低氧训练与低氧大鼠心肌细胞凋亡及凋亡因子的表达

背景：低氧训练时,机体既要承受运动负荷,同时处于外界的低氧环境,此时, 心组织将如何适应其变化?其机制研究国内外较少。 目的：观察低氧与低氧训练对大鼠心肌细胞凋亡及Bax及Bcl-2表达的影响。 方法：SD大鼠共60只随机分为6组,常氧组、低氧8 h组、低氧12 h组、常氧训练组、低氧8 h训练组和低氧12 h训练组,每组10只。后3组大鼠每天在坡度为0的动物跑台上以25 m/min的速度训练1 h。训练完后,将低氧8 h组、低氧8 h训练组和低氧12 h组、低氧12 h训练组放入氧体积分数为12.5%(相当于海拔4 000 m)的低氧舱内8 h和12 h。实验期为4周,5 d/周。最后1次实验结束后24 h,大鼠均实施速眠新Ⅱ腹腔麻醉后取材,采用苏木精-伊红染色、原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法及蛋白免疫组织化学法检测各组大鼠心肌细胞凋亡和Bcl-2、Bax蛋白表达。 结果与结论：①与常氧组相比, 低氧12h组、常氧训练组、低氧训练组心肌细胞凋亡指数均显著增加 (P < 0.05) ;低氧12 h训练组心肌细胞凋亡指数显著多于常氧训练组和低氧8h训练组(P < 0.05) 。②与常氧组比较,其他各组Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax均显著性增高(P < 0.05) ;常氧训练组Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax表达显著高于低氧 8 h组,显著低于低氧12 h训练组(P < 0.05) ;低氧12 h训练组Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax表达比低氧12 h组、低氧8 h训练组显著增加(P < 0.05)。提示低氧、低氧训练可诱导大鼠心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达, 运动时低氧刺激与细胞凋亡率、凋亡指数及病理损伤有关,其中以低氧12 h后运动训练组最明显,心肌细胞的凋亡调控与Bcl-2和Bax相关。     

慢性间歇性低氧对大鼠肾脏GLUT-2和IRS-2表达的影响

目的探讨慢性间歇性低氧及复氧对大鼠肾脏葡萄糖转运蛋白2(GLUT-2)、胰岛素受体底物2(IRS-2)表达的影响。方法将大鼠分为对照组(control)、慢性间歇性低氧组(CIH)和慢性间歇性低氧后复氧组(RH),建立慢性间歇性低氧的动物模型,抽取动脉血立即行血气分析,过氧化物酶法检测血清中血糖及放射免疫法检测大鼠血清胰岛素。取出大鼠肾脏组织,q PCR法检测大鼠肾脏GLUT-2、IRS-2的mRNA表达,Western blot法检测GLUT-2、IRS-2蛋白表达;免疫组化法检测大鼠肾脏GLUT2、IRS-2蛋白表达。结果 control组大鼠血氧饱和度≥95%,CIH组的血氧饱和度≤85%,RH组血氧饱和度≥86%;CIH组大鼠空腹血糖、血清胰岛素及胰岛素抵抗指数较control组、RH组明显升高(P0.05);RH组高于control组(P0.05);GLUT-2、IRS-2的mRNA及蛋白表达较control组和RH组升高(P0.05);RH组高于control组(P0.05)。结论慢性间歇性低氧升高大鼠空腹血糖,上调大鼠肾脏GLUT-2、IRS2的表达,增强胰岛素抵抗,降低胰岛素敏感性。     

慢性低氧对大鼠肺血管L-精氨酸

目的:探讨慢性低氧对大鼠肺血管L-精氨酸/一氧化氮(L-Arg/NO)途径的影响。方法:采用慢性低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺血管孵育,测定慢性HPH对大鼠肺动脉L-Arg转运,一氧化氮合酶(NOS)活性和NO生成释放的影响。结果:(1)低氧4周大鼠肺动脉平均压(mPAP)比对照组高33.7%(P＜0.01),右心室(RV)和左室加室间隔(LV+S)重量比值(RV/LV+S)高44.2%(P＜0.01)。(2)低氧对血浆L-Arg含量无明显影响。(3)低氧大鼠离体孵育的肺动脉摄取低浓度(0.2mmol/L)和高浓度(5.0mmol/L)[³H]-L-Arg分别低于对照组15.8%(P＜0.05)和27.2%(P＜0.01)。(4)低氧大鼠肺动脉tNOS、iNOS和cNOS活性较对照组高38.0%、32.8%和53.0%(P＜0.01)。(5)低氧大鼠血浆NO含量低于对照组,与mPAP和RV/LV+S呈负相关(P＜0.01)。结论:慢性HPH时NOS活性代偿性增强,但L-Arg转运受损使血浆NO生成仍减少,说明L-Arg转运是NO生成的重要限速步骤。     

急性低氧大鼠肺动脉平滑肌内质网钙信号的变化及意义

目的：观察急性低氧大鼠肺动脉平滑肌内质网钙信号的变化及意义。方法:细胞水平：钙荧光探针(Fura-2/AM)负载大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs），荧光分光光度法，细胞外液无Ca2+及含Ca2+，在常氧（37 ℃、5% CO2、21 %O2、74 %N2 ）和急性低氧(37 ℃、5% CO2、2% O2、93 %N2)时，检测理阿诺碱（RD）和环匹阿尼酸（CPA）等对细胞浆内游离钙离子浓度（［Ca2+］i）的影响；离体血管环水平：相同条件，离体血管灌流方法检测肺动脉环张力变化。结果:(1)急性低氧时［Ca2+］i升高：常氧组［Ca2+］i为（96.99±7.16） nmol/L，低氧组为(257.06±32.48) nmol/L (P<0.01)。(2)与低氧组比较，预先用RD或普鲁卡因(procain)抑制内质网理阿诺碱受体敏感钙库，随后再给予低氧刺激时［Ca2+］i不升高，为（100.91±11.21） nmol/L (P<0.01)；而用CPA或thapsigargin（TG）抑制内质网摄取Ca2+，再给低氧刺激时［Ca2+］i呈升高状态(P>0.05)，而在细胞外液含钙及低氧下CPA及TG引起［Ca2+］i进一步升高(P<0.05)。(3)低氧引起肺动脉环收缩：常氧对基础张力无影响，低氧引起肺动脉环收缩，最大收缩张力达（49.28±8.64） g/g,P<0.01。(4)与低氧组比较，预先用RD或procain抑制内质网理阿诺碱受体敏感钙库，再给予低氧刺激，肺动脉环不收缩，最大收缩张力（3.75±1.14） g/g, P<0.01；而用CPA或TG后，再给予低氧刺激，肺动脉环呈收缩状态(P>0.05)，而在细胞外液含钙及低氧下CPA及TG引起肺动脉环进一步收缩(P<0.05)。结论:急性低氧可以引起内质网释放Ca2+，至少来自理阿诺碱受体敏感钙库的Ca2+释放参与了低氧肺血管收缩的发病机制；这可能是PASMCs自身具有的，既不依赖细胞外Ca2+内流，也不依赖血管内皮。     

K~ 通道在正常与慢性低氧大鼠低氧性肺血管收缩反应中的作用

目的 :探讨K 通道在慢性低氧致低氧性肺血管收缩反应降低中的作用。方法 :采用离体肺灌流实验 ,研究 4-AP(4-aminopyridine ,电压依赖性K 通道 -Kv阻滞剂 )、TEA(tetraethylamonium ,Ca2 激活性K 通道 -KCa阻滞剂 )、GLIB(glibenclamide,ATP敏感性K 通道 -KATP阻滞剂 )对正常与慢性低氧大鼠肺血管低氧反应的影响。结果 :4-AP、TEA均可使正常大鼠肺动脉基础压上升 ,且使其肺血管低氧反应明显增强 ;对于慢性低氧大鼠 ,其肺血管对低氧反应明显低下 ,4-AP、TEA升肺动脉基础压的作用明显低于对照鼠肺 ,GLIB也呈现升高肺动脉基础压力作用 ,4-AP、TEA、GLIB均可使肺血管低氧反应大大增强 ,增强的比例明显大于正常对照组。结论 :在离体灌流鼠肺HPV中 ,Kv、KCa的开放起调节作用 ,大鼠经慢性低氧后 ,肺血管反应性明显降低 ,可能与Kv、KCa、KATP在HPV中的调节作用相对增强有关     

睡眠间歇低氧大鼠心室重塑与心肌细胞凋亡和Rho激酶表达的关系

目的 观察睡眠中间歇低氧状态下大鼠心室重塑、血液动力学异常与心肌细胞凋亡和Rho激酶表达的关系,探讨间歇低氧与心室重塑和心力衰竭之间关系的分子机制.方法 24只雄性Wistar大鼠分3组,每组8只.给予适度限制饮食量的普通饮食和每天正常运动量游泳1h,分为常氧(A组)、间歇低氧(B组)、间歇低氧+法舒地尔(C组),60...     

白藜芦醇苷对低氧大鼠肺血管构型重建的影响

目的:观察白藜芦醇苷对慢性常压低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺血管构型重建的影响并探讨可能的机理。方法:29只健康SD大鼠随机分为正常对照组、单纯低氧组和低氧加白藜芦醇苷(PD)组。各组内按照肺小血管外径分为I组(30μm-100μm)和II组(101μm-200μm)。右心导管法检测大鼠肺动脉压力(mPAP)、微量滴定法检测血浆和肺匀浆中磷脂酶A₂(PLA₂)活性、光镜下观察肺小血管中膜厚度(MT%)和中膜面积(MA%)的变化。结果:低氧3周后大鼠mPAP、血浆及肺匀浆中PLA₂活性、肺小血管MA%、I组MT%显著高于对照组,II组MT%无显著性改变。低氧加PD预处理后上述改变明显轻于单纯低氧组。结论:PD可有效防治慢性常压低氧性大鼠肺动脉压力的升高,其机理与抑制大鼠肺血管构型重建有关。     

慢性低氧对大鼠肺血管左旋精氨酸/一氧化氮途径的影响

目的 :探讨慢性低氧对大鼠肺血管左旋精氨酸 /一氧化氮 (Ｌ -Ａｒｇ/ＮＯ)途径的影响。方法 :健康雄性ＳＤ大鼠 40只 ,体重 2 0 0～ 2 50ｇ,随机分为对照 (Ｃ)组与低氧 (Ｈ)组 ,每组 2 0只。将低氧组大鼠置于常压低氧舱内 ,舱内充入氮气使氧浓度维持在 1 0 %± 0 5% ,ＣＯ2 浓度低于 3% ,每天 8ｈ ,每周 6ｄ ,连续 4周。对照组大鼠除吸入空气外 ,其它饲养条件与低氧组相同。实验 4周后 ,给大鼠戊巴比妥钠 ( 35ｍＬ/ｋｇ)腹腔麻醉后 ,采用右心导管法测量大鼠肺动脉压力 ,分别称取右室 (ＲＶ)和左室加室间隔 (ＬＶ Ｓ)的重量 ,以ＲＶ/ＬＶ …     

低氧对大鼠肺组织中介素及其受体系统表达的影响

目的探讨低氧对大鼠肺组织中介素/肾上腺髓质素2(IMD/ADM2)及其受体系统[降钙素受体样受体(CRLR)和受体活性修饰蛋白(RAMPs)]的变化及意义。方法清洁级雄性SD大鼠20只随机均分成对照组和低氧组。采用放免法检测血浆与肺组织中IMD/ADM2及其横向同源物ADM的含量,RT-PCR技术检测肺组织中IMD/ADM2、ADM及其受体系统mRNA的表达。结果①低氧组大鼠平均肺动脉压、右心室与左心室加室间隔重量比[RV/(LV S)]显著高于对照组(P<0.01);②低氧组大鼠肺组织中IMD/ADM2含量显著低于对照组(P<0.01),而ADM含量却显著高于对照组(P<0.01);血浆IMD/ADM2浓度低氧组显著高于对照组(P<0.01);③低氧组大鼠肺组织中IMD/ADM2和ADM mRNA水平均显著高于对照组(P<0.05),而RAMP1 mRNA水平显著低于对照组(P<0.01)。结论在大鼠低氧性肺动脉高压的形成过程中的早期阶段,IMD/ADM2蛋白和基因的表达存在差异性,而RAMP1基因表达下调。     

慢性间歇性低氧对麻醉大鼠心血管系统的影响

目的观察慢性间歇低氧对麻醉大鼠心血管系统的影响。方法通过随机数字表法将72只SD雄性大鼠分为3组,每组24只,分别为常氧对照组(对照组)、常氧麻醉组(模型组)和慢性间歇低氧组(低氧组)。对照组呼吸正常空气,模型组给予用10%水合氯醛0.3 m L/kg腹腔注射麻醉,低氧组在模型组的基础上给予8 h/d慢性间歇低氧刺激。比较各组大鼠的超声心动数据、血压、内皮素-1、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的差异。28 d后处死大鼠,观察各组大鼠心肌细胞结构的改变。结果对照组大鼠心肌形态正常,细胞排列均匀,未见肿胀和炎症;模型组大鼠心肌细胞排列较均匀,未出现肥大和炎性改变;低氧组大鼠心肌细胞排列不均匀,肥大、肿胀、变形,核大深染,心肌组织有明显炎性改变。对照组大鼠心肌细胞核及胞浆呈均匀排列,形态较均一,与对照组比较,模型组细胞形态变化不大,低氧组大鼠心肌细胞形态明显改变,细胞形态、大小的不均一增加,凋亡细胞的颜色由浅变深。低氧组大鼠尾动脉收缩压明显高于对照组和模型组,LVEF显著低于对照组和模型组,差异均具有统计学意义(P0.05)。超声检测值提示低氧组大鼠LVID稍微变大,左心腔扩大,舒张功能尚正常,低氧组和模型组的LVDs均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05),低氧组大鼠的RBC、HCT显著高于对照组和模型组,差异具有统计学意义(P0.05),而低氧组大鼠的dp/dtmax和-dp/dtmax显著高于对照组和干预组,差异具有统计学意义(P0.05),低氧组的血清内皮素-1水平显著高于对照组和模型组,而低氧组的血清NO_2~-/NO_3~-总和与eNOS显著低于对照组和模型组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论慢性间歇低氧可造成麻醉大鼠心功能损伤,此种损伤可能通过氧化应激引起血清内皮素-1、NO含量失衡,导致内皮功能障碍,进而损伤心肌。     

肾上腺髓质素缓解大鼠低氧性肺动脉高压

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)对大鼠低氧性肺动脉高压的防治作用及机制。方法雄性Wistar大鼠18只,分为对照组、低氧组和低氧 ADM组,每组6只。持续皮下注射ADM1-50后,测定平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数RV/(LV S)、肺小动脉病理及形态计量学和体循环平均压(mSBP),放免法测定肺动脉血浆ADM水平,原位杂交测定肺动脉ADMR mRNA的表达。结果①低氧组大鼠mPAP,RV/(LV S),管壁厚度与血管外径比值(MT%)及管壁面积与血管面积比值(MA%)均显著升高(P<0.01);ADM组显著缓解以上变化(P<0.01)。②低氧组与低氧 ADM组肺动脉血浆ADM浓度均高于对照组,且低氧 ADM组较低氧组ADM浓度低(P<0.05)。③低氧组与低氧 ADM组的ADMR mRNA表达较对照组增强(P<0.01)。结论持续皮下注射ADM对慢性低氧所致的肺动脉高压及肺血管重塑有预防和部分逆转作用。     

内源性一氧化碳对低氧大鼠肺动脉胶原代谢的影响

探讨内源性一氧化碳 (CO)对低氧大鼠肺动脉胶原代谢的作用及其机制。采用常压低氧大鼠肺动脉高压模型 ,观察血红素加氧酶 (HO)抑制剂锌原卟啉 9(ZnPP 9)对肺动脉平均压 (PAMP)和肺组织匀浆碳氧血红蛋白 (Hb CO)含量的影响 ,并用免疫组织化学和核酸原位杂交法分别观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达和肺动脉Ⅲ型前胶原[Proα1 (Ⅲ )胶原 ]mRNA、间质性胶原酶 (MMP 1)mRNA、金属蛋白酶组织抑制因子 1(TIMP)mRNA表达的变化。结果发现ZnPP 9使低氧大鼠PAMP明显升高 ,肺组织匀浆CO含量明显降低 ;ZnPP 9显著促进低氧大鼠肺动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达 (P <0 0 1)和Proα1 (Ⅲ )胶原mRNA表达及MMP 1mRNA与TIMP 1mRNA表达 (P <0 0 1)。内源性CO可能通过抑制胶原蛋白的合成对低氧大鼠肺动脉胶原代谢发挥重要的调节作用。     

儿茶酚抑素对间歇低氧高血压大鼠的影响及机制

目的:探讨儿茶酚抑素(CST)对间歇低氧高血压大鼠的作用及机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为3组:control组、IH(间歇低氧组)组和IH+CST组(于低氧前3 d皮下埋植含CST 20 nmol·kg~(~(-1))·d~(-1)的微量渗透泵)。后2组置于间歇低氧舱中,舱内氧浓度为(5±0.5)%~(21±0.5)%,低氧-复氧循环时间为120 s(60 s+60 s),8 h/d,共3周。颈总动脉插管测收缩压(SP)、舒张压(DP)和平均压(MP),检测血浆中氧化/抗氧化损伤指标,Western blot法检测主动脉和肾组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达的变化。结果:SP、DP及MP,IH组均比control组高(P0.01),而IH+CST组则显著低于IH组(P0.01)。IH组的MPO和MDA含量显著高于control组(P0.05),而SOD和羟自由基抑制率显著低于control组(P0.01);IH+CST组的MPO和MDA明显低于IH组(P0.05),SOD和羟自由基抑制率显著高于IH组(P0.01)。与control组相比,IH组大鼠主动脉和肾组织胞浆、胞核中Nrf2蛋白的表达均显著下调(P0.05);IH+CST组与IH组相比,胞浆中Nrf2蛋白的表达显著下调(P0.05),而胞核中Nrf2蛋白的表达显著上调(P0.05)。结论:CST有减轻间歇低氧致大鼠高血压的作用,该作用可能与其通过Nrf2-ARE信号通路调节氧化应激反应有关。     

芒果苷减轻低氧致原代大鼠心肌细胞的凋亡

目的观察芒果苷对低氧诱导的原代大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法无菌分离、培养原代大鼠心肌细胞,对心肌细胞予以2、4、8和12 h的低氧处理,根据心肌细胞凋亡结局确定低氧诱导的原代大鼠心肌细胞凋亡模型的低氧处理时间。将心肌细胞分为正常组、低氧组和芒果苷干预组,每组平行做3批次实验,每批次实验平行做3个复孔。实验结束后,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;分光光度法检测心肌细胞裂解液中凋亡蛋白酶caspase-3和caspase-9的活性;Western blot检测促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平。结果低氧处理12 h后,低氧组较对照组心肌细胞凋亡率显著上升(P<0.05);凋亡蛋白酶caspase-3和caspase-9的活性均显著上升(P<0.05);促凋亡蛋白酶Bax的蛋白表达量显著上升(P<0.05),抑凋亡蛋白酶Bcl-2的蛋白表达量显著下降(P<0.05)。经150μmol/L芒果苷干预后能显著缓解低氧组的各项变化。结论芒果苷能显著减轻低氧诱导的原代大鼠心肌细胞凋亡。     

不同低氧水平暴露对大鼠空间学习记忆、探究能力的影响

目的:观察不同低氧水平暴露对大鼠空间学习记忆、自主探究行为和焦虑情绪的影响。方法:将80只健康雄性SD大鼠随机分为11%和15%氧浓度组,每组均包括对照组(C11、C15)、4 h组(4H11、4H15)、8 h组(8H11、8H15)和12 h组(12H11、12H15),每组10只。C11和C15组大鼠在常氧条件下饲养7 d,其余各组大鼠接受低氧暴露,持续7 d,结束后分别检测大鼠的空间学习记忆、自主探究行为和焦虑情绪的行为学表现。结果:(1)低氧对大鼠空间学习记忆的影响,与C15相比,8H15大鼠第1 d逃避潜伏期显著延长(P0.05),其第1 d与第2 d、第1 d与第3 d逃避潜伏期的差值显著增加(P0.05)。(2)低氧对大鼠自主探究行为和焦虑情绪的影响,与C15相比,4H15大鼠在总运动距离、跨格数、站立次数和进入开放区域次数方面明显减少(P0.05),12H15大鼠在跨格数、进入开放区域次数和开放区域时间方面均显著降低(P0.05,P0.01)。结论:11%和15%氧浓度每天分别暴露8 h、4 h、12 h均会减少大鼠的自主探究行为,增加焦虑情绪。     

胍基丁胺抑制低氧培养大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖

目的：观察胍基丁胺对低氧培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响。 方法： 采用组织块贴壁法原代培养大鼠PASMCs，取对数生长期PASMCs分对照组和胍基丁胺组，比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活力，液闪计数仪测定［3H］-TdR掺入量，流式细胞仪测定细胞周期，图像分析法测定增殖细胞核抗原含量（PCNA）作为细胞增殖的指标。 结果： 常氧和低氧(2.5% O2)培养时，胍基丁胺组LDH活力与对照组LDH活力均无显著差异（P>0.05）；与单纯低氧组相比，50 μmol/L胍基丁胺可显著减少低氧培养PASMCs的［3H］-TdR掺入量(P<0.01)。随着胍基丁胺浓度从50 μmol/L逐渐增加至500 μmol/L，大鼠PASMCs ［3H］-TdR的掺入量亦随之减少(P<0.01)。与单纯低氧组相比，胍基丁胺可显著减少低氧培养PASMCs的PCNA的含量(P<0.01)，使G0/G1期细胞比例显著增加，G2/M期细胞比例显著减少(P<0.01)。 结论： 胍基丁胺对PASMCs不产生明显的细胞毒性作用；胍基丁胺可抑制低氧培养大鼠PASMCs的增殖，这种抑制作用呈剂量依赖性。     

低氧培养促进大鼠髓核间质干细胞增殖

目的研究低氧培养对大鼠髓核间质干细胞(NPMSCs)增殖的影响。方法分离大鼠尾椎髓核获得NPMSCs并进行体外扩增培养,观察细胞形态,流式细胞仪鉴定细胞免疫表型。取第3代NPMSCs分为常氧组和2%低氧组,分别培养7 d及14 d,观察细胞形态;MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞活力和RT-q PCR检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、沉默信息调节蛋白1(SIRT1)及SIRT6的mRNA表达情况。结果原代NPMSCs细胞早期可形成葵花样细胞集落,传代后细胞增殖明显加快,细胞形态以纺锤形为主。第3代细胞高表达干细胞相关阳性表面抗原分子,低表达干细胞相关阴性表面抗原分子。低氧组细胞形态以多角形为主,细胞更容易聚集成团块,且细胞增殖速度明显加快(P0.05),细胞凋亡率明显下降(P0.05)。低氧组HIF-1α、VEGF、GLUT-1、SIRT1及SIRT6表达量明显高于常氧组(P0.05)。结论 2%O2的低氧环境促进髓核间质干细胞增殖,其机制可能与SIRT1及SIRT6介导的HIF-1α信号通路有关。     

间歇低氧促进大鼠海马神经细胞低氧诱导因子1和存活素的表达

目的通过模拟阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的发病特征,建立大鼠间歇性低氧(IH)模型,观察慢性IH早期大鼠海马CA1区低氧诱导因子1(HIF-1)、存活素(survivin)的表达及细胞凋亡情况。方法72只雄性Wistar大鼠随机均分为对照组和间歇低氧(50mL/LIH)组,对照组向低氧箱内持续注入压缩空气,间歇低氧组分别暴露于间歇性低氧条件下(暴露时间每天7h,持续时间分别为3、7、14、21d)。免疫组织化学染色检测海马CA1区HIF-1、survivin蛋白的表达,原位末端标记法检测神经细胞凋亡。结果与对照组比较,海马CA1区神经细胞凋亡指数在间歇低氧3d时无明显差异,间歇低氧7、14、21d组凋亡指数均明显高于对照组,于21d达高峰。与对照组比较,间歇低氧组HIF-1、survivin蛋白的表达在各时间点均增加,14d达峰值后逐渐下降,两者表达呈正相关关系(r=0.836)。结论早期间歇低氧可诱导海马CA1区HIF-1、survivin蛋白的表达,二者在神经细胞凋亡的调控中可能有一定作用。     

雾化吸入亚硝酸钠对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压力及NO、H_2S水平的影响

目的:探讨雾化吸入一氧化氮供体亚硝酸钠(NaNO2)后对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺动脉压力及体内一氧化氮(NO)、硫化氢(H2S)水平的影响。方法:雄性Wistar大鼠50只,随机分为常氧空白组、常氧亚硝酸钠组、低氧空白组、低氧生理盐水组、低氧亚硝酸钠组,采用常压低氧法建立大鼠HPH动物模型。测定肺动脉平均压(mPAP)、右室重量、左室+室间隔重量并计算右心室肥厚指数(RVHI=RV/LV+S);血清及肺匀浆NO含量、血浆H2S水平测定;光镜观察肺小动脉结构改变,弹力纤维+VG染色观察弹力纤维、肌纤维及胶原纤维增生情况。结果:低氧前各组大鼠体重无差别,而低氧后大鼠体重差别显著(P0.05);低氧各组大鼠的mPAP、RVHI值与常氧各组相比均升高,低氧亚硝酸钠与低氧空白组和低氧生理盐水组比较,mPAP和RV/(LV+S)值降低(P0.05);血清中NO水平低氧各组较常氧各组均降低(P0.05);肺组织匀浆中NO水平:低氧空白组和低氧生理盐水组较常氧各组降低(P0.05);而低氧亚硝酸钠组与常氧空白组比较无显著差异(P0.05);血中H2S水平:低氧各组均较常氧各组降低(P0.05);低氧亚硝酸钠组与低氧空白组、低氧生理盐水组比较升高(P0.05)。光镜下,常氧空白组管腔结构正常;常氧亚硝酸钠组未见明显变化;低氧空白组肺小动脉平滑肌增生,胶原纤维增多,管壁增厚,管腔狭窄;低氧生理盐水组变化同低氧空白组;低氧亚硝酸钠组管壁狭窄较低氧空白组有所减少。结论:雾化吸入亚硝酸钠能有效降低肺动脉压力,减轻右室重构,可调节大鼠体内NO、H2S水平,可能通过直接作用或在体内影响气体信号分子的分泌及合成来实现对HPH的防治。     

低氧对大鼠大脑皮层神经干细胞增殖和分化的影响

目的:观察和分析不同低氧浓度对大鼠大脑皮层神经干细胞(neural stem cells,NSC S)增殖和分化的影响。方法:在1%O2、4%O2和常氧环境(20%O2)下培养新生SD大鼠神经干细胞,对神经球计数并测量其直径,分析不同低氧对神经干细胞增殖效率和增殖速度的影响;分化48 h后行β微管蛋白Ⅲ(β-tubulin III)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫细胞荧光染色,对神经元和星形胶质细胞进行计数并分别计算各占的比例。结果:(1)低氧对神经干细胞增殖效率和增殖速度的影响:1%低氧组神经球数量明显低于常氧对照组,具有显著性差异(P<0.05);4%低氧组神经球数量高于对照组,具有显著性差异(P<0.05)。在24 h、36 h和48 h,1%低氧组神经球的直径都小于对照组,在24 h和36 h时具有显著性差异(P<0.05),在48 h具有非常显著性差异(P<0.01);在24 h、36 h和48 h,4%低氧组神经球的直径都大于对照组,在36 h时具有显著性差异(P<0.05),在48 h具有非常显著性差异(P<0.01)。(2)1%低氧组神经元的比例(0.614±0.056)显著高于其对照组(0.471±0.067)(P<0.01);而1%低氧组星形胶质细胞的比例(0.241±0.051)低于其对照组(0.322±0.067)(P<0.05)。4%低氧组神经元的比例(0.625±0.072)显著高于其对照组(0.513±0.032)(P<0.05);而4%低氧组星形胶质细胞的比例(0.237±0.053)显著低于其对照组(0.285±0.042)(P<0.05)。结论:和常氧对照组相比,4%O2促进大鼠大脑皮层神经干细胞的增殖,而1%O2抑制了神经干细胞的增殖;1%O2和4%O2都促进神经干细胞向神经元方向分化,同时抑制向星形胶质细胞分化,1%O2的这种作用更为显著。