扶正解毒方药调控T790M及c-Met改善吉非替尼获得性耐药

目的:探讨扶正解毒方药改善吉非替尼获得性耐药的作用机制.方法:建立肺癌干细胞荷瘤小鼠模型,随机分为生理盐水组、吉非替尼组、扶正解毒方药联合吉非替尼组、扶正中药联合吉非替尼组、解毒中药联合吉非替尼组,测定荷瘤小鼠抑瘤率,应用ARMS法检测肿瘤组织T790M突变,RT-PCR法检测肿瘤组织c-Met基因扩增.结果:吉非替尼...     

奥希替尼和厄洛替尼对 EGFR–T790M 突变 NSCLC 疗效分析

〔摘 要〕 目的：探讨奥希替尼联合厄洛替尼对人表皮生长因子受体（EGFR）–T790M 基因突变非小细胞型肺癌（NSCLC） 的临床疗效和不良反应。方法：将 2019 年 6 月至 2019 年 12 月就诊于德阳市人民医院肿瘤科的 EGFR–T790M 突变 NSCLC 患者随机分为观察组和对照组,每组 30 例。对照组采用厄洛替尼治疗,观察组采用厄洛替尼联合奥希替尼治疗。观察两组 患者治疗后疾病控制率和治疗有效率、评估肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、糖类抗原 125（CA125）和细胞角蛋白片段 19 （CY–FRA21–1）的表达水平和药物不良反应。结果：治疗后,观察组患者的疾病控制率和治疗有效率均高于对照组,差异 均具有统计学意义（P＜0.05）;观察组患者CY–FRA21–1、CEA、CA125水平均低于对照组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）, 两组患者的不良反应发生率,差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。结论：奥希替尼联合厄洛替尼治疗 EGFR–T790M 突变 NSCLC 疗效显著,安全性高。     

补中益气汤联合吉非替尼治疗肺腺癌随机平行对照研究

[目的]观察补中益气汤联合吉非替尼治疗肺腺癌疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将60例住院患者按病志号抽签简单随机分两组。对照组30例吉非替尼250mg,早餐后1h温服。治疗组30例补中益气汤,升麻、柴胡各3g,炙甘草、陈皮各6g,当归9g,土炒白术、人参各12g,炙黄芪15g等,1剂/d,水煎1000mL,早、中、晚口服;吉非替尼治疗同对照组。连续治疗3个月为1疗程。观测临床表现、基因T790M突变携带率、基因T790M突变时间、不良反应。连续治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组CR20例,PR8例,SD1例,PD1例,总有效率93. 33%;对照组CR14例,PR9例,SD4例,PD3例,总有效率90. 00%;治疗组疗效优于对照组两组间无明显差异(P 0. 05)。基因T790M突变携带率两组间无明显差异(P 0. 05),基因T790M突变时间治疗组优于对照组(P 0. 01)。不良反应发生率治疗组略低于对照组,两组间无明显差异(P 0. 05)。[结论]补中益气汤联合吉非替尼治疗肺腺癌,疗效满意,无严重不良反应,值得推广。     

南方红豆杉水提物与厄洛替尼联用抑制裸鼠A549肺癌移植瘤生长及其机制探析

目的研究南方红豆杉水提物联合厄洛替尼抑制裸鼠A549移植瘤生长及其机制。方法建立荷瘤裸鼠模型,随机分为低剂量厄洛替尼组(A组)、标准剂量厄洛替尼组(B组)、低剂量厄洛替尼联合南方红豆杉水提物组(C组)、标准剂量厄洛替尼联合南方红豆杉水提物组(D组)、南方红豆杉水提物组(E组)、对照组(F组),每组12只,接种24 h后连续给药7周,采血1 m L、取瘤组织,计算抑瘤率,金氏公式分析两药联合作用。Real-time PCR和ELISA法分别检测表皮生长因子(EGFR)、环氧化酶(cyclooxygenase,COX)-2及B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,BCL-2)mRNA和蛋白水平。结果与F组比较,B~E组裸鼠移植瘤瘤重均明显降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。低剂量厄洛替尼和南方红豆杉水提物的金氏值为0.92,标准剂量厄洛替尼和南方红豆杉水提物的金氏值为0.96,均为两药合用单纯相加。与F组比较,D、E组EGFR mRNA水平、A~E组COX-2 mRNA水平及B~D组Bcl-2 mRNA水平均明显降低,B~E组COX-2蛋白水平及C、D组Bcl-2蛋白水平均明显降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论南方红豆杉水提物与低剂量厄洛替尼、标准剂量厄洛替尼均有相加抑瘤作用,两者联合抑瘤作用机制可能与下调COX-2和Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平有关。     

吉非替尼对非小细胞肺癌的疗效与T细胞亚群变化分析

目的观察吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)临床疗效与外周T淋巴细胞亚群变化的关系。方法对组织或细胞病理证实的35例晚期NSCLC患者口服吉非替尼250 mg/d。采集全部患者治疗前及治疗后外周血标本,三色染色后流式细胞仪分析CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群变化。结果35例患者中部分缓解13例,稳定13例,进展9例,疾病控制率为74.2%。治疗前后T淋巴细胞亚群无显著差异。结论吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效较好,毒副反应轻微。治疗后T淋巴细胞可以恢复到治疗前水平。     

南方红豆杉水提物抑制裸鼠A549肺癌移植瘤生长及其机制研究

目的: 研究南方红豆杉水提物对裸鼠A549肺癌移植瘤生长的抑制作用和机制。 方法: 建立荷A549肺癌移植瘤模型,随机分为对照组、低、中、高剂量南方红豆杉水提物实验组,24 h后以等体积生理盐水及药物灌胃,给药7周,每3 d测移植瘤长短径,绘制移植瘤生长曲线,给药7周后处死裸鼠,取瘤组织,计算抑瘤率,采用Real-time PCR及Western blot方法检测mRNA和蛋白水平。 结果: 南方红豆杉水提物各剂量组均有明显抑瘤效果(P<0.05)。与对照组相比,各实验组移植瘤组织中EGFR及Survivin mRNA水平明显下调(P<0.05),VEGF mRNA水平无明显变化。灰度值之比分析显示:各实验组移植瘤组织中EGFR及VEGF蛋白水平均有下调趋势,但差异无统计学意义,Survivin及p-EGFR蛋白水平明显下调(P<0.05)。 结论: 南方红豆杉水提物对血管生成无明显影响,可能通过抑制Survivin蛋白,抑制EGFR磷酸化,起到抑制移植瘤生长的效果。     

南方红豆杉水提物对肿瘤细胞增殖抑制作用的研究

目的研究南方红豆杉水提物对人胃腺癌细胞株SGC-7901和人乳腺癌株MCF-7增殖的抑制作用和机制。方法采用二苯基四氮唑溴盐比色法（MTT法）检测南方红豆杉水提物和紫杉醇对SGC-7901和MCF-7细胞增殖的抑制作用;光镜观察其对2种细胞形态的影响;流式细胞仪检测其对2种细胞凋亡的影响。结果南方红豆杉水提物对肿瘤细胞的增殖有抑制作用;其抑制作用机制为诱导细胞凋亡。结论南方红豆杉水提物对肿瘤细胞的增殖有抑制作用。     

南方红豆杉水提物对人肺癌A549细胞增殖抑制作用的研究

目的:研究南方红豆杉水提物对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用和机制。方法:采用MTT法检测南方红豆杉水提物对A549细胞增殖的抑制作用;生长曲线法观察其抑制A549细胞的时间-效应曲线;流式细胞仪检测其对A549细胞周期及凋亡的影响;倒置显微镜及电镜观察其对A549细胞形态的影响。结果:南方红豆杉水提物对A549细胞的增殖有抑制作用;其抑制作用机制为使A549细胞周期出现明显的G0/G1期阻滞,诱导细胞凋亡。结论:南方红豆杉水提物对人肺癌A549细胞的增殖有抑制作用。     

南方红豆杉水提物联合顺铂对人肺癌A549细胞增殖抑制作用的研究

目的:研究南方红豆杉水提物联合顺铂对肺癌A549细胞增殖的抑制作用和机制。方法:将A549细胞分为不同浓度顺铂组、不同浓度南方红豆杉水提物组及空白组,用CCK-8法检测药物作用48 h后对细胞存活率的影响。根据上述结果,再将A549细胞分为低浓度顺铂联合不同浓度南方红豆杉水提物组、低浓度顺铂组、空白对照组,用CCK-8法检测药物作用48 h后对细胞存活率的影响,用RT-PCR检测细胞内Bcl-2、Bax、Survivin基因表达变化。结果:南方红豆杉水提物可增加顺铂对A549细胞的抑制作用,且随着药物浓度的增加,其抑制作用逐步增强;顺铂联和红豆杉通过下调Bcl-2,Survivin,并上调Bax的表达,而促进细胞发生凋亡,具有抗肿瘤作用。结论:南方红豆杉水提物联合顺铂能抑制A549细胞生长,其机制可能为凋亡相关基因Bcl-2,Survivin的降低,促凋亡基因Bax的增高有关。     

养阴解毒颗粒联合吉非替尼治疗表皮生长因子受体突变晚期肺腺癌阴虚型的临床研究

目的:观察中药养阴解毒颗粒联合吉非替尼治疗表皮生长因子受体(EGFR)突变晚期肺腺癌阴虚型的临床疗效.方法:69例晚期肺腺癌患者随机分为治疗组35例和对照组34例.对照组口服吉非替尼,治疗组在口服吉非替尼的基础上联合养阴解毒颗粒,比较两组的临床疗效.结果:治疗组客观缓解率在第3、6、8个月时显著高于对照组(P＜0.05...     

南方红豆杉水提物诱导人肺癌A549细胞凋亡及其分子机制的实验研究

目的 探讨南方红豆杉水提物诱导人肺癌A549细胞的凋亡作用及其分子机制。     

南方红豆杉水提物对肺癌裸鼠抑瘤作用及生活质量影响的研究

目的：研究不同浓度南方红豆杉水提物抑瘤作用及对荷瘤裸鼠生活质量的影响.方法：50只BALB/C-NU裸鼠建立A549肺癌模型后,分为5组：模型组、CTX组及南方红豆杉低、中、高剂量组,分别给予生理盐水、CTX及低、中、高剂量南方红豆杉水提物处理,比较各组药物的抑瘤率及各组裸鼠的生活质量.结果：CTX组抑瘤率41.89％,明显高于南方红豆杉水提物组（分别为15.08％、24.58％和36.87％）,但南方红豆杉水提物在改善荷瘤裸鼠生活质量方面有明显的优势.结论：南方红豆杉水提物治疗肿瘤,可能使患者在生存期及生活质量方面有所改善.     

南方红豆杉水提物诱导人肺腺癌A549细胞凋亡与紫杉醇抑瘤机制不同的研究

目的:初步探讨南方红豆杉水提物抗人肺腺癌A549细胞(以下简称"A549细胞")的作用机制,明确其与紫杉醇抗肿瘤机制的不同。方法:以流式细胞仪检测南方红豆杉水提物对A549细胞凋亡的影响,以紫杉醇为对照;以普通光学显微镜观察南方红豆杉水提物和紫杉醇对A549细胞形态的影响;以Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白P-jnk的表达。结果:①流式细胞检测及光镜观察发现南方红豆杉水提物处理后A549细胞呈典型的早期凋亡表现(P<0.05,P<0.01),而紫杉醇组细胞以坏死及晚期凋亡表现为主(P<0.05,P<0.01),且其比例均呈现一定的剂量-效应关系;②Western blotting检测发现南方红豆杉水提物处理后A549细胞P38蛋白表达无明显变化、P-jnk蛋白随药物浓度增加表达减少(P<0.01)。结论:南方红豆杉水提物抗A549细胞的机制与紫杉醇不同,其作用机制主要与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

消癌平逆转厄洛替尼非小细胞肺癌耐药的作用机制研究

肺癌是我国发病率和死亡率居于首位的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌（NSCLC）占了85%。酪氨酸激酶抑制剂（TKI）的出现为NSCLC治疗带来了新的希望,但获得性耐药是制约TKI的主要问题。     

抗瘤增效方联合吉非替尼治疗老年非小细胞肺癌患者及对炎症因子,T细胞亚群水平及血清肿瘤标志物的影响

目的:探讨抗瘤增效方联合吉非替尼治疗老年非小细胞肺癌及对患者炎症因子,T细胞亚群水平及血清肿瘤标志物影响。方法:选取郑州大学附属肿瘤医院肿瘤内科非小细胞肺癌Ⅳ期老年患者84例,患者或家属签字同意,积极配合此次研究,按随机数字表法分组,对照组患者(42例)予以单纯吉非替尼治疗,研究组患者(42例)予以吉非替尼联合抗瘤增效方治疗,观察并记录所有患者治疗前后生存质量、炎症因子及T细胞亚群水平,同时对比临床疗效及不良反应状况。结果:对照组有效率低于研究组(P0.05);与治疗前比较,两组患者治疗后生存质量、炎症因子及T细胞亚群水平均发生变化,研究组治疗后躯体功能,角色功能,社会功能,情绪功能评分高于对照组,研究组治疗后白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2),白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)和γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平高于对照组,研究组治疗后CD8+水平低于对照组,CD4+及CD4+/CD8+水平高于对照组(P0.05);治疗后,对照组血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)升高,治疗组VEGF下降(P0.05);与治疗前比较,两组患者癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA),糖抗原(carbohydrate antigen-125,CA125)及细胞角蛋白19片段21-1(cytokeratin 19 fragments,CYFRA21-1)差异无统计学意义,组间比较差异无统计学意义;两组患者不良反应较轻,无药物不良反应。结论:抗瘤增效方联合吉非替尼治疗老年非小细胞肺癌疗效确切,能提高生活质量及免疫功能。     

蟾毒灵联合吉非替尼对肺癌细胞H1975的影响及机制研究

目的 观察蟾毒灵联合吉非替尼对肺癌细胞H1975生长的影响,探讨蟾毒灵增强吉非替尼抗肿瘤作用的可能机制。方法 应用MTT法检测蟾毒灵（1～100 nmol/L）、吉非替尼（0.1～20 μmol/L）及两药联合干预对H1975细胞增殖的抑制作用;流式细胞术观察蟾毒灵（10 nmol/L）、吉非替尼（1 μmol/L）及联合用药对H1975细胞凋亡的影响;Western blot检测单独用药或联合用药对表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）、Met信号通路相关蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,吉非替尼浓度超过5 μmol/L时才见到其对H1975细胞生长的抑制作用;蟾毒灵与吉非替尼联合后,可明显抑制肿瘤细胞的生长。流式细胞术结果显示,蟾毒灵联合吉非替尼干预后肿瘤细胞凋亡率为（61.64±5.61）%,明显高于单用蟾毒灵的（18.34±3.42）%和单用吉非替尼的（7.32±1.08）%,差异有统计学意义（P<0.01）。Western blot结果显示,蟾毒灵联合吉非替尼能明显下调H1975细胞p-EGFR、p-Met、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达。结论 蟾毒灵联合吉非替尼可显著抑制H1975细胞的增殖,促使肿瘤细胞凋亡;其抗肿瘤活性的机制可能与阻断EGFR－磷酯酰肌醇－3激酶（PI3k）/Akt信号通路有关。     

黄连活性成分药根碱干预T790M突变EGFR-TKIs耐药非小细胞肺癌的机制研究＊基于网络药理学及实验验证

目的 通过网络药理学及分子对接技术预测黄连活性成分药根碱（Jatrorrhizine）干预表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors，EGFR-TKIs）耐药非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）的效果及作用机制，运用体外细胞学实验进行验证。方法 通过Swiss Target Prediction数据库、PharmMapper数据库、TCMSP数据库及PubMed数据库获得黄连活性成分药根碱的潜在靶标，使用OMIM、Gene Cards及DisGeNET数据库收集非小细胞肺癌相关基因，经人工检查剔除假阳性基因后通过Venn工具获取药根碱和非小细胞肺癌的交集基因，通过PubMed数据库进一步验证靶标后导入STRING数据库，构建蛋白-蛋白相互作用（protein-protein interaction，PPI）网络，通过Cytoscape软件进行拓扑分析，通过DAVID数据库进行GO富集分析及KEGG通路分析，通过KEGG PATHWAY数据库比对药根碱靶标与EGFR-TKIs耐药通路之间的关系，预测药根碱干预EGFR-TKIs耐药非小细胞肺癌的直接作用靶标及靶通路。借助Auto Dock软件进行分子对接验证，PyMol软件进行可视化。采用EGFR-TKIs耐药非小细胞肺癌细胞模型H1975细胞系（即T790M突变EGFR-TKIs耐药非小细胞肺癌细胞系）进行细胞学实验，通过CCK-8初步考察药根碱对H1975细胞增殖能力的影响，采用蛋白质印迹法（Western blot，WB）验证药根碱对H1975细胞中部分关键靶蛋白的调控作用。结果 共获得药根碱靶标328个，非小细胞肺癌疾病基因3965个，药根碱与疾病交集基因69个，有7个核心靶基因为EGFR-TKIs耐药通路相关基因，富集分析显示PI3K-Akt信号通路为重要靶通路，分子对接结果表明药根碱与PI3K及mTOR之间均有较好的结合活性。药根碱可下调靶蛋白PI3K和mTOR的磷酸化，促进H1975细胞凋亡（P<0.01）。结论 黄连活性成分药根碱可能通过PI3K-Akt信号通路发挥抗T790M突变EGFR-TKIs耐药非小细胞肺癌的效用。