SELDI蛋白质芯片技术在肺癌早期诊断中的研究进展

随着人类基因组计划的完成,分子医学的研究领域已转移到蛋白质组学研究。蛋白质组学为发现肿瘤诊断标志物及可能的新型治疗靶分子提供了可能,肿瘤发生早期的蛋白质变化有可能成为临床早期诊断指标。表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术是一种操作简单、敏感性高、特异性强的高通量蛋白组学方法,是基于蛋白质芯片和质谱技术联用的多种肿瘤标志物筛选的分析平台。现主要对SELDI蛋白质芯片技术在肺癌早期诊断中的应用研究现状予以简要综述。     

表面增强激光解吸/离子化蛋白质芯片技术在肝细胞癌早期诊断研究中的应用

随着蛋白质组学研究技术的飞速发展,集样品分离、纯化、检测和数据分析为一体的表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱蛋白质芯片技术已成为蛋白质组学研究的有力工具,它可以快速、简便地直接检测各种体液及分泌物,具有标本用量少、高通量分析等特点,并在筛选、鉴定肿瘤标志物及临床疾病的诊断、防治方面发挥了重要作用。本文介绍了该技术的特点和分析步骤,以及该技术在肝细胞癌早期诊断中的应用情况,并对其前景进行展望。     

SELDI飞行质谱技术检测结直肠癌患者血清肿瘤转移相关蛋白

结直肠癌的淋巴结转移和远处转移是决定患者预后的主要原因,早期结直肠癌的5年生存率明显优于中晚期患者.目前对大肠癌侵袭转移的分子机制仍不清楚.     

SELDI蛋白质芯片技术在结直肠癌临床诊断中的应用及发展前景

结直肠癌是消化系统常见的恶性肿瘤。近年来，随着我国生活条件和饮食习惯的改变，结直肠癌发病率呈明显上升趋势。目前对结直肠癌的检查手段主要有大便隐血试验、血清学肿瘤标记物检测、消化道钡剂灌肠、肠镜及其他影像学检查方法，但检测的阳性率和准确性都较低，或者为侵入性检查，重复性较差。寻找结直肠癌特异性的早期诊断方法，是临床亟待解决的问题。     

激光捕获显微切割联合SELDI蛋白质芯片筛选肺腺癌早期诊断标志蛋白

目的 探讨应用激光显微切割(LCM)联合表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱蛋白质芯片(SEL,DI-TOF-MS)及模式识别分类技术-支持向量机(SVM)筛选肺腺癌标志蛋白的可行性.方法 将6例新鲜肺腺癌组织标本及其配对的4例正常肺组织制备8μm厚度冰冻切片,改良HE染色;用LCM技术选择性获取同质腺癌细胞和配对正常肺组织细胞.应用PBSⅡ+型SELDI-TOF-MS分析仪(IMAC芯片)分析腺癌及其配对正常细胞的蛋白质表达谱,比对差异点;应用SVM筛选并验证候选标志蛋白的判别效能.结果 平均每个LCM帽子的激光点数约4000 shots,获得了同质性>95%的肿瘤细胞和正常细胞.比较腺癌和配对正常细胞之间的SELDI谱图,共筛选出84个蛋白峰.将差异最明显的10个蛋白峰作为候选标志蛋白.和正常组织相比,6种蛋白在腺癌中呈低表达,4种蛋白在腺癌中呈高表达.差异有统计学意义(P<0.05).初步筛选出3191 m/z蛋白峰作为腺癌诊断标志蛋白.结论 LCM联合SEIDI蛋白质芯片技术有可能筛选出敏感性高、特异性强的肺腺癌标志蛋白;该技术将为肺腺癌早期诊断研究提供新的强有力的工具.     

基因组学和蛋白质组学在肺癌研究中的应用

基因组学和蛋白组学始终是近年来基础研究的热点所在,有关这方面的内容包括了基因芯片、组织芯片、蛋白芯片的液质液相层析质谱(LC-MS)、表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)等多个方面的研究。研究的内容从肺癌的分子诊断、早期发现、特异性标志物的发现,扩展到     

SELDI蛋白质芯片技术检测膝骨性关节炎患者黏附关节液中蛋白质的差异改变

目的运用表面增强激光解吸附离子化飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术检测膝骨性关节炎患者关节液中蛋白质的差异改变，寻找骨性关节炎特异的生物标志，以期用于骨性关节炎的早期诊断。方法使用WCX2芯片，SELDI-TOF—MS技术检测20例膝骨性关节炎患者和8例正常对照关节液中蛋白质谱的改变。结果膝骨性关节炎患者与正常人比较，关节液中的蛋白质存在差异表达，共有6个蛋白表达水平发生变化，其中5754Da和15522Da蛋白峰仅在患者中表达，在正常人中不表达，13412．3Da蛋白符合Cys—tatin-c。结论SELDI蛋白芯片技术可以检测关节液标本，检测膝骨性关节炎患者关节液蛋白质的差异表达敏感性高，从而为骨性关节炎的早期诊断提供了一种新的方法。     

血清蛋白质指纹图谱与人工神经网络模型在肺癌诊断中的应用

目的筛选肺癌相关标志物并建立诊断肺癌的蛋白质谱模型。方法应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术检测了86例肺癌、80例健康对照样本的血清蛋白质质谱,结合人工神经网络建立肺癌诊断模型。结果从肺癌组与健康对照组中筛选出了4个蛋白质荷比峰建立肺癌诊断模型,该诊断模型的特异性为 100％（95％的置信区间为93.9％～100.0％）,敏感性为93.6％（87.6％～96.4％）,准确率为96.7%（88.1％～98.3％）。结论成功建立了肺癌诊断模型,该模型在肺癌的诊断中具有较高的敏感性和特异性。     

SELDI-TOF-MS技术用于结直肠癌诊断意义的分析

目的探讨SELDI蛋白芯片技术在结直肠癌患者中的诊断价值。方法应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪和CM10芯片检测结直肠癌患者和构成比相似的对照组外周血清,筛选出结直肠癌特异蛋白峰并初步建立诊断模型。通过盲筛进一步验证诊断模型。同时收集上述结直肠癌患者根治术后7d的55例血清,观察手术前后有无差异蛋白峰。结果筛选出的特异蛋白峰质荷比为3 413,4 101,4 191,4 306,4 366,6 453,6 645,8 586,8 709,13 786,13 996,5 647,7 993和15 960Da,初步建立诊断模型。利用该模型对结直肠癌进行盲法验证,诊断的准确率为91.11%,灵敏度为88.89%,特异度为93.33%。根治术前后未发现差异蛋白峰。结论 SELDI技术可以筛选出结直肠癌患者血清特异蛋白并建立诊断分类树模型,有望成为结直肠癌早期诊断的辅助指标。     

SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术建立胃癌血清特异性标志物诊断分类树研究

目的:观察胃癌手术前后血清蛋白质谱的变化,筛选能够快速诊断胃癌的特异性标志物。方法:采用IMAC#3蛋白质芯片和表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术,对46例胃癌患者和40例正常人的血清蛋白质谱进行分析。结果:胃癌术前血清与正常人血清蛋白质谱有14个蛋白质表达量有明显差异。以热休克蛋白27、葡萄糖调节蛋白、抑制素、蛋白质二硫化物异构酶A 3这4个蛋白质所组成的模板,可将胃癌与正常人正确分组,利用该模板建立胃癌诊断的分类树模型用于诊断胃癌的灵敏度95.7%,特异性92.5%,术后血清蛋白质谱中,原表达上调的蛋白质明显下调。结论:SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术为建立蛋白质模板用以诊断胃癌提供了可靠的技术平台。     

热休克蛋白60和C-反应蛋白联合检测对大肠癌诊断的临床意义

目的探讨联合检测血清热休克蛋白60（HSP60）与C-反应蛋白（CRP）对大肠癌的诊断价值。方法采用ELISA法和免疫比浊法分别对68例大肠癌患者和40例健康对照者进行血清HSP60和CRP含量检测,并分析其与大肠癌转移和临床分期的关系。结果大肠癌患者血清HSP60和CRP的含量明显高于对照组,具有统计学意义（P〈O．05）,有转移与无转移相比,血清HSP60和CRP的阳性率差异有统计学意义（P〈0．05）,Ⅲ～Ⅳ期与I～Ⅱ期血清HSP60和CRP阳性率比较,差异均有统计学意义,分别为P〈0．05和P〈0．01。血清HSP60对大肠癌诊断的敏感性为46．8％,特异性为96．3％;血清CRP对大肠癌诊断的敏感性为54．2％,特异性为89．6％;而血清HSP60与CRP联合检测对大肠癌诊敏感性和特异性分别增高到75．6％和98．4％。结论血清HSP60与CRP水平是大肠癌发生发展的重要检测指标,联合检测对大肠癌患者诊断和预后具有重要的临床价值。     

SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术在原发性肝癌诊断中的应用研究

目的：筛选AFP阴性原发性肝癌（肝癌）患者与健康人血清中的差异蛋白,构建能与血清AFP联合使用的疾病诊断模型。方法：应用表面增强激光解析—电离飞行时间—质谱（SELDI-TOF-MS）技术和CM10芯片检测33例AFP阴性肝癌患者与35例健康人的血清,获得差异蛋白峰并建立疾病诊断模型。结果：32个蛋白峰差异具有统计学意义（P〈0.05）,在AFP阴性肝癌组血清中有6个上调,26个下调;诊断模型的准确度为80.9%,灵敏度为81.8%,特异度为80.0%。结论：应用SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术建立的疾病诊断模型有望与血清AFP联合使用从而提高肝癌的诊断效率。     

GST-π和P-gp在大肠癌中的表达及意义

目的：研究大肠癌谷胱甘肽-巯基-转移酶-π（GST-π）和P-糖蛋白（P-gp）的表达情况及二者与大肠癌临床病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学S-P法检测86例大肠癌组织和52例远端正常组织（距癌灶〉locm）GST-π和P—gp）的表达情况,并分析二者与大肠癌临床病理特征的关系。结果：大肠癌组织GST-π和P—gp）的阳性表达率均明显高于远端正常组织（P〈0．01,P〈0．05）。大肠癌组织P—gp表达与淋巴结转移有关,有淋巴结转移者P1p阳性表达率明显高于无淋巴转移者垆〈0．05）。大肠癌G跚、一丌和P—gp的表达呈正相关妒〈0．01）。结论：GST-π、P—gp）在大肠癌中的高表达可能与大肠癌原发性多药耐药有关,临床联合检测GST-π和P-gp可为制定合理的个体化化疗方案提供理论依据。     

结核蛋白芯片检测对结核病诊断的价值

目的探讨结核蛋白芯片检测对诊断结核病的价值。方法使用蛋白芯片系统检测血清结核抗体的病例共3 000例,其中结核病357例,非结核病2 643例。我们采用蛋白芯片技术检测结核杆菌中五种成分,即ESAT-6、CFP10、LAM、38kD和16kD,分析其结果。结果 357例结核病患者中共238例结核抗体阳性,2 643例非结核病患者408例阳性,结核蛋白芯片检测的灵敏度为66.7%,特异度为84.6%。结论结核蛋白芯片是诊断结核病的较有效方法,具有特异性好、快速方便等优点,对结核病快速辅助诊断起积极作用。     

老年人结直肠癌穿孔临床诊治分析

目的探讨老年人结直肠癌穿孔的特点、诊断方法、术式选择及疗效和进一步提高诊治水平的措施。方法回顾性分析我院53例老年人结直肠癌穿孔患者的临床资料。结果术前明确诊断20例(37.7%)。行右半结肠癌根治性切除I期肠吻合术20例;行左半结直肠癌I期根治切除,Hartmann造口术26例;姑息性结直肠癌切除术+近端结肠造口+远端关闭术5例,单纯修补穿孔+近端结肠双腔造瘘术2例。围术期死亡9例(13.2%),44例治愈或好转。结论老年人结直肠癌合并穿孔病死率较高,误诊率较高,并发症多,要详细地采集病史、进行严格的体格检查和分析辅助检查结果,制定个体化诊疗方案,及时手术、选择合理的手术方式可减少病死率,提高生活质量。     

奥沙利铂联合5-FU、FA治疗大肠癌31例疗效分析

目的 :评价国产奥沙利铂联合 5 -FU、FA治疗大肠癌的临床疗效和不良反应。方法 :患者 3 1例 ,奥沙利铂13 0mg/m2 静脉滴注 2小时d1 ,5 -FU 3 0 0mg/m2 静脉持续注射 2 4小时d1 ～d5 ,FA 10 0mg静脉滴注 2小时d1 ～d5 ,2 1d为 1周期 ,治疗 2周期后评价疗效。结果 :在 3 1例中 ,部分缓解 12例 ,有效率 3 8.7% ,主要不良反应为感觉神经毒性及贫血 ,胃肠道反应轻可耐受。结论 :该方案是治疗大肠癌的有效方法 ,毒副反应轻。     

结直肠癌DNA含量分析

应用流式细胞仪（FCM）对35例结直肠癌及正常大肠粘膜的细胞DNA含量进行分析，以探讨其和病理组织学及预后的关系。结果表明，35例直肠癌中26例（74．3％）为DNA异倍体．DNA指数（DI）与病理分级及Dukes’分期相关，DNA倍体与病理类型及Dukes’分期无关。因此DNA含量与患者预后有关．     

PNA结合蛋白在胰癌诊断中的作用

胰癌病人的组织和血清中存在着一种特异性糖蛋白。该糖蛋白上有花生凝集素的结合位点。根据这一蛋白与ＰＮＡ的高度亲和性，作者建立了一种用ＰＮＡ捕捉再加抗体识别的酶联免疫测定法（ＥＬＩＳＡ）。用此方法检测了胰腺癌病人血清２４例，对照５０例（包括慢性胰腺炎８例，其他肿瘤１６例，正常人２６例）。胰癌血清的平均含量高于对照组３．１倍。经ｔ检验证明胰腺癌组与其他组之间有非常显著差异（Ｐ〈０．０１）。该方法的敏感性     

雷替曲塞联合伊利替康一线治疗晚期结直肠癌的临床研究

目的 评价雷替曲塞联合伊立替康(CPT-11)治疗晚期结直肠癌的疗效和不良反应.方法 将59例晚期初治结直肠癌患者随机分为治疗组(31例)和对照组(28例).治疗组采用雷替曲塞+CPT-11方案治疗,对照组采用CPT-11+5-FU+LV方案治疗.结果 治疗组和对照组的有效率分别为41.9％和17.9％,差异有统计学意义(P＜0.05);疾病控制率分别为87.1％和64.3％,差异有统计学意义(P＜0.05).两种治疗方案的不良反应发生率比较无明显差异.结论 雷替曲塞联合CPT-11作为一线方案治疗晚期结直肠癌是有效的.     

结直肠癌合并2型糖尿病的临床特点分析

目的:探讨结直肠癌合并2型糖尿病患者的临床特点.方法:回顾性分析182例经手术或肠镜活检病理证实的结直肠癌患者的临床资料,其中62例伴发2型糖尿病者作为观察组,其余120例结直肠癌无糖尿病患者作为对照组,分析结直肠癌伴发糖尿病的分期及转移情况.结果:观察组分期以中晚期(C+D期)为主,与对照组比较差异显著(P＜0.05...