Sorcin表达受抑乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7／A02对化疗药物敏感性的观察

目的观察可溶性耐药相关钙结合蛋白基因（Sorcin）表达受抑乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7／A02对化疗药物敏感性的影响,并探讨其机制。方法将MCF-7／A02细胞分为两组,观察组转染针对Sorcin基因的siRNA,对照组不转染。MTT法检测细胞对阿霉素（ADR）、依托泊苷（VP-16）、高三尖杉酯碱（HHT）、长春新碱（VCR）的敏感性,用流式细胞仪检测细胞对碱性蕊香红-123（Rho-123）的外排功能及VP16处理后的细胞凋亡率,Western blot法检测细胞中的Bcl-2、Bax蛋白。结果观察组ADR、VP-16、HHT、VCR的IC50分别为（19．92±1．29）、（31．47±2．36）、（4．19±0．27）、（2．96±0．23）μg／ml,对照组分别为（111．57±5．60）、（144．77±20．43）、（24．30±0．43）、（5．89±0．28）μg／ml,两组比较,P均〈0．01。观察组细胞凋亡率为9．15％±0．25％,对照组为4．10％±0．12％,两组比较,P〈0．01。观察组细胞内Rho-123的荧光强度为6．34±0．86,对照组为5．42±0．73,两组比较,P〉0．05。观察组细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达量为0．59±0．032、1．80±0．03,对照组分别为0．69±0．025、1．94±0．04,两组比较,P均〈0．05。结论抑制Sorcin表达可显著增强MCF-7／A02细胞对化疗药物的敏感性;这种作用可能与其调节Bcl-2／Bax通路促进MCF-7／A02细朐凋亡有关。     

人类软骨糖蛋白－39对成人膝关节软骨祖母细胞增殖的影响

目的：观察人类软骨糖蛋白－39（ HCgp－39）对成人膝关节软骨祖母细胞增殖的影响。方法取正常及OA关节软骨标本,向分离培养所得的软骨祖母细胞中分别加入0、25、50、100、500 ng／mL的HCgp－39。收集培养0、24、48、72 h的细胞,加入10μL的MTS检测液,酶标仪检测各孔光的吸收值（ OD值）,比较各组细胞对HCgp－39的敏感性。结果 OA组：48 h时加入25、50、100、500 ng／mL组的OD值分别为0．81±0．01、0．88±0．02、0．93±0．01、1．03±0．04;72 h分别为1．02±0．05、1．12±0．01、1．21±0．01、1．28±0．01;与未加入HCgp－39组比较均有统计学差异（P＜0．05或＜0．01）;正常软骨组：48 h时加入25、50、100、500 ng／mL组的OD值分别为0．67±0．01、0．63±0．01、0．61±0．01、0．58±0．01;72 h分别为1．18±0．02、1．1±0、1．08±0．01、0．97±0．02;与未加入HCgp－39比较均有统计学差异（P＜0．05或＜0．01）。结论在成人的关节软骨中存在软骨祖母细胞;HCgp－39能够促进关节软骨中软骨祖母细胞的增殖。     

鸟嘌呤核苷酸抑制因子2基因表达与肝癌细胞迁移和侵袭能力的关系

目的:探讨鸟嘌呤核苷酸抑制因子2(RhoGDI2)对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:选取肝癌细胞株HCCLM3细胞,随机分为对照组、空白转染组和shRNA转染组,其中空白转染组转染空白质粒,shRNA转染组转染RhoGDI2-shRNA,采用MTT法检测各组细胞增殖,Transwell试验检测各组细胞迁移及侵袭能力,qRT-PCR检测各组细胞RhoGDI2 mRNA表达,Western blot检测各组细胞MMP-9、pAKT和VEGF表达。结果:shRNA转染组细胞RhoGDI2 mRNA相对表达量为(0.201±0.082),明显低于对照组和空白转染组(P<0.05);shRNA转染组细胞培养6 h、12 h和24 h时OD值分别为(0.312±0.110)、(0.562±0.107)和(0.700±0.110),明显低于对照组和空白转染组(P<0.05);shRNA转染组细胞迁移率和穿膜细胞数分别为(0.310±0.030)%和(9.28±1.11)个,明显低于对照组和空白转染组(P<0.05);shRNA转染组细胞MMP-9、pAKT和VEGF相对表达量分别为(0.762±0.100)、(0.201±0.092)和(0.501±0.101),明显低于对照组和空白转染组(P<0.05)。结论:下调RhoGDI2表达,可抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,值得进一步研究。     

Let-7a对人乳腺癌MCF-7细胞的作用及机制探讨

目的观察Let-7a对体外生长的人乳腺癌MCF-7细胞株的抑制作用,并探讨其作用机制。方法分别用Lipofectamine^TM2000介导的Let-7a和siRNA转染人乳腺癌细胞株MCF-7（分别为Let-7a组、空白对照组和阴性对照组）,半定量RT—PCR法检测两组C—myc mRNA表达;Western blot法测定转染24h后C-myc蛋白的表达水平;CCK-8法检测细胞增殖抑制率。结果Let-7a组的C-myc mRNA表达水平明显低于空白对照组和阴性对照组,P均〈0．01;在MCF-7细胞中存在相对分子质量62kD的特异性条带,与C-myc相对分子质量相符,Let-7a组特异性条带明显弱于对照组;Let-7a组细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组（P〈0．05）,且具有时间和浓度依赖性。转染24h后,Let-7a组凋亡率明显高于对照组（P〈0．05）。结论Let-7a对体外生长的人乳腺癌MCF-7细胞增殖有抑制作用;其机制可能为抑制C-myc基因的表达。     

姜黄素对乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞增殖、侵袭的影响及其机制探讨

目的观察姜黄素对雌激素受体阳性（ER＋）乳腺癌细胞MCF-7和ER-乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭的影响,并探讨其机制。方法将MCF-7/MDA-MB-231随机分为四组,姜黄素高、中、低剂量组（姜黄素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组）分别加入5、10、20μg/ml的姜黄素,对照组不加。MTT法检测细胞的增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期,通过Boyden小室观察细胞侵袭力,RT-PCR法检测细胞中的MMP-9 mRNA。结果与对照组相比,姜黄素各剂量组细胞增殖下降,G0/G1期及S期细胞比例减少,而G2/M期细胞比例显著增加,细胞侵袭指数降低,细胞中的MMP-9 mRNA表达下降,P均〈0.05。结论姜黄素能抑制MCF-7/MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭作用,与其降低MMP-9基因表达有关。     

miRNA-126靶向抑制A549细胞迁移和侵袭能力的研究

目的研究microRNA-126（miR-126）对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞迁移和侵袭能力的影响。方法利用脂质体介导法将十勾建的miR126过表达质粒转染至NSCI．C细胞株A549细胞（A549／miR-126组）,并设空质粒转染组（A549／MOCK组）和空白对照组（A549组）。利用RT-PCR技术检测3组细胞中EGFI。7（miR126的靶标）的表达水平,采川细胞划痕实验观察细胞迁移能力差异,采用Transwell小室法分析3组细胞侵袭能力的差异。结果RT—PCR检测A549／miR-126组、A549／MOCK组和A549组细胞中EGFI。7mRNA分别为2．32±0．088、1．43±0．026和1．00±0．000,差异有统计学意义（P〈0．01）;细胞划痕实验显示A549／miR—126组、A549jM（）CK组和A549组细胞平均迁移距离分别为3．0μm、2．65μm和0．5μm,平均抑制率分别为0、11．25％和83．75％,差异有统计学意义（P〈O．05）;Transwell小室实验显示,A549／miR126组24hr侵袭细胞数为（28．6±2．322）个,36h侵袭细胞数为（29．2±3．7683）个,A549／M（）CK组24h为（49．8±3．7014）个,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-126可上调EGFL7mRNA的表达,并可能通过表达产物EGFI。7蛋白抑制A549细胞的迁移和侵袭能力。     

整合酶相互作用分子1基因对糖尿病下肢缺血性疾病的影响

目的检测整合酶相互作用分子1（INII）基因在糖尿病大鼠下肢缺血性疾病血管中的表达,探讨其对血管内皮细胞影响的分子机制。方法以8周龄的雄性SD大鼠为研究对象,通过尾静脉注射链脲佐菌素（STZ）的方法获得16只糖尿病大鼠模型,以完全随机分组方法将大鼠分为2组（每组8只）：实验组部分结扎双侧股外动脉制作下肢缺血模型,对照组仅进行糖尿病造模,不作其他处理。以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting技术检测2组下肢动脉壁INII的mRNA和蛋白表达情况。合成针对删门的小干扰RNA（siRNA．INll）,并转染入人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC-12,对照组分别为无关序列转染及脂质体对照;应用噻唑蓝（MTT）比色法、Transwell侵袭小室实验、RT—PCR、Western blotting等技术检测转染INII—siRNA前后HUVEC．12细胞迁移及血管生成能力的变化,进一步检测迁移相关基因细胞间黏附分子1（ICAM-1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制物1（TIMP-1）和血管生成相关基因血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血管紧张素2（Ang-2）的变化情况。以t检验与方差分析做组问数据对比。结果糖尿病下肢缺血大鼠的动脉壁内删7mRNA和蛋白表达均较对照组明显增加（分别为0．83±0．07、0．21±0．03和0．92±0．08、0．31±0．03,t=23．03、20．19,均P〈0．01）;转染后与脂质体及无关序列对照组相比,INII-siRNA组HUVEC-12细胞INII mRNA及蛋白表达均显著降低（INII mRNA分别为0．26±0．01、0．75±0．08、0．80±0．07,INII 蛋白分别为0．11±0．02、0．79±0．12、0．82±0．14,F=36．49、24．17,均P〈0．01）;INII-siRNA组迁移能力明显增强（分别为66±5、35±3、37±5,F=19．39,P〈0．01）。与两对照组相比,MJ-siRNA组HUVEC-12中ICAM-1、MMP-2、VEGF、bFGF和Ang-2的mRNA和蛋白表达明显增强（均P〈0．05）,TIMP-1的mRNA和蛋白表达显著降低（F：36．48、237．91,P〈0．05）。结论 INII 可抑制血管内皮细胞的迁移和血管生成能力,该效应可能是通过调控细胞中ICAM-1、MMP-2、TIMP-1、VEGF、bFGF和Ang-2的表达实现的。     

程序性细胞死亡因子4过表达对胃癌细胞BGC823凋亡及凋亡调控蛋白的影响

目的通过稳定转染程序性细胞死亡因子4（programmed cell death4,PDCIM）基因至胃癌细胞BGC823中,观察过表达PDCD4对BGC823凋亡的作用及对凋亡相关调控蛋白Akt／p-Akt、FLIP、caspase-8及cleaved-caspase-8的影响。方法构建针对人PDCD4的真核表达载体并转染至BGC823细胞,Annexin V—FITC／PI联合流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测蛋白的表达。结果成功构建PDCD4真核表达载体并转染至BGC823中,获得稳定过表达PDCD4的细胞模型,过表达PDCD4的BGC823细胞凋亡率（10．82％±1．29％）较未转染组（5．06％±0．83％）明显升高（P〈0．05）。转染PDCD4后,Akt／p-Akt表达（0．25±0．04／0．06±0．01）较未转染组（0．65±0．09／0．18±0．02）明显降低（P〈0．01）,FLIP蛋白在转染组中的表达（0．12±0．01）较未转染组中的表达（0．48±0．06）明显降低（P〈0．01）,而转染组caspase-8（0．36±0．07）及cleaved—caspasc-8（0．24±0．05）较未转染组caspase-8（0．18±0．04）及cleaved-caspase-8（0．11±0．02）明显升高（P〈0．05）。结论PDCD4过表达可促进胃癌细胞BGC823的凋亡,并且抑制Akt和FLIP的表达,从而促进caspase-8的活性。     

反义肝素酶基因对胰腺癌细胞体外增殖和侵袭的抑制作用

目的:研究反义肝素酶基因对人胰腺癌SW1990细胞体外增殖和侵袭能力的抑制作用．方法:反义肝素酶基因转染胰腺癌sW1990细胞,并设空载体对照组和空白对照组,以流式细胞仪检测细胞周期;免疫组化、Western blot及RT-PCR检测肝素酶蛋白和mRNA表达;平板克隆形成实验检测细胞增殖活性,Transwell侵袭小室模型检测细胞体外侵袭能力．结果:与空白组和空载组比较,反义组细胞周期中S期比例明显减少(18.8％±2．5％vs 36．3％±2．2％,33．2％±2．1％,P<0．01),G1期细胞比例明显升高(66．0％±2．7％vs30．7％±3．2％,39．8％±4．9％,P<0．01);肝素酶蛋白及mRNA表达分别降低34．3％和37．8％:细胞克隆形成数目减少(12．2±2．8 vs 30．8±4．4,28．3±2．7,P<0．01);Transwell侵袭小室中24 h穿膜细胞数减少(13．0±3．5 vs 34．8±5．8,29．4±5．6．P<0．01)．结论:反义肝素酶基因抑制人胰腺癌SW1990细胞体外增殖及侵袭能力．     

NF-κB基因对胰腺癌细胞侵袭作用的影响及机制

目的探讨NF-κB基因对胰腺癌细胞侵袭的影响及机制。方法应用NF-κB基因小于扰RNA（siRNA）转染处理人胰腺癌PANC-1细胞,采用Westernblot方法检测NF-KB蛋白水平,采用Boyden小室模型试验检测癌细胞侵袭能力。收集转染48h的癌细胞,采用包含有96个转移相关基因的芯片检测基因表达情况;根据基因芯片结果,随机抽取3个表达明湿变化的基因采用荧光实时定量PCR（RT—PCR）验证基因芯片结果。结果转染组癌细胞NF-κB蛋白水平下调（P〈0．05）,且与时间和浓度相关。与对照组比较,转染组细胞的穿膜细胞数减少（P〈0．05）,且呈浓度依赖关系。基因芯片检测发现,96个基因中有11个基因表达出现明显变化,其中9个基因明显下调,包括基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-7和血管内皮生长因子（VEGF）,有2个基因出现明显上调。采用荧光RT—PCR方法检测MMP-2、MMP-7、VEGF基因表达,结果也发现这3个基因表达下调,且下调幅度与基因芯片结果一致。结论NF-κB基因siRNA转染可明昆抑制胰腺癌细胞的锚着不依赖性增殖和恶性侵袭,其机制可能与下调MMP-2、MMP-7和VEGF有关。     

外源性组织金属蛋白酶抑制剂-1对基质金属蛋白酶-9高表达大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响

目的观察外源性组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）对基质金属蛋白酶-9（MMP-9）高表达大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响,为寻找治疗糖尿病足的新方法提供实验依据。方法应用sD大鼠皮肤成纤维细胞株CRL-1213用高糖（22mmol／L）＋高同型半胱氨酸（100μmol／L）联合培养建立体外MMP-9高表达皮肤成纤维细胞模型,用外源性TIMP-1（100μg／iJ）抑制MMP-9的活性,采用实时PCR法和ELISA法检测MMP．9基因及蛋白表达量,用明胶酶谱法检测MMP-9蛋白活性,采用流式细胞术检测细胞增殖功能、CCK-8检测细胞活力、ELISA法检测细胞胶原（羟脯氨酸）分泌能力、划痕实验评价细胞横向迁移能力、Transwell法评价细胞纵向迁移能力。采用单因素方差分析进行统计学分析。结果TIMP-1干预组大鼠皮肤成纤维细胞MMP-9mRNA和蛋白的表达量与MMP-9高表达组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,但MMP-9蛋白活性受到明显抑制（1．47±0．13VS0．434-0．13,t=12．495,P〈0．01）。与对照组比较,MMP-9高表达组大鼠皮肤成纤维细胞S期的比例[（9．31±0．24）％VS（6．54±0．29）％]、增殖指数[（13．8±0．5）％VS（11．3±0．6）％]、细胞活力（1．76±0．13V81．35±0．12）、胶原（羟脯氨酸）分泌量[（1126-1-63）vs（353±61）μg／L]、6h横向迁移率[（38．7±2．6）％VS（21．3±2．1）％]和纵向迁移细胞数（91±4vs71±4）均明显减少（t=16．433、7．328、5．113、19．847、11．529、8．124,均P〈0．05）;TIMP-1干预后,大鼠皮肤成纤维细胞S期的比例[（6．54±0．29）％VS（7．75±0．27）％]、增殖指数[（11．3±0．6）％vs（12．5±0．5）％]、细胞活力（1．35±0．12VS1．64±0．14）、胶原（羟脯氨酸）分泌量[（3534-61）vs（829±59）仙g／L]、6h横向迁移率[（21．3±2．1）％VS（31．5±2．7）％]和纵向迁移细胞数（71±4vs85±4）与MMP-9高表达组比较得到明显改善[t=6．881、3．292、3．615、12．590、6．644、6．015,均P〈0．05]。结论MMP-9高表达大鼠皮肤成纤维细胞的生物学行为受到抑制,外源性TIMP-1能够减缓这种抑制作用。     

核抗原Mina53在人胃癌细胞中的作用及其意义探讨

背景:核抗原Mina53基因为原癌基因Myc的下游直接靶基因之一,在一些消化系统恶性肿瘤中呈高表达,并与肿瘤增殖、侵袭、转移或患者生存期相关。目的:研究Mina53在人胃癌细胞中的作用及其对胃癌发生、发展的意义。方法:选择Mina53表达水平较高的人胃癌细胞株SGC7901和AGS,应用RNA干扰技术下调其Mina53表达,以转染无关序列siRNA的细胞作为对照组。采用CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,细胞侵袭和迁移实验检测细胞侵袭、迁移能力。结果:与相应对照组相比,Mina53 siRNA转染组SGC7901、AGS细胞增殖受抑(96 h相对增殖率:60%和68%),并发生明显细胞周期G1期阻滞(SGC7901细胞G1/G2:2.76±0.12对1.86±0.06,P<0.05;AGS细胞G1/G2:1.78±0.13对1.34±0.05,P<0.05),细胞凋亡率分别增加9.8%±1.2%和10.6%±1.5%(P<0.05),穿透Transwell小室基质胶细胞数(SGC7901细胞:11.67±0.88对24.33±1.45,P<0.05;AGS细胞:8.00±1.15对20.33±1.73,P<0.05)和穿透Transwell小室微孔膜细胞数(SGC7901细胞:7.00±1.53对14.67±2.03,P<0.05;AGS细胞:8.00±1.16对15.33±1.45,P<0.05)均显著减少。结论:Mina53对人胃癌细胞的增殖、细胞周期、细胞凋亡以及侵袭、迁移能力具有调控作用,可能影响胃癌的生长、浸润和转移,有望作为胃癌基因治疗的靶点。     

基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1在高原地区慢性肺心病发病机制中的作用

目的探讨基质金属蛋白酶。9（MMP-9）及其基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）在高原慢性肺心病（HACCP）发病机制中的作用。方法选择高原肺心病急性加重期患者56例（A组）、缓解期患者51例（B组）和健康对照组40例（c组）,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定诱导痰上清液中MMP-9、TIMP-1表达,并分析其与呼吸功能的关系。结果A组诱导痰中MMP-9、TIMP-1和MMP-9／TIMP-1比值[分别为（976．33±201．65）．g／ml、（624．35±151．22）ng／ml、（1．55±0．16）]显著高于B组[分别为（426．74±123．14）ng／ml、（326．404-112．21）ng／ml、（1．31±0．14）,t值为8．367～17．202,P〈0．01]和C组[分别为（142．55±66．11）ng／ml、（121．78±62．26）ng／ml、（1．14±0．11）,t值为13．642—25．832,P〈0．01];B组显著高于c组（t值为6．827～14．233,P〈0．01）。A、B组诱导痰上清液中MMP-9、TIMP-1、MMP-9／TIMP-1比值与诱导痰中性粒细胞、PaCO：均呈显著正相关（r=0．304～0．743,P〈0．01或P〈0．05）,与FEVl％、Pa02均呈显著负相关（r=-0．314～-0．689,P〈0．01或P〈0．05）。结论MMP-9、TIMP-1和MMP-9／TIMP-1比值失衡在HACCP发病机制中起了一定作用,并与中性粒细胞、PaCO：呈显著正相关,与FEV。％、PaO2呈显著负相关。     

基质金属蛋白酶类在颅内动脉瘤中的表达

目的检测基质金属蛋白酶类(MMPs)中MMP-2、MMP-9在颅内动脉瘤中的表达情况。方法取经DSA证实为颅内动脉瘤,并经显微神经外科手术夹闭动脉瘤的17例患者的17个动脉瘤的瘤壁组织为研究标本(动脉瘤组)。17个动脉瘤中,小动脉瘤10个,大动脉瘤7个;Hunt-HessⅠ～Ⅱ级的患者为11例,≥Ⅲ级的患者为6例。对照组为同期经CT及MRI证实为非血管性疾病的外伤患者,共15例,取其颞浅动脉组织为对照标本。经HE染色及免疫组化染色,检测动脉瘤的瘤壁组织和正常血管壁的组织结构变化及其中MMP-2、MMP-9的表达情况,计算阳性指数(PI)。结果①对照组的动脉壁各层MMP-2、MMP-9的阳性表达较低。动脉瘤组瘤壁组织的内膜、中膜、外膜有MMP-2、MMP-9的阳性表达。②动脉瘤组患者MMP-2、MMP-9的阳性表达率分别为88.2%和82.4%,高于对照组的6.7%和13.3%,差异有统计学意义,P<0.01。③小动脉瘤患者MMP-2和MMP-9的PI值分别为5.1±2.2、5.1±4.2,大动脉瘤患者MMP-2和MMP-9的PI值分别为4.6±2.4、4.1±2.3,差异均无统计学意义,P>0.05。④Hunt-HessⅠ～Ⅱ级患者MMP-2和MMP-9的PI值分别为4.5±1.6、4.2±3.7,高于Ⅲ级患者的MMP-2和MMP-9的PI值(分别为5.7±3.1、5.7±3.1),差异均无统计学意义,P>0.05。⑤经Spearman相关分析,动脉瘤组MMP-2的PI值与MMP-9的PI值呈正相关,r=0.425,P<0.05。结论 MMP-2、MMP-9在动脉瘤的瘤壁组织中表达较高,其高表达可能促进了颅内动脉瘤的形成和破裂。     

基质金属蛋白酶-9基因启动子甲基化在非小细胞肺癌治疗中的作用

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因启动子甲基化在非小细胞肺癌(NSCLC)治疗中的作用。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测NSCLC患者及健康人外周血白细胞MMP-9启动子的甲基化状态。用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血浆MMP-9的含量及RT-PCR检测外周血白细胞中MMP-9mRNA的表达水平。结果 NSCLC组MMP-9基因启动子平均甲基化密度显著降低,与对照组相比有显著性差异(23.5±4.7vs40.6±3.8,P<0.05);NSCLC组MMP-9mRNA表达显著增强,与对照组相比有显著性差异(1.35±0.31vs0.76±0.07,P<0.05);NSCLC组MMP-9含量显著增高,与对照组相比有显著性差异(597±143vs242±65,P<0.05)。MMP-9甲基化状态与NSCLC患者的肿瘤组织类型、TNM分期无关(P>0.05);MMP-9mRNA表达及MMP-9蛋白水平与NSCLC的组织类型无关(P>0.05),但和TNM的分期有关:Ⅲ期、Ⅳ期MMP-9mRNA表达及MMP-9蛋白水平均明显高于Ⅱ期(P>0.05)。经相关性分析,MMP-9mRNA表达与其基因启动子甲基化密度变化成正相关(R=0.79,P<0.05);MMP-9含量与其基因启动子甲基化密度变化成正相关(R=0.82,P<0.05);MMP-9含量与MMP-9mRNA的表达成正相关(R=0.77,P<0.05)。结论 NSCLC患者MMP-9基因启动子处于低甲基化状态,其通过增强MMP-9mRNA表达及促进MMP-9蛋白分泌在肿瘤的发生发展中发挥作用。     

葛根素对兔动脉粥样硬化基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1表达的影响

目的：观察葛根素对动脉粥样硬化兔髂动脉分泌和表达基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制物-1（TIMP-1）的影响。方法：20只家兔分为正常对照组（正常饮食，6只）、病理对照组（球囊和高脂饮食，8只）和葛根素组（球囊、高脂饮食和葛根素，8只）。球囊损伤后4周处死，取一侧病变髂动脉做病理切片，应用免疫组化法测定MMP-9和TIMP-1的蛋白表达；取另一侧病变髂动脉抽提总RNA应用半定量逆转录多聚酶链式反应（RT—PCR）测定MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达。结果：兔动脉粥样斑块MMP-9 mRNA（mRNA／GAP—DH mRNA）表达：正常对照组、病理对照组、葛根素组的分别为0．81±0．17，1．52±0．24，1.03±0．19，病理对照组、葛根素组的较正常对照组显著增加（P〈0．05），而葛根素组的较病理对照组显著下降（P〈0．05），上述三组的TIMP—1 mRNA的表达依次为1．44±0．14，2．63±0．16，2．67±0．12，病理对照组与葛根素组的较正常对照组显著增加（P〈0．05），但病理对照组与葛根素组间无显著差异（P〉0．05）。免疫组化检测显示葛根素抑制MMP-9蛋白质表达（P〈0．05），但对TIMP-1蛋白质的表达无影响。结论：葛根素可能是通过调节兔动脉粥样斑块分泌MMP-9途径发挥稳定动脉粥样硬化斑块的作用。     

冠心病患者血浆巨噬细胞移动抑制因子、基质金属蛋白酶-9测定的临床意义

目的观察冠心病患者巨噬细胞移动抑制因子（MIF）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）血浆水平的变化,探讨其在不同类型冠心病中的临床意义。方法我院心内科住院患者97例,根据冠状动脉造影结果分为对照组24例和冠心病组73例,冠心病组根据临床诊断分为稳定型心绞痛（SAP）组33例,急性冠脉综合征（ACS）组4JD例,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测动脉血浆MIF和MMP-9水平。结果ACS组MIF血浆水平（17．96±1．58）μg／L,高于对照组（9．62±1．70,P〈0．01）及SAP组（10．39±1．25,P〈0．01）,对照组与SAP组差异无统计学意义（P〉0．05）。ACS组MMP-9血浆水平（51．18±2．26）μL,高于对照组（26．74±2．99,P〈0．01）及SAP组（28．06±3．01,P〈0．01）,对照组与SAP组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论患者血浆MIF、MMP-9可能对冠状动脉粥样硬化斑块的形成及重塑有促进作用,对冠心病的发展有一定的预测价值。     

小檗碱抑制心肌梗死后心室重构的作用

目的探讨小檗碱对心肌梗死后心室重构的影响。方法结扎新西兰兔左冠状动脉前降支,制作急性前壁心肌梗死模型。5d后随机分为治疗组[n=14,小檗碱8mg/（kg·d）,耳缘静脉注射,连续5d]和对照组（n=14,注射等量生理盐水,连续5d）。干预后4周分别行血流动力学检查,测量体质量及左、右心室重量;通过免疫组织化学法检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9表达。结果治疗组与对照组比较,左心室重量/体质量（LVW/BW）[（1.55±0.12）×10^-3比（1.69±0.13）×10^-3,P〈0.05]、左室舒张末压（LVEDP）均显著降低（4.76±3.56mmHg比8.21±5.88mmHg,P〈0.05）,左室内压最大上升速率（±dp/dtmax）和最大下降速率（-dp/dtmax）显著增加（1.54±0.26mmHg/ms比1.10±0.27mmHg/ms,P〈0.05;1.67±0.38mmHg/ms比1.21±0.33mmHg/ms,P〈0.05）;同时梗死周边正常心肌组织MMP-2、MMP-9分布率显著减少（53.9%±3.1%比88.8%±4.5%,P〈0.05及49.1%±3.9%比94.2%±6．2％,P〈0．01）。结论小檗碱抑制心肌梗死后心室重构,推测和减少心肌组织MMP生成有关。     

冠心病患者介入治疗后血CRP、MMP-9水平与预后的关系

目的：探讨冠心病（CHD）患者介入治疗前后外周血 C 反应蛋白（CRP）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9s）水平变化,并分析其与患者预后之间的关系。方法：入选2009年7月～2011年4月在我院行冠脉支架植入术的CHD 患者278例为介入组,未行支架植入的 CHD 患者234例为 CHD 对照组。根据冠脉造影结果,介入组进一步分为单支（143例）、双支（92例）和三支病变组（43例）。比较两组患者不同时间 CRP、MMP-9水平变化,并分析其与冠脉病变及患者预后之间的关系。结果：与入院时比较,支架植入术后24h,48h,介入组患者 CRP [（2.43±0.62）mg/L 比（2.87±0.73）mg/L,（2.98±0.87）mg/L]、MMP-9水平[（12.63±2.68）ng/ml 比（14.62±3.49）ng/ml,（19.62±4.63）ng/ml]显著上升（P ＜0.05～＜0.01）;而术后第14d 与患者入院时差异无统计学意义,P ＞0.05;CHD 对照组患者在治疗过程中 CRP 和 MMP-9水平差异均无统计学意义,P ＞0.05;冠脉病变越严重,CRP、MMP-9水平越高,三支病变组的 CRP、MMP-9水平[（2.51±0.64）mg/L,（14.67±2.97）ng/ml]显著高于单支病变[（1.83±0.51）mg/L,（9.68±1.42）ng/ml]、双支病变组[（2.17±0.59）mg/L,（11.62±2.19） ng/ml],P ＜0.05～＜0.01;CRP≥3 mg/L、MMP-9≥15 ng/ml 者心血管事件发生率（33.3％、29.1％）分别显著高于 CRP ＜3 mg/L、MMP-9＜15 ng/ml 者（16.1％、18.2％）,差异均有统计学意义,P 均＜0.05。结论：冠心病患者行支架植入术后48h 内其血清 C 反应蛋白、基质金属蛋白酶-9水平显著升高,并且升高水平与冠脉病变程度及预后有关。     

孟鲁司特钠对支气管哮喘患者血清MMP-9和TIMP-1水平的影响

目的 通过采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定支气管哮喘（简称哮喘）治疗前后血清中基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1）水平,观察白三烯受体拮抗剂孟鲁司特钠对轻度持续性哮喘患者血清中MMP-9和TIMP-1水平的影响.方法 选取轻度持续性哮喘患者61例,随机分成治疗组29例和对照组32例,治疗组使用常规治疗＋孟鲁司特钠10 mg每日一次口服,疗程为7～14 d,对照组使用常规治疗,疗程为7～14 d,采用ELISA法测定两组治疗前后血清MMP-9和TIMP-1水平,并对其变化进行分析比较.结果 ①治疗后治疗组血清MMP-9水平[（22.75±6.51） μg/L]明显低于对照组治疗后[（28.93±7.59）μg/L]（P＜0.05）;治疗组治疗前血清MMP-9水平[（29.07±7.83） μg/L]明显高于治疗组治疗后[（22.75±6.51）μg/L]（P＜0.05）.②治疗后治疗组血清TIMP-1[（10.74±4.14） μg/L]明显低于对照组治疗后[（13.75±2.59） μg/L]（P＜0.05）;治疗组治疗前血清TIMP-1水平[（13.76±3.53） μg/L]明显高于治疗组治疗后[（10.74±4.14） μg/L]（P＜0.05）.结论 孟鲁司特钠可明显降低轻度持续性哮喘患者血清中MMP-9和TIMP-1的水平.MMP-9和TIMP-1的水平可作为轻度持续性哮喘患者疗效判断的指标之一.孟鲁司特钠可能会通过下调哮喘患者血清MMP-9和TIMP-1的水平,减少气道细胞外基质沉积.