小型猪渐进性梗阻性黄疸模型的建立

目的建立小型猪慢性渐进性梗阻性黄疸模型，评价其模拟临床渐进性梗阻性黄疸患者的价值。方法开腹手术，将并行有16G注射器针头的胆总管用5％碘酒溶液浸泡处理的10号丝线捆扎后，抽除针头。使胆总管早期部分狭窄，后期组织受化学物质刺激发生无菌性炎症反应、纤维组织修复等病理改变，引发胆管组织慢性纤维瘢痕狭窄，造成渐进性梗阻性黄疸。结果实验动物术后观察28d无死亡，第5—7天逐渐出现黄疸，之后渐重；第28天时的总胆红素较术前明显升高[（1．22±0．41）μmol／L比（125．90±35．77）μmol／L（P〈0．01）]；4周后病理显示胆总管组织发生慢性纤维瘢痕样变，管腔狭窄阻塞。结论本小型猪动物模型模梗阻性黄疸呈渐进性、慢性过程。可重复性强、耐受性好，是比较理想的梗阻性黄疸动物模型。同时，小型猪肝胆系统的生理及解剖结构与人相近，可为临床胆管狭窄和肝门部癌相关研究提供较可靠实验依据。     

IL-1β通过诱导一氧化氮的产生抑制肝细胞能量代谢

目的 利用原代培养大鼠肝细胞，研究白细胞介素－1β（IL－1β）对细胞能量同的影响及其作用机制。方法 所有实验使用雄性Wistar大鼠（5－7周龄，体重170－230g），无菌条件下原位胶原酶灌注肝脏分离肝细胞。观察指标饭知：细胞内ATP含量；培养液中酮体比（KBR）；培养液中一氧化氮（NO）浓度；Western Blot方法分析一氧化氮合酶（iNOS）的表达。结果 IL－1β剂量领带地抑制原代培养大鼠肝细胞内ATP含量和KBR；IL－1β剂量和依赖地诱导iNOS的表达和NO的产生；L－Arginine(NO合成底物）显著促进了IL－1β刺激的NO产生，进一步抑制了细胞的能量代谢；L－NMMA（iNOS抑制剂）完全抑制了IL－1β刺激的NO产生，逆转了IL－1β对细胞能量代谢的抑制作用。结论 IL－1β具有抑制原代培养大鼠肝细胞能量代谢的作用，IL－1β的这种作用是通过诱导肝细胞iNOS的表达和NO的产生实现的。     

白介素-1β诱导胃上皮细胞GES-1表达肠道特异性标志物

目的 观察白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养的人胃黏膜上皮GES-1细胞中肠道特异性标志物尾侧型同源转录因子-1(CDX1)和肠道黏蛋白-2(MUC2)表达的诱导作用,探讨其作用机理.方法 通过不同浓度及不同作用时间的IL-1β刺激人胃黏膜上皮GES-1细胞,采用实时定量PCR法检测CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表达水平;并使用NF-κB抑制剂PDTC预处理GES-1细胞,检测PDTC对IL-1β诱导的CDX1 mRNA和MUC2 mRNA表达水平的影响.结果 正常情况下人胃黏膜上皮GES-1细胞不表达CDX1 mRNA和MUC2 mRNA,而IL-1β可以诱导GES-1细胞中CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表达,该作用在一定浓度范围内呈现剂量依赖性(P＜0.05);IL-1β作用8 h时,CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表达达到峰值(P＜0.05),随后表达逐渐降低.经NF-κB抑制剂PDTC预处理后的GES-1细胞,CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表达水平明显下降(P＜0.05). 结论 IL-1β可能通过NF-κB信号通路促进人胃黏膜上皮细胞中CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表达,在胃黏膜肠上皮化生中发挥作用.     

白细胞介素-6抑制白细胞介素-1β诱导的兔纤维环细胞凋亡的研究

目的探讨白细胞介素(IL)-6对IL-1β在体外诱导兔纤维环细胞凋亡作用的影响。方法以10μg/L浓度的IL-1β诱导体外培养的原代兔纤维环细胞发生凋亡,然后分别加入10μg/ L和100μg/L的IL-6以影响纤维环细胞凋亡进程。对细胞行Annexin-V-PI染色和Caspase-9功能染色,采用流式细胞仪检测结果。结果IL-1β诱导下,凋亡纤维环细胞比例由(2.67±1.08)%上升至(20.37±1.57)%,而在两种浓度IL-6的干预下,细胞凋亡比例分别为(18.17±4.68)%和(9.42±1.27)%,与IL-1β诱导退变的纤维环细胞差异有统计学意义(P＜0.05)。而Caspase-9功能阳性细胞也由(19.40±0.98)%分别降至(15.13±1.45)%和(10.17±2.50)%(P＜0.05)。结论IL-6对IL-1β诱导的体外兔纤维环细胞凋亡有明显的抑制作用,这种抑制作用可能是通过抑制纤维环细胞内Caspase-9的激活实现的。对IL-6抑制作用的进一步研究,将有助于明确椎间盘细胞凋亡的调控途径,为椎间盘退变的治疗寻找新切入点。     

Modic改变动物模型的建立及其评估

 目的 采用终板钻孔髓核置入建立兔Modic改变动物模型,并通过影像学、组织学和分子生物学等进行评估,探讨建立Modic改变动物模型的可行性及Modic改变的形成机制。方法 54只新西兰大白兔(体重2.5~3.0 kg,雌雄各半)随机分为髓核置入组、肌肉置入组和对照组,每组各18只。髓核置入组行腰椎前外侧手术入路暴露L_4-5、L_5-6椎间盘右前外侧,使用16 G骨穿针在L5-6椎间盘紧邻骺板的椎体处钻孔,深度约3 mm;利用5 ml空针刺入L4-5椎间盘中,抽取髓核并将其推入至椎体的钻孔内;肌肉置入组行相同手术显露及钻孔方法在L5-6椎间盘紧邻骺板的椎体处钻孔,取少量椎旁肌肉置入椎体的钻孔内;对照组行相同手术显露及钻孔方法,但不置入任何组织。止血、冲洗后,缝合各层组织和皮肤。术后12、16和20周行MR检查后各组动物处死6只,取标本进行大体形态学和组织学（HE染色）观察造模形成情况,实时荧光定量RT-PCR及Western blot观察造模部位炎症因子的表达。结果 术后12周、16周和20周,MRI显示髓核置入组T1加权像可见有低信号出现,T₂加权像则显示低信号的背景下出现了不同程度的混杂高信号,而对照组及肌肉置入组均未见明显信号改变。大体观察及组织学观察结果也证实髓核置入组髓核置入部位出现组织的异常增殖。RT-PCR及Western blot检测显示髓核置入组IL-4、IL-17及IFN-γ的高表达现象,髓核置入组均高于肌肉置入组和对照组,且基本与术后时间呈正相关。肌肉置入组与对照组比较差异无统计学意义。结论 终板钻孔髓核置入法可以成功建立Modic改变的动物模型,自身免疫因素很有可能在Modic改变中发挥着重要的作用。     

白介素-1在骨关节炎发病机制中的研究进展

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是临床常见的关节病,严重影响患者的身体健康和生活质量,给家庭和社会带来了巨大的经济负担。OA的病因及发病机制至今尚未完全明确,但细胞因子在其发病机制的研究中越来越受到重视,尤以IL-1被认为是骨性关节炎发生发展中最核心的因子。近年来,许多临床试验把IL-1作为治疗骨关节炎的靶点,为OA的治疗提供新的方法。本文就IL-1参与OA软骨破坏的机制做一综述。     

机械通气对大鼠肺组织早期生长因子-1、C-jun和白介素-1β表达的影响

目的探讨机械通气对大鼠肺组织早期生长因子-1（Egr-1）、C-jun和白介素-1β表达的影响。方法清洁级雄性SD大鼠40只，随机分为假手术组（A组）和机械通气30、60、90、120min组（B、C、D、E组），每组8只。腹腔注射3％戊巴比妥35mg／kg麻醉后，行气管切开置管，B—E组采用小动物呼吸机行机械通气，潮气量42ml／kg，呼吸频率40次／min，吸呼比为1：2。吸入氧浓度为21％，A组气管切开置管不做机械通气。分别以RT-PCR、免疫组化和HE染色方法测定肺组织Egr-1、C-jun和IL-1β的mRNA和蛋白表达，并观察肺组织病理学变化，同时行动脉血气分析。结果与A组比较，C组Egr-1、C-jun的mRNA和蛋白表达增加，D、E组Egr-1、C-jun、IL-1β的mRNA和蛋白表达均增加（P〈0．05）。与B、C组比较，D、E组上述三种mRNA及蛋白表达均增加（P〈0．05或0．01），且E组上述三种蛋白表达高于D组（P〈0．05）。光镜下A、B组肺泡结构未见异常，C组肺泡腔内略有渗出、血管周围有少量炎症细胞；D、E组上述病理改变加重且E组更严重。结论机械通气60min可诱发肺组织Egr-1、IL-1β和C-iun表达上调．且随通气时间的延长、肺病理性损伤的加雷．其表汰茸也在增加。     

白介素-1β诱导尾型同源盒转录因子2异位表达在胃黏膜肠上皮化生中的意义

目的 探讨白介素（IL）-1β对人胃黏膜上皮细胞尾型同源盒转录因子2（CDX2）表达的调控及其在胃黏膜肠上皮化生中的作用.方法 用不同浓度IL-1β刺激人胃黏膜上皮GES-1细胞,采用实时荧光定量PCR法、免疫细胞化学染色法及免疫印迹方法,在不同时间点检测CDX2 mRNA和蛋白表达水平.使用NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）预处理GES-1细胞,观察PDTC对IL-1β诱导的CDX2 mRNA和蛋白表达的影响.电镜观察IL-1β长期刺激下GES-1细胞超微结构的改变.结果 IL-1β可以诱导人胃黏膜上皮细胞上调CDX2 mRNA的表达.予1μg/LIL-1β刺激后,GES-1细胞CDX2 mRNA和蛋白表达水平分别为0.0749±0.0021和0.56±0.04;加入PDTC后,CDX2 mRNA和蛋白表达水平分别为0.0006±0.0002和0.40±0.06;差异均有统计学意义（均P＜0.05）.IL-1β长期刺激后,GES-1细胞表面会长出很多较长的微绒毛,同时细胞质内的分泌小泡也相应增加,胃上皮细胞开始出现肠上皮细胞的特征.结论 IL-1β能够通过NF-κB通路促进人胃黏膜上皮细胞CDX2 mRNA和蛋白表达上调,在胃黏膜肠上皮化生中发挥重要作用.     

慢性牙周炎与慢性肾衰竭动物模型中IL-1β的表达

目的：检测和分析白细胞介素-1β（IL-1β）在大鼠慢性牙周炎（CP）和慢性肾衰竭（CRF）模型中的表达。方法：40只SD大鼠随机分为4组,每组10只,正常对照组,慢性牙周炎组,慢性肾衰竭组,牙周炎＋慢性肾衰竭（复合组）,各组接受相应的建模干预处理。酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IL-1β水平,免疫组化法观察各组肾组织中IL-1β的表达程度,检测肾功能及牙周指标。结果：复合组血清IL-1β水平及肾组织中IL-1β的表达较其他组高（P〈0.05,P〈0.01）,慢性肾衰竭组、复合组血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）高于对照组、慢性牙周炎组（P〈0.05）。慢性牙周炎组、复合组牙龈附着丧失（AL）高于对照组、慢性肾衰竭组（P〈0.05）。结论：CP与CRF之间可能具有相关性,IL-1β的表达可能与两疾病的发生发展有关。     

猪皮肤软组织爆炸伤动物模型的建立

目的建立皮肤软组织爆炸伤动物模型。方法分别在6只15～20 kg的小白家猪双侧臀部和双侧肩胛部,采用Φ3．6×12电雷管距皮肤不同距离引爆致伤。伤后测量创面面积和深度,并对创伤部位进行X线检查。结果距猪皮肤0、1、2和3 cm各致伤6个创面,伤后6 h创面平均面积分别为(13．08±0．86)、(7．33±0．77)、(2．25±0．47)和(0．00±0．00)cm2;创面平均深度分别为(2．53±0．28)、(1．10±0．13)、(0．45±0．11)和(0．00±0．00)cm;0 cm组6个创面中有3个发生骨折,1 cm组、2 cm组和3 cm组均无骨折发生。结论本实验建立的皮肤软组织爆炸伤模型造成的创面面积和深度较均一,调整致伤距离可以造成轻、中和重度皮肤软组织爆炸伤创面,适合实验研究。     

腹主动脉瘤动物模型的建立

目的:通过研究腹主动脉瘤的建立方法,探讨肾动脉平面以下主动脉瘤的治疗方法,为腔内血管外科提供研究方法。方法:实验用猪74头,分别用人工血管成形法、带少许肌肉的腹膜组织成形法、腔内技术动脉瘤成形术三种方法制成腹主动脉瘤模型,通过对比各种方法的优缺点,确定一种效果更确切、更适宜的培训方法。结果:人工血管成形法制作腹主动脉瘤成功率为97.1%(34/35),带少许肌肉的腹膜组织成形法成功率为38.1%(8/21),腔内技术动脉瘤成形术成功率为16.7%(3/18)。结论:人工血管成形法制作腹主动脉瘤模型成功率高,可重复性强,效果良好,是培训腹主动脉瘤腔内隔绝术初学者良好的培训实验模型。     

简化型腹部多器官移植动物模型的建立

目的建立一种非静脉转流的简化型猪腹部多器官移植模型。方法采用健康长白幼猪,供、受猪为同一胎猪,按体重相近原则配对。供者器官原位灌洗,摘取全腹脏器以及与之相连的腹主动脉和下腔静脉,修剪成肝、胰、胃、十二指肠以及近端2 m空肠的器官簇,整块移植到切除整个前肠和中肠器官(肝、胰、胃、十二指肠、全部小肠和大部分结肠)的受者腹腔。术中未使用静脉转流。术中监测受者的血流动力学、pH值及电解质变化。结果25次手术中,仅19次手术顺利完成,受者术后存活时间为2～146 h。与无肝前期相比,无肝初期、新肝初期及新肝期的平均动脉压、中心静脉压明显下降(P<0.05);与无肝初期相比,新肝期的平均动脉压、中心静脉压也明显下降(P<0.05);新肝期受者处于严重的代谢性酸中毒状态。结论在非静脉转流下建立简化型猪腹部多器官移植模型是可行的。     

膀胱肿瘤动物模型建立的研究进展

膀胱肿瘤是泌尿系统最常见的肿瘤,并且治疗后容易复发和进展,所以迫切需要新的方法应用于膀胱肿瘤的治疗.无论是研究新的治疗方法还是开展个体化治疗,都需要一个能与人膀胱癌相似的动物肿瘤模型.迄今为止,已经建立了很多动物膀胱癌模型,但是成瘤率差异较大,据文献报道的动物模型成瘤率有30％～100％.目前,建立一个稳定可靠的、简单易行、可复制传代的动物膀胱肿瘤模型仍然是个挑战.现将目前膀胱肿瘤动物模型的建立和监测方法方面的进展进行综述.     

IL-1α和IL-1β在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:通过检测胃癌组织和癌旁组织中白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)和IL-1β的表达水平并分析其与临床病理特征的关系,探讨IL-1α和IL-1β在胃癌发生、发展中的作用。方法:取73例原发性胃癌新鲜的肿瘤和对应远离肿瘤切缘(≥5 cm)的癌旁组织。用RIPA裂解液提取组织中的总蛋白,BCA法测定各组织的蛋白浓度,酶联免疫吸附实验检测组织中IL-1α和IL-1β的含量,细胞因子含量与蛋白浓度的比值为相对细胞因子含量,分析相对细胞因子含量与临床病理资料的关系。结果:胃癌组织中IL-1α的含量较癌旁组织明显升高[(3.450比2.665)ng/g,P<0.05]。结论:炎性因子IL-1α和IL-1β在胃癌的发生发展中有重要作用。     

滑液中IL-1Ra/IL-1β比率与骨关节炎临床症状相关性分析

目的 测量OA滑液中IL-1Ra和IL-1β水平,并评估它们的水平或它们之间的比率与OA临床症状之间的相关性.方法 按美国风湿病学会诊断标准纳入48例膝OA病人,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定滑液中IL-1Ra和IL-1β水平,按Kellgren-Lawrence分级评估影像学表现,按加拿大西安大略和麦克玛斯特...     

神农33对急性肺损伤大鼠白介素—1β因素表达的影响

目的：观察白介素－1β（IL－1β）在内毒素（LPS）所致急性肺损伤（ALI）发病过程中的作用及神农33（SN33）注射液对ALI大鼠的保护作用。方法：Wistar大鼠尾静脉注射LPS,建立ALI模型。分别采用ELISA和Northern Blotting方法检测不同时相血清中IL－1β含量及肺组织IL－1βmRNA水平的变化;同时以地塞米松为对照,观察SN33对IL－1β基因表达的影响。光镜、电镜观察大鼠肺病理形态学变化。结果：LPS诱发大鼠ALI过程中血清IL－1β水平显著高于正常对照组（P＜0．01）,峰值为LPS攻击后2h;肺组织IL－1βmRNA表达明显增高,峰值为LPS攻击后1h;以SN33保护的大鼠,IL－1β和mRNA表达均明显低于相应时相LPS攻击组;且肺损伤程度减轻,结论：IL－1β在LPS诱导的ALI过程中起着重要作用;SN33注射液可以抑制IL－1β的释放和表达,对肺脏有一定的保护作用。     

肾结石动物模型的建立

目的:对比异物植入法与乙二醇法在肾结石动物模型建立方面的差异。方法:将30头家猪平均分为A(乙二醇法)、B(异物植入法)两组进行肾结石模型的建立,通过超声监测、尸检证实成石时间、结石大小、成石率、肾积水等指标。应用SPSS 16.0软件进行统计学分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:A、B两组死亡率分别为13.3%(2/15)、6.7%(1/15);经B超检测证实,A组成石时间平均(29.1±3.7)d,成石率86.7%(13/15),饲养5周后尸检取出结石,结石直径平均(3.6±0.4)mm;B组成石率93.3%(14/15),饲养5周后经B超证实结石未被吸收,78.6%家猪有肾积水表现。尸检可见肾结石形成,结石直径平均(35±2.7)mm。与A组相比,B组即刻形成结石,成石时间短,成石率高、结石体积大,差异有统计学意义。肾积水模型形成方面,B组亦优于A组。结论:与乙二醇法相比,异物植入法成石快、成石率高、肾结石体积大,操作简便易行,便于推广,还可进行肾积水模型的建立,为经皮肾镜穿刺提供了良好的动物模型基础。     

TNF-α,IL-1β在胰性脑病发病机制中的作用

目的探讨炎性细胞因子TNF-α,IL-1β在急性胰腺炎时对脑组织损害的影响,从而阐明胰性脑损害的发病机制. 方法采用5%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管以建立鼠的急性胰腺炎模型,并用生理盐水,TNF-α,IL-1β,TNF-α加IL-1β等试剂预处理.5h后处死动物,检查胰腺、脑组织形态学变化;并检测脑组织含水量、脑微血管内白细胞聚集及附壁现象. 结果经炎性细胞因子预处理后,脑组织含水量,脑微血管内白细胞聚集及附壁现象显著增加(p<0.05),脑组织病理损害程度加重;而各组胰腺炎症无明显差异(P>0.05). 结论炎性细胞因子TNF-α,IL-1β参与和促进了急性胰腺炎时脑损害的发生和发展.     

白介素-1β基因多态性与晚期膝骨关节炎易感性的关联性研究

目的探讨IL-1β基因的单核苷酸多态性和单体型与中国汉族人晚期膝骨关节炎（KOA）的易感性相关。方法采用病例对照研究,纳入120例中国汉族膝OA患者和130例年龄、性别匹配的健康对照者,用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血清中IL-1β的水平,用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法对IL-1β基因的-511C／T（rs16944）、＋3954C／T（rs114363）和-31C／T（rs1143627）位点进行单核苷酸多态性进行分析,并测序验证酶切结果。结果膝骨性关节炎患者组血清中白细胞介素1β水平明显高于健康对照组（t=-8．26,P〈0．01）,单核苷酸多态性分析显示：在膝OA患者组和健康对照组之间IL-1β-31C／T位点基因型分布和等位基因频率没有明显差异,该研究中没有发现IL-1β＋3954Tr基因型。膝OA患中的IL-1β-511TC、IL-1β＋3954CT基因型频率较健康对照组增加（P〈0．05,P〈0．05）,通过Logistic回归分析,IL-1β-511TC、IL-1β＋3954CT基因型与膝OA高风险发病率具有相关性（IL-1β-511TC,OR=1．842,95％CI=1．021—3．327,P〈0．05;IL-1β＋3954CT,OR=2．372,95％CI=1．022—5．509,P〈0．05）。此外,单体型分析显示与单体型TCC相比,单体型TCT和CCC与膝OA高风险发病率具有更强的相关性（TCT．OR=3．24,95％CI：1．50—7．00,P〈0．01;CCC．OR=6．07,95％CI：2．20—16．07,P〈0．01）。结论白细胞介素-1β基因的-511C／T（rs16944）和＋3954C／T（rs114363）位点多态性与中国汉族人膝OA的易感性相关。