InvA-PCR应用于磐安县钩端螺旋体病检测的研究

目的:针对InvA-PCR方法检测钩端螺旋体病的研究。方法:根据侵袭蛋白A基因(InvA)与卫生行业标准推荐的引物G1/G2对比,进行特异性与灵敏度研究,并应用于磐安鼠标本钩端螺旋体PCR检测。对磐安县2009分离菌株进行钩端螺旋体InvA-PCR和LS-PCR鉴定。结果:InvA-PCR具有较高的灵敏度和特异性,该引物可特异性扩增致病性钩端螺旋体DNA,对本实验所用的其他细菌不扩增。2009年分离的钩端螺旋体菌株进行PCR鉴定结果与血清学鉴定结果相符。对鼠标本进行InvA-PCR检测,InvA-PCR检测阳性率为5%。与卫生行业标准推荐的引物G1/G2对比,符合率为100%。结论:InvA-PCR检测方法可灵敏、特异地检测致病性钩端螺旋体,能正确有效地反应野生动物带毒率,为控制钩端螺旋体病提供依据。     

聚合酶链反应检测钩端螺旋体的研究进展

钩体病是由钩端螺旋体(简称钩体)引起的一类季节性人畜共患病。该病型别较多，临床症状复杂，危害较大。自从1886年Weil医生首次报导本病以来．各国学在钩体病原学、病理学、流行病学、实验室诊断及疫苗的研制等方面的研究进展迅速，特别是八十年代后，随着分子生物学的发展，许多新方法用于钩体病的研究，取得了许多成果,     

用聚合酶链反应（PCR）检测临床标本中的钩端螺旋体

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测临床标本中的钩端螺旋体王际莘译杨裕华校基因ＤＮＡ－ＤＮＡ杂交有助于确定９种基因型的钩体，其构成２００多种血清型，其中非致病性钩体仅有三种。即双曲钩端螺旋体，Ｌ．ｍｅｙｅｒｉ和Ｌ．ｗｏｌｂａｃｈｉ。致病性钩体由二种构成：问号...     

InvA-PCR快速检测鼠肾标本中钩端螺旋体

目的:探讨InvA-PCR方法快速检测钩端螺旋体的应用价值。方法:对2009年淳安县106只鼠肾标本直接提取其DNA用invA-PCR法进行检测,同时对106只鼠肾标本进行分离培养和显微镜凝集试验(MAT)血清学鉴定。结果:106只鼠肾标本经InvA-PCR法检测,9份标本钩端螺旋体invA基因呈阳性,阳性率为8.5%。106只鼠肾标本分离培养,分离到3株钩端螺旋体菌株,均为黄疸出血群,阳性率为2.8%。3份培养阳性标本InvA-PCR均阳性。结论:InvA-PCR方法操作方便、耗时短、特异性强、灵敏度高,可作为致病性钩端螺旋体可靠的快速诊断方法,可用于钩体病的流行病学调查和钩体病临床标本快速初筛。     

浙江省钩端螺旋体PCR检测方法建立与应用

目的：为更好的进行钩端螺旋体病监测,为预防措施提供依据.方法：建立PCR检测方法,进行灵敏度、特异性研究.探索钩端螺旋体PCR扩增DNA条件.对浙江省2006年分离菌11株进行PCR鉴定,对龙游、常山捕获的一百只鼠和一百只蛙肝、脾、肾标本在提取其DNA后进行PCR检测.结果：所建立PCR检测方法具备较高灵敏度和较好特异性.对2006年分离的钩体菌株进行的PCR鉴定结果与血清学鉴定结果相符.鼠和蛙肝、脾、肾标本进行PCR检测,PCR检测阳性率10%,钩体菌株培养分离率仅为1%.x2=15.58,P＜0.05有显著差异.测序及培养均能证实PCR检测结果具有特异性.结论：钩体PCR检测方法的建立能更加准确的反映野生动物自然带毒率.钩体PCR检测方法可推广应用.     

二种PCR检测方法应用于钩端螺旋体检测结果分析

钩端螺旅体病(Leptospirosis,简称钩体病)是由钩端螺旅体(Leptospira,简称钩体)引起的一种分布广泛的人兽共患性传染病.     

浙江省钩端螺旋体FlaB—PCR检测方法的建立与应用

目的探讨FlaB-PCR检测方法对钩端螺旋体（钩体）检测的可行性。方法根据鞭毛蛋白B基因（FlaB）选择引物,与卫生行业标准推荐的引物G1／G2对比,进行特异性与灵敏度研究,并应用于龙游、常山两地的蛙、鼠标本钩体PCR检测。对浙江省2007年分离菌株进行钩体PCR鉴定。结果FlaB-PCR具有较高的灵敏度和特异性,该引物可特异性扩增致病性钩体DNA,对本实验所用的其他细菌不扩增。2007年分离的钩体菌株进行PCR鉴定结果与血清学鉴定结果相符。鼠和蛙肾标本进行FlaB-PCR检测,阳性率20．94％,与卫生行业标准推荐的引物G1／G2对比,两法符合率为90．54％。结论FlaB-PCR检测方法可灵敏、特异地检测致病性钩体,能正确有效地反映野生动物带病毒率,可为控制钩体病提供依据。     

应用PCR技术检测小型兽类肾组织中钩端螺旋体DNA的研究

目的 :应用PCR技术对安徽省 7个不同地区所获的小型兽类肾组织中携带的钩端螺旋体DNA进行检测。结果 :安徽省的小型兽类携带钩体DNA检出率为 9.41% (16 / 170 ) ,不同地区间检出率有所不同 ,个别地区啮齿类动物携带钩体DNA检出率高达 19.0 5 % (12 / 6 3) ,而有的地区则未检出 ;不同的小兽之间携带钩体DNA的检出率也有所不同 ,黑线姬鼠为 12 .96 % (14/ 10 8) ,褐家鼠为 5 .88% (2 / 34 ) ,其余 4种啮齿类动物则未检出。结论 :应用PCR技术能准确及时地从宿主动物的肾脏组织中检测出钩体DNA的存在 ,其高度特异性、敏感性是鼠肾培养及鼠血MAT的检测不可比拟的 ,用其来分析钩体病的流行因素、流行特征和地理分布以及为今后扩大钩体病调查 ,提供了新的手段     

PCR扩增技术在钩端螺旋体病早期诊断中的应用

目的 研究钩体病患者血清中钩体DNA，为防治该病提供科学依据。方法 应用PCR技术。测定患者血清钩体DNA和MAT法测血清中钩体抗体。结果 40份患者早期血清中PCR法检出阳性8份，53份血清中MAT法检出阳性11份。结论 PCR分子生物学技术应用钩体病早期诊断是一种快速敏感扔效的方法，有利于提高钩体病防治总体水平。     

lipL32—PCR应用于钩端螺旋体检测

目的探讨lipL32-PCR检测方法对钩端螺旋体（钩体）检测的可行性。方法根据外膜脂蛋白基因（@L32）设计引物,与卫生行业标准推荐的引物G1／G2对比,进行特异性与灵敏度研究,并应用于常山县蛙、鼠肾脏标本钩体PCR检测;对浙江省2008年分离菌株进行钩体PCR鉴定。结果lipL32-PCR具有较高的灵敏度和特异性,该引物可特异性扩增致病性钩体DNA,对本实验所用的其他细菌不扩增。2008年分离的钩体菌株PCR鉴定结果与血清学鉴定结果相符;鼠和蛙肾标本进行liL32-PCR和卫生行业标准的G1／G2PCR检测,结果两法符合率为95．0％;lipL32-PCR检测阳性率为10．0％,G1／G2-PCR检测阳性率为5．0％,采用精确计算概率法进行阳性率比较,二者差异无统计学意义（尸：0．25）。结论liL32-PCR检测方法可灵敏、特异地检测致病性钩体,能正确有效地反映野生动物带菌率,为控制钩体病提供依据。     

四川省钩端螺旋体宿主动物调查

目的：了解野鼠、耕牛和猪的钩端螺旋体带菌情况，探讨减少钩端螺旋体病发病影响因素。方法：对野鼠鼠肾、耕牛牛尿和生猪猪肾进行钩端螺旋体菌株的分离培养。结果：在野鼠鼠肾和水牛牛尿中分离出钩端螺旋体菌株。结论：野鼠仍是我省钩端螺旋体病的主要传染源，水牛为七日热群钩端螺旋体病的传染源。初步发现近年我省钩端螺旋体病发病减少可能是由于野鼠种群变化带来的结果。     

山东省1964～2006年钩端螺旋体病流行病学分析

目的了解山东省1964～2006年钩端螺旋体病流行趋势,探讨钩体病流行规律。方法采取回顾性研究方法对山东省1964～2006年钩体病流行病学调查和监测点资料进行分析。结果1964～2006年钩体病共报告133 594例,死亡81例。除鲁北地区滨洲,其余16市均发生过钩体病,分布在89个县,占全省的66.92%（89/133）。发病时间为7,8,9月份,流行形式主要为雨水型,其次是洪水型,临床类型以流感伤寒型为主,主要流行菌群为波摩那群。带菌猪是山东钩体病的主要传染源,猪带菌率与雨水型、洪水型钩体病流行密切相关。结论20世纪80年代前钩体病在山东省流行较严重,年均发病率在13.50/10万,20世纪90年代后钩体病基本得到了控制,年均发病率在0.071/10万。     

PCR在钩端螺旋体病诊断和流行病学上的应用

钩端螺旋体病足具有强传染性的人兽共患病,其临床症状多变,容易与其他感染性疾病混淆,快速准确地诊断钩端螺旋体病及进行有效的流行病学调查十分重要.PCR具有特异性强、自动化程度高、快速高效等优点,在钩端螺旋体病的早期诊断和流行病学调查上具有很好的应用前景.     

2015-2019年安徽省钩端螺旋体病疫情动态监测分析

目的 了解安徽省钩端螺旋体病流行特征,为制定防治对策提供科学依据.方法 用描述性流行病学方法对2015-2019年安徽省钩端螺旋体病流行特征进行分析,采用病原学、血清学检测方法探索主要的流行菌群.结果 2015-2019年安徽省钩体病年平均发病率为0.028/10万,发病最高年份是2016年(0.077/10万),职业...     

Canine leptospirosis, United States, 2002-2004

The proportion of positive Leptospira microscopic agglutination tests for 23,005 dogs significantly increased from 2002 to 2004 (p < 0.002) regardless of the positive cutoff titer used and was highest (p < 0.05) for serovars Autumnalis and Grippotyphosa. The strongest positive serologic correlation (r = 0.72) was between serovars Autumnalis and Pomona.     

洪涝灾区健康人群免疫水平及控制钩体病对策

目的调查洪涝灾区健康人群免疫水平，探讨洪涝灾区控制钩体病流行对策。方法选择湖北省仙桃、宜都市，公安县等钩体病流行较为严重的地区作为调查点，进行血清学等调查。结果近年洪灾频繁发生，钩体病传染源扩散较快，健康人血清隐性感染率较高，公安县以黄疸出血群和流感伤寒群免疫水平较高，仙桃和宜都市以黄疸出血群和波摩那群免疫水平较高，健康人血清钩体IgG显著高于IgG抗体。健康人血清黄胆出血群、波摩那群、流感伤寒群抗体阳性率分别为27．61％，13．73％，11．68％，分别低于10年前平均水平20％～54％。结论首次定量调查健康人血清钩端螺旋体IgG和IgM抗体水平，奠定了我省健康人钩端螺旋体免疫水平测定、钩端螺旋体疫苗效果测定和钩端螺旋体病人诊断基础。控制钩体病的流行应采取接种钩体菌苗等综合性防治措施。     

PCR技术在前列腺液细菌检测中的应用

目的 应用聚合酶链反应(PCR)技术检测慢性前列腺炎患者前列腺液中病原菌的阳性率.方法 收集97例慢性前列腺炎患者的前列腺液,分别用16S rRNA基因PCR方法和细菌培养法进行检测,比较两种方法检测 病原菌的敏感性.结果 97例慢性前列腺炎患者前列腺液中,PCR方法检测出58例,阳性率为59.79％,培养法检出10例,阳性率为10.31％,PCR方法检出率明显高于培养法(P＜0.01).结论 16S rRNA基因PCR检测方法具有快速,特异性和敏感性高等特点.     

警犬基地钩端螺旋体病流行状况及疫苗接种效果观察

目的通过对公安部南昌市警犬基地及其幼犬寄养环境的钩端螺旋体(以下简称钩体)病的系统监测,了解公安部南昌市警犬基地钩体病的流行状况,为警犬基地或其他类型的犬场钩体病防制提供依据。方法 2009~2011年钩体病流行季节在警犬基地及其幼犬寄养环境范围内,分别在健康人群、基地外环境(鼠、青蛙)等宿主中进行钩端螺旋体抗体检测和病原分离,分析该犬场养殖基地和幼犬寄养环境的人、犬及其他宿主动物所感染钩体型别是否一致,了解钩体在区域范围内人—犬—其他宿主动物的传播关系。结果训犬师(刑警学院新学员)感染钩体型别与基地褐家鼠中分离的钩体型别基本一致,幼犬寄养环境健康人群感染钩体型别也与当年度寄养的幼犬感染的钩体型别基本一致。根据基地钩体病型别定购了覆盖所有感染型别的人用钩体多价疫苗对幼犬进行疫苗接种,1个月和3个月后各型抗体阳转率均达到100%,这是首次报告人用钩体多价疫苗对犬类有效。结论公安部南昌市警犬基地已成为钩体病的疫源地,幼犬寄养在农户家会导致感染钩体,针对钩体型别选择合适的疫苗分别进行人、犬疫苗接种,结合灭鼠措施,对降低训犬师(主要是刑警学院实习学员)、犬场周围群众、犬及外环境钩体病的感染率,减少基地经济财产损失,保护疫源地周围人群的身体健康,有重要的社会意义和经济价值。     

幽门螺杆菌flaB基因克隆及序列分析

目的：将幽门螺杆菌（Helicobacter，pylort，Hp）鞭毛蛋白B亚单位基因（月2B）克隆到质粒载体pNEB193上，并进行序列分析，为Hp疫苗的构建奠定基础。方法：用PCR方法扩增Hp月2B基因，并将其定向克隆入质粒pNEB193上，然后进行序列分析。结果：PCR扩增获得长度为1545bp的月2B基因片段，并成功克隆入pNEB193，序列分析结果显示扩增的月2B基因序列与Genebank公布的月2B基因序列基本一致。结论：本研究获得了月2B阳性克隆子，为Hp重组疫苗的研究奠定了基础。