尿视黄醇结合蛋白测定在过敏性紫癜中的意义

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视黄醇结合蛋白测定及临床应用研究进展

视黄醇结合蛋白（Retinolblindingprotein,RBP）为血浆中的一种小分子蛋白质,是血中维生素A的特异转运蛋白,1968年由Kanai等首次分离,1971年Peterson和Beeggard从尿中将其分离。RBP具有从肝细胞中转运视黄醇至周围组织的功能,在体内维生素A的代谢中发挥重要作用,近年来,视黄醇结合蛋白检测及临床应用日益受到关注,检测血和尿中视黄醇结合蛋白,对肾脏、肝脏及营养状况等疾病的诊断和治疗有着重要意义。本文对视黄醇结合蛋白的理化特性、检测方法及临床应用进行阐述。     

尿视黄醇结合蛋白检测对早期诊断紫癜性肾炎的临床价值

目的通过检测过敏性紫癜、紫癜性肾炎患儿尿视黄醇结合蛋白（RBP）,探讨其在早期诊断小儿过敏性紫癜肾损害的临床价值。方法将53例患儿分3组：HSP组为尿常规多次检查阴性的过敏性紫癜病例20例;HSPN组为尿常规检查阳性的过敏性紫癜病例13例;正常对照组20例。用ELISA法,成批检测尿RBP,用免疫浊度法检测尿微量白蛋白（mALB）。同时做尿肌酐的测定,以免因尿浓缩造成结果波动,结果用蛋白/肌酐（p/c）比值表示。RBP〉26.2mg/mol Cr时为异常。结果HSP组尿mALB高于对照组,2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。HSP组尿RBP高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。HSPN组尿RBP和mALB均明显高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。HSPN组尿RBP高于HSP组,差异有统计学意义（P〈0.05）。实验组患儿尿常规及尿RBP阳性率比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论过敏性紫癜患儿尽管尿常规正常,肾小球功能正常,其近端肾小管已有不同程度的损害,而紫癜性肾炎肾小管损害更明显,尿RBP较尿常规敏感性更高。尿RBP可做为早期诊断过敏性紫癜肾损害的敏感指标。     

尿视黄醇结合蛋白在狼疮性肾炎活动期的临床意义

目的测定活动期狼疮性肾炎患者、非活动期狼疮性肾炎患者及健康体检者尿视黄醇结合蛋白(urinarg retinol-binding prottin,URBP)含量,探讨URBP在狼疮性肾炎活动期的临床意义.方法采用上海德波生物技术有限公司提供的试剂盒,用全定量酶联免疫吸附法(ELISA法)测定URBP,各组间所测得结果的平均值分别进行比较.结果活动期狼疮性肾炎患者及非活动期狼疮性肾炎患者URBP平均水平均明显高于健康人群(p＜0.05).且活动期患者URBP平均水平又明显高于非活动期患者(p＜0.05).活动期狼疮性肾炎患者经治疗活动病变控制后,其URBP显著下降(p＜0.05).结论URBP可作为狼疮性肾炎活动期的标志物.     

小儿哮喘尿视黄醇结合蛋白的变化及意义

目的探讨小儿哮喘肾功能的改变,测定尿视黄醇结合蛋白(retinolbindingprotein,RBP)水平的变化。方法59例哮喘患儿急性发作期和恢复期采用酶联免疫吸附法(ELISA)进行尿RBP的测定,并以30例健康儿童作对照。结果小儿哮喘急性发作期尿RBP含量显著高于对照组(P<0.01),重度哮喘组又显著高于轻中度哮喘组。恢复期显著低于急性发作期,与正常对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论小儿哮喘急性发作期尿RBP含量升高,能敏感地反映早期肾功能的改变。     

尿视黄醇结合蛋白在狼疮性肾炎早期诊断中的临床意义

目的测定尿常规检查阴性的系统性红斑狼疮患者尿中视黄醇结合蛋白(Uryonary retynol-bindingprlttin,URBP)含量,寻找狼疮性肾炎早期诊断的标志物.方法采用上海德波生物技术有限公司提供的试剂盒,用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定URBP,并与健康人对比.结果系统性红斑狼疮组URBP明显高于健康人群,(P＜0.05).结论URBP是狼疮性肾炎早期诊断的标志物.     

尿视黄醇结合蛋白在诊断近端肾小管功能早期损害的价值

探讨尿视黄醇结合蛋白与早期近端肾小管功能损害的关系。方法:38例患者按病种分为非胰岛素依赖性糖尿病组、原发性高血压组及原发性肾脏病组,每组又按血肌酐是否正常分为二组共6组,测定各组治疗前的尿RBP平均值并与正常对照组进行对比。结果:除高血压血肌酐正常组外,其余各组尿RBP平均值均比正常对照组尿RBP平均值高,P<0.01。结论:尿视黄醇结合蛋白(RBP)可做为早期近端肾小管功能损害及早期糖尿病肾病的诊断指标。     

尿视黄醇结合蛋白在糖尿病肾病早期的诊断意义

目的探讨尿视黄醇结合蛋白(RBP)在糖尿病肾病早期的诊断意义.方法采用酶联免疫法(BLISA)测定78例非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者和30例健康人的尿RBP,同时测定尿微量白蛋白(Alb)和尿β2-微球蛋白(β2-MG).结果NIDDM患者RBP较正常对照组增高,尿RBP与尿A1b、尿β2-MG呈正相关.结论尿RBP可作为诊断早期糖尿病肾病的敏感指标.     

糖尿病肾病与慢性肾小球肾炎的尿微量蛋白分析

目的 为了探讨糖尿病肾病患者与慢性肾小球肾炎患者的尿微量蛋白的差异。方法 用酶联免疫法分别测定了40例糖尿病肾病患者和36例慢性肾小球肾炎患者的尿视黄醇结合蛋白(RBP)和白蛋白(Alb)。结果 糖尿病肾病患者尿RBP较慢性肾小球肾炎患者高,但尿Alb较慢性肾小球肾炎患者低。结论 糖尿病肾病对肾小管损害较慢性肾小球肾炎明显,但对肾小球损害不如慢性肾小球肾炎明显。尿RBP、Alb可分别作为早期诊断两种疾病的敏感指标。     

尿微量白蛋白及视黄醇结合蛋白联合检测对糖尿病肾病的早期诊断

目的 探讨尿微量白蛋白（mALB）及视黄醇结合蛋白（RBP）联合检测在糖尿病肾病的早期诊断价值。方法对所有研究对象均留取晨尿5ml,离心取上清夜,检测mALB及RBP。结果糖尿病组尿微量白蛋白及视黄醇结合蛋白均显著显著高于对照组（P〈0．01）。结论联合检测尿mALB及RBP可提高糖尿病早期肾损害的检出及判断肾损害的部位。     

副黏病毒Tianjin株重组血凝素-神经氨酸酶单克隆抗体的制备及在临床检测中的初步应用

目的:建立双抗体夹心ELISA法,调查副黏病毒Tianjin株引起婴幼儿下呼吸道感染情况。方法:用纯化的重组HN片段免疫BALB/c小鼠,按常规方法制备单克隆抗体。以兔抗Tianjin株多克隆抗体为捕获抗体,单抗G7G7E7为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA法,检测104例下呼吸道感染患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)标本。结果:获得3株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株G7H4D3、G7D9G3和G7G7E7。3株单克隆抗体与副黏病毒Tianjin株有较高结合活性,与甲、乙型流感病毒,新城疫病毒(NDV),人副流感病毒(hPIV)1型、3型、肺炎支原体均无交叉反应性。ELISA相加试验和阻断试验表明,3株单抗识别相同或相近表位区域,识别的表位在抗病毒免疫应答中处于免疫优势地位。双抗体夹心ELISA法检测阳性率为1.92%(2/104)。结论:与RT-PCR和间接ELISA法比较,双抗体夹心ELISA法,具有敏感性高、特异性强的优点,适于临床检测使用。副黏病毒Tianjin株是婴幼儿下呼吸道感染的重要致病因子之一。     

血清及脑脊液中β-葡萄糖醛酸酶测定在脑肿瘤诊断中的临床意义

目的 :探讨血清和脑脊液中β-葡萄糖醛酸酶 (β-G)活性测定对脑肿瘤诊断的临床意义。方法 :建立酶联免疫吸附试验 (ELISA)技术测定脑肿瘤及非肿瘤脑病患者血清及脑脊液中和健康献血者 (正常对照 )血清β-G活性,并以CT、MRI及病理结果为参照 ,进行诊断试验研究。结果 :神经胶质瘤患者血清和脑脊液β-G活性均明显高于脑膜瘤及正常对照组 (血清组P<0.05 ,脑脊液组P<0.01) ;神经胶质瘤患者血清和脑脊液增高程度呈正相关 (r=0.745 ,P<0.05) ,检测血清 β-G活性判断恶性脑肿瘤的灵敏度为78.1 %、特异度为74.1%、准确度为75 %。结论 :血清和脑脊液中β-G活性测定对恶性脑肿瘤诊断有一定的参考价值 ;β-G活性可以作为一种初步筛选的方法 ,配合影像学检查进行临床诊断     

生物素亲和素系统在ECP的实验效能

目的:评估生物素亲和素系统检测嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)双抗夹心ELISA试验中的应用。方法:建立直接包被抗体的检测法、先包被生物素的检测法和先包被亲和素的检测法,比较3种方法的灵敏度、不准确度和变异度,并用3种方法检测皮肤病患者和正常对照人群的ECP水平。结果:直接包被抗体的ECP检测法线性范围为2.5~200μg/L,灵敏度为2.75μg/L,不准确度为11.5%;先包被生物素的检测法线性范围为2.5~500μg/L,灵敏度为2.61μg/L,不准确度为10.9%;先包被亲和素的检测法线性范围为2.5~500μg/L,灵敏度2.68μg/L,不准确度为11.9%;3种方法的重复性差异无统计学意义;先包被亲和素的检测法最稳定,直接包被抗体的检测法次之,先包被生物素的检测法最不稳定;3种方法及ADL双抗夹心检测试剂盒检测患者及正常对照者血清ECP水平,差异无统计学意义。结论:生物素亲和素包被可提高实验的灵敏度、线性范围,减少抗体用量,节约抗体包被时间。     

妊娠相关蛋白A在急性冠状动脉综合征诊断中的应用分析

目的:探讨妊娠相关蛋白A(PAPP-A)在冠状动脉综合征(ACS)诊断中的临床价值。方法:收集2010年5月—2010年7月收治的ACS患者(ACS组)117例和稳定型心绞痛患者(SAP组)68例,正常组84例为健康体检者。采用酶联免疫检测(ELISA)分析其PAPP-A水平。跟踪ACS、SAP患者治疗3周后血清PAPP-A水平变化。结果:PAPP-A在ACS患者血清中水平最高,与SAP患者和正常组比较差异有统计学意义(均P<0.001),而SAP患者和正常组差异无统计学意义(P=0.641)。与治疗前比较,治疗3周后ACS患者PAPP-A变化差异有统计学意义(t=23.105,P<0.01),而SAP患者差异无统计学意义(t=1.031,P>0.05)。结论:PAPP-A和斑块不稳定性有关,其水平检测有助于预测急性冠脉事件发生、危险程度以及康复情况。     

高血压病患者血浆胰岛素原测定的临床意义

目的 :探讨高血压病患者血浆胰岛素原 (PI)水平及其与血压的相关性。方法 :用酶联免疫吸附法检测24例健康人及44例高血压病患者血浆PI水平并对比分析。结果 :高血压病组与对照组血浆PI浓度分别为(17 2±8 2) pmol/L和 (7 9±2 8) pmol/L ,两组比较有显著性差异(P<0.01) ,高血压病组PI与SBP和DBP水平无明显相关性 ,PI与腰围、臀围呈正相关(r值分别为3 354和2 232 ,P<0.01)。结论 :高血压病患者血浆PI浓度增高 ,高胰岛素原血症可能与高血压病的发生和发展有关     

初治肺结核患者强化治疗前后检测IL-2、SIL-2R及IL-4的临床意义

目的探讨细胞因子IL-2、SIL-2R及IL-4检测在初治肺结核患者强化治疗后的临床意义。方法选择涂阳初治肺结核病患者40例(结核组)及正常健康对照组30例。分别空腹抽取静脉血,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定IL-2、SIL-2R及IL-4。结果结核组治疗前3种细胞因子IL-2、SIL-2R及IL-4较对照组和结核组治疗2个月后的值差异均有显著性。40例结核涂阳患者,治疗2个月后31例转阴,痰菌转阴率77.5%。结论检测细胞因子IL-2、SIL-2R及IL-4,对于结核患者免疫状况、治疗方案有效与否及病情变化的判断有一定作用。     

多囊卵巢综合征早期自然流产患者IGFBP-1水平测定及临床意义

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白1（IGFBP-1）在多囊卵巢综合征（polycysticovarysyn—drome,PCOS）早期自然流产患者中的表达及临床意义。方法选择妊娠〈12周的PCOS流产患者77例为试验组,同期正常妊娠〈12周要求人工流产者68例为对照组。2组均于孕3～5周、孕6～8周和孕9～11周采用酶联免疫吸附法（enzyme—linkedimmunosorbentassay,ELISA）检测早期外周静脉血中IGFBP-1、IGF-1、人性激素结合球蛋白（SHBG）、空腹胰岛素、空腹血糖、睾酮和游离睾酮,同时采用流式细胞术检测蜕膜组织中IGFBP-1和IGF-1的表达。结果试验纽孕3～5周和孕9—11周空腹血清胰岛素水平及孕3～5周空腹血糖显著高于对照组（P〈0．01）,但孕6—8周血清胰岛素水平及孕6—8周和孕9～11周空腹血糖与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。不同孕周试验组睾酮和游离睾酮均显著高于对照组（P〈0．01）,IGFBP．1和SHBG水平显著低于对照组（P〈0．05或〈0．01）,IGF．1水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。以B—actin作为内参照,试验组不同孕周蜕膜组织中IGFBP—l蛋白的表达显著低于对照组（P〈0．05）,而IGF-1蛋白的表达显著高于对照组（P〈0．05）。结论PCOS早期自然流产患者血清中IGFBP-1、SHBG水平降低以及流产蜕膜组织中IGFBP-1、IGF-1蛋白表达的减少,提示子宫内膜上皮及间质功能障碍可能是PCOS患者发生流产的重要环节。     

2型糖尿病病人真胰岛素测定的临床观察与研究

目的；观察研究2型糖尿病病人血浆胰岛素与真胰岛素水平改变对评价β细胞功能的意义。方法：采用酶联免疫法及其他方法对33例正常人和58例2型糖尿病病人测定OGTT、真胰岛素、胰岛素、C－肽等，并观察比较其间的变化。结果：正常人与病人真胰岛素均明显低于胰岛素（P＜0.05），尤以病人餐后2小时降低更加明显（P＝0.000704）。：临床常用的放射免疫法测定的免疫反应性胰岛素值明显高于酶联免疫法测定的真胰岛素值。真胰岛素检测能否正确评价β细胞功能，有待进一步探讨。     

间歇性低氧相关组织因子表达在儿童睡眠呼吸暂停综合征的临床生物学意义

[摘要]目的:探讨间歇性低氧相关组织因子在儿童睡眠呼吸暂停综合征中表达的相关性及临床生物学意义,为探索儿童睡眠呼吸暂停综合征细胞乏氧代谢损伤机制提供分子病理学基础。方法:以正常儿童群体为对照,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测对氧磷酶2、白三烯等低氧相关组织因子在儿童睡眠呼吸暂停综合征睡眠状态及清醒状态中的差异。结果:对氧磷酶2与白三烯的表达在正常儿童、睡眠呼吸暂停综合征患儿中存在明显差异(P<0.05);在清醒状态与睡眠状态呼吸暂停综合征患儿中比较差异无统计学意义(P>0.05);其表达水平与OSAS分级呈正相关,r分别为0.78和0.66(P<0.05)。 结论:对氧磷酶2和白三烯与儿童睡眠呼吸暂停综合征呼吸暂停低通气(AHI)分级相关,并可作为独立因子辅助其诊断及分级。     

双抗体夹心酶联免疫法检测不同样品中的蓖麻毒素

目的应用酶联免疫吸附分析方法（ELISA）检测待测样品中的蓖麻毒素。方法用蛋白G亲和层析柱纯化蓖麻毒素单克隆抗体（4C13,3D74,5E4和5H6）,以3D74及辣根过氧化物酶（HRP）标记的4C13建立的双抗体夹心ELISA对含有蓖麻毒素的多种样品进行检测。结果抗蓖麻毒素的单克隆抗体经亲和层析纯化后具有较高的蛋白纯度,应用HRP标记的4C13与3D74建立双抗体夹心ELISA,对于溶解于磷酸缓冲液中的蓖麻毒素标准品的检测灵敏度可达2．5μg·L^-1;对于土壤、面粉、牛奶、咸菜汁、雪碧、可乐和腐乳汁．中的蓖麻毒素样品检测的灵敏度为2．5-5．0μg·L^-1;与磷酸缓冲液样品相比较,含有相同浓度蓖麻毒素的小鼠和人血清样品ELISA的阳性结果明显减弱．结论双抗体奕心酶联免疫法能够有效用于含有蓖麻毒素样品的检测分析。