多发性骨髓瘤患者miR-21和miR-32的表达及临床应用

目的探讨microRNA-21(miR-21)和microRNA-32(miR-32)在多发性骨髓瘤(MM)骨髓单个核细胞中的表达水平及意义。方法选取2010年1月至2014年1月在我院血液科及骨科就诊的多发性骨髓瘤患者46例和正常对照的骨髓标本30例作为研究对象,患者均符合多发性骨髓瘤的诊断标准,采用实时荧光定量PCR法检测骨髓单个核细胞中miR-21和miR-32的表达水平。结果 miR-21和miR-32在MM中的表达水平明显高于正常对照组,难治组miR-21和miR-32表达水平明显高于初治组,差异均有统计学意义(P0.05)。治疗缓解组miR-21和mR-32的表达水平低于初治组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 miR-21和miR-32的表达可以对MM患者疾病进展和预后进行预测。     

多发性骨髓瘤中miR-21与SPRY2基因表达的相关性研究

目的：检测多发性骨髓瘤（MM）患者外周血miR-21的表达水平,研究MM中miR-21与SPRY2基因表达的相关性。方法选择30例MM患者、15例意义未明单克隆丙种球蛋白病（MGUS）患者及20例正常对照（NC）的门诊患者,用实时荧光PCR定量检测miR-21和SPRY2表达水平;Western blot检测miR-21和SPRY2在MM细胞系中表达;在荧光显微镜下观察：U266用脂质体转染荧光标记的 miR-21 mimic/inhibitor后miR-21的表达。结果 MM组血清循环miR-21的表达水平较MGUS组和NC组显著增高,差异有统计学意义（P＜0.01）;在miR-21内源性高表达的MM细胞株中,SPRY2明显低表达;反之,明显高表达;荧光标记的 miR-21 mimic/inhibitor,转染效率90%以上,转染mimics细胞miR-21表达量（98.6±14.2）较未处理的U266细胞miR-21表达量（0.82±0.13）升高了120.2倍（差异有显著的统计学意义,P＜0.001）,转染inhibitor细胞miR-21表达量（0.37±0.06）较未处理细胞降低了61.9%（差异有明显的统计学意义,P＜0.05）。结论 miR-21可能是导致SPRY2在MM中表达下调的一个负性调控因子。miR-21与MM 的发生发展和疾病预后有密切关系,可作为判断MM 患者预后不良指标之一。     

miR-21在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

检测microRNA-21(miR-21)在多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中表达水平,分析miR-21表达水平与临床Durie-Salmon(D-S)分期法和常用肿瘤负荷指标血浆β2微球蛋白(β2-MG)水平的相关性,探讨miR-21在MM的发生、发展及预后中的意义。收集43例MM患者及20例正常对照的骨髓标本,用D-S分期法对MM患者进行临床分期,行髂骨穿刺获取BMMNC,采用实时荧光定量PCR方法检测BMMNC中miR-21表达同步抽取外周血,检测β2-MG水平。结果表明:①miR-21在MM患者BMMNC中表达水平明显高于正常对照者,复发/难治组MM患者miR-21表达水平明显高于初治组MM患者,差异有统计学意义(P<0.05);②MM患者化疗后miR-21表达水平较化疗前明显减低(P<0.05),其中以化疗有效组减低最为明显(P<0.05),无效/进展组miR-21表达水平化疗前后无明显改变;③miR-21表达水平与患者病程D-S分期和血浆β2-MG水平有相关性。结论:miR-21过表达在MM的发病中发挥着重要的致癌基因作用,与MM肿瘤细胞的增殖、化疗效果和疾病预后有密切关系;miR-21表达水平与血浆β2-MG水平、临床D-S分期呈正相关,可能成为判断MM患者预后不良的指标之一。     

miR-203a-5p靶向调控JAG1对多发性骨髓瘤细胞增殖、周期调控的作用及机制研究（英文）

目的:探讨miR-203a-5p在多发性骨髓瘤(MM)中的生物学功能及其调控机制。方法:采用稳健排序整合方法对GEO数据库中的3个miRNA表达谱(GSE16558、GSE24371和GSE17498,包含131个MM样本和17个正常浆细胞样本)进行差异性表达整合分析。用慢病毒构建了能稳定过表达miR-203a-5p的MM细胞株。采用qRT-PCR方法检测MM细胞株RPMI8226及U266中miR-203a-5p的表达情况,并检测miR-203a-5p表达上调后对MM细胞增殖及细胞周期表型的影响。应用稳定表达miR-203a-5p的U226细胞进行裸鼠成瘤实验,评价miR-203a-5p在体内肿瘤发生中的作用。利用Target Scan和miRanda等生物预测软件预测miR-203a-5p的候选靶基因,利用荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和Western blot研究MM细胞中miR-203a-5p的潜在靶点。结果:miR-203a-5p在MM细胞系中的表达显著低于正常浆细胞。miR-203a-5p过表达可以抑制RPMI8226和U266细胞的增殖和细胞周期进展。动物体内实验表...     

多发性骨髓瘤发病相关机制研究

多发性骨髓瘤(MM)是以产生免疫球蛋白的浆细胞恶性增殖为特征的肿瘤。近年来随着分子生物学技术的应用和B细胞发育分化途径的阐明,对其发病机制的研究,取得了令人鼓舞的进展。现就此领域的几个主要问题的研究进展作一介绍。1 骨髓瘤细胞的起源尽管MM患者骨髓中大量积聚的主要是恶性浆细胞,但这些细胞本身的增殖指数并不高。此外,除了终末期患者之外,外周血中极少有恶性浆细胞出现,而在很早期的MM患者,其骨髓中就受到广泛累及。因此,人们推测存在骨髓瘤细胞的前     

miRNA-192-5p在多发性骨髓瘤中的表达水平及其调控机制研究

目的 探讨miR-192-5 p在多发性骨髓瘤中的表达水平及其调控机制.方法 选取骨髓瘤细胞株U266作为研究对象,利用荧光定量PCR检测多发性骨髓瘤细胞中miR-192-5 p的表达水平;使用生物信息学网站预测miR-192-5 p潜在靶基因USP1并利用双荧光素酶报告实验验证其靶向关系;利用细胞转染实验对多发性骨髓...     

治疗多发性骨髓瘤可能的靶分子

多发性骨髓瘤 (ＭＭ)至今仍被认为是不可治愈的疾病。常规化疗ＭＭ的中位生存期为 3～ 4年 ,大剂量化 (放 )疗加造血干细胞移植 ,其完全缓解率虽有所提高 (2 0 %～ 40 % ) ,但最终难免复发。随着对ＭＭ分子机制的进一步阐明 ,人们目前已发现了多种潜在的治疗的靶分子 ,并针对这些靶分子合成了许多的候选药物 ,这不但拓展了ＭＭ的治疗思路 ,更为最终治愈ＭＭ带来了新的希望。1　骨髓微环境　ＭＭ细胞的生长与骨髓微环境密切相关。ＭＭ细胞可通过粘附分子与细胞外基质蛋白及骨髓基质细胞(ＢＭＳＣ)粘附 ,促进ＩＬ 6的旁分泌 ,而ＩＬ 6又可进一…     

多发性骨髓瘤患者循环microRNA-21的表达与意义

摘要：目的：了解多发性骨髓瘤(MM)患者循环microRNA-21（miR-21）的表达情况。 方法：用荧光定量PCR法检测34例MM患者循环miR-21的表达水平,并与血清Ig的总量（IgG+IgA+IgM）、lambda轻链、kappa轻链、Ca²⁺、乳酸脱氢酶（LDH）、清蛋白(Alb)、β2-微球蛋白(β2-MG)、血红蛋白(Hb)作相关性分析。 结果:MM组循环miR-21的相对表达水平为2.01±0.27,显著高于意义不明的单克隆丙种球蛋白病（MGUS）组0.76±0.20(t=15.39,P<0.01)和健康人对照(NC)组0.43±0.11(t=27.74,P<0.01)。MM组Ⅰ期的miR-21水平显著低于Ⅱ期和Ⅲ期（t=-4.16,t=-4.32,P均<0.01）。MM组循环miR-21水平与血kappa轻链(r=0.532, P<0.05)、血lambda轻链(r=0.615,P<0.01)、Ig的总量（IgG+IgM+IgA）(r=0.625,P<0.05) 及血清β2-MG（r=0.491, P<0.05)均呈显著正相关,与血清Alb呈负相关(r=-0.585,P<0.01)。而与LDH（r=0.250,P>0.05)、Hb（r=-0.286,P>0.05)及Ca²⁺（r=-0.227,P>0.05)均无相关性。 结论:MM患者循环miR-21可以反映骨髓瘤细胞的负荷,监测MM病情进展。     

伴1q21染色体扩增型多发性骨髓瘤的研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是发生于浆细胞的恶性血液系统疾病.细胞遗传学在MM危险分层中发挥重要作用,1q21扩增是MM常见的异常染色体核型之一.研究表明,1q21扩增与MM患者预后不良相关.目前随着新药的研发、细胞免疫治疗的深入开展及造血干细胞移植技术的提升,MM的缓解深度和生存期明显延长.快速而准确地识别高危患者并根据患者...     

多发性骨髓瘤误诊21例分析

我科自 1991～ 2 0 0 1年共收治多发性骨髓瘤 5 3例 ,其中先后在院内、外误诊 2 1例 ,占 39.6 % ,误诊时间 3～ 31个月 ,分析如下。1　临床资料本组男 15例 ,女 6例 ,年龄最小 2 6岁 ,最大 6 7岁 ,平均45 .2岁。骨痛 5例 ,骨折 3例 ,水肿 4例 ,发热 3例 ,胸闷 2例 ,乏力、呕吐 2例 ,头晕 1例 ,截瘫 1例。骨骼畸形 3例 ,贫血 4例 ,颅神经损害 2例 ,两肺湿罗音 3例 ,眼睑水肿 3例 ,其他有骨压痛、舌淀粉样变、雷诺现象等。本组分型 :Ig G型 13例 ,Ig A型 5例 ,轻链型 3例。分期 : 期 1例 , 期 15例 , 期 5例。分组 :A组 12例 ,B组 9例。误…     

多发性骨髓瘤病人骨髓细胞中Cmtm5基因异常低表达

本研究检测cmtm5(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing member5)基因在多发性骨髓瘤(MM)骨髓细胞中的表达水平,并探索其与临床特征的关系。应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(real-time quantitative RT-PCR,RQ-RT-PCR)技术检测MM患者骨髓细胞、MM细胞系及正常人骨髓细胞cmtm5基因的表达。以cmtm5拷贝数与abl拷贝数的比值表示cmtm5基因的相对表达水平。结果表明,51例初治及难治复发MM患者骨髓细胞cmtm5表达量(0.047±0.062)显著低于20例正常人骨髓细胞cmtm5表达量(0.255±0.333,p0.01)。ISSⅢ期患者组cmtm5基因表达量(0.034±0.034)显著低于ISSⅠ期患者组的表达量(0.103±0.109,p0.01)。两种人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226及CZ1的cmtm5基因表达量(为0.014±0.009、0.004±0.006)均低于正常人骨髓细胞。15例治疗有效患者的cmtm5基因表达量与治疗前及复发时相比显著升高(0.020±0.005;0.227±0.038,p0.01)。cmtm5基因的表达量与骨髓浆细胞比例呈负相关(r=-0.307,p0.05),而与性别、年龄、血红蛋白水平、M蛋白量、免疫球蛋白分型、IgH是否阳性等没有明显的相关性。结论:多发性骨髓瘤患者骨髓细胞cmtm5基因表达水平降低,且与ISS分期有关,与骨髓浆细胞数呈负相关,此结果说明cmtm5基因在MM的发病机制中发挥一定作用。     

Pdcd5基因在多发性骨髓瘤患者中的异常表达

本研究探讨骨髓瘤患者骨髓细胞中pdcd5基因的表达。应用ELISA方法和实时定量逆转录．聚合酶链反应（real—time quantitative RT-PCR,RQ—RT-PCR）技术,检测多发性骨髓瘤（MM）患者及正常人PDCD5蛋白和基因的表达,比较pdcd5基因的表达与患者临床特征的关系。结果表明：45例初治及难治复发MM患者血浆PDCD5蛋白水平显著低于20例健康人和20例治疗有效患者,分别为（16．91±0．28）ng／ml,（19．11±0．29）ng／ml,（17．94±0．154）ng／ml（P均〈0．05）。45例初治及难治复发MM患者骨髓细胞pdcd5基因表达量显著低于正常人,分别为0．64±0．47和1．28±1．21,P〈0．05。结论：多发性骨髓瘤患者低表达PDCD5,pdcd5基因可能参与了MM的发病机制。     

多发性骨髓瘤患者PBMC中miR-335的甲基化及其表达研究

目的探讨micorRNA-335(miR-335)表达及甲基化水平在多发性骨髓瘤(MM)诊断中的应用。方法用荧光定量PCR检测43例MM患者和30例体检健康者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-335的表达水平,用甲基化特异性PCR(MSP)检测miR-335启动子区甲基化水平,分析其与各临床指标的相关性。结果 43例MM患者PBMC中miR-335的表达水平为34.8(15.3,84.9),显著低于健康对照组的269.4(63.3,780.2),Z=4.384,P0.05。11例MM患者(25.6%,11/43)呈现完全甲基化,其余患者均为部分甲基化,而23例体检健康者(76.7%)呈现完全非甲基化(Uc=6.62,P0.05)。初诊MM患者miR-335表达量高于复发/进展期患者(Z=2.309,P0.05),但复发/进展期患者中miR-335启动子区甲基化程度(75%)高于初诊患者(25%),T=24.5,P0.05。MM患者miR-335表达水平与轻链λ浓度呈相关性(r=0.51,P0.05)。结论 MM患者miR-335表达水平和甲基化可作为MM潜在的辅助诊断指标。     

多发性骨髓瘤发病机制研究新进展

多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是发生于骨髓的多灶性浆细胞肿瘤，是常见的血液系统恶性肿瘤，近年来发病率有逐渐增高的趋势，目前的主要治疗措施是联合化疗与造血干细胞移植，仍属于不能治愈的疾病，严重威胁中老年人群的生命健康。其特征为血清单克隆性免疫球蛋白、溶骨性骨骼破坏、骨痛等。其免疫组织化学特点主要表现为骨髓瘤细胞表达CD38＋，CD138＋，以及免疫球蛋白IgG或IgD、IgM等染色阳性，80％全B抗原阴性。由于MM的病因尚不明确，我们就关于MM可能发病机制研究的新进展，从遗传因素、病毒因素、骨髓微环境、黏附受体、肿瘤血管增生等五个方面加以综述，并着重关注于一些可能成为免疫组织化学标记物的分子或基因，希望对MM的临床分子病理学诊断与鉴别诊断或预后判断有所助益。     

21例多发性骨髓瘤患者临床分析

目的:总结多发性骨髓瘤的临床及实验室检查特点,提高多发性骨髓瘤的早期诊断率.方法:回顾性分析21例多发性骨髓瘤患者的临床资料.结果:多发性骨髓瘤患者红细胞,血红蛋白、总蛋白、免疫球蛋白、血沉等多项指标的异常率＞50%;骨髓涂片检查示瘤细胞＞10%18例;病理切片免疫组织化学检查示CD138阳性率100%;16例骨骼疼痛者行(-)骨显像检查,诊断骨折7例,骨代谢活跃8例,溶骨性损害1例.结论:多发性骨髓瘤早期临床表现复杂多样,易误诊和漏诊.血液、尿液等常规筛查,骨髓细胞涂片检查、病理切片免疫组织化学检查及影像学检查,有助于多发性骨髓瘤早期诊断.     

21例多发性骨髓瘤患者临床分析

目的:总结多发性骨髓瘤的临床及实验室检查特点,提高多发性骨髓瘤的早期诊断率。方法:回顾性分析21例多发性骨髓瘤患者的临床资料。结果:多发性骨髓瘤患者红细胞、血红蛋白、总蛋白、免疫球蛋白、血沉等多项指标的异常率>50%;骨髓涂片检查示瘤细胞>10%18例;病理切片免疫组织化学检查示CD138阳性率100%;16例骨骼疼痛者行г-骨显像检查,诊断骨折7例,骨代谢活跃8例,溶骨性损害1例。结论:多发性骨髓瘤早期临床表现复杂多样,易误诊和漏诊。血液、尿液等常规筛查,骨髓细胞涂片检查、病理切片免疫组织化学检查及影像学检查,有助于多发性骨髓瘤早期诊断。     

冬凌草甲素对多发性骨髓瘤抗肿瘤的机制研究

本研究探讨冬凌草甲素（Oridonin）对人多发性骨髓瘤（MM）细胞株U266抗肿瘤作用及其分子机制。CCK-8法检测冬凌草甲素对细胞增殖的影响;瑞氏染色法观察细胞的形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR方法检测U266细胞FGFR3、BC12、CCNDJ、MYC基因表达水平的变化;Westernblot方法分析BCL2、MYC、CCNDl、FGFR3和P53蛋白表达水平的变化。结果表明,①冬凌草甲素能够抑制U266细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性;②10μmol／L冬凌草甲素处理U266细胞24h后,光学显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态学改变;③U266细胞凋亡比例随冬凌草甲素药物浓度及作用时间的延长而增加;④经冬凌草甲素处理后的U266细胞中,FGFR3、BCL2、CCNDJ、MYC基因表达下调,同时其相应的蛋白质表达下调,P53蛋白表达上调,上述变化均呈浓度和时间依赖性。结论：冬凌草甲素可以抑制人多发性骨髓瘤U266细胞增殖并诱导其凋亡,发挥其抗肿瘤作用。本研究为MM新的靶向治疗方案选择提供理论依据。     

多发性骨髓瘤耐药分子机制

多发性骨髓瘤的耐药与下列因素有关:靶细胞内药物浓度降低;药物靶细胞的改变;抑制药物诱导的凋亡;尤其是后者,现越来越受到重视。已发现许多基因及其突变、细胞因子、细胞与细胞或与细胞外基质的粘附、骨髓血管生成的增加等许多因素均参与骨髓瘤细胞抵抗药物诱导的凋亡。     

醋酸棉酚诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡及其机制的实验研究

本研究探讨醋酸棉酚对经典人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226的作用及其机制。采用四唑盐比色试验（MTT）、细胞形态学观察、流式细胞仪检测、DNA电泳、Western—blot等方法分剐观察醋酸棉酚对RPMI8226细胞的抑制增殖、诱导凋亡效应及其机制。结果表明：醋酸棉酚在〉16μmol／L浓度时可显著抑制RPMI8226细胞的增殖、促进其凋亡,随着剂量的增加以及时间的延长,效应越明显。研究还发现,醋酸棉酚是通过抑制线粒体膜电位（△ψm）、诱导Bax、Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达来实现上述效应的。结论：醋酸棉酚对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞具有选择性抑制增殖、促进凋亡的效应。     

沉默HDAC4抑制多发性骨髓瘤细胞增殖作用机制的研究

目的探究沉默组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)基因表达对多发性骨髓瘤LP-1细胞增殖、凋亡的影响以及作用机制。方法脂质体Lipofectamine 2000转入LP-1细胞中,实验分为对照组(不做任何处理)、阴性组(转入siRNA NC)、siRNA HDAC4组(转入siRNA HDAC4)。CCK-8法检测细胞的增殖活性,Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞的凋亡率,蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞中HDAC4、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的表达量。结果转染siRNA HDAC4后,LP-1细胞中HDAC4蛋白的表达量显著低于对照组(P 0. 05);与对照组相比,siRNA HDAC4组细胞的增殖活性显著降低(P 0. 05);而凋亡率显著增加(P 0. 05); siRNA HDAC4组细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平显著高于对照组(P 0. 05),但Bcl-2蛋白水平显著降低(P 0. 05)。结论沉默HDAC4基因可抑制多发性骨髓瘤LP-1细胞增殖,诱导其凋亡,可能通过降低Bcl-2水平,促进Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9表达发挥作用。