噬菌体展示技术对金黄色葡萄球菌IsdB蛋白抗原表位的分析

金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus,S.aureus)感染已经成为世界难题,其耐药性的迅速出现及传播更加剧了它的危害.S.aureus疫苗研究中,一些表面蛋白具有较好的免疫原性,可作为疫苗候选物.IsdB是一种表面蛋白,具有较好的免疫原性,其抗原表位的确定对于以此蛋白为基础的单一蛋白疫苗或融合蛋白疫苗的研究和制备有很大意义.本论文以IsdB的单克隆抗体3B6株McAb为配基,从噬菌体随机七肽库中筛选抗体识别的模拟肽.经测序及序列比对分析,发现IsdB的抗原表位为空间构象,集中在NEAT结构域前端.本研究对于IsdB疫苗的研究具有一定的参考价值.     

噬菌体展示技术生物淘选CTGF表位的研究

噬菌体展示技术筛选缔组织生长因子（CTGF，connective tissue growth factors）蛋白表位。用含有30mmol／L葡萄糖的DMEM培养液干预人肾小球系膜细胞2d后，提取CTGF天然蛋白，应用Western blot—ting方法鉴定CTGF单克隆抗体的特异性；以CTGF单克隆抗体为筛选工具，对噬菌体随机12肽库进行筛选，逐步增加选择压力，经过3轮筛选后随机挑取4个克隆测序，用竞争抑制和间接ELISA方法检测噬菌体阳性克隆的特异性。Westernblotting分析显示，CTGF单克隆抗体能与CTGF天然蛋白及重组蛋白特异性结合。噬菌体文库经过3轮筛选后得到的阳性克隆，测序结果表明4个克隆的序列高度一致，推导获得小肽序列，命名为ZD521；竞争抑制和间接ELISA分析与预期结果一致。本研究用噬菌体展示技术成功获得与CTGF单抗高度结合的小肽，为CTGF功能研究以及进一步以该肽为疫苗预防和治疗纤维化疾病打下基础。     

应用噬菌体展示短肽探索腺病毒表位

腺病毒感染可以引起广泛的疾病,例如急性咽炎、气管炎、肺炎、结膜炎、角膜炎、及胃肠炎等,在我国引起肺炎的腺病毒绝大多数为3型或7型。对于腺病毒感染至今尚缺乏特异性地预防和治疗手段。本研究目的是为了获得含有中和抗体相关的3型腺病毒模拟表位短肽的噬菌体克隆,为设计新疫苗提供新的思路。从噬菌体肽库中筛选目的短肽是近年来发展起来的一项新技术,噬菌体肽库也称噬菌体表位库,即以噬菌体衣壳蛋白PⅢ为载体,插入一段编码外源短肽的随机基因片段,从而构成了一个长度固定、序列随机的短肽集合体。本研究用3型腺病毒中和抗体筛选噬菌体随机十五肽库,经三轮筛选后,随机挑取了22个噬菌体克隆,分别加入3型腺病毒感染的Hela细胞,用结晶紫染色法观察Hela细胞的病变程度。并选择一个有明显保护作用的,即病变程度较轻的阳性噬菌体克隆进行测序。结果发现8／22个克隆菌体短肽对3型腺病毒感染Hela细胞具有保护作用。其中一个有明显保护作用的噬菌体短肽的序列为：Leu-Val-Gly-Ile-Trp-His-Arg-Leu-Pro-Gly-Ala-His-Arg-Gly-Ala,即LVGI－WHRLPGAHRGA。我们得到的结论是噬菌体短肽可以模拟中和抗体相关的腺病毒表位,保护Hela细胞免受3型腺病毒感染。     

应用噬菌体肽库筛选NMDA受体抗原表位

目的利用噬菌体展示随机肽库技术,进行NMDAR1抗原表位研究.方法以R1JHL单克隆抗体作为筛选分子,生物淘洗噬菌体展示随机12肽文库.经过4轮的筛淘,ELISA结合实验鉴定阳性克隆,提取阳性克隆噬菌体单链DNA进行序列分析.结果对阳性噬菌体进行递呈肽氨基酸序列分析,获得一阳性克隆序列HYNLSSDRKVRL,与R1JHL单克隆抗体识别序列相比,两者存在一致性序列DRK.结论 DRK可能为NMDA受体抗原表位.     

黑素瘤抗原-3表位及基因治疗研究进展

<正>黑素瘤抗原-1(Melanoma antigen-1,MAGE-1)是Vander Bruggen等[1]于1991年在研究恶性黑素瘤时发现的人类第一个肿瘤特异性抗原,现已形成拥有24个结构上相似的MAGE基因成员的家族[2]。MAGE蛋白及其细胞毒性T淋巴细胞(Cytolytic T lymphocyte,CTL)表位不仅能在体外有效诱     

噬菌体展示技术的概况与应用

噬菌体展示技术是一项独特的基因重组表达技术,亦是一种简便、有效的筛选工具,通过淘选,得到与靶标具有高亲和性和选择性的蛋白质或者多肽。GP Smith于1985年首次实现了利用丝状噬菌体表达外源基因,开始了噬菌体展示技术的研究;抗体噬菌体展示成为第一种也是最广泛使用的体外筛选技术,目前已有多种人抗体通过该技术获得并被批准用于临床治疗;噬菌体随机肽库筛选获得的多肽可以作为分子载体靶向运载药物,也可以直接与靶点分子特异性结合,发挥生物治疗的作用。近年来,该技术在寻找肿瘤特异性靶分子和靶向治疗方面显示了其独特的优势。噬菌体展示衍生产品在疾病的诊断和治疗中发挥着重要作用,并且将在不同的医学技术领域广泛应用,包括生物传感、监测、分子成像、基因治疗、疫苗开发和纳米技术。本文对噬菌体展示技术的概况及其应用进行了综述,探讨了噬菌体展示技术的优势和不足,为实现噬菌体展示技术在不同技术领域的广泛应用奠定一定的基础。     

沙眼衣原体主要外膜蛋白抗原表位的研究进展

沙眼衣原体是人类生殖道感染的常见病原菌，其主要外膜蛋白具有较强的抗原性，是目前沙眼衣原体疫苗靶抗原的最佳选择。本文就沙眼衣原体主要外膜蛋白的CTL表位、Th细胞表位和B细胞表位的研究进展作一简要综述。     

B细胞蛋白质抗原表位的研究方法进展

Ｂ细胞抗原表位的研究对于免疫识别基础理论和实际应用有积极意义。文章归纳总结了近年来用于Ｂ细胞抗原表位分析的几种常用方法。     

彩色超声对诊断阑尾炎的价值

目的：探讨彩色超声对阑尾炎的临床诊断价值。方法：对238例阑尾炎患者用4.0MHz低频探头检测阑尾区后,再改用7.0MHz高频探头反复扫描阑尾区,并以阑尾形态结构和超声显像表现为基础进行分析。结果：回顾分析本院238例阑尾炎患者中,彩色超声诊断阑尾炎208例,准确率为87.68%。结论：彩色超声诊断阑尾炎有较高临床诊断及鉴别诊断价值,能够提供直观和科学的手术依据。     

多功能腹膜检查针对良恶性腹水的鉴别诊断

目的评价多功能腹膜检查针在良恶性腹水鉴别诊断中的价值。方法回顾比较327例住院腹水患者用多功能腹膜检查针进行活检、刷检及活检刷检前后腹水细胞学检查结果。结果327例腹水患者最终均已明确诊断,多功能腹膜检查针检查活检前细胞学、腹膜活检、腹膜刷检,及活检刷检后腹水细胞学检查,良性腹水各项检查结果均为良性,特异度均为100%。恶性腹水189例中,经活检前细胞学检查明确诊断者101例,灵敏度53.4%;经活检明确诊断者171例,灵敏度90.5%;经刷检明确诊断者157例,灵敏度83.1%;经活检刷检后细胞学明确诊断者170例,灵敏度90.0%;而多功能腹膜活检针三项检查综合确诊者177例,灵敏度93.7%。有6例为刷检未明确诊断,而在活检及活检刷检后细胞学明确诊断者;7例仅在活检中明确诊断;6例仅在刷检后细胞学明确诊断。活检、刷检及活检刷检后的细胞学检查的诊断灵敏度均明显高于活检前腹水细胞学检查(χ2=64.241、38.288、62.064,P<0.001);活检和刷检相比,活检诊断灵敏度明显高于刷检(χ2=4.518,P<0.05);活检刷检后细胞学检查灵敏度与单一刷检相比明显升高(χ2=3.831,P<0.05),而活检和活检刷检后细胞学检查无统计学差异;单一活检、单一活检刷检后细胞学检查和多功能腹膜检查针三项检查综合相比无显著性差异。多功能腹膜检查针对良恶性腹水的诊断灵敏度达93.7%,准确度达96.3%。结论多功能腹膜检查针对良恶性腹水鉴别诊断具有较大的价值。     

多功能腹膜检查针在疑难腹水病因诊断中的价值

目的探讨多功能腹膜检查针在疑难腹水病因诊断中的价值。方法用多功能腹膜检查针对96例疑难腹水患者进行活检、刷拭活检及活检、刷拭活检后的腹水细胞学检查。结果多功能腹膜检查针对疑难腹水的检查病因确诊率可达83.3%。结论多功能腹膜检查针对疑难腹水病因诊断具有较大的诊断价值。     

多层螺旋CT多期扫描在小肾癌诊断中的价值

目的分析多层螺旋CT（SCT）多期扫描在小肾癌诊断中的价值。方法选取确诊为小肾癌的患者124例,年龄41~75岁,平均（58.1±8.4）岁。分析患者术前肾脏SCT资料,比较不同病理亚型瘤体密度、各期CT值、强化程度和模式。结果平扫期,嫌色细胞癌瘤体密度均匀,乳头状癌和透明细胞癌瘤体密度不均匀。透明细胞癌皮髓期呈不均匀强化,实质期强化程度快速下降,排泄期持续下降;乳头状和嫌色细胞癌皮髓期呈轻度或中度均匀强化,实质期和排泄期呈持续强化。乳头状癌平扫期CT值显著高于透明细胞癌和嫌色细胞癌（P〈0.05）,嫌色细胞癌和乳头状癌排泄期、实质期和皮髓期CT值均显著低于透明细胞癌（P〈0.05）,透明细胞癌和乳头状癌均匀强化的比率显著低于嫌色细胞癌（P〈0.05）。结论 SCT多期扫描是诊断小肾癌较理想的选择之一,其不同病理亚型具有特征性SCT表现。     

彩色多普勒超声在急诊主动脉夹层诊断中的应用价值

目的 探讨彩色多普勒超声在急诊主动脉夹层诊断中的应用价值.方法 对我院2008年1月至2010年2月经急诊确诊并手术治疗的100例主动脉夹层患者的病历资料进行回顾性分析,将所有患者彩色多普勒超声检查结果与螺旋CT血管造影(SCTA)、手术结果进行对照,分析其诊断及分型的准确率,并进行统计学分析.结果 100例主动脉夹层患者中,经急诊彩色多普勒超声检查诊断主动脉夹层者89例,其中DeBakeyⅠ型34例,DeBakeyⅡ型25例,DeBakeyⅢ型30例.与SCTA与手术结果对照,彩色多普勒超声在诊断主动脉夹层的诊断准确率为89.0％(89/100).对Debakey Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲb型的诊断准确率分别为100.0％ (34/34)、96.2％ (25/26)、84.0％ (21/25),高于对DeBakeyⅢa型的诊断准确率60.0％ (9/15),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 彩色多普勒超声对主动脉夹层的诊断具有较高的特异性和敏感性,安全无创,是常用的首选方法,在急诊主动脉夹层的诊断和筛查中有较高的应用价值.     

超声心动图诊断胎儿先天性心血管畸形的临床价值

目的：研究使用超声心动图对于诊断胎儿先天性心血管畸形的重要意义,总结概括出现误诊以及漏诊的原因,提高诊断准确率。方法本院通过对10981例进行产前胎儿超声心动图检查的孕妇研究总结,通过对产前超声诊断结果与孕妇产后的超声心动图诊断以及被认为是畸形胎儿的尸体解剖结果进行比对,确定超声心动图诊断的价值。结果2981例孕妇中有107例（3.60%）胎儿检出先天性心血管异常。在这107例胎儿中,单纯性三尖瓣反流胎儿有77例（72.57%）,心腔内强回声光斑胎儿9例（8.73%）,左室假腱索胎儿6例（5.60%）,结构性心血管异常胎儿11例（10.28%）,单纯性肺动脉瓣反流胎儿2例（1.87%）,其中有11例孕妇选择引产。结论胎儿超声心动图是一种有效的胎儿先天性心脏病产前检查方法,有利于降低先天性心脏病患儿的出生率。     

经阴道彩色多普勒超声对早期异位妊娠的临床诊断价值

目的 探讨经阴道彩色多普勒超声诊断早期异位妊娠的临床价值.方法 对经手术和病理证实的30例异位妊娠患者的超声声像图表现进行回顾性分析.结果 超声声像图表现为典型孕囊型5例、混合包块型25例.结论 经阴道彩色多普勒超声检查对异位妊娠的诊断具有重要价值.     

多普勒超声心动图对成人心肌致密化不全诊断价值的探讨

目的探讨超声心动图对心肌致密化不全（noncompaction of the ventricular myocardium,NVM）的诊断价值。方法采用超声心动图常规测量各腔室内径及心功能主要参数,分析二维、CDFI及频谱多普勒特点。结果①二维显示病变处心肌内外分为截然不同的两层,外层较薄,表现为回声较强的致密层,内层较厚,显示为为突出的肌小梁及深陷其问的隐窝,呈＂蜂窝状＂,好发于左心室心尖部、侧壁。左房室增大,可合并室壁隐窝或房室腔内血栓形成。②病变处心内膜呈波浪状。③M型超声心动图显示该处室壁运动幅度低平,收缩期室壁增厚率下降。④多普勒超声心动图显示深陷于肌小梁间的隐窝内可见血流信息,并与心室腔相通。结论NVM具有特征性超声改变,彩色多普勒超声心动图是无创、敏感诊断心肌致密化不全的首选方法。     

CT对间质性肺疾病的诊断价值

目的探讨CT表现对间质性肺疾病的诊断价值。方法对诊断明确的71例间质性肺疾病患者行普通CT和高分辨CT(HRCT)检查并分析其影像特点。结果沿支气管血管束分布的结节影是结节病较具特征性的肺内改变;呈周边分布的网织影则常见于特发性肺纤维化;外源性过敏性肺泡炎既可见空气—间腔影,也可为结节影或网织影。结论CT检查对间质性肺疾病有一定的诊断价值。     

彩色多普勒超声诊断门静脉海绵样变性的临床应用价值

目的 探讨彩色多普勒超声在诊断门静脉海绵样变性(cavernous transformation of the portal vein,CTPV)中的临床应用价值.方法 使用彩色多普勒超声观察和分析36例CTPV患者的门静脉系统及周围相关脏器二维超声与血流状况.结果 CTPV患者的超声具有特征性表现,与血管造影或MRI或手术相符合,诊断准确可靠,继发改变为门静脉高压综合征.结论 彩色多普勒超声能客观反映CTPV的部位、性质及血流特点,时CTPV的诊断及鉴别诊断具有重要价值,可作为本病诊断的首选检查方法并为临床制订治疗方案提供可靠依据.