和9号全染色体涂抹探针,对6例ALL患者进行FISH和染色体涂抹分析。结果d ic(7;9)ALL占同期ALL的0.88%;7例患者中2例为单纯d ic(7;9),4例同时伴有t(9;22)和其他染色体异常(初诊白细胞计数>100×109/L),1例伴有其他染色体异常而无t(9;22)(初诊白细胞计数<100×109/L);6例患者有不同程度的肝、脾和淋巴结肿大;进行免疫表型分析的6例患者中5例为B系ALL;双色FISH检则结果示6例患者中3例为bcr/ab l重排阳性,且6例患者衍生染色体着丝粒均为7号和9号着丝粒融合而成,染色体涂抹分析也证实7号和9号染色体之间发生了易位。结论d ic(7;9)是ALL中一种较少见的再现性异常,并有独特的临床和实验室特点。     

23例伴9号染色体短臂异常的急性淋巴细胞白血病临床研究

目的研究伴9号染色体短臂（9p）异常的急性淋巴细胞白血病（ALL）的临床及分子细胞遗传学特征。方法对23例伴9p异常的ALL患者进行回顾性分析其临床特征及预后；应用荧光原位杂交（FISH）技术鉴定其累及的基因。结果9p异常ALL占同期ALL的5．26％。有免疫学资料的21例患者，4例为T系ALL；17例为B系ALL，其中早前B细胞型3例。11例以del（9p）为主要遗传学特征，其余12例9p异常包括t（9p）或del／add（9p）作为继发或伴发于其他染色体异常的复杂核型。经FISH检测发现14例患者有p16基因缺失。与核型正常组患者相比，del（9p）患者更易累及脾脏，且生存期短。结论9p异常是一个非随机的染色体改变且极易累及p16基因。伴有9p缺失的患者具有独特的临床特征与不良的预后。     

荧光原位杂交技术检测急性淋巴细胞白血病异常染色体

目的　研究荧光原位杂交技术（ＦＩＳＨ） 在检测异常染色体中的应用价值及其意义。方法　用ＦＩＳＨ方法和染色体Ｇ分带技术对比观察急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ） 患者染色体的变化。结果　对３８ 例患者１７ ,１８ 和２１ 号染色体进行Ｇ分带技术检查,结果分别有１１,１３ 和１８ 例患者细胞染色体存在三倍体细胞。ＦＩＳＨ 检查结果,除上述病例发现三倍体细胞外,染色体Ｇ分带检查正常者中也有部分病例存在三倍体。结论　ＦＩＳＨ检测异常染色体,方法简便、灵敏、可靠,与常规细胞遗传学方法比较,ＦＩＳＨ 方法不需要培养细胞,对分裂期和分裂间期细胞均可进行基因定位检测,尤其在有核细胞少等不适于进行细胞遗传学分析的情况下,ＦＩＳＨ 方法仍可得到有意义的数据。     

MLL基因重排急性白血病患儿的临床和生物学特点研究

目的对儿童急性白血病进行混合谱系白血病(mixed lineage leukemia，MLL)基因重排的临床和实验研究：方法应用MLL双色荧光原位杂交(FISH)基因探针进行双色FISH，以13对引物行多重RT—PCR检测融合基冈，并联合染色体R带核型分析及流式细胞仪免疫表型检测，对298例儿童急性白血病中16例含有MLL基因重排患儿进行分析：结果MLL基因重排的白血病在儿童急性白血病中占5.4％，而在婴幼儿白血病中占56．3％；对106例患进行多重RT—PCR，检测到涉及MLL基因重排11例，其中MLL／AF42例，MLL／AF61例，MLL／AF6、MLI／ELL合并MLL／AFX或HOX11各1例，MLL／AF92例，MLL／AF101例，MLI／ELL2例。串联重复dup11q231例，HOX活化1例；27例进行了FISH检测，发现9例有MLL重排，其阳性率为36．0％；16例MLL基因重排患儿中14例(87．5％)有克隆性染色体异常，其中11例累及11号染色体[t(4；11)2例，t(6；11)、t(8；11)、t(7；8；11)、t(9；11)各1例， 112例，11q-3例]；16例MLL基因重排患儿中11例为B系ALL，以B祖细胞或前B细胞白血病为主，5例为急性单核细胞白血病，其中3例有CD7和CD2淋系抗原表达；16例MLL基因重排患儿中8例接受治疗，7例获得完全缓解。结论多重RT—PCR和FISH联合是检测MLL重排最精确和灵敏的方法，MLL基冈重排中包括易位、缺失和重复。MLL基因重排的检测对儿童急性白血病预后判断和治疗方案的选择具有重要意义，并且对WHO分型将其单独列为11q23／MLL白血病提供了有力的依据。