八肽缩胆囊素对脂多糖诱导血管内皮细胞诱生型一氧化氮合酶表达变化的抑制作用

目的探讨八肽缩胆囊素（CCK-8）对脂多糖（LPS）诱导血管内皮细胞诱生型一氧化氯合酶（iNOS）表达变化的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304细胞。用0．01、0．1和1mg／L LPS处理2～24h，用生理盐水、10mol／LCCK-8和0．1mg／L LPS＋10^-8、10^-7、10^-8mol／L CCK-8处理16h；用比色法检测培养液中一氧化氮（NO）含量、细胞NOS活性，免疫细胞化学及蛋白质免疫印迹法检测iNOS蛋白表达。结果与生理盐水处理的对照组比较，LPS诱导培养液NO含量增多、细胞NOS活性增高、iNOS蛋白表达上调；CCK-8剂量依赣性抑制LPS的上述效应。而单独作用对iNOS蛋白表达、NOS活性和NO含量均无明显影响。结论CCK-8可以明显抑制LPS引起ECV-304细胞iNOS蛋白表达上调。减少NO生成。     

八肽胆囊收缩素对游离脂肪酸损伤的胰岛β细胞的保护作用

目的：观察八肽胆囊收缩素对高浓度游离脂肪酸损伤的小鼠胰岛β细胞（NIT—1细胞）的保护作用，并观察同时应用胆囊收缩素受体非特异性拮抗剂丙谷胺对此作用的影响。 方法：实验于2004-03／12在河北省人民医院中心实验室进行。将体外培养良好的NIT—1细胞分为对照组、游离脂肪酸组（加入0．25mmol／L软脂酸）、八肽胆囊收缩素组（加入游离脂肪酸同时加入10pmol／L八肽胆囊收缩素）、丙谷胺组（八肽胆囊收缩素组同时加丙谷胺，终浓度32mg／L）。37℃、体积分数为0．05的CO2条件下分别培养48h和72h，放免法测定培养液上清中胰岛素水平；MTT法检测NIT—1细胞增殖情况；流式细胞术方法测定细胞凋亡率；免疫组化法观察bcl-2的表达。 结果：①培养上清中胰岛素水平：游离脂肪酸组48h和72h明显少于对照组（P〈0．01）；八肽胆囊收缩素组显著高于游离脂肪酸处理组（P〈0．01）；丙谷胺组与游离脂肪酸组无显著差异。②细胞增殖反应：游离脂肪酸组48h和72h明显低于对照组（P〈0．01）．八肽胆囊收缩素组则显著高于游离脂肪酸组（P〈0．01），丙谷胺组与游离脂肪酸组结果相仿。③细胞凋亡率：游离脂肪酸组48h和72h明显高于对照组（P〈0．01），八肽胆囊收缩素组则显著低于游离脂肪酸组（P〈0．01），丙谷胺组与游离脂肪酸组结果相仿。④bcl-2阳性表达水平：游离脂肪酸处理不同时间后其表达明显减少；八肽胆囊收缩素处理后表达增加，丙谷胺组较八肽胆囊收缩素组表达略少。 结论：①游离脂肪酸可导致胰岛β细胞明显损伤，表现在胰岛素分泌的减少、细胞增殖能力的降低、细胞凋亡率增加以及bcl-2基因表达减少。②八肽胆囊收缩素对游离脂肪酸损伤的胰岛β细胞具有明显的保护作用。③非特异性胆囊收缩素受体拮抗剂可以在一定程度上逆转八肽胆囊收缩素的保护作用；提示其保护作用可能是通过与胆囊收缩素受体结合实现的。     

坐骨神经切断大鼠脑脊液中CCK-8含量的动态变化及其与吗啡镇痛的关系

目的：研究神经源性疼痛时吗啡镇痛效应的降低与中枢八肽胆囊收缩素(CCK-8)的释放量之间的关系。方法：以切断大鼠单侧坐骨神经作为引起神经痛的动物模型，用放射免疫分析法，观察术后第3，7，10和14天脑脊液中CCK-8-ir含量的变化，并在相应的时间点分别皮下注射吗啡(4mg／kg)和CCKB受体拮抗剂L-365，260(0．5mg,／kg)，观察痛阈(辐射热甩尾潜伏期)的变化。结果：(1)大鼠单侧坐骨神经切断后一周，脑脊液中CCK-8样免疫活性物质(CCK-8-ir)的浓度(代表中枢CCK-8的释放量)增加了125％，此时吗啡的镇痛效果降低，而CCK拮抗剂使吗啡镇痛效果提高。(2)坐骨神经切断后1．5～2周，中枢CCK-8释放减少或保持正常水平，此时吗啡镇痛效果正常，CCK拮抗剂也不能使其效应进一步提高。(3)假手术组大鼠于第14天(第四次注射吗啡)时，吗啡作用减弱(发生耐受)，此时CCK拮抗剂显示出对吗啡镇痛的加强作用。结论：单侧坐骨神经切断后一周吗啡镇痛效果减弱，可能与当时中枢CCK-8释放过多有关。切断坐骨神经后中枢释放CCK-8水平的变化，是影响阿片镇痛的重要因素。     

干扰素-γ对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs)增殖的作用及干扰素-γ对其增殖的影响。方法 幼龄Wistar大鼠（4周龄）12只，分成对照组，血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）组，干扰素-γ组和干扰素-γ AngⅡ组，采用组织块贴壁法培养胸主动脉平滑肌细胞，分别测定^3H-胸腺嘧啶（^3H-TdR),^3H-亮氨酸（^3H-Leu)的掺入量和细胞周期中各期细胞构成比。结果 AngⅡ（0.1μmol/L）作用24h能使VSMCs的^3H-TdR与^3H-TdR与^3H-Leu的掺入量比对照组增多。且S期和G2/M期细胞增多，细胞增殖指数增大；干扰素-γ组无以上作用，与AngⅡ组相比，干扰素-γ（500U/mL) AngⅡ组^3H-TdR,^3H-Leu的掺入量明显减少，S期细胞构成比和细胞增殖指数亦明显减少。结论 AngⅡ对血管平滑肌细胞有促增殖作用。这种促增殖作用能被干扰素-γ所拮抗。     

八肽缩胆囊素调节脂多糖诱导ECV-304细胞核转录因子-κB表达的受体机制研究

目的探讨八肽缩胆囊紊（CCK-8）调节脂多糖（LPS）诱导血管内皮细胞核转录因子-κB（NF—κB）表达的受体机制。方法培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304；用溶剂（生理盐水）、LPS、CCK-8、CCK受体（CCK—R）非特异性拮抗剂丙谷胺、CCK—A受体（CCK—AR）特异性拮抗剂CR-1409、CCKB受体（CCK—BR）特异性拮抗剂CR-2945分别或联合刺激ECV-304细胞1h。用蛋白质免疫印迹法（Western blot）榆测NF-κB p65蛋白表达；用免疫细胞化学技术榆测NF—κB p65蛋白核移位。结果与溶剂对照组比较，LPS可诱导ECV-304细胞NF-κB p65蛋白核移位，且其表达明显上调；CCK-8可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的核移位及表达上调；CCK受体拮抗剂可翻转CCK-8的上述抑制效应，其中CR-1409、CR-2945、丙谷胺作用依次增强。结论CCK-AR和CCKBR参与介导了CCK-8对LPS诱导ECV-304细胞NF—κB表达的抑制作用，其中CCK—BR的作用比CCK—AR稍强。     

生长激素对脂多糖刺激大鼠腹腔巨噬细胞NO产生及iNOS mRNA表达的影响及意义

目的：研究重组人生长激素对脂多糖（LPS）刺激大鼠腹腔巨噬细胞活性的改变,TNF—α、iNOS mRNA的表达情况及对NO的产生的影响。方法：分离提取大鼠腹腔巨噬细胞,用12S刺激2h后加入不同浓度重组人生长激素,6h后观察巨噬细胞活性RT—PCR检测巨噬细胞内TNF—α、iNOS mRNA的表达情况,上清液测NO浓度。结果：巨噬细胞用12S刺激后,活性明显增强,TNF—α、iNOS mRNA表达上调,NO产生增加,使用不同剂量的生长激素后能均够抑制巨噬细胞的活性,iNOS mRNA表达下调,NO产生减少,而对TNF—α mRNA的表达无明显影响。结论：低剂量的生长激素可以抑制12S对巨噬细胞的活化作用,其部分机制是下调了iNOS mRNA表达,使NO产生减少,但其抑制作用不随浓度的增加而上升。在体外rhGH并不直接抑制TNF—αmRNA的表达。     

血管平滑肌细胞功能调节中血管紧张素1型受体表达和生物学作用的变化

目的：探讨血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)转染表达血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)2型受体(angiotensin Ⅱ type 2 receptor，AT2R)后其1型受体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor，AT1R)表达所受的影响。方法：用同源重组方法构建带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(AdCMV—AT2R)，体外转染VSMC，分别用流式细胞仪检测AT1R、AT2R细胞转染表达率、用免疫组织化学法和免疫荧光法检测其膜表达、以反转录聚合酶链式反应法(RT—PCR)和蛋白印迹法检测其mRNA和蛋白表达。结果：AdCMV—AT2R转染后，随着转染表达时间延长，AT2R细胞表达率呈显著增加趋势，48h最高表达率达89．51％，AngⅡ作用与否及不同浓度AngⅡ作用对AT2R表达无显著影响。而转染前后AT1R表达相对较稳定，受不同浓度AngⅡ作用，其表达明显呈增加趋势。AT2R峰值表达时，免疫组织化学法和免疫荧光法检测其膜表达结果也提示AT2R表达随转染表达时间延长显著增加，转染前后AT1R表达无明显变化，在一定浓度范围内，AngⅡ刺激对AT2R表达无显著影响，却显著增加AT1R的膜表达。RT-PCR法和蛋白印迹法检测AT1R和AT2R的mRNA和蛋白表达结果与其细胞表达率和膜表达的检测结果相一致。结论：AT2R转染表达并发挥其生物学作用时，对ATIR的表达无明显影响，VSMC转染表达AT2R后，AngⅡ刺激仍可使AT1R表达增加，提示AT1R和AT2R之间不存在表达方面此消彼长的关系，因而，AT2R转染表达有助于对VSMC功能的调节。     

胆管结石患者 Oddi 括约肌中胆囊收缩素受体和一氧化氮合酶及其血中胆囊收缩素和一氧化氮水平的意义

目的 探讨胆管结石患者Oddi括约肌中胆囊收缩素(CCK)受体和一氧化氮合酶(NOS)及其血清中CCK和NO含量的改变及意义.方法 测定41例胆管结石患者和6例对照组血中的CCK和NO水平及Oddi括约肌中CCK受体和NOS含量.结果 胆管结石组血中CCK含量[(38.91±4.85)pmol/L]、NO含量[(40.84±4.74)pmol/L]较对照组[(30.67±1.81)pmol/L]和[(32.81±1.11)pmol/L]明显升高;Oddi括约肌中CCK受体[(67.59±5.87)ng/L]及NOS含量[(457.52±45.40)ng/L]明显低于对照组[(78.99±1.71)ns/L]与[(519.61±11.38)ng/L];血中CCK、NO水平及Oddi括约肌中CCK受体、NOS含量在原发性肝内胆管结石组、胆囊结石伴胆管结石组、原发性胆总管结石组中有所不同.结论 胆管结石患者Oddi括约肌中CCK受体及NOS含量下降导致Oddi括约肌功能下降,进而胆汁淤积,促进胆管结石的形成.     

胆管结石患者Oddi括约肌中胆囊收缩素受体和一氧化氮合酶及其血中胆囊收缩素和一氧化氮水平的意义

目的探讨胆管结石患者Oddi括约肌中胆囊收缩素（CCK）受体和一氧化氮合酶（NOS）及其血清中CCK和NO含量的改变及意义。方法测定41例胆管结石患者和6例对照组血中的CCK和NO水平及Oddi括约肌中CCK受体和NOS含量。结果胆管结石组血中CCK含量[（38．91±4．85）pmol／L]、NO含量[（40．84±4．74）pmol／L]较对照组[（30．67±1．81）pmol／L]和[（32．81±1．11）pmol／L]明显升高;Oddi括约肌中CCK受体[（67．59±5．87）ng／L]及NOS含量[（457．52±45．40）ng／L]明显低于对照组[（78．99±1．71）ng／L]与[（519．61±11．38）ng／L];血中CCK、NO水平及Oddi括约肌中CCK受体、NOS含量在原发性肝内胆管结石组、胆囊结石伴胆管结石组、原发性胆总管结石组中有所不同。结论胆管结石患者Oddi括约肌中CCK受体及NOS含量下降导致Oddi括约肌功能下降,进而胆汁淤积,促进胆管结石的形成。     

复方丹参滴丸对高糖/高胰岛素诱导兔胸主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：观察复方丹参滴丸对高糖／高胰岛素诱导免胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的抑制作用及其机制。方法：组织贴块法原代培养VSMCs，用高糖／高胰岛素诱导细胞增殖。设正常对照组，模型组，一氧化氮合酶（NOS）抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯（L—NAME）组，吡格列酮以及联合L—NAME组，复方丹参滴丸浸膏低、中、高剂量干预组，低、中、高剂量复方丹参滴丸浸膏合用L—NAME组。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定VSMCs增殖，试剂盒检测细胞总NOS及一氧化氮（NO）含量。结果：高糖／高胰岛素可诱导VSMCs增殖，表现为模型组VSMCs含MTT溶解物的吸光度（A）值显著高于正常对照组，总NOS活性及NO含量显著低于正常对照组（P均〈0．01）；与模型组比较，吡格列酮及中、高剂量复方丹参滴丸浸膏组VSMCs含MTT溶解物的A值均明显降低，总NOS活性及NO含量明显增加，并且能被L—NAME部分阻断（P〈0．05或P〈0．01）；低剂量复方丹参滴丸浸膏组上述结果比较差异均无显著性（P均〉0．05）。结论：复方丹参滴丸浸膏可以通过NO介导而抑制VSMCs增殖。     

Impairment of smooth muscle function of rat thoracic aorta in an endothelium-independent manner by long-term administration of N(G)-nitro-L-arginine methyl ester

In this study, we aimed to elucidate whether the daily hypertensive dose of long-term N(G)-nitro-l-arginine methyl ester (l-NAME) treatment, could make a difference between endothelial and smooth muscle functions in rat thoracic aorta. We test the hypothesis that high-dose, long-term l-NAME treatment has a depressive effect on vascular smooth muscle contractile activity which is not related with nitric oxide (NO) synthesis inhibition. After 14 days of treatment, isometric tension and (45)Ca(2+) influx were measured in aortic tissues isolated from l-NAME(10) and l-NAME(100) hypertensive (10 and 100 mg/kg/day, systolic blood pressures 167 +/- 7 and 172 +/- 10 mmHg, respectively) and control normotensive rats (132 +/- 7 mmHg). In l-NAME(10)- and l-NAME(100)-treated rats, acetylcholine-induced relaxation in aortic rings was suppressed with no significant difference between the treatments. l-NAME(100) (but not l-NAME(10)) treatment, significantly inhibited contractile responses to phenylephrine, angiotensin II, and K(+) (80 mm) in endothelium-intact tissues. The effect of l-NAME(100) on phenylephrine-induced contractile responses was not observed after 3 days of treatment. In endothelium-denuded aortic tissues of l-NAME(100) (but not l-NAME(10))-treated rats, phenylephrine (1 x 10(-6) m)- and K(+) (80 mm)-induced contractions and (45)Ca(2+) influxes were significantly reduced. In Ca(2+)-free medium (0.1 mm EDTA), on the contrary, the transient contractions obtained by either phenylephrine (1 x 10(-6) m) or caffeine (1 x 10(-2) m), or the sustained contractions induced by 12-o-tetradecanoylphorbol-13-acetate (1 x 10(-6) m; a protein kinase C activator) in endothelium-denuded aortic rings, were not modified by both l-NAME treatments. These results indicate that in aortic rings from l-NAME hypertensive rats, low and high doses, long-term l-NAME administration may be associated with equivalent inhibition in NO-dependent vasodilator tone (corresponding to equivalent hypertension values); whereas only high-dose, long-term l-NAME administration produces an endothelium-independent decrease in vasocontrictor activity, at least partly explained by a reduction in extracellular Ca(2+) influx.     

辛伐他汀对脂多糖诱导肺损伤大鼠的一氧化氮合酶的影响

目的 探讨辛伐他汀对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤大鼠的一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法 30只SD大鼠随机分为对照组、LPS组和辛伐他汀治疗组,治疗组又分1 h、3 d和7 d组,每组6只.治疗组大鼠在实验前经胃管分别给予辛伐他汀10 mg/kg(4 ml/kg)治疗1 d,3 d,7 d,每天1次;对照组和LPS组则给予蒸馏水(4 ml/kg),每天1次,连续7 d.在最后一次给药1 h后,LPS组和治疗组大鼠从尾静脉注射LPS 5 mg/kg(2.5 ml/kg),对照组则予注射无菌生理盐水(2.5 ml/kg).观察6 h,处死大鼠,取样,比色法测定血清和肺匀浆诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、构成型一氧化氮合酶(cNOS)和一氧化氮(NO)水平,免疫组化法检测肺组织iNOS和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达.结果 LPS组血清和肺匀浆NO均高于对照组(p<0.001),治疗组则低于LPS组(P<0.05);LPS组血清和肺匀浆iNOS活力均高于对照组而cNOS活力则降低(P<0.05),治疗组肺匀浆iNOS活力显著低于LPS组而eNOS显著升高(P<0.001);免疫组化显示:LPS组肺组织iNOS表达强于对照组,而eNOS表达则显著减弱,治疗组的iNOS表达弱于LPS组,eNOS表达则显著增强,与其减轻肺损伤相关.结论 辛伐他汀可逆转LPS诱导的肺组织iNOS活性的升高和eNOS活性的下降,减轻内毒素性肺损伤.     

四妙勇安汤对高胰岛素/高糖诱导兔血管平滑肌细胞外基质分泌的影响及机制

目的：观察四妙勇安汤药物血清对高胰岛素/高糖诱导的兔血管平滑肌细胞（VSMC）细胞外基质（ECM）分泌的影响及其可能的作用机制。方法采用血清药理学方法制备药物血清,高胰岛素/高糖诱导兔VSMC增殖。实验分为空白组〔10%胎牛血清（FBS）的正常DMEM〕、正常组（10%FBS的正常DMEM+正常血清）、模型组（10%FBS的高糖DMEM+100 U/L胰岛素+正常血清）、西药组（10%FBS的高糖DMEM+100 U/L胰岛素+辛伐他汀血清）、中药组（10%FBS的高糖DMEM+100 U/L胰岛素+四妙勇安汤血清）。用消化法检测细胞培养上清液中羟脯氨酸（Hyp）含量;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测含药血清对兔VSMC的四型胶原蛋白（COL-Ⅳ）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其组织抑制因子（TIMP-1）的mRNA表达和对MMP-2/TIMP-1比值的影响。结果与模型组比较,中药组、西药组细胞培养上清液Hyp含量明显降低（均P＜0.05）,且中药组明显低于西药组（mg/L：234.19±26.43比266.73±30.00,P＜0.05）。与正常组比较,模型组COL-Ⅳ、MMP-2的mRNA呈显著高表达（COL-ⅣmRNA：0.78±0.03比0.41±0.02,MMP-2 mRNA：0.80±0.12比0.41±0.02,均P＜0.05）,TIMP-1 mRNA表达水平降低（0.35±0.04比0.79±0.07,P＜0.05）,MMP-2/TIMP-1比值增加（2.30±0.35比0.52±0.05,P＜0.05）。与模型组比较,中药组、西药组COL-Ⅳ、MMP-2 mRNA表达水平均降低,TIMP-1 mRNA水平提高,MMP-2/TIMP-1比值有所下降（COL-ⅣmRNA：0.55±0.04、0.58±0.03比0.78±0.03,MMP-2 mRNA：0.62±0.05、0.67±0.08比0.80±0.12,TIMP-1 mRNA：0.56±0.02、0.60±0.01比0.35±0.04,MMP-2/TIMP-1：1.11±0.06、1.16±0.15比2.30±0.35,均P＜0.05）,但中药组、西药组比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论四妙勇安汤能够减少高胰岛素/高糖诱导的VSMC分泌ECM,其可能机制与减少Hyp合成,影响COL-Ⅳ、MMP-2、TIMP-1 mRNA表达水平,调整MMP-2/TIMP-1的平衡有关。     

晚期氧化蛋白产物对血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的研究晚期氧化蛋白产物对血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应技术和酶联免疫吸附试验测定细胞中单核细胞趋化蛋白-1mRNA的表达量及蛋白的含量。观察晚期氧化蛋白产物对平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响。结果晚期氧化蛋白产物促进平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1mRNA和蛋白表达的作用(P<0.01)。结论晚期氧化蛋白产物促进平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1mRNA和蛋白表达可能是其致动脉粥样硬化机制之一。     

低频电磁场对大鼠主动脉平滑肌细胞骨桥蛋白基因表达的影响

目的 观察不同磁场强度、不同作用时间的低频电磁场（LFEMF）对培养的大鼠主动脉的血管平滑肌细胞（VSMC）骨桥蛋白（OPN）基因表达的影响，以探讨磁场是否能用于经皮冠状动脉介入治疗（PCI）后冉狭窄（RS）的防治。方法 用含10％小牛血清的DMEM培养液体外培养大鼠主动脉VSMC，随机分为对照组、不同磁场强度（20，40，60mT）及作用时间（10，20，30min）实验组，应用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western Blot技术结合光密度扫描分析，观察LFEMF对VSMC的OPN表达的影响。结果 各LFEMF组均明显抑制VSMC的OPN mRNA和OPN蛋白的表达，且具有磁场强度依赖性抑制作用，但无时间依赖性（P〈0．05）。结论 LFEMF能在基因水平上抑制VSMC的OPN的表达。     

Effects induced by inhibitors of the phosphatidylinositol 3‐kinase/Akt and nitric oxide synthase/guanylyl cyclase pathways on the isometric contraction in rat aorta: a comparative study

This work was aimed to determine whether isometric contraction in Wistar rat aorta is related to the phosphatidylinositol 3‐kinase (PI3K)/Akt‐dependent activation of endothelial nitric oxide synthase (eNOS). Basically, we hypothesized that additional increases in active tone occur after the pharmacological inhibition of a transduction pathway involved in NO synthesis or action. In intact aortic rings contracted with phenylephrine or high K⁺, the cumulative administration of the PI3K inhibitor, LY294002, elicited significant decreases – but not supplementary increases – in tone. In endothelium‐intact tissues, on the other hand, the Akt1/2 kinase inhibitor did not alter phenylephrine‐ and K⁺‐induced isometric contractions. The PI3K inhibitor wortmannin (1 × 10^?7 m ) produced a significant supplementary contraction only in endothelium‐intact aortic rings precontracted with phenylephrine. Higher concentrations of this inhibitor produced relaxations of phenylephrine and high K⁺‐constricted endothelium‐intact and endothelium‐denuded aortic rings. LY294002 and wortmannin did not cause any potentiating effect on phenylephrine‐ and angiotensin II‐induced concentration‐dependent contractile responses in endothelium‐intact tissues. In intact aortic rings contracted with phenylephrine or high K⁺, the addition of the NOS inhibitor, L‐NAME, or the guanylyl cyclase inhibitor, ODQ, further augmented tone in a concentration‐dependent manner, and these supplementary contractions were significantly reduced by endothelium removal. Taken together, our data suggest that the PI3K/Akt pathway is not counteracting aortic isometric contractions by activation of the eNOS. It appears, on the other hand, that the smooth muscle PI3K can stimulate contraction without activation of the protein kinase Akt in response to GPCR agonists and high K⁺.     

短期缺氧-复氧对大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因表达的影响

目的 研究短期缺氧-复氧对大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因表达的影响.方法 无菌条件下留取大鼠胸主动脉中膜,采用组织贴块法培养的第4～7代细胞,通过观察细胞在缺氧环境下形态学变化、死亡细胞计数等,判断缺氧刺激对体外培养平滑肌细胞活性的影响,并与正常培养箱内对照进行比较.提取细胞总RNA,用RT-PCR法,研究平滑肌细胞在缺氧及复氧后不同时间段myocardin mRNA的表达变化.结果培养细胞呈典型的"峰谷"样生长.自制缺氧装置24 h内氧分压明显降低,且pH值波动不明显.RT-PCR结果表明,与正常对照组相比,平滑肌细胞myocardin mRNA表达在缺氧12、24 h后逐渐降低[(0.871±0.053)与(0.573±0.074)、(1.329±0.042),P＜0.05].缺氧12 h降低最明显.且随着缺氧时间的延长,myocardin基因的表达水平逐渐回升,并增高;缺氧24 h再复氧6 h后,其表达水平逐渐回升,复氧12 h接近正常表达水平.结论 短期缺氧-复氧影响大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因的表达.     

在大鼠骨骼肌急性损伤修复过程中按摩对神经型一氧化氮合成酶、肝细胞生长因子mRNA表达的影响

目的:研究按摩对大鼠骨骼肌急性损伤修复过程中肌卫星细胞激活关键因子神经型一氧化氮合成酶(n NOS)、肝细胞生长因子(HGF)m RNA表达的影响,探讨按摩对于骨骼肌急性损伤修复的作用。方法:将44只SPF级成年雄性SD大鼠按随机抽样法分为3组,正常对照组(A组,n=4),自然恢复组(C组,n=24),按摩组(M组,n=16)。A组不做任何处理,C、M组用改良打击器制备大鼠腓肠肌急性损伤模型。C组不给予按摩,M组于造模后第3天介入按摩治疗。C、M组于造模后第7天、第14天、第21天及第28天取实验动物腓肠肌样本,HE染色观察组织病理改变,实时荧光PCR检测肌卫星细胞中n NOS、HGF m RNA表达量。结果:按摩干预治疗后,M、C组与A组比较,各时间点n NOS、HGF m RNA表达量均高于A组,且具有显著差异(P<0.01);M组与C组比较,在7天、第14天、第21天及第28天n NOS、HGF m RNA表达量M组均高于C组(P<0.01)。M组与C组比较,损伤区域成肌细胞更多,肌丝稠密,肌卫星细胞增殖明显,血供更丰富,坏死组织恢复更快。结论:按摩可有效提高肌卫星细胞中n NOS、HGF m RNA表达水平,激活更多的肌卫星细胞,促进受损骨骼肌的修复再生。