烧伤创面内表皮生长因子与表皮生长因子受体蛋白变化的临床研究

目的：观察烧伤创面内表皮生长因子（EGF）与表皮生长因子受体（EGFr）的变化,探讨表皮生长因子在创面愈合中的作用,为临床治疗提供依据。方法：应用免疫组织化学方法对35例烧伤病人创面不同部位内的EGF蛋白和EGFr蛋白的表达强度和分布情况进行了观察。结果：EGF蛋白和EGFr蛋白在烧伤创面内有明显的一致表达,在创面上皮愈合边缘部位EGF蛋白和EGFr蛋白表达最强;在创面中心肉芽部位EGF蛋白和EGFr蛋白表达次之;在创面已经愈合部位EGF蛋白和EGFr蛋白表达相对减弱;正常皮肤对照部位EGF蛋白和EGFr蛋白无明显的表达。结论：烧伤创面内不同部位EGF、EGFr蛋白的表达强度和分布情况不同,其变化与创面愈合密切相关,提示创面内源性的EGF、EGFr蛋白表达变化在促进创面愈合方面有很重要的作用。     

影响碱性成纤维细胞生长因子促进烧伤创面愈合因素的探讨

采用大白鼠１５％Ⅲ度烧伤模型，探讨了影响碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）促进烧伤创面愈合的因素。结果发现，烧伤创面早期切痂可保持ｂＦＧＦ的活性。４０天创面愈合率达８４．０％，而未切痂组愈合率仅９，Ｏ％。肝素可增强ｂＦＧＦ促进创面肉芽组织生长、毛细血管增生、纤维母细胞增殖及细胞ＤＮＡ合成。创面感染的控制有利于保护ｂＦＧＦ的活性。伤后１周开始使用ｂＦＧＦ为适宜时期。     

影响碱性成纤维细胞生长因子促进烧伤创面愈合因素探讨

采用大白鼠１５％Ⅲ度烧伤模型，探讨了影响碱性成纤维细胞生长因子促进烧伤创面愈合的因素。结果发现，烧伤面早期切痂可保持ｂＦＧＦ的活性。４０天创面愈合率达８４．０％，而未切痂组愈合率仅９．０％。肝素可增强ｂＦＧＦ促进创面肉芽组织生长、毛细血管增生、纤维母细胞增殖及细胞ＤＮＡ合成。创面感染的控制有利于保护ｂＦＧＦ的活性。伤后１周开始使用ｂＦＧＦ为适宜时期。     

深Ⅱ度烧伤创面汗腺干细胞标志物的变化规律

目的 了解深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中汗腺上皮细胞增殖并向表皮细胞转化的规律,探讨其机制.方法 选择2004年1月-2007年12月,江苏省泰州市第四人民医院和山东大学第二医院收治的四肢与躯干烧伤患者28例.收集患者深Ⅱ度烧伤创面组织标本37块、浅Ⅱ度烧伤创面组织标本21块、正常皮肤标本10块.采用免疫组织化学双染色法,观察细胞角蛋白10(CK10)、CK14、CK19、bel-2和P63在深、浅Ⅱ度烧伤创面及正常皮肤汗腺分泌部上皮细胞中的表达情况.结果 正常皮肤汗腺分泌部上皮细胞中等强度表达CK19、CK14和CK10,基底层肌上皮细胞微弱表达P63和CK14,CK10表达阳性的终末分化细胞不表达bcl-2和P63.浅Ⅱ度烧伤创面修复过程中,其汗腺分泌部结构及上述蛋白表达未见异常.深Ⅱ度烧伤后7 d创面汗腺分泌部上皮细胞P63和bcl-2表达增强;伤后8～10 d创面基底细胞增殖、迁移和鳞状上皮化,形成bcl-2、P63、CK19和CK14表达强阳性的实心岛状上皮结构,并随肉芽组织向创面浅层迁移,经鳞状上皮增殖完成创面再上皮化.深Ⅱ度烧伤创面愈合后13～30 d,超常增殖的表皮基底层和基底上层细胞仍强烈表达bcl-2、CK14、CK19和P63. 结论干细胞和短暂扩充细胞逆分化过程导致上皮生长滞后和肉芽组织过度增殖,这种失衡现象可能是导致深Ⅱ度烧伤创面修复失控的重要机制之一.     

类肝素对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响

目的探讨深Ⅱ度烧伤创面早期加深而延迟愈合的机理。方法采用大鼠深Ⅱ度烫伤模型，创面外用类肝素软膏，观察其对大鼠深Ⅱ度烫伤早期创面病理变化和创面愈合的影响，并测定了烧伤创面含水量，血浆和烧伤创面抗凝血酶Ⅲ（ＡＴ－Ⅲ）、纤维蛋白降解产物（ＦＤＰ）含量、烧伤创面羟脯氨酸含量、Ⅰ／Ⅲ型胶原比例、真皮细胞增殖周期及创面愈合时间。结果创面外用类肝素可以降低烧伤创面水肿程度，增加血浆ＡＴ－Ⅲ活性，增加烧伤创面中ＦＤＰ含量及羟脯氨酸含量，促使Ⅰ／Ⅲ型胶原比例降低，增加真皮细胞中ＤＮＡ合成，减轻烧伤创面早期加深，缩短大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合时间。结论类肝素具有促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的作用。     

Ⅲ度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面自体皮移植对创面愈合的影响

目的探讨对Ⅲ度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面,采用自体皮移植修复的机制,并评价其疗效.方法采用肉眼、病理组织学、免疫组织化学、电镜和流式细胞术,动态观察成年Ⅲ系小型猪Ⅲ度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面自体植皮术(A组)后,移植皮片活性与结构,移植床肉芽组织、胶原纤维、微血管、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)蛋白表达和成纤维细胞超微结构变化,并与Ⅲ度烧伤后传统的肉芽刮除纤维板创面自体植皮术(B组)进行比较,另设对照组,皮肤仅剃毛(C组). 结果术后3天,移植皮片成活,A组较B组皮片损伤轻、皮肤细胞增殖指数高、移植床血管内皮细胞及肉芽组织增生,bFGF表达明显.5天,两组血管内皮细胞及肉芽组织增殖旺盛,成纤维细胞呈蛋白合成旺盛和功能活跃象,新生胶原纤维出现,但B组增殖更加明显.7～14天,A组表皮结构及真皮毛细血管密度逐渐恢复正常,移植床肉芽组织逐渐成熟为纤维结缔组织,而B组则延后2天左右.21天后,A组愈合创面病理改变轻于B组.30～60天,A组创面收缩及改容程度明显轻于B组,且触之较软、移动度尚可. 结论Ⅲ度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面自体皮移植术的疗效优于传统手术.     

类肝素对大鼠深II度烫伤创面愈合的影响

目的 探讨深Ⅱ度烧伤创面早期加深而延迟愈合的机理。方法 采用大鼠深Ⅱ度烫伤模型，创面外用类肝素软膏，观察其对大鼠深Ⅱ度烫伤早期创面病理变化和创面愈合的影响，并测定了烧伤创面含水量，血浆和烧伤创面抗凝血酶Ⅲ（ＡＴ－Ⅲ）、纤维蛋白降解产物（ＦＤＰ）含量、烧伤创面羟脯氨酸含量、Ｉ／Ⅲ型胶原比例、真皮细胞增殖周期及创面愈合时间。结果 创面外用类肝素可以降低烧伤创面水肿程度，增加血浆ＡＴ－Ⅲ活性，增加烧伤创     

烧伤创面应用生长因子后的DNA分析

将基因重组的人表皮细胞生长因子（ｒｈ－ＥＧＦ）、酸性成纤维细胞生长因子（ｒ－ａＦＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｒ－ｂＦＧＦ）和牛脑提取液（ｂＢＥ）外用于烧伤创面，旨在探讨皮肤组织和细胞ＤＮＡ的含量及周期变化。实验结果显示：烧伤创面经应用ｒｈ－ＥＧＦ，ｒ－ａＦＧＦ，ｒ－ｂＦＧＦ和ｂＢＥ后第５天与生理盐水组（ＮＳ）相比，创面愈合率、表皮细胞和全厚层皮肤组织的ＤＮＡ含量均高于ＮＳ组（Ｐ＜０．０１）；全厚层皮肤ＤＮＡ的流式细胞仪分析表明，应用生长因子各组的Ｓ期细胞数百分比均高于ＮＳ组（Ｐ＜０．０１），细胞分裂增殖旺盛，Ｇ期细胞不断进入Ｓ期，使Ｓ期细胞数增加，ＤＮＡ的合成和含量增加。提示：烧伤创面外用细胞生长因子可促进表皮细胞的增殖，加速创面的愈合。     

提高深Ⅱ度烧伤创面的处理水平

深Ⅱ度烧伤伤及皮肤真皮网状层。由于身体各部位真皮的厚度不同，同等热力造成的烧伤程度深浅不一，深Ⅱ度创面可能部分接近浅Ⅱ度、部分临界Ⅲ度。偏浅的深Ⅱ度创面大多可自行愈合，而临界Ⅲ度的创面则需手术植皮才能愈合。目前临床上对烧伤深度的判断多较主观，加之烧伤部位、年龄、致伤原因、早期创面不断变化以及医生自身的经验等因素，在烧伤深度的判断方面容易出现混乱，处理上亦存在较大差异。     

烧伤创面应用生长因子后的DNA分析

将基因重组的人表皮细胞生长因子，酸性成纤维细胞生长因子，碱性成纤维细胞生长因子和牛脑提取液外用于烧伤创面，旨在探讨皮肤组织和细胞ＤＮＡ的含量及周期变化。实验结果显示：烧伤创面经应用ｒｈ－ＥＧＦ，ｒ－ａＦＧＦ－ｒ－ｂＦＧＦ和ｂＢＥ后第５天与生理盐水组相比，创面愈合率，表皮细胞和全厚层皮肤组织的ＤＮＡ含量均高于ＮＳ组；全厚层皮肤ＤＮＡ的流式细胞仪分析表明，应用生长因子各组的Ｓ期细胞数百分比增高于ＮＳ组     

Ⅱ度烧伤病人皮肤角朊细胞ICAM-1的表达

目的探讨Ⅱ度烧伤创面愈合过程中角朊细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）的表达及其意义。方法应用免疫组织化学染色技术,对烧伤后不同时间Ⅱ度烧伤皮肤组织角朊细胞ＩＣＡＭ１的表达进行动态观察。８例健康人皮肤,６例烧伤病人正常皮肤及８例Ⅱ度烧伤愈合后增生性瘢痕组织为对照组。结果健康人正常皮肤基底层细胞ＩＣＡＭ１可低表达,烧伤病人正常皮肤基底层细胞ＩＣＡＭ１可表达增强。Ⅱ度创面基底层细胞伤后１周内ＩＣＡＭ１表达轻度增高,２周内明显增强,２～４周稳定高表达,ＩＣＡＭ１呈极性分布,新生上皮多层角朊细胞ＩＣＡＭ１表达显著增强,ＩＣＡＭ１阳性细胞呈长柱状排列。结论Ⅱ度烧伤皮肤角朊细胞ＩＣＡＭ１表达增强可能与创基炎性细胞浸润相关,具有诱导角朊细胞增殖、迁移,加速上皮化的作用。     

珍石烧伤膏对wistar大鼠深Ⅱ°烧伤创面愈合影响的研究

目的:通过动物实验观察珍石烧伤膏促进创面愈合情况,探究珍石烧伤膏治疗烧伤的作用机制及为指导临床治疗提供实验依据。方法:将78只wistar大鼠随机分为模型组(72只)及正常对照组(6只),模型组背部行深Ⅱ°烧伤后分3组:A组为同体对照,右侧创面涂珍石烧伤膏,左侧对照创面直接用凡士林油纱覆盖包扎。B组背部创面全部涂珍石烧伤膏。C组凡士林油纱覆盖。观察每组创面愈合程度、创面组织病理学变化、胶原的变化和羟脯氨酸含量。结果:珍石组大鼠不同时间点的创面愈合率均高于对照组(P<0.05),愈合时间明显缩短(P<0.05),愈合创面上皮化程度好于对照组,胶原分布规律,羟脯氨酸含量明显高于对照组。结论:珍石烧伤膏通过促进上皮细胞生长,刺激羟脯氨酸表达,调节胶原合成,减少瘢痕形成等机制促进伤口愈合。     

Ⅱ度烧伤病人皮肤角朊细胞ICAM-1的表达

目的探讨Ⅱ度烧伤创面愈合过程中角朊细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达及其意义。方法应用免疫组织化学染色技术,对烧伤后不同时间Ⅱ度烧伤皮肤组织角朊细胞 ICAM-1的表达进行动态观察。8例健康人皮肤,6例烧伤病人正常皮肤及8例Ⅱ度烧伤愈合后增生性瘢痕组织为对照组。结果健康人正常皮肤基底层细胞 ICAM-1可低表达,烧伤病人正常皮肤基底层细胞ICAM-1可表达增强。Ⅱ度创面基底层细胞伤后1周内 ICAM-1表达轻度增高,2周内明显增强,2～4周稳定高表达,ICAM-1呈极性分布,新生上皮多层角朊细胞 ICAM-1表达显著增强,ICAM-1阳性细胞呈长柱状排列。结论Ⅱ度烧伤皮肤角朊细胞 ICAM-1表达增强可能与创基炎性细胞浸润相关,具有诱导角朊细胞增殖、迁移,加速上皮化的作用。     

Ⅱ度烧伤病人皮肤角朊细胞ICAM—1的表达

目的 探讨Ⅱ度烧伤伤面愈合过程中角朊细胞间附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的表达及其意义。方法 应用免疫组织化学染色技术,对烧伤后不同时间Ⅱ度烧伤皮肤组织角朊细胞ＩＣＡＭ－１的表达进行动态观察。８例健康人皮肤,６例烧伤病人正常皮肤及８例Ⅱ度烧伤愈合后增生性瘢痕组织为对照组。结果 健康人正常皮肤基底层细胞ＩＣＡＭ－１可低表达,烧伤病人正常皮肤基底层细胞ＩＣＡＭ－１可表达增强。Ⅱ度他面基底层细胞伤后１周内Ｉ     

The effect of topical hyperalimentation on wound healing rate and granulation tissue formation of experimental deep second degree burns in guinea-pigs

Revital , a product containing 19 amino acids, was applied to experimental deep second degree burns in guinea-pigs for 24 days, in order to assess the effect of this form of hyperalimentation on the healing process. Silver sulphadiazine cream served as the contralateral control standard. Epithelialization was faster in the silver sulphadiazine treated burn wounds, while contraction of both tested wounds proceeded at a similar rate. Revital significantly enhanced the formation of granulation and scar tissue in this burn wound model. These observations indicate that topical wound hyperalimentation promotes granulation tissue formation of experimental deep second degree burns in guinea-pigs.     

锌-金属硫蛋白对大鼠皮肤烫伤创面的影响

目的研究Ｗｉｓｔａｒ大鼠深Ⅱ度烧伤后皮肤活力的下降与脂质过氧化反应的关系。方法以氧耗量、琥珀酸脱氢酶、Ｓｃｈｉｆ’ｓ碱及创面愈合时间为指标,以金属硫蛋白作为保护剂外用于烫伤创面,分别采用空白对照及５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ,１×１０－５ｍｏｌ／Ｌ两种浓度,测定伤后８,２４,４８ｈ各项指标的变化。结果皮肤氧耗量、琥珀酸脱氢酶活性下降,Ｓｃｈｉｆｓ碱含量明显升高。应用金属硫蛋白保护后,皮肤活性（氧耗及琥珀酸脱氢酶含量）均显著高于对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）,同时Ｓｃｈｉｆ’ｓ碱含量下降（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）,创面愈合时间平均提前２天。结论烫伤组织损伤与脂质过氧化反应有一定的关系,而金属硫蛋白有一定保护作用。     

大鼠浅度烫伤创面愈合与相关生长因子及受体的基因表达

目的探讨浅Ⅱ度烧伤创面愈合过程中相关生长因子及其受体的作用。方法采用大鼠浅Ⅱ度烫伤模型,观察了大鼠浅Ⅱ度烫伤后创面愈合过程中组织学、炎性细胞、表皮细胞周期的变化,检测了创面相关生长因子及受体的基因表达。结果炎性细胞到达创面依次为中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞;表皮细胞周期变化为伤后３天细胞增殖活跃,伤后７天细胞分裂明显增多;伤后１,３天ＰＤＧＦ（血小板源性生长因子）、ＰＤＧＦＲ（血小板源性生长因子受体）和ＥＧＦＲ（表皮生长因子受体）基因表达明显增强,伤后３,５天ＥＧＦ（表皮生长因子）、ＴＧＦβＲ２（转化生长因子β受体α）基因表达增强,伤后５,７天ＴＧＦβＲ１（转化生长因子β受体１）基因表达增强,伤后７,１０天ＴＧＦβ１（转化生长因子β）基因表达增强。结论烧伤诱导相关生长因子及受体的基因表达,并且具有时相性和可逆性;相关生长因子基因表达与表皮细胞周期间可能存在相互调控作用,生长因子是调控创面愈合的主要因素。     

Interleukin-8 levels and activity in delayed-healing human thermal wounds

There are numerous causes for slow or delayed wound healing. Because slowly healing wounds are often inflamed, we quantitated the inflammatory chemokine, interleukin-8, produced by slowly healing human burn wounds and compared this to interleukin-8 from healed wounds and normal intact skin. Interleukin-8 levels were increased significantly in unhealed wounds (19.7 ng/ml) compared to healed wounds (7.7 ng/ml) or normal skin (5.7 ng/ml). Interleukin-8 in these ranges was added to adult human keratinocytes and fibroblasts. Interleukin-8 significantly decreased keratinocyte replication but had no effect on fibroblast replication. The rate or final degree of fibroblast populated collagen lattice contraction was inhibited at interleukin-8 concentrations between 10 and 30 ng/ml, but not altered at concentrations below 10 ng/ml and above 100 ng/ml. The concurrent application of indomethacin at 10 microg/ml reversed this interleukin-8 induced inhibition. Interleukin-8 inhibited myosin ATPase activity, apparently by reducing the phosphorylation of nonmuscle myosin light chain. We conclude that elevated levels of interleukin-8 may be found during delayed healing, and these elevated interleukin-8 levels may directly contribute to retarded wound closure.     

Protease levels are significantly altered in pediatric burn wounds

Burn wounds contain high levels of protease activity due to the need to remodel the damaged extracellular matrix proteins. While necessary, excessive protease activity can lead to improper wound healing and is associated with increased contraction and fibrosis. No studies to date have investigated the expression changes of all the collagenases and elastases in burn wounds. The present study compares gene expression changes and changes in collagenase and elastase activity between burn wound eschar and normal skin in a pediatric population. Deidentified pediatric tissues were used for these experiments. Burn wound tissue was excised as part of normal standard care within a week from injury; normal skin was removed during elective plastic surgery procedures. RNA-sequencing was performed and significant results were confirmed with qRT-PCR. Activity assays showed a significant increase in both collagenase and elastase activity in the burn wound tissue compared to the normal skin. Western blotting and substrate zymography of tissue homogenates evaluated the results at the protein levels. Four elastases and three collagenases were determined to be significantly upregulated in the wound tissues by both RNA-sequencing and qRT-PCR. Cathepsin V was the only protease that was significantly downregulated. All but one metalloproteinase studied was significantly upregulated. None of the serine proteases were significantly altered in the wound tissues. In conclusion, matrix metalloproteinases appear to be the most highly elevated proteases after a pediatric burn wound injury, at least within the first 3–7 days. The data warrant further investigation into the effects of MMPs on burn wound healing.     

成纤维细胞表面粘附分子β1整合素在伤口愈合中的表达

目的研究伤口愈合过程中,细胞外基质（Ｅｘｔｒａｃｅｌｕａｒｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ）中粘附分子整合素β１的表达与胶原合成之间的密切关系。方法运用间接免疫胶体金标记技术,在电镜下观察了１２例中厚取皮供区创面成纤维细胞表面粘附分子β１整合素的表达及细胞超微结构的变化,并作了流式细胞仪检测。结果中厚取皮供区创面成纤维细胞表面粘附分子整合素α５及β１亚单位的表达与对照组相比有显著差异;同时,前者细胞内富含有核糖体积聚的内质网,微管、微丝等细胞器的含量也较高。结论上述结果揭示了在伤口愈合过程中,粘附分子整合素β１的表达与胶原合成之间有重要的关系,为进一步探索粘附分子在伤口愈合中的作用打下了基础。