电磁脉冲辐射后小鼠免疫器官损伤的病理研究

目的 :研究电磁脉冲 (EMP)照射后小鼠脾脏和胸腺的组织病理变化。方法 :198只小鼠经 6× 10 4V/m电磁脉冲辐照后 6h、1d、3d、7d、14d、2 8d、3个月、6个月、9个月和 12个月共 10个时相点活杀取脾脏和胸腺 ,分别应用光镜和电镜进行组织学和超微结构观察。结果 :电磁脉冲辐照后早期 :脾脏脾小体结构不清 ,体积缩小 ,生发中心不明显 ;淋巴细胞核固缩、崩解 ;红髓中巨噬细胞增多 ,血窦扩张、充血明显。照后中期 :脾脏红髓纤维化 ;胸腺皮质细胞变性坏死 ,髓质内可见灶状出血 ,出血灶周围细胞核固缩。照后后期 :脾脏出现“假小叶”状纤维化 ,胸腺皮质变薄 ,髓质变宽 ,皮髓质比例倒置 ,髓质内纤维组织增生甚至纤维化。照后晚期 :脾脏被膜增厚 ,胸腺出现萎缩 ,脾脏和胸腺中的淋巴细胞均有所恢复。在透射电镜下 ,脾脏和胸腺内淋巴细胞均出现典型的凋亡图像。结论 :电磁脉冲辐照后脾脏和胸腺发生明显损伤 ,脾脏损伤更为严重和迅速 ,其病变具有进行性、阶段性及缓慢恢复性特点 ,表明免疫系统器官为EMP辐照敏感组织之一。     

血小板第4因子造血保护作用的实验研究

目的 :研究血小板第 4因子 (PF4)对环磷酰胺 (CTX)处理小鼠体内造血系统的保护作用。方法 :实验鼠用PF4注射 2次 ,间隔 6h ,第二次注射后 2 0h给予CTX 2 0 0mg·kg- 1 。动态观察小鼠外周血白细胞数以及不同时期外周血T细胞亚群 ,骨髓粒-巨噬系集落形成单位 (CFU -GM)、细胞周期和小鼠脾脏、胸腺的变化。结果 :PF4能增加CTX处理小鼠骨髓CFU -GM的产率 ,加速体内CFU -GM的恢复 ;短时增加CTX处理小鼠骨髓G0 /G1 期细胞 ,减少骨髓细胞的坏死和凋亡 ;增加胸体比和脾体比。但是PF4对小鼠外周血白细胞数和T细胞亚群未见明显影响。结论 :PF4能保护小鼠骨髓及胸腺、脾脏等器官组织免受CTX损伤 ,增加骨髓CFU -GM的形成能力     

不同剂量60Co γ射线对小鼠淋巴细胞及其调节性T细胞亚群的影响

目的 分析不同剂量照射对小鼠淋巴细胞及其调节性T细胞亚群数量和表型的影响。方法 用不同剂量⁶⁰Co γ射线全身照射小鼠,分离胸腺和脾脏中的淋巴细胞,计数各样本细胞数后利用流式细胞仪分析CD4+T细胞和CD4+FOXP3+CD25+Treg细胞亚群的比例。结果 小鼠受照后胸腺细胞和脾脏细胞呈剂量依赖性减少,在照后4 d降至最低(F=118.08、144.01,P<0.05)。较高剂量照射后,胸腺中Treg细胞数随时间逐渐减少,而脾脏中该细胞亚群逐渐恢复;较低剂量照射后,胸腺中Treg细胞数有所增加。与0 Gy组相比较,Treg细胞比例随剂量增加而增加(胸腺中F=5.16、89.44、3.01,P<0.05;脾脏中F=52.02、32.13、27.45,P<0.05)。结论 不同剂量引起淋巴细胞及其Treg细胞亚群的辐射响应不同,其中Treg细胞亚群对较高剂量照射具有显著的辐射抗性,而低剂量照射可能诱导Treg细胞成熟分化或迁移。此外,淋巴细胞及其亚群的不同时间效应,也表明淋巴细胞成熟分化规律的差异。     

低剂量率低水平辐射对机体某些免疫功能的影响

用⁶⁰CoY源, 剂量率0.068mGy/分, 对C57BL/6小鼠进行全身照射, 照射剂量为24.4、48.8,73.2,97.6和122.0mGy.照射后检测小鼠脾脏抗体形成细胞(PFC),胸腺细胞³H-TdR自发掺入率。脾脏及胸腺有核细胞数, 脾细胞酸性α醋酸蒙酯酶(ANAE)染色的变化。结果表明, 当照射荆瑶为24.4mGy时, 胸腺细胞自发掺八率明显增高, 当照射剂量为73.2mGy时, 脾脏PFc明显增加。以上低剂量率小剂量作用下呈现出的机体某些免疫功能的刺激作用, 并非由于调节性T细胞数量的变化所致。讨论了引起不同免疫学多数刺激效应均不同辐射剂量与各参数辐射敏感住之闻的可能关系。     

维生素D对不同剂量X射线照射小鼠免疫功能的保护作用

目的 观察维生素D对不同剂量X射线照射小鼠免疫功能的影响。方法 将小鼠采用随机数字表法分为5组:健康对照组、2 Gy和5 Gy照射组、2 Gy+药物(维生素D)组和5 Gy+药物(维生素D)组。给药组小鼠在不同剂量X射线照射后,连续7 d腹腔注射6 IU维生素D[1,25(OH)₂D₃]/g体重,于给药后第8天,5组小鼠均处死。测定小鼠体重、胸腺和脾脏指数,ConA诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力,ELISA法检测脾细胞IL-2的分泌量。结果 与健康对照组相比,2和5 Gy照射组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力、脾细胞IL-2的分泌量均显著降低(F=36.20、7.13,P<0.05);与2 Gy照射组相比,2 Gy+药物组小鼠胸腺指数、脾脏指数、脾脏T淋巴细胞增殖能力均显著增高(t=-2.54、-2.24、-2.84,P<0.05);与5 Gy照射组相比,5 Gy+药物组小鼠的胸腺指数、脾细胞IL-2的分泌量显著增高(t=-5.02、-2.64,P<0.05)。结论 维生素D能够改善受照小鼠的免疫功能,但随照射剂量增大,改善作用减弱。     

CD4~ T细胞在受照小鼠体内的分裂需要的肽不同于胸腺的选择

目的:探讨不同MHCII类分子结合肽对输注给T细胞缺失小鼠体内的CD4 T细胞分裂的影响。方法:小鼠受到450cGy(137　Cs)照射前或照射后36h静脉输注从不同品系小鼠的淋巴结或脾脏中采集、纯化并标记羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)的T细胞,通过分析小鼠CD4 T细胞荧光强度的直方图来反映其分裂程度。结果:源于B6.PL(Thy1.1 )小鼠的T细胞输注7d后,未受照B6(Thy1.2 )小鼠淋巴结及脾脏的T细胞几乎未出现分裂,而受照小鼠的CD4 和CD8 T细胞同时开始分裂。将BALB/c及B6.PL小鼠的T细胞分别输注给RAG2敲除(RAG2KO)及TCR-βKO…     

小鼠淋巴结B细胞的扫描分光光度分析

作者曾于1981年对小鼠淋巴结T细胞进行扫描分光光度分析,本文主要根据5′核苷酸酶(5′N)染色法鉴别小鼠淋巴结和胸腺B淋巴细胞所获得的初步结果,进一步应用扫描分光光度法分析小鼠淋巴结B细胞群的光吸收特性。材料和方法实验动物、细胞悬液涂片制备、5′N活力测定原理、步骤及5′N阳性细胞的确定,详见前文。本实验以测得的5′N阳性细胞百分数代表小鼠淋巴结细胞悬液中的B淋巴细胞百分数。     

富勒醇对60Coγ射线致小鼠损伤的防护作用

目的 研究^60Coγ衍生物富勒醇对^60Coγ射线损伤的防护和恢复治疗作用及机制。方法 分别在辐照前和辐照后给小鼠腹腔注射富勒醇，^60Coγ射线全身均匀照射，吸收剂量5．0Gy，测定小鼠体重、脾指数、胸腺指数、血象和SOD含量的变化；取小鼠脾脏并制成脾细胞悬液，应用流式细胞仪(FCM)检测脾脏细胞的周期。结果 辐照损伤后小鼠体重减轻、脾指数和胸腺指数降低、血象中各项指标下降、脾脏细胞周期中S期所占的比例升高。富勒醇可促进上述指标不同程度的恢复，并使脾脏细胞周期中S期恢复正常。加速了脾脏细胞的分裂增殖，从而使脾细胞能较快的得到修复,结论 富勒醇对^60Coγ射线照射小鼠具有一定的防护和恢复治疗的作用。     

HPD的组织学效应:免疫器官

LACA小鼠腹腔注射HPD 0.4mg、2.0mg和2.0mg×3/只后,免疫器官都发生不同程度的组织学效应。主要为胸腺萎缩,脾和淋巴结(肠系膜)的胸腺依赖区萎缩及其中淋巴细胞减少;脾白髓边缘区内淋巴细胞减少或消失,淋巴滤泡萎缩,滤泡内中、小淋巴细胞对HPD的反应比生发中心细胞更明显。牌生发中心数量减少和截面积变小。文中强调,这些代表T、B淋巴细胞系统的组织结构变化,必然会影响或有损机体的细胞和体液免疫功能。     

淡豆豉提取物对急性辐射损伤小鼠的保护作用研究

目的研究淡豆豉提取物对6Gy的^60Coγ辐射损伤小鼠的保护作用。方法6Gy的^60Coγ全身性照射小鼠造模,小鼠灌胃给予0．5％CMC—Na为溶媒配制的阳性对照药尼尔雌醇和淡豆豉提取物的混悬液28d,每天1次,照射前后分别连续灌胃给药14d;血细胞分析仪检测白细胞、红细胞、血小板等血液学指标,称取小鼠体质量,脾脏和胸腺质量;透射电子显微镜观察小鼠脾脏、胸腺、小肠和睾丸的超微结构。结果淡豆豉提取物能明显减轻^60Coγ射线引起的小鼠外周血白细胞、红细胞、血小板等指标的减少和体质量减轻,显著提高股骨骨髓有核细胞数,明显改善辐射受损的脾脏、胸腺、小肠和睾丸的超微结构和增加萎缩的胸腺、脾脏等指数。结论淡豆豉提取物对低剂量^60Coγ辐射损伤小鼠具有明显的保护作用。     

新月菱形藻胞外多糖抗病毒活性研究

目的阐明新月菱形藻胞外多糖(exopolysaccharidesofNitzschiaclosterium,EPN)及其硫酸酯(sulfatedexopolysaccharidesofNitzschiaclosteriumSEPN)的体内抗流感病毒活性。方法以流感病毒亚甲型小鼠肺炎适应株(FM1)对小鼠鼻吸入法造模,EPN和SEPN对染毒小鼠灌胃,以对小鼠肺指数抑制率作为体内抗病毒活性指标,同时观察小鼠的胸腺和脾脏指数;以MTT法检测EPN和SEPN对小鼠淋巴细胞增值和对NK细胞杀伤的促进作用。结果EPN和SEPN都显示出体内抗流感病毒作用,其中,中剂量组(100mg·kg-1)作用最为显著。与同等剂量的EPN相比,SEPN对FM1病毒表现出更为显著的体内抗病毒活性。EPN和SEPN均能不同程度地提高染毒小鼠的胸腺指数和脾脏指数,显著地促进小鼠淋巴细胞的增值反应,提升小鼠NK细胞的杀伤活性。结论新月菱形藻胞外多糖及其硫酸酯可能通过促进淋巴细胞增值,增强NK细胞的杀伤活力实现对FM1病毒的抑制作用。其中SEPN还通过自身携带的负电荷与病毒颗粒的正电荷相互作用阻止病毒进入宿主细胞从而抑制其复制来发挥抗病毒作用。     

卡拉胶寡糖对放射损伤的防护作用

目的 探讨卡拉胶寡糖对受6．0Gy X射线照射小鼠的辐射防护作用。方法采用6MV X直线加速器一次全身照射BALB／c小鼠，3个卡拉胶寡糖组照射前连续14d和照射后继续给药7d。观察小鼠30d存活率、外周血白细胞总数、胸腺指数和脾脏指数、脾脏NK细胞活性和腹腔巨噬细胞吞噬功能。结果卡拉胶寡糖组小鼠30d存活率比照射对照组提高75％～90％；而且卡拉胶寡糖能加速小鼠外周血白细胞的恢复，明显提高胸腺指数和脾脏指数，激活脾脏NK细胞的杀伤活性，增强巨噬细胞吞噬功能。结论卡拉胶寡糖对受照射小鼠有明显的辐射防护作用。     

齐酞酸钠对免疫性肝损伤模型小鼠的保护作用

目的　观察齐酞酸钠 (Oleanolicand 3β-phthalicmonoesterdisodiumsalt,OAPES)对BCG(卡介苗 )加LPS(脂多糖 )诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法　采用卡介苗 (BCG)加脂多糖 (LPS)诱导小鼠免疫性肝损伤 ,通过检测小鼠的胸腺、肝脏、脾脏指数以及血清谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)活性来研究OAPES的保肝功能。结果　造模组小鼠与正常对照组相比 ,胸腺指数明显减小 ,肝脏指数及脾脏指数明显增大 ,血清ALT及AST活性显著增高 ;给药组中、小剂量组 (10 0、5 0mg·kg-1)显著降低模型小鼠血清ALT及AST活性 ,大 (2 0 0mg·kg-1)、中剂量组可显著增大胸腺指数。结论　本实验成功地复制了BCG加LPS诱导小鼠产生免疫性肝炎的模型 ;OAPES对这种免疫性肝损伤具有显著的保护作用     

类泛素化蛋白酶8对T细胞活化与分化的影响

目的 探讨类泛素化蛋白酶8(SENP8)在T细胞活化和分化过程中的作用。方法 C57BL/6背景的Senp8基因打靶小鼠(Senp8^F/F小鼠,简称WT小鼠)与同背景的Cd4-Cre转基因小鼠交配,获得在T细胞中特异性缺失SENP8的小鼠(Senp8^F/F;Cd4-Cre小鼠,简称KO小鼠),通过鼠尾基因组DNA PCR以及胸腺细胞免疫印迹实验进行基因型鉴定。流式细胞术分析SENP8缺失对稳态T细胞比例和数量的影响,并以李斯特菌尾静脉注射感染WT和KO小鼠,7 d后流式细胞术分析CD8⁺T细胞活化、扩增、效应因子表达情况。结果 PCR鉴定结果揭示,KO小鼠有Cd4-Cre基因和纯合的Loxp片段;免疫印迹结果显示,KO小鼠胸腺细胞中的SENP8蛋白表达下降;证明成功构建了T细胞中特异性敲除SENP8的小鼠模型。流式细胞术检测结果表明,CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞在稳态WT和KO小鼠脾脏中的比例和数量并无显著差异。李斯特菌感染7 d后,条件性缺失SENP8不影响CD4^...     

五鹤续断对辐射损伤小鼠保护作用的研究

目的 研究五鹤续断(WHDA)注射液对辐射损伤小鼠的保护作用.方法 将160只昆明种雌性小鼠分为正常对照组、照射组和低剂量WHDA+照射组、高剂量WHDA+照射组,观察其30 d存活率;测定辐射后6 h、3 d、6 d、9 d小鼠的外周血象;测定辐射后小鼠的胸腺、脾脏和肝脏质量;测定辐射后小鼠外周血和肝脏的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)及丙二酰二醛(MDA)水平.结果 WHDA可提高辐射后小鼠的存活率,对其白细胞及血小板的数量变化有显著影响,但对其胸腺、脾脏、肝脏质量均无明显影响.WHDA还能显著提高辐射后小鼠的SOD活性,增加GSH水平,降低MDA水平.结论 WHDA对辐射损伤小鼠有明显的保护作用.     

Zn诱导金属硫蛋白(MT)合成对小鼠脾淋巴细胞放射性凋亡的影响

ＭＴ是一类富含巯基和金属的小分子蛋白质。因其结构的独特性和功能的多样性 ,已引起了国内外学者的普遍关注。既往研究证实 ,Ｚｎ可诱导小鼠肝等组织表达ＭＴ ,但Ｚｎ对小鼠胸腺和脾脏等免疫器官ＭＴ表达及其生物学作用的研究国内外仅见少量文献报道。为此我们利用胸腺和脾脏ＭＴ基因表达的差异性 ,探讨了ＭＴ合成对辐射所致脾脏及胸腺淋巴细胞凋亡的影响。一、材料和方法1 动物 :雄性昆明种小鼠 ,体重 (2 0± 2 )ｇ ,购于白求恩医科大学实验动物部。2 实验过程(1)Ｚｎ诱导ＭＴ蛋白表达的剂量效应及时程变化 :小鼠随机分为注Ｚｎ组和对照…     

2Gy60Coγ射线照射诱导调节性T细胞的辐射凋亡机制

目的 分析2 Gy ⁶⁰Co γ射线照射对小鼠调节性T细胞存活率的影响,并初步探讨Treg细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax与CD39表达之间的关系。方法 用2 Gy ⁶⁰Co γ射线全身照射小鼠,分离胸腺、脾脏中的淋巴细胞,计数细胞数后利用流式细胞仪对Treg细胞亚群的凋亡率、CD39及凋亡相关因子的表达进行分析。结果 受照后Treg细胞较CD4+FOXP3-T细胞的存活率高,胸腺和脾脏中Treg细胞存活率的时间效应关系不同;受照后Treg细胞凋亡率增加,以照后4 d增幅最为显著(t=-3.6、-7.4, P<0.05);受照后胸腺与脾脏中Bax/Bcl-2的比值变化规律不同,前者中该比值增加,以照后4 d增加最为显著(t=-3.4, P<0.05),而脾脏中该比值于照后4 d减小(t=2.4, P<0.05);受照后4 d胸腺Treg细胞中CD39表达上调(t=-6.6, P<0.05),而脾脏中表达下调(t=2.6, P<0.05)。结论 受照后Treg细胞凋亡率、Bax/Bcl-2比值的变化规律与CD39的表达规律基本一致。     

致死照射小鼠移植骨髓后淋巴组织的重建

机体受致死量射线照射后,造血细胞移植对淋巴组织的重建已日益为人们所重视。这不仅因为淋巴组织是存活动物免疫机能的细胞学和组织学基础,而且移植后的一些合并症如GVHD等也与植入后增殖的免疫活性细胞的性能密切相关。非特异性酸性α萘醋酸酯酶染色法是近年来发展起来的鉴别T与B淋巴细胞的较方便的方法。本文即应用这种方法观察小鼠在受致死照射和移植骨髓后外周血和胸腺、脾脏以及肠系膜淋巴结中T与B淋巴细胞消长的动态变化。     

小鼠狼疮样肾炎模型的建立

目的:研制可诱导的小鼠狼疮样肾炎模型.方法:本研究利用正常成年DBA/2J与C57BL/6杂交子一代(B6D2F1)(雄性)小鼠为受体鼠,接受多次大量DBA/2J(雄性)小鼠脾脏、胸腺、淋巴结细胞的静脉输注(每周2次,共4次),2个月左右大部分受体小鼠出现局部胡须脱落、腹水、毛发变色等现象.结果:ELISA显示血清中IgG、IgG1和IgG2含量明显增加(P<0.01).考马斯亮蓝染色法检测显示,近80%实验组小鼠出现蛋白尿,而对照组小鼠未发现存在尿蛋白.病理学分析显示,皮肤、肠道、肝脏和肾脏均有炎性细胞浸润,尤以肝脏、肾脏病变为著.结论:提示已初步建立了较稳定的小鼠狼疮样肾炎模型,为相关后续研究提供了有益的资料.     

电离辐射对小鼠组织金属硫蛋白-1mRNA表达的影响

目的 探讨X射线全身照射对小鼠肝、脑、胸腺及脾脏金属硫蛋白(MT)-1 mRNA表达的影响及其剂量效应关系。方法 采用Northem杂交方法检测了X射线全身照射后小鼠肝、脑、胸腺及脾脏MT-1 mRNA水平变化。结果 4GyX射线照射后肝脏及胸腺MT-1mRNA水平逐渐升高，照射后4h达峰值，分别为假射组的1．82及1．72倍，24h基本恢复至正常水平；0．5～6Gv照射后4h，肝脏及胸腺MT-1mRNA水平均呈剂量依赖性增加，6Gy照射后MT-1mRNA水平分别为假照组的2．13和1．62倍。但X射线全身照射后小鼠脑及脾脏MT-1mRNA水平未见明显变化。结论 X射线全身照射可提高小鼠肝脏和胸腺MT-1 mRNA水平，但对小鼠脑及脾脏MT-1mRNA表达无影响.