HPLC测定不同产地叶下珠中6种成分含量及指纹图谱研究

目的建立HPLC法同时测定叶下珠中没食子酸、短叶苏木酚、柯里拉京、老鹳草素、鞣花酸和芦丁6种成分含量的方法及指纹图谱分析方法。方法叶下珠以50%甲醇超声提取, 采用Phenonmenex Luna C18(4.6 mm×250 mm, 5 μm)色谱柱, 以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相, 梯度洗脱, 流速1.0 ml/min, 柱温25 ℃, 进样量10 μl, 检测波长270 nm。建立不同产地叶下珠HPLC指纹图谱, 采用主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘判别(OPLS-DA)分析不同产地叶下珠化学成分的差异性。结果没食子酸、短叶苏木酚、柯里拉京、老鹳草素、鞣花酸和芦丁分别在0.042 8～0.641 6、0.033 4～0.501 4、0.142 2～2.133 1、0.383 1～5.746 5、0.063 1～0.946 2、0.019 2～0.287 8 μg范围内与峰面积线性关系良好, 平均回收率分别为103.65%、96.39%、101.85%、95.04%、98.79%、98.33%。不同产地叶下珠HPLC指纹图谱共有14个特征峰, 鉴别指认其中6...     

HPLC法测定不同产地叶下珠中没食子酸的含量

目的:对不同产地叶下珠中没食子酸的含量进行测定,为药材的使用及药材标准的制定提供依据。方法:采用HPLC法,色谱柱为Diamosil C1 8柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(3:97),流速为1.0mL/min,检测波长为271nm。结果:没食子酸的进样量在0.2337¹.6359μg范围内与峰面积积分值有良好的线性关系,R=0.9999,平均加样回收率为99.61%(n=6),RSD为0.88%。不同产地叶下珠中没食子酸含量在1.63%1.6359μg范围内与峰面积积分值有良好的线性关系,R=0.9999,平均加样回收率为99.61%(n=6),RSD为0.88%。不同产地叶下珠中没食子酸含量在1.63%².34%。结论:不同产地叶下珠中没食子酸的含量差别较大,以陕西紫阳广城含量最高。     

叶下珠薄层色谱鉴别及福林酚法测定总多酚含量研究

目的:建立闽产叶下珠的薄层色谱鉴别法,考察比较叶下珠中总多酚含量测定法,优化测定条件。方法:采用聚酰胺薄层色谱法,选取叶下珠主成分没食子酸、柯里拉京、鞣花酸和芦丁为对照品,以冰醋酸-乙醇-乙酸乙酯-甲酸(8∶6∶2∶0.5)为展开剂,取出,晾干,喷以5%氯化铁乙醇溶液、晾干、显色。以峰形、灵敏度、显色稳定性以及准确度等为评价指标,考察普鲁士蓝法(PB法)与福林酚法(FC法)测定叶下珠中总多酚含量的方法适宜性,选定采用FC法作为叶下珠中总多酚的含量测定方法。通过单因素考察和L_9(3~4)正交试验,优化福林酚试剂的用量、碳酸钠溶液的浓度、显色时间和显色温度。结果:主成分斑点分离良好,供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上,显示相同颜色的斑点。测定叶下珠中总多酚含量的FC法最佳测定条件为1.0 m L样品提取液中加2.0 m L福林酚试剂,放置5 min,加3.0m L10%碳酸钠溶液,加水稀释至10 m L,摇匀,25℃显色1 h,760 nm波长处测定吸光度。结论:所建立的聚酰胺薄层色谱法及优选的总多酚含量测定福林酚法稳定可靠,可作为闽产叶下珠药材品质评价的方法。     

种源、产地及采收树龄对厚朴药材质量的影响

目的:以厚朴酚类和挥发油类成分为指标,对影响厚朴药材质量的因素进行分析.方法:以厚朴和凹叶厚朴主产区所产的不同树龄厚朴/凹叶厚朴为研究对象,用水蒸汽蒸馏法提取样品中的挥发油,以气相色谱-质谱联用技术对挥发油进行指纹图谱定性和β-桉叶醇含量测定;采用高效液相色谱技术,对厚朴酚类成分进行指纹图谱定性和含量测定.结果:厚朴和凹叶厚朴的液相色谱指纹图谱有7个相同的特征峰,气相色谱-质谱图谱中有20个相同的特征峰.厚朴样品中厚朴总酚的含量均达到药典要求.同产地不同树龄厚朴/凹叶厚朴样品中厚朴总酚的含量差别不大.湖北恩施产厚朴中厚朴总酚的含量较其他产地厚朴样品高,浙江丽水产凹叶厚朴中厚朴总酚的含量较其他产地凹叶厚朴样品低.厚朴中和厚朴酚与厚朴酚的比例基本上大于0.7,凹叶厚朴基本上小于0.7.厚朴中和厚朴酚质量分数(平均值2.89%)明显比凹叶厚朴(平均值0.78%)高.在挥发油方面,树龄小的厚朴和凹叶厚朴样品中β-桉叶醇含量较树龄高者少.结论:产地和生长年限的不同对厚朴质量影响不大,种源是影响厚朴药材质量的主要因素.     

不同产地藏药余甘子总鞣质含量测定

目的:建立磷钼钨酸/干酪素分光光度法测定不同产地藏药余甘子中总鞣质含量的方法.方法:以没食子酸为对照品,磷钼钨酸为显色剂,检测波长760 nm,测定8个不同产地余甘子中总鞣质含量.结果:没食子酸在0.306～2.448 mg·L-1与吸光度呈良好线性关系(r=0.999 1),平均加样回收率99.27％,RSD 2.30％.不同产地余甘子药材总鞣质含量差别较大(6.72％ ～ 11.95％),印度和尼泊尔产余甘子中总鞣质含量最高.结论:该方法简单、准确、重复性好,可用于测定余甘子中总鞣质含量.     

不同采收期金莲花茎叶中总黄酮和荭草苷的动态变化研究

目的 建立RP-HPLC同时测定不同产地叶下珠中没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的方法.方法 采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.2％醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为270 nm,体积流量1 mL/min,柱温35℃.结果 没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的线性范围分别为0.062 2～0.622 0 μg(r=0.999 7)、0.130 4～1.304 0μg (r=0.999 4)、0.246 4～2.464 0 μg (r=0.999 2)、0.081 2～0.488 0 μg (r=0.999 3);平均回收率分别为103.62％、101.20％、100.09％、100.27％,RSD分别为1.29％、2.08％、1.40％、2.98％.结论 本测定方法简便、准确、重复性好,可用于叶下珠中没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的测定.     

湖北蕲春产凹叶厚朴质量研究(Ⅰ)

目的:研究湖北蕲春产凹叶厚朴的质量.方法:采用高效液相色谱法测定湖北蕲春产凹叶厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量,并与其它不同产地、品种厚朴样品进行比较.结果:蕲春凹叶厚朴的厚朴酚与和厚朴酚含量较低,但符合药典规定.结论:本研究为湖北蕲春产凹叶厚朴药材的品质鉴定提供了依据.     

不同产地狭叶柴胡中柴胡皂苷含量的测定

目的 测定不同产地狭叶柴胡中柴胡总皂苷及柴胡皂苷a的含量.方法采用可见分光光度法和高效液相色谱法.结果 不同产地狭叶柴胡药材中的柴胡总皂苷和柴胡皂苷a的含量差异较大,且同一药材中柴胡总皂苷与柴胡皂苷a含量的高低不一致,未显示出相关性.结论 为保证狭叶柴胡药材的质量和疗效,应制定药材中柴胡皂苷的限量标准.     

不同产地砂仁总酚测定及抗氧化活性比较

目的:建立砂仁总酚含量的快速测定方法,比较不同产地砂仁总酚的抗氧化活性,为砂仁药材资源的综合开发和品质评价提供理论基础。方法:以香草酸为对照品,采用福林酚比色法测定砂仁的总酚含量;通过DPPH法、ABTS法和FRAP法测定不同产地砂仁的抗氧化活性。结果:砂仁总酚含量测定的线性范围为0.002 0~0.011 9 mg·mL~(-1),平均加样回收率为96.6%(RSD=3.3%,n=6);3种方法测定的砂仁抗氧化活性均与总酚含量呈显著正相关(P0.01),相关系数分别为0.966,0.966和0.927。结论:本文建立的砂仁总酚含量测定方法简便、快速、重复性好;不同产地的砂仁均具有一定的抗氧化活性,总酚含量与产地具有一定的相关性。     

珠子草药材质量标准及HPLC指纹图谱研究

目的建立珠子草药材的质量标准及HPLC指纹图谱,探讨不同产地珠子草药材成分的差异性。方法分别从性状、鉴别、检查和浸出物、含量测定方面对珠子草药材的质量标准进行研究。采用ZORBAX Eclipse plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,柱温25℃,检测波长270 nm,流速1.0 mL/min,进样量10μL,对10个不同产地珠子草药材进行测定;采用相似度分析和主成分分析对指纹图谱进行评价。结果拟定了珠子草药材质量标准草案,建立了10个不同产地珠子草药材的HPLC指纹图谱,确定了8个共有峰,指认了短叶苏木酚和柯里拉京2个特征峰。不同产地珠子草的化学成分组成及含量存在一定差异,其中柯里拉京可作为区别产地的特征性物质。结论本研究建立的定性定量检测方法操作简便、准确可靠、专属性强、重复性好,可作为珠子草药材的质量控制方法;建立的珠子草HPLC指纹图谱可为该药材的鉴别及质量控制提供参考。     

冰糖草总黄酮含量测定及显色方法优化

目的:建立用紫外-可见分光光度法测定冰糖草总黄酮含量的方法.方法:对显色剂的种类、浓度与用量进行考察,采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色反应体系,测定冰糖草中总黄酮含量.结果:以芦丁为对照品,测定波长为506 nm,在4.8～96.2 mg·L-1线性关系良好(r =0.999 3),平均回收率为103.71％ (RSD 2.68％,n=6).结论:该方法简便、快捷、准确,可作为冰糖草总黄酮含量测定的方法.     

三七中总皂苷含量测定的对照品筛选

目的: 考察选用不同皂苷类对照品为指标对样品中三七总皂苷含量测定的影响。 方法: 以人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、三七皂苷R₁、三七总皂苷为对照品,香草醛-高氯酸显色,采用紫外分光光度法测定三七中三七总皂苷的含量。 结果: 以不同对照品为指标测定三七总皂苷含量时,结果存在明显差异。 结论: 紫外分光光度法测定三七及其制剂中总皂苷含量时,可用三七总皂苷作对照品,为含有三七的制剂含量测定提供较为可靠的实验数据。     

桑白皮中总黄酮含量测定方法研究

目的: 建立一种桑白皮中总黄酮的含量测定方法。 方法: 以桑根酮C为对照品,采用盐酸-镁粉显色体系,于481 nm下测定桑白皮总黄酮含量。 结果: 桑根酮C在146.8～734.0 mg·L^-1与吸光度呈良好线性关系(n=5,r=0.999 8),平均回收率为96.74%,RSD 2.60%(n=6)。 结论: 该含量测定方法准确、简便、经济,是一种较理想的测定桑白皮中总黄酮含量的方法。     

大鼠体内麻黄汤中总生物碱的药代动力学考察及其与盐酸麻黄碱含量变化的比较

目的:考察麻黄汤中总生物碱在大鼠体内的药代动力学过程,比较其与盐酸麻黄碱的体内含量变化。方法:大鼠口服灌入麻黄汤,于不同时间点眼眶取血,采用酸性染料比色法测定血浆样品中总生物碱含量,通过3P97软件进行房室模型拟合并计算药代动力学参数,利用HPLC测定血浆样品中盐酸麻黄碱含量,比较二者在大鼠体内的含量变化。结果:总生物碱在4~144 mg·L-1与吸光度呈良好线性关系。总生物碱在大鼠体内的代谢过程符合一室模型,t1/2=339.88 min,tmax=265.86 min,AUC=326 631.38 min·mg·L-1;盐酸麻黄碱10 min入血,但在第6 h基本未能测出。结论:酸性染料比色法可用于麻黄汤中总生物碱的药代动力学分析,方法准确可靠。盐酸麻黄碱入血、消除均较快。     

H2O2对远志愈伤组织中总酚总黄酮含量及相关酶活性的影响

目的:研究远志愈伤组织在加有不同浓度H_2O_2的MS培养基上总酚总黄酮含量变化及抗氧化酶活性变化,从细胞水平探讨其适应H_2O_2环境胁迫的生理机制。方法:以远志愈伤组织为实验材料,H_2O_2浓度设置为0,5,10,15,20 mmol·L~(-1)5个梯度加至MS培养基中,分别在培养5,10,15,20,25 d后取样测定愈伤组织总酚、总黄酮含量及抗氧化酶活性。结果:H_2O_2浓度在5 mmol·L~(-1)下远志愈伤组织15 d时总酚、总黄酮含量最高。当远志愈伤组织培养5 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时的超氧化物歧化酶(SOD)活性最高。培养25 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时的过氧化物酶(POD)活性最高。培养25 d,外源H_2O_2浓度为15 mmol·L~(-1)时的过氧化氢酶(CAT)活性最高。结论:远志愈伤组织具有适应一定浓度H_2O_2环境胁迫的能力,在其受到H_2O_2环境胁迫时,远志愈伤组织能通过调节自身的次生代谢物、保护酶系统来缓解带来的伤害。对次生代谢物总酚、总黄酮的含量在5～10 mmol·L~(-1)时有显著促进作用;在5 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时可显著提高SOD活性;在25 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时可显著提高POD活性;在25 d,外源H_2O_2浓度为15 mmol·L~(-1)时可显著提高CAT活性。     

不同产地粉萆薢总皂苷含量测定

目的:建立粉萆薢总皂苷含量测定方法.方法:以薯蓣皂苷元为对照品,高氯酸为显色剂,测定波长408 nm,采用可见分光光度法测定了5个不同产地粉草薢药材总皂苷含量.结果:薯蓣皂苷元线性范围为1.55 ～ 12.42 mg·L-1,r=0.999 5(n=6),加样回收率为100.69％,RSD 2.75％,不同产地粉萆薢总皂苷含量分别为广西玉林2.85％,RSD 1.32％;广西南宁2.76％,RSD 1.16％;浙江临安2.54％,RSD 1.38％;湖北宜昌1.94％,RSD 1.83％;四川崇州0.84％,RSD 1.75％.结论:测定方法简便,准确,重复性好,可作为粉萆薢总皂苷的含量测定.     

毛鸡骨草中总黄酮含量测定方法

目的:建立毛鸡骨草总黄酮含量的专属性测定方法。方法:采用紫外-可见分光光度法研究三乙胺显色剂及其不同含水乙醇溶液对黄酮类成分光谱吸收变化影响。结果:不同黄酮类显色后光谱吸收峰变化存在明显差异;三乙胺法适应于芹菜素黄酮类含量测定,且不同体积分数乙醇对其吸收光谱具有显著影响,当加入50%乙醇显色后光谱吸收值稳定在400nm,经方法学考察,芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-葡萄糖苷对照品在0.507~101.4 mg·L-1与吸光度具有良好的线性关系(r=0.999 5),平均加样回收率为98.01%,RSD 2.1%。结论:毛鸡骨草总黄酮含量的测定可采用三乙胺-50%乙醇显色法,该方法对于芹菜素母核黄酮类具有良好的专属性和准确性,操作简单易行。     

补骨脂生品及炮制品抗氧化活性

目的:筛选补骨脂生品及5种炮制品(雷公法制补骨脂、炒盐补骨脂、酒炒补骨脂、炒补骨脂和盐蒸补骨脂)各石油醚(PE)部位、乙酸乙酯(EA)部位和正丁醇(BU)部位的体外抗氧化活性,并比较不同炮制方法对补骨脂抗氧化活性的影响.方法:以二丁基羟基甲苯(BHT)为阳性对照,利用清除二苯代苦味酰基(DPPH)和[2,2’-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基以及铁离子还原/抗氧化(ferricreducing/antioxidant power assay,FRAP)3种方法对补骨脂生品及炮制品各部位抗氧化活性进行评价.结果:雷公法补骨脂、炒盐补骨脂、酒炒补骨脂和炒补骨脂各PE部位清除DPPH自由基的能力(IC50分别为97.1,97.7,99.9和95.7 mg·L-1)均低于补骨脂生品PE部位(IC50 =77.3 mg·L-1);补骨脂生品PE部位清除ABTS自由基的能力(IC50=1.8 mg·L-1)强于阳性对照BHT(IC50=2.3 mg·L-1),酒炒补骨脂和盐蒸补骨脂BU部位清除ABTS自由基的能力(IC50为5.8 mg·L-1和5.1 mg·L-1)均高于补骨脂生品正丁醇部位(IC50=6.8 mg·L-1);5种补骨脂炮制品各部位还原Fe3+的能力均比补骨脂生品各部位低.结论:补骨脂生品及炮制品各部位显示出不同的抗氧化活性,且不同炮制方法抗氧化活性差距较大.     

5种紫珠属药材中总酚、总黄酮与其抗氧化活性的相关性研究

目的: 研究5种紫珠属药材中总酚、总黄酮与其抗氧化活性的相关性。方法: 采用紫外分光光度法测定5种紫珠属药材总酚和总黄酮的含量;采用清除O₂^-·,DPPH·,ABTS⁺·,·OH评价法、Cu²⁺螯合法、Fe³⁺还原法及对大豆卵磷脂脂质过氧化的抑制效果评价它们之间抗氧化活性的差异。结果: 5种药材的总酚和总黄酮含量相差较大,其中,裸花紫珠含量最大;各种方法所得抗氧化活性强弱顺序有区别;除了抗脂质过氧化外,其他方法所得结果均与总酚和总黄酮含量呈正相关。结论: 5种紫珠属药材富含总酚和总黄酮成分,具有较强抗氧化活性,可以作为天然抗氧化剂进行开发。