体外培养雪旺氏细胞三种方法的比较

目的找到一种适合修复周围神经缺损要求的雪旺氏细胞培养方法。方法分别采用三种不同方法进行雪旺氏细胞培养,并比较各种方法培养的雪旺氏细胞的生长情况及纯度。结果先用酶消化后组织块贴壁培养的的方法,雪旺氏细胞“爬出”速度较直接组织贴壁培养方法快,但较直接酶消化法慢,而纯度均较其他二种方法高。结论先用酶消化组织块,后再将组织块贴壁培养的方法是一种适合修复周围神经缺损要求的雪旺氏细胞培养方法。     

自身免疫性、多发性周围神经病患者的免疫球蛋白和银杏制剂对体外培养的SD大鼠雪旺氏细胞生长的影响

目的：明确自身免疫介导的多发性周围神经病患者血清中的免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig)是否具有破坏雪旺氏细胞（Schwann cell,Sc)的作用；银杏制剂（Extract of Ginkgo biloba 761,EGb761)在这种情况下是否具有保护Sc的作用。方法：在离体培养的雪旺氏细胞中分别加入正常人和自身免疫性周围神经病患者的Ig、Ig和EGb761的混合液，观察雪旺细胞的形态学变化。结果：正常人的Ig对Sc的生长无影响；患者的Ig对体外培养的Sc的生长有抑制作用。EGb761对Sc的生长无显著影响。结论：自身免疫性周围神经病患者的Ig在补体的参与下对体外培养的Sc有明显的破坏作用。银杏制剂在这种情况下似乎无显著的保护体外Sc继续生长的作用。     

米非司酮对体外培养子宫肌瘤细胞作用的形态学观察

目的观察不同浓度米非司酮作用下体外培养的子宫肌瘤细胞的形态学变化,寻找治疗子宫肌瘤的最佳米非司酮浓度。方法光镜及电镜下观察不同浓度米非司酮（10^-8～10^-4mol/L）下体外培养的子宫肌瘤细胞的其形态学变化。结果 10^-8～10^-7mol/L米非司酮对细胞生长无影响,10^-6mol/L以上浓度肌瘤细胞萎缩,10^-4mol/L抑制作用最强。结论米非司酮破坏肌瘤细胞结构,干扰核膜、胞膜、细胞器、及染色体,并与米非司酮浓度成正相关。     

体外培养细胞缺氧模型及特点

细胞是形成生物体结构和功能的基本单位,是生命科学的研究基础。体外培养是指将有机体的活细胞放在类似于体内环境的体外环境中生长和发育的方法,由于体外培养的细胞成分单一,易于控制环境因素、重复性好,故而成为疾病研究的重     

细胞体外培养工作中存在的问题及预防

体外细胞培养是指在体外模拟体内的生理环境，在无菌、适当温度和一定营养条件下，使从体内取出的细胞生长、繁殖并维持其结构和功能的方法。细胞培养技术广泛用于科研、教学及临床研究实验中，这项技术受多种因素的影响，如：工作环境是否无菌、操作手法是否正确以及维持细胞所需的培养液等。笔者通过多年来从事细胞培养技术的研究工作，现将体会报道如下。     

大鼠卵巢细胞体外培养及生殖毒理研究中的应用

大鼠卵巢细胞体外培养及生殖毒理研究中的应用张天宝综述杨在昌孙棉龄审校第二军医大学卫生毒理学教研室（上海２００４３３）长期以来，人们把化学物质对胚胎或胎儿的潜在毒性效应作为生殖毒理学的研究重点。然而，近１０年来研究发现：人群中不育、性功能异常、月经周期...     

骨骼肌卫星细胞体外培养及鉴定方法进展

骨骼肌卫星细胞是骨骼肌中具有增殖分化潜能的干细胞,它是在1961年由Muaor首次从青蛙骨骼肌纤维中分离出来的。肌组织作为人体的最大组织,同其他组织相比具有来源丰富,取材方便的优势。大量研究证实卫星细胞对骨骼肌受创伤后肌纤维的再生和修复起着重要作用,并且在治疗心血管疾病中有广阔的临床前景。但是骨骼肌细胞中卫星细胞所占的比例较少,为1%～5%,因此在体外如何获得足够数量,并将高     

人膀胱癌细胞原代培养及体外药物敏感性实验研究

目的研究不同个体表浅性膀胱癌组织对抗癌药物及其联合应用的敏感性。方法采用肿瘤细胞原代培养技术和MTT比色法测定了59例膀胱癌组织对灌注抗癌药物及其联合应用的抑制率和敏感性。结果14例失败,45例获得成功,总体可评价率为76.3%,不同个体对不同抗癌药物的抑制率存在明显差异;除MTX对膀胱癌G1和G3级平均抑制率差异有统计学意义外,其它抗癌药物对不同个体膀胱癌细胞的平均抑制率与膀胱癌的病理分级、分期均无关;抗癌药物对初发膀胱癌的敏感率和平均抑制率均高于复发膀胱癌;2种不同作用机制的抗癌药物联合应用对不同个体膀胱癌细胞的敏感率和平均抑制率均高于单一药物,二者敏感率和平均抑制率差异有统计学意义。结论应根据药敏结果,选择相对敏感的抗癌药物,并将作用于不同机制、细胞不同周期的抗癌药物联合,制订个体化膀胱灌注治疗方案,以提高疗效,最大限度减少副反应,减少肿瘤复发率。     

人脑膜瘤细胞的原代培养

目的 建立一种人脑膜瘤细胞原代培养简单有效的方法.方法 新鲜脑膜瘤组织取自福建协和医院神经外科25例连续治疗的脑膜瘤手术病人,以胰蛋白酶消化法分离细胞,用含10%胎牛血清的DMEM培养液进行培养并传代,显微镜下观察脑膜瘤细胞生长状况.上皮膜抗原(EMA)、波形蛋白(Vimentin)对脑膜瘤细胞进行免疫组化鉴定.结果 用胰酶消化法培养脑膜瘤细胞,方法简单,细胞形态典型;EMA、Vimentin表达阳性,鉴定为脑膜瘤细胞.结论 单一的胰蛋白酶消化法是一种简单有效的脑膜瘤细胞原代培养的方法.     

对体外培养的胸腺基质细胞几种酶组化方法的探讨

对体外培养的胸腺基质细胞几种酶组化方法的探讨大同医学专科学校（０３７００８）王裕民，贺建文我们对传代培养的小鼠胸腺基质细胞几种酶组织化学的显示方法进行了摸索探讨，现介绍如下。材料与方法取ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠胸腺，培养于３７℃、５％ＣＯ２孵箱内，将其传代培...     

TUNEL法计数体外培养细胞凋亡细胞数的体会

ＴＵＮＥＬ是末端脱氧核苷酸转移酶 (ｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ)介导的ｄＵＴＰ原位切口末端标记 (ｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅ ｏｔｉｄｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｄＵＴＰｎｉｃｋｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇ ,ＴＵＮＥＬ)技术 ,是原位检测细胞凋亡情况的一种基本方法 ,目前应用很广泛。作者在顺铂诱导人卵巢癌细胞系ＨＯ 8910细胞凋亡的研究中 ,使用到了该技术 ,现将使用过程中的体会报告如下。1　材料与方法1 1　材料　原位细胞凋亡检测试剂盒为德国罗氏诊断公司(ＲｏｃｈｅＤｉ…     

不同浓度臭氧在不同时间对体外培养家兔椎间盘细胞作用的实验研究

目的观察不同浓度的臭氧在不同作用时间对家兔椎间盘细胞的作用影响。方法首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧：30μg/ml,60μg／ml和80μg／ml,然后于15min及30min后,采用台盼蓝细胞排斥试验计算椎间盘细胞的活细胞率;结果低浓度组活细胞率为80％左右,高浓度组活细胞率10％左右。15min时,不同浓度组之间台盼蓝细胞排斥试验结果差异都具有统计学意义;30min时,对照组与低浓度组差异无统计学意义,其他组之间存在统计学意义;不同时间只有中浓度组存在统计学意义。结论随着臭氧浓度的增加,作用时间的延长,椎间盘细胞活细胞率呈降低趋势。     

微囊化新生猪胰岛细胞的体外试验研究

目的探讨微囊化技术对新生猪胰岛细胞分泌功能的影响。方法于高压静电场中采用聚电解质络合法制备新生猪胰岛细胞的海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊,以未包囊组胰岛细胞为对照,通过对2组培养液中的胰岛素含量测定及高糖、低糖、茶碱刺激试验,比较微囊化技术对新生猪胰岛细胞分泌功能的影响。结果2组培养液中的胰岛素含量与糖刺激试验结果差异均不显著(P>0.05)。结论微囊化的新生猪胰岛细胞与未包囊组的分泌功能无明显差异。     

脑损伤细胞供体的研究现状

脑损伤所引起的神经功能损伤严重影响患者的生活质量,并给社会和家庭带来沉重的经济负担,因此寻找损伤后神经功能修复的方法已成为目前研究的热点,而细胞移植是修复神经损伤的方法之一.而参与移植的细胞种类繁多,为了寻找一种更好、更合适的移植细胞,本文就目前出现的各种移植细胞做一综述.     

导管修复神经损伤的运用及进展

修复神经损伤的传统方法是神经端端吻合或神经移植，但是神经恢复效果有限，而且存在着供区功能障碍等缺陷，自从Lundborg等利用神经再生室模型证实神经趋化特异性，神经导管神经损伤的优势逐渐为人们所认识和接受。同时许多年来，神经导管一直是人们研究的热点，所实验的材料包括自体材料和人工合成材料，其中人工合成的可吸收材料，代表了今后发展的方向。此外人们也一直在研究改变导管内的生物环境，包括基质，细胞，神经营养因子以促进神经的再生，以及构建组织工程化人工神经。这些研究的目的是改进导管修复周围神经中还存在的一些不足，以提高周围神经损伤修复的疗效。     

吗啡对体外培养的人乳腺细胞雌激素受体mRNA表达的影响

目的：研究吗啡对雌激素诱导的体外培养人的正常乳腺细胞的雌激素受体（ER）mRNA表达的影响。方法：购买人正常乳腺纤维细胞株进行培养，给予17-β雌二醇（E2），吗啡（Mor）及纳洛酮干预。通过RT—PCR的方法半定量分析吗啡对正常乳腺细胞ER mRNA表达的影响。结果：ER与内参照B—actin分别在249 bp和270 bp处出现特征性条带。雌激素组、吗啡组与对照组比较，差异有显著性（P〈0．05），E2＋Mor组与对照组比较，差异无显著性（P〉0．05）。吗啡作用24h呈剂量依赖性抑制乳腺细胞ERmRNA的表达，3组吗啡的终浓度分别为1×10^-6mol／L、1×10^-5mol／L、1×10^-4 mol／L，差异有显著性（P〈0，05）。结论：从mRNA水平证明了外源性阿片类药物吗啡可直接影响雌激素对乳腺的促增殖作用，同时还可剂量依赖性下调雌激素受体mRNA的表达。     

Long Evans大鼠视皮层星型胶质细胞的体外培养

目的 建立星型胶质细胞体外培养体系,为体外研究星型胶质细胞的功能奠定基础.方法 无菌条件下取新生1～3 d的Long Evans(LE)大鼠视皮层,差速贴壁法除去成纤维细胞,摇床振荡法除去其他细胞,免疫荧光法对细胞进行鉴定.结果 分离培养的细胞具备典型的星型胶质细胞形态,表达了星型胶质细胞特异性抗原GFAP,并能分泌硫酸软骨素.结论 该方法培养的星型胶质细胞具有正常的形态和功能,可用于星型胶质细胞的体外功能研究.     

氟化钠对体外培养乳大鼠心肌细胞毒作用的细胞化学的定量研究

本文用细胞化学方法研究了氟化钠对体外培养乳大鼠心肌细胞内糖原，琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和培养液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的影响。结果显示：当培养液中Ｆ－的终浓度达到３．２３μｇ／ｍｌ时，即可引起细胞内糖原浓度及ＳＤＨ活性显著下降。当培养液中Ｆ－的终浓度达６．４５μｇ／ｍｌ时，培养液中ＬＤＨ漏出量显著增加，并随着Ｆ－浓度增大而显著增多。上述结果表明：氟化物严重损害心肌细胞的能量代谢和细胞膜的完整性，导致细胞停搏、死亡，并对心肌有直接毒性作用。