胃癌淋巴管生成与淋巴结转移的关系

目的:研究胃癌淋巴管生成与淋巴结转移的关系。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)mRNA及其蛋白在5株胃癌细胞株和3对伴有淋巴结转移的胃癌组织及相应的正常黏膜中的表达。此外,还应用免疫组织化学方法检测86例胃癌标本的淋巴管密度(LVD)和VEGF-C蛋白的表达。结果:VEGF-C mRNA和蛋白高表达于3株胃癌细胞,而VEGFR-3 mRNA和蛋白在上述3个细胞株中均呈弱表达。VEGF-C和VEGFR-3 mRNA均表达于3对伴有淋巴结转移的胃癌和相应的正常黏膜组织中,但在正常组织中的表达水平低于肿瘤组织。VEGF-C蛋白在66.3%(57/86)的病例中呈阳性表达。在伴淋巴结转移的胃癌中,VEGF-C表达较无淋巴结转移者更显著(P<0.001),其表达与淋巴管浸润(P<0.001)和TNM分期(P<0.01)均密切相关,但与病人的年龄和性别、肿瘤大小、位置、组织学类型、浸润深度及远处转移均无明显相关。LVD则与VEGF-C蛋白表达(P<0.001)、淋巴结转移(P<0.01)、淋巴管浸润(P<0.01)、TNM分期(P<0.05)及组织学类型(P<0.05)密切相关,但与病人的年龄和性别、肿瘤大小、位置、浸润深度及远处转移无明显相关。结论:在胃癌中,VEGF-C可能通过VEGFR-3信号通道促进淋巴管生成,从而增加胃癌淋巴结转移率。因此,肿瘤淋巴管生成可能成为治疗胃癌的一个新靶点。     

血管和淋巴管生成及淋巴转移的关系

目的探讨胃癌组织中血管表皮生长因子C(VEGF-C)表达与血管和淋巴管密度及肿瘤淋巴转移的关系. 方法采用免疫组化SP法检测68例胃癌组织中VEGF-C、CD-31及淋巴管内皮标记物VEGFR-3,计算VEGF-C表达的阳性率及肿瘤微血管和微淋巴管密度. 结果淋巴结阳性组中VEGF-C阳性率(70%)显著高于淋巴结阴性组(30%), P<0.05;与VEGF-C阴性组(24.4±2.1)比较,VEGF-C阳性组淋巴管密度(29.6±3.0)明显增高,P<0.05,而微血管密度在两组之间差异无显著意义,P>0.05;与淋巴结阴性组比较,在淋巴结转移阳性组淋巴管密度(31.6±2.1)、微血管密度(40.2±2.3)均有显著提高,P<0.05. 结论 VEGF-C主要通过调节胃癌组织微淋巴管的生成而影响胃癌淋巴结转移;微淋巴管密度与微血管密度均为胃癌淋巴结转移的重要影响因素.     

肿瘤淋巴管生成与肿瘤淋巴转移的研究进展

肿瘤淋巴管的生成在肿瘤转移过程中起着至关重要的作用，由于长期以来缺乏特异性识别新生淋巴管的标志物，肿瘤淋巴管生成的研究未引起人们足够的重视，远远落后于肿瘤相关血管生成的研究。近年来随着淋巴分子生物学研究的深入，肿瘤淋巴管的研究也取得了令人鼓舞的进展。许多研究证实了VEGF-C及VEGF-D对肿瘤淋巴管生成的调控作用，使得肿瘤淋巴管生成的研究开始成为肿瘤淋巴转移研究的热点。     

胃癌淋巴管生成与淋巴管密度的相关性研究

胃癌的发病率日益增加,而淋巴转移是导致患者最终死亡的重要原因之一.血管内皮生长因子C(VEGF-C)、血管内皮生长因子D(VEGF-D)与其特异性的受体血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)结合能够促进淋巴管生成,并促进淋巴管转移,并且与肿瘤的淋巴管密度密切相关.近年来对于胃癌的淋巴管的研究正在开展,本文就胃癌淋巴管生成机制、淋巴管生成与淋巴管密度关系的最新研究进展以及此项研究的临床意义加以综述.     

微淋巴管密度和VEGF-C在胃癌淋巴转移的相关分析

目的:探讨微淋巴管密度(MLVD)和VEGF-C水平与胃癌淋巴转移的关系。方法:应用免疫组化法分别检测56例胃癌和18例正常组织中血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达和D2-40标记的MLVD。分析两者间的相关性。结果:胃癌组织中VEGF-C的阳性表达率明显高于正常胃组织(均P<0.05),胃癌组织中MLVD明显高于正常胃组织(均P<0.05);VEGF-C的表达以及MLVD与胃癌浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05),且MLVD与胃癌分化程度有关(P<0.05);VEGF-C阳性胃癌组织MLVD明显大于其阴性胃癌组织(P<0.05)。结论:VEGF-C的表达和MLVD与胃癌淋巴结转移有关,VEGF-C是预测胃淋巴结转移的有效指标之一。     

血管内皮生长因子D促进胃癌淋巴管生长

目的研究血管内皮生长因子D（VEGF-D）与胃癌淋巴管转移之间的关系。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）从人胃癌旁正常组织中扩增人VEGF-D全长cDNA，经T-A克隆酶切鉴定及测序得到完整的序列后，亚克隆并构建pEGFP／VEGF-D真核表达载体，转染低表达VEGF-D的胃癌细胞株SGC7901，通过体外G418抗生素筛选得到高表达VEGF-D的肿瘤细胞克隆，用这种高表达VEGF-D的胃癌细胞接种于裸鼠皮下，用淋巴管内皮细胞透明质酸盐受体（LYVE-1）行免疫组织化学染色观察肿瘤淋巴管密度和形态。结果对照组和转染pEGFP／VEGF-D组肿瘤的重量分别为（1．13±0．40）g和（2．24±0．82）g，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。肿瘤组织内的淋巴管密度分别为2．89±1．32和5．74±1．30，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。周边肿瘤组织存在扩张的功能性淋巴管。结论VEGF-D在胃癌中可能通过主动促进淋巴管生长来促进肿瘤生长和远处转移。     

胃癌组织中血管表皮生长因子C表达与血管和淋巴管生成及淋巴转移的关系

目的探讨胃癌组织中血管表皮生长因子C(VEGF C)表达与血管和淋巴管密度及肿瘤淋巴转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测 6 8例胃癌组织中VEGF C、CD 31及淋巴管内皮标记物VEGFR 3,计算VEGF C表达的阳性率及肿瘤微血管和微淋巴管密度。结果淋巴结阳性组中VEGF C阳性率 (70 % )显著高于淋巴结阴性组 (30 % ) ,P <0 0 5 ;与VEGF C阴性组 (2 4 4±2 1 )比较 ,VEGF C阳性组淋巴管密度 (2 9 6± 3 0 )明显增高 ,P <0 0 5 ,而微血管密度在两组之间差异无显著意义 ,P >0 0 5 ;与淋巴结阴性组比较 ,在淋巴结转移阳性组淋巴管密度 (31 6± 2 1 )、微血管密度 (4 0 2± 2 3)均有显著提高 ,P <0 0 5。结论VEGF C主要通过调节胃癌组织微淋巴管的生成而影响胃癌淋巴结转移 ;微淋巴管密度与微血管密度均为胃癌淋巴结转移的重要影响因素     

血管内皮生长因子D和微淋巴管密度及微血管密度与直肠癌进展的关系

目的研究血管内皮生长因子D（VEGF—D）、微淋巴管密度（MLD）和微血管密度（MVD）在直肠癌中的表达情况及它们与直肠癌发展、转移的相关性。方法选取手术切除并经病理证实的中低位直肠癌标本80例、直肠息肉标本40例和正常直肠组织80例，应用免疫组织化学方法测定其VEGF—D的表达和MLD、MVD水平。结果（1）VEGF—D在直肠癌组织中的阳性率为55％（44／80），直肠息肉和正常直肠组织则均为0（P〈0．05）；MLD在直肠癌组织中为2．80±1．31，直肠息肉中为0．50±0．72，正常直肠组织中MLD为0．25±0．44，直肠癌组织中的MLD明显高于直肠息肉和正常直肠组织（P〈0．05）；MVD在直肠癌组织中为80．10±23．18，直肠息肉中为27．00±11．01，正常直肠组织中为10．45±5．34，直肠癌组织中的MVD明显高于直肠息肉和正常直肠组织（P〈0．05）。（2）直肠癌组织中的VEGF-D表达和MLD、MVD水平与淋巴结转移、术前远处转移有明显相关性（P〈0．01，P〈0．05）。（3）直肠癌组织中的MLD与VEGF—D呈正相关，随着VEGF—D表达的增高MLD明显增高（P〈0．01）。结论VEGF-D和MLD是反映直肠癌淋巴管生成的理想指标，同时也是反映直肠癌进展程度的重要指标，直肠癌淋巴管生成及血管生成可能具有协同作用。     

VEGF-C在胃癌组织中的表达与淋巴管生成及淋巴结转移的相关性研究

摘要：采用免疫组化S-P法检测20例正常胃组织、44例无淋巴结转移的胃癌组织和44例有淋巴结转移的胃癌组织中VEGF-C表达水平，分析其与微淋巴管密度（LMVD）、淋巴结转移的关系。 结果示, VEGF-C在胃癌组织组的表达明显高于正常胃组织组（P＜0.01）；胃癌组织中VEGF-C的表达强度与微淋巴管密度（LMVD）有关（P＜0.05）；有淋巴结转移组胃癌组织的微淋巴管密度（LMVD）明显高于无淋巴结转移组（P＜0.01）；胃癌组淋巴结转移的数目与VEGF-C的表达强度有关（P＜0.05）。提示：VEGF-C的表达与胃癌淋巴管生成及淋巴结转移关系密切；VEGF-C和微淋巴管密度（LMVD）是胃癌淋巴结转移的重要影响因素。     

胰腺癌淋巴管生成与血管内皮生长因子C的关系

目的探讨人胰腺癌组织中血管内皮生长因子C（VEGF-C）和其受体3（VEGFR-3）的表达与胰腺癌微淋巴管密度（LVD）、区域淋巴结转移的关系。方法免疫组织化学SP法检测67例人胰腺癌组织VEGF-C的表达情况，VEGFR-3结合Ⅳ型胶原（collagen type Ⅳ）进行LVD计数并结合临床和病理资料进行分析。结果VEGF-C的表达和胰腺癌分化程度、区域淋巴结转移、远处转移均呈显著相关（P〈0．05），LVD与胰腺癌分化程度、区域淋巴结转移、VEGF-C的表达程度呈明显相关（P〈0．01）。VEGFR-3不仅在肿瘤淋巴管内皮细胞上表达还在部分肿瘤血管内皮细胞上表达。结论VEGF-C通过其受体VEGFR-3促进胰腺癌淋巴管生成、区域淋巴结转移。     

肝细胞生长因子在胃癌病人血清中的表达及意义

目的:肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种多肽生长因子,其促进细胞增殖,诱导细胞迁移、侵袭及参与血管生成,在肿瘤发生发展过程中具有重要作用。本研究通过检测胃癌病人血清HGF水平,分析其与胃癌临床病理特征的关系,并与常用肿瘤标志物CA19-9、CEA进行比较,探讨胃癌病人血清中HGF的表达及其临床意义。方法:用酶联免疫吸附夹心法检测80例胃癌病人术前血清HGF、CA19-9、CEA水平,并观察60例病人根治术后血清HGF变化。结果:胃癌病人血清HGF水平(2.94±2.67)μg/L明显高于正常对照组(1.02±0.31)μg/L(P=0.002);分层分析发现,随着疾病的进展,血清HGF水平逐渐升高[Ⅰ期(2.19±2.12)μg/L,Ⅱ期(2.53±2.38)μg/L,Ⅲ期(3.92±3.45)μg/L,Ⅳ期(4.13±3.71)μg/L];Ⅲ期和Ⅳ期分别与Ⅰ期进行比较,均有显著差异(P<0.05)。另外,80例病人血清HGF、CA19-9和CEA的阳性率分别为80%、16.2%和5.0%,HGF阳性率明显较高(P<0.01)。结论:胃癌病人血清HGF水平明显高于正常对照组,且血清HGF的表达水平与胃癌淋巴结及肝脏转移呈正相关.血清HGF表达水平可作为反映胃癌生物学行为和判断预后的参考指标。     

PIGF及其受体Flt-1在胃癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨眙盘生长因子（PIGF）及其受体血管内皮生长因子受体-1（Flt-1）-5胃癌血管形成和临床病理特点的关系。方法：应用免疫组织化学染色法检测84例胃癌组织及20例正常胃组织中的PIGF和Flt-1,并计算以CD34为标志的微血管密度（MVD）,分析其与胃癌临床病理因素及预后的关系。结果：PIGF和Flt-1在胃癌组织中的表达均高于正常胃组织（P〈0．05）。PIGF表达与胃癌的组织学分化程度、浸润深度、Borrmann分型、淋巴结转移有关（P〈O．05）;Flt-1表达与胃癌的浸润深度、Borrmann分型有关（P〈0．05）;MVD与肿瘤浸润深度、Borrmann分型、淋巴结转移有关（P〈0．05）。PIGF与Flt-1表达阳性患者的5年存活率分别为45．5％、40.4％。浸润深度、Flt-1阳性表达为影响胃癌患者生存的独立预后因素。结论：PIGF／Flt-1通路可能在胃肿瘤血管发生及发展过程中起重要作用,从而影响胃癌的进展及预后。     

血管内皮生长因子C对胃癌淋巴结转移及微转移的预测价值研究

目的分析胃癌患者血清中血管内皮生长因子C（VEGF-C）的表达情况及其与淋巴结微转移的关系,初步探讨VEGF-C对胃癌患者的临床价值。 方法选择2012年1月至2016年1月间中山市人民医院行胃癌根治术的患者113例以及同期的健康成人志愿者30例,采用酶联免疫吸附技术（ELISA）检测胃癌患者及健康人群的血清VEGF-C的蛋白质量浓度;免疫组织化学染色法检测常规苏木精-伊红（HE）染色无淋巴结转移的患者淋巴结微转移情况;分析VEGF-C蛋白在血清的表达与患者临床病理资料以及淋巴结微转移之间的关系。 结果113例胃癌患者的血清VEGF-C蛋白质量浓度为（1 687.06±305.21）ng/L,显著高于健康对照的（729.46±182.31）ng/L,差异有统计学意义（t=8.61,P<0.05）。淋巴结转移组66例患者的血清VEGF-C质量浓度为（2 063.75±313.08）ng/L,显著高于无淋巴结转移组47例的（1 208.39±231.92）ng/L,差异有统计学意义（t=7.23,P<0.05）。淋巴结微转移组15例共41枚的VEGF-C质量浓度为（1 306.01±265.69）ng/L,与无淋巴结微转移组32例（1 183.26±206.54）ng/L比较,差异无统计学意义（t=1.92,P>0.05）。不同TNM临床分期的胃癌患者VEGF-C表达水平差异有统计学意义（F=10.21,P<0.05）。以血清VEGF-C质量浓度1 705.60 ng/L为诊断界值,预测淋巴结转移的敏感度和特异度分别为77.3%和83.0%。 结论血清VEGF-C浓度可作为胃癌的辅助诊断指标,检测血清VEGF-C浓度对术前预测胃癌淋巴结转移和提高术前临床分期的准确性有益。血清VEGF-C浓度与胃癌淋巴结微转移的相关性不大。     

神经生长因子及其受体家族同步下调在胃癌发生中的作用

目的研究神经生长因子(NGF)及其受体家族在胃癌组织及其相对应正常胃黏膜中mRNA的表达,探讨它们在胃癌发生中的作用。方法5例胃癌患者癌组织mRNA及相对应的正常胃黏膜组织mRNA,等量混合分别构成胃癌组织mRNA组及正常胃黏膜mRNA组,α-33PdATP同位素标记反转录cDNA作探针,采用Microarray基因微阵列杂交技术,检测胃癌与相对应正常胃黏膜间NGF及其受体Trk家族mRNA表达,分析其表达差异。结果NGF及其受体Trk家族在胃癌组织及其相对应正常胃黏膜中均有不同程度的表达。与相对应正常胃黏膜相比,胃癌组织中NGF、BDNF、NT-3、NT-4/5、NT-6及受体TrkA、B、C均同时下调,NGF家族下调程度大于Trk家族,其中NT-3及BDNF下调程度最大。Trk家族中TrkC下调程度最大。结论与NGF及Trk家族在其它肿瘤组织中表达上调不同,NGF家族及Trk家族在胃癌组织表达下调,它们在胃癌发生中极可能是通过另一新的Ras或Raf信号传导途经,而发挥独特的促凋亡作用。     

肝细胞生长因子及其受体c—Met表达与结直肠癌同时性肝转移的相关性研究

目的探讨肝细胞生长因子及其受体c-Met（HGF-cMet）的表达与结直肠癌同时性肝转移的关系。方法2001年6月至2010年6月间有30例结直肠癌同性性肝转移患者在山东省肿瘤医院接受原发癌和肝转移癌一期根治性切除术,根据其是否伴有区域淋巴结转移分为实验Ⅰ组（T1～T4N1～N2M1,21例）和实验Ⅱ组（T1-T4N0M1,9例）。并选取与实验I组匹配的T4-T4N1-N2M0患者（21例）和T1～T4N0M0患者（21例）以及与实验Ⅱ组匹配的T1-T4N0M0患者（9例）作为对照。应用免疫组织化学方法检测原发灶、淋巴结转移灶及其肝转移灶中HGF和c-Met的蛋白表达水平。结果实验Ⅰ组（T1～T4N1-N2M1）原发灶HGF阳性表达率[71％（15／21）]明显高于其匹配的T1～T4N1～N2M0对照组[43％（9／21）]和T1～T4N0M0对照组[19％（4／21）]（均P〈0．05）;且c—Met阳性表达率[90％（19／21）]也明显高于T1～T4N0M0对照组[43％（9／21）,P〈0．05],但与T1-T4N1-N2M0对照组[86％（18／21）]的差异则无统计学意义（P〉0．05）。实验Ⅱ组（T1～T4N0M1）与其对照组（T1～T4N0M0）原发灶HGF阳性表达率（6／9比5／9．P〉0．05）和c-Met阳性表达率（8／9比6／9,P〉0．05）的差异均无统计学意义。实验Ⅰ组患者原发灶、淋巴结转移灶及肝转移灶中HGF和c—Met表达一致率分别为81％（17／21）和76％（16／21）。结论HGF及其受体c—Met可能对存在区域淋巴结转移的结直肠癌同时性肝转移的发生具有一定作用,而对无淋巴结转移的结直肠癌发生肝转移的作用可能较小。     

RNA干扰靶向抑制胃癌细胞血管内皮生长因子C表达的实验研究

目的 构建针对血管内皮生长因子C（VEGF-C）的RNA干扰质粒表达载体pSIH1-H1-copGFP,并评价其转染胃癌细胞后对VEGF-C表达的抑制作用.方法 设计并合成针对VEGF-C基因mRNA序列的3条短发夹RNA及1条阴性对照序列,克隆到pSIH1-H1-copGFP载体,重组构建RNA干扰质粒,并将其转染胃癌细胞（SGC7901）,采用RT-PCR分析转染后VEGF-C基因的表达情况.结果 重组构建pSIH1-H1-copGFP载体经双酶切及插入片断序列分析,表明其成功插入设计位点,并且序列完全一致.3种siRNA质粒表达载体的转染效率均为60%～70%,对VEGF-C mRNA表达的抑制率分别为35.4%、33.8%和81.5%.结论 RNA干扰质粒表达载体介导对VEGF-C基因的RNA干扰可明显抑制胃癌细胞中VEGF-C的表达,可能成为抑制胃癌淋巴管生成的一种有效手段.