与紫杉醇作用机理相同的新型微管稳定剂epothilones

微管蛋白聚合成微管的数量增减是一个动态平衡过程，这对许多细胞过程是不可缺少的。抗肿瘤药物紫杉醇可稳定已聚合的微管，从而导致正在增殖细胞的有丝分裂停止和细胞毒作用。作者用一种敏感的过滤测热分析法检测微管的集结活性，已证实ePothilonesA与ePothilonesB在体外及在培养细胞中具有紫杉醇的所有生物学活性。此类ePothilones是等效的；它们在体外微管蛋白聚合成微管以及在细胞培养中增加微管的稳定性和成束作用方面显示的动力学性质类似于紫杉醇。此外，这些16元的大环内酯类是‘H一紫杉醇结合的竞争性抑制剂；在竞争性取代分析…     

新的微管抑制剂YB-13诱导HeLa细胞凋亡及其机制

目的研究吲哚3-草酰胺衍生物YB-13在体外试验中诱导宫颈癌细胞株(HeLa细胞)发生凋亡及其作用机制。方法采用MTT法、细胞生长曲线、细胞集落、荧光显微镜、DNAladder和流式细胞仪等方法进行凋亡检测,用RT-PCR方法检测凋亡过程中相关基因表达的变化;间接免疫荧光观察YB-13对细胞骨架的影响,观察YB-13对微管蛋白聚合和解聚。结果吲哚3-草酰胺衍生物YB-13在体外试验中对HeLa细胞的杀伤力强,荧光显微镜观察到了凋亡小体;DNAladder法检测到凋亡时DNA降解形成的梯带,流式细胞仪检测到了细胞凋亡峰,同时观察到细胞周期的变化。在凋亡过程中,凋亡相关基因bcl-2家族中bcl-2表达下调而bax表达上调;实验观察到YB-13能影响HeLa细胞的细胞骨架,并且YB-13可影响微管蛋白聚合和解聚。结论YB-13在体外试验中能诱导HeLa细胞发生凋亡,其作用机制可能与bax基因表达上调、bcl-2基因表达下调以及对微管蛋白的抑制作用有关。     

去甲斑蝥素对体外微管蛋白聚合的抑制作用

目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对微管蛋白聚合-解聚过程的影响。方法采用蛋白凝胶电泳鉴定从猪脑中提取的微管蛋白,并用Bradford法测定微管蛋白含量。在经过秋水仙碱和紫杉醇验证稳定的37℃和4℃平衡体系内加入NCTD 10,20和30μmol.L-1观察微管蛋白聚合-解聚活性。人卵巢癌SK-OV-3细胞加入NCTD 60μmol.L-1作用8 h,取上清和沉淀,Western印迹法检测微管蛋白含量。结果与空白对照组相比,在37℃聚合反应中,NCTD 10,20和30μmol.L-1组对微管蛋白聚合的抑制率分别为(5.5±2.7)%,(7.1±1.2)%和(27.5±0.4)%,在此浓度范围内NCTD随浓度的升高抑制作用增强(P<0.05),但对微管蛋白在4℃的解聚影响不显著。NCTD 60μmol.L-1作用人卵巢癌细胞后,细胞中游离微管蛋白增加了(91.5±8.5)%,聚合微管蛋白量减少了(51.8±3.8)%,说明NCTD抑制了人卵巢癌细胞SK-OV-3中微管蛋白的聚合。结论 NCTD对体外微管蛋白的聚合具有一定的抑制作用。     

抗肿瘤药多西紫杉醇制剂的应用研究近况

多西紫杉醇(Docetaxel或多西他赛)是法国罗纳普朗克·乐安公司开发、已广泛上市的一种紫杉烷类抗癌药物,为白色或近似白色粉状物,相对分子质量为861.9,是由浆果紫杉(Taxus baccata,European yew)针叶中提取物经半合成所得的产物。由于多西紫杉醇以t-丁氧羰基取代了紫杉醇中的苯甲酸基团,因而水溶性略大于紫杉醇(紫杉醇在水中的溶解度小于0.004 g/L)。其作用机制是促进微管蛋白聚合及抑制微管解聚,“冻结”微管的组成部分———细胞内骨架的合成,导致形成稳定的非功能性微管束,因而破坏肿瘤细胞的有丝分裂。另有研究发现,多西紫杉醇还能调…     

紫杉醇联合卡铂治疗晚期非小细胞肺癌23例

紫杉醇(paclitaxel)最早在20世纪70年代首先从美国西部紫杉中分离得到。它在癌细胞分裂时能与细胞微管蛋白结合,促使细胞中微管蛋白稳定和聚合,使细胞有丝分裂受到阻断,从而抑制肿瘤生长,对卵巢癌、乳腺癌有肯定的疗效,90年代已开始用于肺癌的临床研究。自2000年开始,笔者采用紫杉醇治疗晚期非小细胞肺癌23例。现将结果报道如下。1对象与方法1.1研究对象:患者选择标准:经组织学或细胞学证实,行为状态(PS)0～2级(WHO/ECOG标准)血象正常,无明显肝、肾功能障碍和心电图异常,预期生存期大于3个月,无周围神经系统疾病,具有判断疗效的客观指标…     

紫杉醇抗人舌癌细胞株的体外研究

目的：观察紫杉醇对人舌癌细胞的体外作用，探讨其抗癌效果及作用机制。方法：MTT法检测紫杉醇体外抗Tca8113人舌癌细胞作用，光镜和电镜下观察受处理细胞形态学变化，并用流式细胞仪分析其细胞周期的改变。结果：MTT法和形态学观察显示紫杉醇对Tea8113人舌癌细胞增殖有明显抑制作用，流式细胞仪分析经处理的癌细胞有G2／M期阻滞和细胞凋亡现象。电镜下可见紫杉醇处理的癌细胞的微管聚合。结论：紫杉醇是一种抗微管类的抗癌药物和G2／M阻滞剂。     

紫杉醇静脉输注的注意事项

紫杉醇问世于20世纪90年代，国内、外临床应用结果表明其在治疗卵巢癌、乳腺癌和肺癌中有较好疗效，是目前抗癌活性较强的化疗药。其抗癌机制是通过刺激微管的聚合，促进微管双聚体装配成微管，使微管超稳定，最终使细胞增殖停止在有丝分裂期的G2／M期，其独特的作用机制和确切疗效，已成为迄今发现的最具有应用价值的抗癌药之一。     

丹酚酸C诱导肝癌HepG2细胞有丝分裂阻滞及凋亡的研究

目的研究丹酚酸C(salvianolic acid C,SalC)的体外抗肿瘤细胞增殖作用及其分子机制。方法 MTT法检测Sal C对人肿瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡,Giemsa染色进行细胞有丝分裂的形态学观察,微管蛋白聚合实验检测Sal C对微管蛋白聚合活性的影响,比色法检测细胞中Caspase-3和Caspase-6的活性。结果丹酚酸C能抑制多种人肿瘤细胞增殖,其中对HepG2细胞的抑制作用较明显。流式细胞术分析发现Sal C使HepG2细胞阻滞于G2/M期并随作用时间延长出现明显的凋亡峰,细胞中Caspase-3和Caspase-6的活性升高。Gi-emsa染色提示HepG2细胞发生有丝分裂阻滞。Sal C能明显抑制微管蛋白的聚合。结论 Sal C具有抗肿瘤细胞增殖活性,通过抑制微管蛋白聚合诱导细胞有丝分裂阻滞从而诱导凋亡。     

国外植物药产品介绍(8)

8.01 紫杉醇(Paclitaxel)异名泰素(Taxol)药理本品系来自红豆杉属植物茎皮的天然抗肿瘤剂,现可通过半合成或其它方法获得。它能促进微管聚合与防止微管解聚,最终导致对细胞分裂和处于分裂期细胞的功能所必需的微管正常功能重组的抑制及诱导微管排列的紊乱。此外它还能调节体内免疫功能,促进肿瘤坏死因子的释放,以此杀伤或抑     

土贝母皂苷对人低分化上皮样鼻咽癌细胞(CNE-2Z)微管的作用

目的：探讨土贝母皂苷(皂苷)对人低分化上皮样鼻咽癌细胞株(CNE-2Z)微管的影响：方法：采用细胞免疫荧光法观察皂苷处理的CNE-2Z细胞微管的变化，蛋白免疫印迹法分析皂苷处理的CNE-2Z细胞中聚合和未聚合微管蛋白含量的变化。结果：免疫荧光图像结果表明，皂苷作用的CNE-2Z细胞丧失正常的微管网络，蛋白免疫印迹结果证实皂苷使CNE-2Z细胞未聚合的微管蛋白比例增加，而且这一作用与剂量和时间呈正相关。结论：皂苷能抑制CNE-2Z细胞内微管的聚合，提示皂苷是一种有效的抗微管剂、     

紫杉醇联合顺铂、氟尿嘧啶治疗晚期食管癌

食管癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,预后较差,近几年国外研究证明,紫杉醇(PTX)是目前治疗食管癌最有效的药物,单药有效率在31%[1].紫杉醇通过与细胞微管蛋白结合,促使细胞中微管稳定和聚合,抑制微管解聚,从而抑制肿瘤生长.为进一步探讨紫杉醇治疗晚期食管癌的有效化疗方案,我们自2003年5月～2005年5月应用紫杉醇联合顺铂(DDP)、氟尿嘧啶(TCF)方案治疗晚期食管癌35例,获得满意的疗效.现报道如下.     

HPLC测定大鼠血浆中紫杉醇浓度

紫杉醇（paclitaxel）是近20年来发现的疗效显著的抗癌药物之一。与其他抗癌药物不同,紫杉醇是通过诱导和促进微管蛋白聚合、装配及稳定微管作用阻止肿瘤细胞生长,对卵巢癌、乳腺癌、头颈部癌、     

紫杉醇联合化疗治疗晚期乳腺癌及卵巢癌近期疗效观察

紫杉醇系植物类抗癌药，其抗癌机理在于它能够促使微管聚合，形成稳定的不具活性的微管聚合物，从而影响肿瘤细胞的有丝分裂，造成细胞死亡。目前已证明紫杉醇对乳腺癌、卵巢癌、头颈部肿瘤及非小细胞肺癌(NSCLC)具有较高的疗效。我院自1997年1月至2000年8月对20例晚期或复发的乳腺癌及卵巢癌患者进行以紫杉醇为主的联合化疗。现报告如下。     

多西紫杉醇联合化疗方案治疗转移性乳腺癌40例临床分析

<正>多西紫杉醇是一种半合成的紫杉醇类药,作用靶点是微管,可促进微管蛋白聚合和阻止微管蛋白解聚的作用,从而抑制细胞的有丝分裂和增殖,起抗肿瘤作用,对转移性乳腺癌有较高疗效。我科从2007年1月至2008年3月采用以多西紫杉醇为主的联合化疗方案治疗转移性乳腺癌,取得较好     

紫杉醇为主的化疗药学监护

紫杉醇类药物是从紫杉的树干、树皮或针叶中提取或半合成药物,是一类新型抗微管药物。它的作用机制是癌细胞分裂时能与细胞微管蛋白结合,促使细胞中微管双聚体装配成微管并通过干扰去多聚化过程使微管稳定,从而抑制微管网正常动力学重组导致细胞有丝分裂受到阻断,从而抑制肿瘤生长[1]。紫杉醇有显著的放射增敏作用,这可能使癌细胞中止于对放疗治疗敏感期:G2和M期。紫杉醇是广谱的抗肿瘤植物药物,近     

高效液相色谱法测定血浆中多西紫杉醇的含量

多西紫杉醇(docetaxel,Doc,又名多西他赛)是新一代紫杉烷类抗肿瘤药物.Doc首先由法国罗纳普朗克乐安公司开发,1995年4月首次在墨西哥上市,商品名为taxotere(泰索帝).其作用机制是促进微管蛋白聚合及抑制微管解聚,"冻结"微管的组成部分--细胞内骨架的合成,导致形成稳定的非功能性微管束,因而破坏肿瘤细胞的有丝分裂[1].临床研究表明,Doc抗瘤谱广,是现有药物中治疗转移乳腺癌(MBC)和非小细胞肺癌(NSCLC)最有效的单剂化疗药物[2].本研究采用反相高效液相色谱法测定血浆中Doc的药物浓度,为临床监测患者的血药浓度,调整不同患者的给药剂量、避免毒副反应及药动学研究提供一种新方法.     

新型α-甲基查尔酮类衍生物的合成及体外抗宫颈癌活性研究

目的以查尔酮母核为先导化合物,设计合成α-甲基查尔酮类衍生物并进行体外抗宫颈癌活性研究。方法以2,4-二氯苯丙酮与取代苯甲醛为原料,经Claisen-Schmidt反应合成一系列新型α-甲基查尔酮类衍生物3a～3k,其结构经~1H-NMR、~(13)C-NMR及HR-ESI-MS谱确证。通过MTT法测定3a～3k对人宫颈癌细胞(SiHa和HeLa)及中国仓鼠正常卵巢细胞(CHO)的体外抗增殖活性;采用流式细胞仪技术检测3g对HeLa细胞的促凋亡作用及对细胞周期的影响;通过CADD法对3g与鼠双微粒体2(MDM2)和微管蛋白进行分子对接,测定化合物结合能量及结合位点。结果与结论3a～3k对人宫颈癌细胞株均表现出不同程度的抗增殖作用,其中3g对HeLa细胞的抑制活性最显著,IC_(50)值为16.51μmol·L~(-1);3g对HeLa细胞作用24 h凋亡比例高达84.06%;主要阻滞HeLa细胞于S期;分子对接结果预测3g对MDM2蛋白及微管蛋白均具有较强的抑制作用。     

多西紫杉醇联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的疗效观察及临床护理

<正>非小细胞肺癌(NSCLC)是肺癌中最常见的一种,约占肺癌总例数的80%[1]。而且大多数患者确诊时已属晚期,失去了手术机会,化疗是主要的治疗方法。多西紫杉醇作为新一代的紫杉类抗癌药,是浆果紫衫针叶中的提取物经半合成所得产物,可促进微管蛋白聚合及延缓微管的解聚作用,导致形成稳定的非功能性的微管束,从而破坏癌细胞的有丝分裂和细胞增殖[2],此外,多西紫杉醇是一种有效的     

紫杉醇的临床研究

<正> 紫杉醇是由云南红豆杉树皮中分离提取的抗癌新药。药理研究证明,紫杉醇对多种人癌细胞有非常强的杀伤作用,其半抑制浓度(LC50)在0.002～0.009μg/ml之间,抗癌谱广。作用机制研究证明,紫杉醇具有高度亲脂性,可促进微管双聚体装配成微管后通过防止去多聚化过程使微管稳定化,抑制微管网正常动力学重组,导致整个细胞周期微管束的排列异常和细胞分裂期间微管多发性星状体的产生,从而抑制肿瘤细胞分裂,产生抗肿瘤作用。     

mTOR通路增强宫颈癌紫杉醇耐药细胞株HeLa/PTX对紫杉醇的敏感性

目的探讨mTOR在宫颈癌紫杉醇耐药中的作用及mTORC1/2双重抑制剂OSI-027联用紫杉醇后HeLa/PTX细胞对紫杉醇(paclitaxel,PTX)敏感性的变化并对相关机制进行研究。方法用sh-RNA-Raptor及sh-RNA-Rictor质粒转染HeLa/PTX细胞以下调Rictor及Raptor的表达,采用western blot法检测mTOR信号通路相关蛋白(Raptor、Rictor、p-Akt(ser473)、Akt和p-p70S6K)和凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)的表达情况;采用平板克隆形成实验、CCK-8法及Western blot法检测单用mTORC1/2双重抑制剂(OSI-027)、PTX及联用OSI-027和PTX后细胞克隆形成能力、增殖活力的变化并计算药物联用指数(combination index,CI)及mTOR信号通路相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达情况。结果与对照组相比,在HeLa/PTX细胞中下调Raptor后p-p70S6K表达显著降低(P<0.001),p-Akt(ser473)/Akt比率显著升高(P<0.001),Bcl-2/Bax比值无显著差异(P>0.05)。下调Rictor后p-p70S6K蛋白表达、p-Akt(ser473)/Akt及Bcl-2/Bax比值均显著降低(P<0.001);与单独使用OSI-027或PTX相比,联合用药组细胞的克隆形成能力及增殖活力均明显下降且两药联用具有协同作用;与空白对照组相比,单用PTX处理HeLa/PTX细胞后p-Akt(ser473)/Akt比率略降低(P<0.05),p-p70S6K表达无明显变化(P>0.05),而单用OSI-027处理HeLa/PTX细胞后p-Akt(ser473)/Akt比率及p-p70S6K表达均显著降低(P<0.001);与单用OSI-027及PTX相比,联合用药处理HeLa/PTX细胞后p-Akt(ser473)/Akt比值、Bcl-2/Bax比值及p-p70S6K蛋白表达均显著降低(P<0.001)。结论抑制mTORC2信号通路的活性可减弱mTORC1抑制引起的p-Akt(ser473)反馈激活可成为克服紫杉醇耐药的有效靶点;mTORC1/2双重抑制剂OSI-027与紫杉醇联用可产生协同抗肿瘤作用。