泰山白花丹参干叶片高质量DNA的提取

目的为了从富含多酚和多糖的泰山白花丹参干叶片中分离出适用于AFLP分析的高质量基因组DNA。方法比较了4种DNA提取方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。CTAB-freeBuffer清洗,4倍CTAB抽提和固体PVP和VC防止氧化。结果使用该方法从泰山白花丹参干叶片中分离的DNAA260/A280为1.86,由此法所得的DNA可直接用于AFLP分析。结论该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量DNA。     

高质量植物基因组DNA的分离

为了从富含多酚和我糖的药用植物组织中分离出高质量基因组DNA,本文通过改良几种已经存在的分离方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。使用该方法从人参、西洋参及三七的新鲜或干燥根组织分离DNA时,A260/A280为1.8左右,分子量大小约为21.2kb,由此所得的DNA可直接用于AFLP分析,即用EcoR I/Mse I消化DNA后,用DNA的限制酶切片段经T4 DNA连接酶连接,再用巢式PCR扩增,构建出可重复的、多态性丰富的人参、西洋参、三七基因组DNA AFLP指纹图谱。结果表明,该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量和高分子量DNA,此法亦有望用于其它植物DNA的分离。     

高质量植物基因组DNA的分离

为了从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量基因组DNA ,本文通过改良几种已经存在的分离方法 ,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。使用该方法从人参、西洋参及三七的新鲜或干燥根组织分离DNA时 ,A2 60 /A2 80 为 1.8左右 ,分子量大小约为 2 1.2kb ,由此所得的DNA可直接用于AFLP分析 ,即用EcoRⅠ /MseⅠ消化DNA后 ,用DNA的限制酶切片段经T4DNA连接酶连接 ,再用巢式PCR扩增 ,构建出可重复的、多态性丰富的人参、西洋参、三七基因组DNAAFLP指纹图谱。结果表明 ,该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量和高分子量DNA ,此法亦有望用于其它植物DNA的分离。     

改良SDS法快速提取赤芍干叶片DNA的研究

目的 从富含多糖和小分子杂质的赤芍干叶片中快速分离出适用于各生物技术分析的高质量基因组DNA,为赤芍的鉴定研究提供实验基础。方法 以常规的SDS法为基础,进一步优化DNA提取各步骤,获得了一种快速可行的提取高质量赤芍干叶片DNA的方法。结果 使用该方法从4个不同产地的赤芍干叶片中分离的DNA A_260/A280分别为1.90、1.88、1.91、1.93,所需时间均小于2.5 h,所得DNA分别直接用于PCR分析,结果满意。结论 该方法用于提取赤芍干叶片DNA快速可行,可有效地从富含多糖和小分子杂质的组织中分离出高质量DNA,方法简便、快速,成本低。     

一种适于AFLP分析的天麻花葶DNA提取方法

目的：获得能用于中药天麻扩增片段长度多态性（AFLP）分析及其它分子生物学研究的高质量DNA。方法：以天麻花葶为材料，采用改良SDS法提取天麻DNA，经紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测。结果：改良的SDS法能获得高质量的DNA，OD260／OD280为1．75～1．9，蛋白质、多糖、RNA等去除较彻底，适于AFLP分析。结论：改良的SDS法所提取天麻DNA适于AFLP分析。     

泰山白花丹参不同部位微量元素的分析比较

目的分析比较泰山白花丹参不同部位微量元素含量。方法用电感耦合等离子发射光谱仪分别测定泰山白花丹参根、茎、叶、花四个部位16种微量元素的含量，对不同部位微量元素含量进行分析比较。结果白花丹参根中镁元素含量最高，其次为铜和钡；茎中只有铬元素含量略高于根，其他测定的16种微量矿质元素含量均低于其他三个部位；叶中锌、铬、硼、锶4种元素含量略高于其他三个部位；而花中镍、铁、钛等微量元素含量显著高于根、茎、叶三个部位。另外，花中的锰、钒、锡、铅、镉、锂等6种微量元素含量也均高于其他三个部位。结论从微量元素角度分析，白花丹参的花也具有一定的药用价值。     

山茱萸叶脱氧核糖核酸(DNA)提取方法的研究

目的：研究山茱萸叶总DNA的提取方法。方法：在传统CTAB取法基础上，设计了几种山茱萸叶总DNA提取方案。结果：采用优化改良的总DNA提取方法，从山茱萸叶片中提取的总DNA杂质少、质量好，RAPD扩增效果良好。结论：该法可作其他含有多糖及多酚杂质的药用植物组织提取DNA的参考方法。     

两种木兰科植物的总DNA提取技术探讨

为了从富含次生代谢物的白玉兰、醉香含笑叶片中提取高质量的总DNA，研究对核质分离的CTAB法进行进一步的改进，降低CTAB含量防止对总DNA的降解；在氯仿，异戊醇抽提前加入NH4Ac溶液冰浴处理，降低DNA的黏性。所得DNA经电泳、紫外吸收、限制性内切酶酶切和PCR扩增检测，结果表明改进后提取的DNA完全满足分子生物学实验的要求，其中以改良CTAB法Ⅰ最佳。     

丹参干叶片的DNA提取

目的以丹参干叶片为材料,优选一种有效去除多酚类杂质的DNA提取方法.方法先用PVP-40T与材料共研碎,加预冷的提取缓冲液冰置,弃去上清液,沉淀用加Vit C粉末(调pH＝6～6.5)的2×CTAB抽提缓冲液提取.结果得到的DNA可以很好地用于PCR扩增.结论该方法适用于提取含多酚材料的DNA.     

泰山白花丹参对人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的研究泰山白花丹参对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,在培养液中预先加入不同浓度(0、0.3、0.6、0.9g/L)的白花丹参制剂后,以0.001%过氧化氢诱导内皮细胞损伤,通过光镜观察细胞形态,以四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞存活数量,用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡变化。结果血管内皮细胞受到氧化损伤后,细胞存活率明显降低,而预先加入白花丹参制剂可改善上述结果,它能抑制H2O2引起的血管内皮细胞减少,降低凋亡细胞比例。结论泰山白花丹参对内皮细胞氧化应激损伤有保护作用。     

百合鳞叶总DNA提取方法的改进

目的建立一种适合RAPD分析的百合鳞叶总DNA提取方法。方法在传统CTAB提取方法上,对其进行改良,进一步优化提取方法。结果用改良CTAB法提取的总DNA的OD260/OD280在1.6-2.0之间,电泳条带清晰,其含量和纯度完全满足RAPD分析的要求。结论该方法提取百合鳞叶总DNA简便实用。     

药用植物珠子参新鲜块根DNA提取方法研究

目的为获取珠子参高质量、高产量的总DNA,满足SSR-PCR标记实验。方法采用经典CTAB法、改良CTAB法、高盐低PH法和SDS法对珠子参总DNA提取方法进行比较研究,用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量。结果 4种方法中产量最高的为经典CTAB法,产率为149.533ng/g,纯度最高的为改良CTAB法,OD260/OD280为1.796。结论 4种方法提取的DNA质量均满足SSR-PCR标记实验,扩增效果改良CTAB法和SDS法效果最佳。     

天麻总DNA提取的研究

目的：寻找快速便捷的天麻总DNA的提取方法.方法：采用天麻干品为材料,用CTAB,SDS 2种提取法及液氮、玻璃砂2种研磨方法提取干天麻总DNA,并进行了比较.结果：2种不同的研磨法和2种不同的提取方法,均可从天麻中提取到一定纯度的DNA,其中CTAB法提取的DNA纯度较好,产率较高;SDS法提取的DNA纯度较低且不稳定,产率较低.结论：从天麻干品中采用CTAB法提取DNA用于分子生物学研究是可行的,用玻璃砂研磨能取得与液氮相近的结果.     

笃斯越桔果实总DNA提取方法的比较研究

目的探讨越桔果汁总DNA的最佳提取方法。方法分别采用SDS法、高盐低pH值法、CTAB法、异硫氰酸胍法提取越桔果汁的基因组DNA,并对其进行核酸含量测定和电泳及RAPD-PCR检测。结果SDS法、高盐低pH值法、CTAB法、异硫氰酸胍法提取越桔果汁的基因组DNA其OD260/OD280分别为1.944、1.738、1.661、1.813,其浓度分别为2.363μg/μl、0.548μg/μl、0.735μg/μl、1.455μg/μl;电泳检测显示异硫氰酸胍法提取DNA条带最清晰,扩增产物最多。结论用异硫氰酸胍法提取越桔果汁总DNA优于其它方法。     

龙血树总RNA提取方法的研究

目的 探讨有效提取龙血树总RNA的方法，为进一步开发和利用龙血树资源提供依据。方法 以龙血树的根、茎和叶为实验材料，将Schneiderbauerd提出的从富含多酚类化合物的植物组织中提取总RNA的方法做了改进，建立了一种简单实用的从富含多酚类化合物的植物材料中提取总RNA的方法。结果 所提RNA的0D260／013230均大于2．0，OD260／OD280的值在1．80～1．92之间，电泳条带清晰，RNA完整性好。结论 用该方法能高质高量地制备富含多酚类化合物的药用植物RNA。     

鼠麴草基因组DNA的提取方法及随机扩增多态性DNA分析

目的以鼠麴草的叶为材料,研究鼠麴草DNA的提取方法及对其进行随机扩增多态性DNA（RAPD）的分析。方法采用略改进的十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法、高盐低pH法、木本法和十二烷基硫酸钠（SDS）法分别提取鼠麴草叶的基因组DNA。通过RAPD分析所提取的DNA,比较所用的提取方法。结果CTAB法得到DNA的A260/A280为1.937,浓度为992.25μg/ml,优于其他3种方法。结论CTAB法是4种方法中最佳的方法。     

川党参的基因组DNA提取与ISSR引物筛选

目的 筛选最适党参基因组DNA的提取方法及ISSR (inter-simple sequence repeat)引物,为研究党参种植资源遗传多样性及DNA鉴定奠定基础.方法 以党参嫩叶作为材料,采用常规SDS法、改良CTAB法和试剂盒法3种提取方法基因组DNA,用优化的ISSR-PCR反应对100条引物进行筛选.结果 以党参嫩叶为材料提取基因组DNA,改良CTAB法效果最佳.从公布的100条ISSR引物中筛选出10条引物,能扩增条带清晰、稳定性好、多态性高的DNA条带.结论 以党参嫩叶为材料提取基因组DNA进行ISSR分子标志研究遗传多样性时应采用改良CTAB法,筛选出合适的引物在ISSR分子标志中很重要.     

忍冬叶片基因组DNA的提取与分析

目的:获取高质量的忍冬基因组DNA。方法:采用改良CTAB法从忍冬叶片中提取DNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法、酶切检测其质量,并与常规CTAB法比较。结果:改良CTAB法所得DNA优于常规CTAB法,电泳条带清晰,完整性好,纯度高,能被完全酶切。结论:改良CTAB法适合忍冬基因组DNA的提取。