恶性肿瘤

Surviving mRNA和caspase-3 mRNA在卵巢上皮性癌中的表达及意义；SurvivinKi67在卵巢原发癌与转移癌中的表达及其临床意义；卵巢癌化疗后合并抗利尿激素分泌异常综合征1例；二硫代氨基甲酸吡咯烷增敏多西他赛对卵巢癌细胞毒性作用的机制研究；CA125对Ⅲ期卵巢癌细胞减灭术疗效的预测价值[编者按]     

恶性种瘤

端粒酶活性及粘附分子CD44 v5／v6与卵巢癌恶性行为的相关性研究；体外MTT法预测卵巢上皮癌化疗药敏性与体内疗效相关性的评估；HSV-TK／GCV系统在难治性卵巢癌裸鼠移植瘤模型中的实验研究;阿斯匹林对卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响及其作用机制研究；卵巢上皮性癌ERCC1表达与顺铂化疗耐药关系的研究。     

妇科肿瘤

缺氧诱导因子-1α及血管生长因子与晚期卵巢浆液性癌腹膜播散和预后相关性分析；PTEN蛋白在卵巢子宫内膜异位囊肿及卵巢子宫内膜样癌组织中的表达及临床意义；1，25（OH）2D3联合顺铂对卵巢癌细胞株HO8910增殖及Skp2／P27蛋白表达的影响；紫杉醇与奥沙利铂联合化疗治疗晚期卵巢上皮性癌的临床观察；卵巢透明细胞癌70例临床分析     

癌相关成纤维细胞对上皮性卵巢癌细胞耐药性影响及机制初步研究

目的：探讨癌相关成纤维细胞（carcinoma?associated fibroblasts,CAFs）对卵巢癌细胞化疗耐药性影响及机制。方法：通过CAFs和卵巢癌细胞Ovcar3共培养,采用流式细胞术检测顺铂（cis?diammin?odichloroplatinum,DDP）对共培养前后卵巢癌细胞凋亡率的改变;应用实时定量PCR、Western blot检测DDP对共培养前后卵巢癌细胞中PI3K、AKT、XIAP 的mRNA水平及其蛋白水平的变化;以及AKT 体外特异性阻断剂LY294002对CAFs引起化疗耐药的逆转作用。结果：CAFs与卵巢癌细胞共培养后,DDP诱导的卵巢癌细胞凋亡显著减少（P < 0.05）;共培养组卵巢癌细胞中PI3K及XIAP 的mRNA表达水平明显高于对照组（P < 0.05）;共培养后PI3K/XIAP蛋白表达显著升高（P < 0.05）;磷酸化AKT（p?AKT）蛋白表达显著升高（P < 0.01）。抑制剂LY294002可显著降低XIAP蛋白表达。结论：CAFs可通过影响PI3K/AKT/XIAP信号通路,影响卵巢癌化疗耐药效应。     

应用组织芯片技术检测GPC3蛋白在肝细胞癌及其他肿瘤中的表达

目的 研究GPC3蛋白在肝细胞癌(hepatocellular careinoma,HCC)及其他人类常见肿瘤组织中的表达.方法 应用组织芯片及免疫组化技术检测36例HCC组织、33例HCC癌旁组织以及其他人类常见肿瘤组织及其癌旁组织中CPC3蛋白的表达.结果 (1)GPc3蛋白在Hcc、肺鳞癌、癌旁慢性浅表性胃炎组织中表达.而在胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、胆管细胞癌组织中无表达;(2)36例HCC组织及33例HCC癌旁组织中GPC3蛋白的表达率分别为66.7%(24/36),3.0%(1/33),两者之间差异有显著性(P<0.001);(3)HCC组织中GPC3蛋白表达与患者年龄、性别、病理分级无相关性(P>0.05).结论 GPC3蛋白在HCC、肺鳞癌组织中表达,而在胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌中表达沉默,GPC3是一个值得期待的多种肿瘤特异性标志物.     

消癥抑癌方对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移的影响

目的 探讨消癥抑癌方对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和迁移的影响及潜在作用机制。方法 利用网络药理学分析消癥抑癌方抗卵巢癌的关键活性成分和核心靶点,并通过基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析筛选其相关生物学过程和通路。制备消癥抑癌方含药血清,用含药血清处理卵巢癌SKOV3细胞。采用CCK-8法和EdU染色法检测消癥抑癌方含药血清对SKOV3细胞增殖的影响;采用划痕实验和Transwell迁移实验检测消癥抑癌方含药血清对SKOV3细胞迁移的影响;采用Western blotting法检测消癥抑癌方含药血清对SKOV3细胞自噬蛋白(P62)、自噬相关蛋白3(ATG3)、微管相关蛋白1轻链3 B(LC3B)及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白的影响。结果 网络药理学研究显示,消癥抑癌方抗卵巢癌的关键活性成分是槲皮素、山柰酚、木犀草素、汉黄芩素、柚皮素等,核心靶点是MAPK3、AKT1、SRC、MAPK1、TP53等。KEGG富集分析共得到171条通路(P<0.01),其中Degree值排名较靠前且与...     

妇科肿瘤

080263 ERK1／2在曲普瑞林逆转卵巢癌OVCAR-3细胞顺铂耐药中的作用；080264 c—kit基因及其靶体SCF在卵巢上皮性肿瘤中的表达；080265 超声微泡造影剂促进GFP质粒转染卵巢癌细胞的实验研究；080266 三氧化二砷对卵巢癌细胞的生长及化疗敏感性的影响；080267 缺影复氧对卵巢癌SKOV3细胞增殖能力的影响……     

HIF-1α、pVHL在卵巢透明细胞癌的表达及意义

目的：探讨缺氧诱因子1α(HIF-1α)、pVHL在卵巢透明细胞癌中的表达情况及意义。方法：采用免疫组化方法对30例卵巢透明细胞癌及40例其他类型卵巢癌(高级别浆液性癌、子宫内膜样癌、黏液性癌)进行HIF-1α、pVHL检测,并对比分析两指标的阳性率。结果：卵巢透明细胞癌HIF-1α的阳性率为83.3%,高于其他类型卵巢癌,即高级别浆液性癌10%、子宫内膜样癌10%、黏液性癌0%;而pVHL在4种卵巢癌中均为局灶弱阳。结论：HIF-1α在卵巢透明细胞癌中表达阳性率明显高于其他类型卵巢癌,可用于透明细胞癌的病理诊断与鉴别诊断;而pVHL的表达无明显差异。     

Toll样受体4参与卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控

目的 探讨Toll样受体4 (TLR4)异常表达对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响。方法 免疫组化法检测卵巢癌及其周围正常组织中TLR4的表达情况；构建针对TLR4基因的siRNA，转染人卵巢癌细胞株SKOV3，实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测TLR4 mRNA表达，Western blotting检测TLR4蛋白表达；CCK-8法检测TLR4 siRNA转染SKOV3细胞6～24 h后细胞的生长情况，流式细胞仪检测细胞转染24 h后的凋亡情况。结果 TLR4在卵巢癌及其周围正常组织中均有表达，且卵巢癌组织中TLR4表达量明显高于癌旁组织（P <0.05）;TLR4 siRNA转染后，SKOV3细胞中TLR4 mRNA及蛋白表达水平明显降低（P <0.05）;siRNA转染24 h后，SKOV3细胞活力下降，细胞凋亡率升高（P <0.05）。结论 TLR4参与了卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控，干扰TLR4能抑制SKOV3细胞增殖，诱导细胞凋亡。     

应用组织芯片技术检测GPC3蛋白在肝细胞癌及其它肿瘤中的表达

目的 研究GPC3蛋白在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及其他人类常见肿瘤组织中的表达。方法 应用组织芯片及免疫组化技术检测36例HCC组织、33例HCC癌旁组织以及其他人类常见肿瘤组织及其癌旁组织中GPC3蛋白的表达。结果 ①GPC3蛋白在HCC、肺鳞癌、癌旁慢性浅表性胃炎组织中表达,而在胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、胆管细胞癌组织中无表达;②36例HCC组织及33例HCC癌旁组织中GPC3蛋白的表达率分别为66.7% (24/36),3.0%（1/33）,二者之间差异有显著性（P＜0.001）;③HCC组织中GPC3蛋白表达与患者年龄、性别、病理分级无相关性（P＞0.05）。结论 GPC3蛋白在HCC、肺鳞癌组织中表达,而在胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌中表达沉默,GPC3是一个值得期待的多种肿瘤特异性标志物。     

肾透明细胞癌和卵巢癌与HLAI类抗原关联性研究

目的 分析HLAI类抗原与肾透明细胞癌和卵巢癌的关联性。为确定与这些肿瘤的易感性和抵抗性有关的基因。并为寻找肿瘤特异性的抗原肽,开展肿瘤免疫诊断和治疗奠定基础。方法 实验采用微量淋巴细胞毒试验。分析82例肾透明细胞癌和21例卵巢癌患者外周血HLA-A抗原和-B抗原的抗原频率。结果 与肾透明细胞癌和卵巢癌关联的HLAI类完全不同,其中与肾透明细胞癌关联的位点大大多于卵巢癌的位点,有A9、A11、A28、BG15、B22、B27和B40;而与卵巢癌关联的HLAI类抗原位点只有A10、A36和B12,且卵巢癌关联A10抗原保持显著关联。结论 HLAI类抗原关联性研究显示,HLA-A10可能为卵巢癌提供抵抗性。     

铜死亡相关基因SLC31A1在肾细胞癌中的功能及预后价值

目的:探讨铜死亡相关基因SLC31A1在肾细胞癌的表达水平、肿瘤浸润免疫细胞相关性及其对预后的影响，并在体外实验中验证SLC31A1在肾细胞癌中的功能。方法:采用TCGA数据库收集肾细胞癌的临床数据及铜死亡相关基因转录组数据；采用HPA数据库收集蛋白表达数据；采用ssGSEA和Spearman分析计算免疫细胞浸润水平及其与铜死亡相关基因的关系；采用R语言比较肾细胞癌患者不同临床分期中SLC31A1的mRNA表达水平差异；采用Kaplan-Meier(KM)分析探索SLC31A1对肾细胞癌预后的影响；采用COX分析判断SLC31A1是否是独立预后因素；采用RT-qPCR检测SLC31A1 mRNA的表达水平。过表达质粒调控SLC31A1在细胞中的表达后采用克隆形成及划痕实验检测调控SLC31A1后对细胞增殖侵袭能力的影响。结果:铜死亡相关基因FDX1、DLD、DBT、SLC31A1、ATP7A、GCSH、DLST、DLAT、PDHA1、PDHB在肾细胞癌中的mRNA和蛋白水平均低于正常组织(P<0.05)。SLC31A1与17种瘤内免疫浸润细胞正相关(P<0.05)。SLC3...     

癌相关成纤维细胞来源的外泌体miR-625-3p对卵巢癌细胞SKOV3迁移和侵袭能力的影响及其机制

目的 探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)分泌的外泌体(exos) miR-625-3p对卵巢癌细胞SKOV3迁移和侵袭能力的影响及其机制。方法 选取2021年5月至12月于衡水市人民医院接受手术的卵巢癌患者的癌组织和邻近的非癌组织(5对)。从卵巢癌组织和相邻的正常组织中分离出CAFs和正常成纤维细胞(NFs)。采用Western blot评估NFs和CAFs中α-SMA和vimentin的蛋白表达,利用外泌体提取试剂盒从NFs和CAFs培养基中获得NFs-/CAFs-exos。通过透射电子显微镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)和Western blot评估NFs-/CAFs-exos的形状、粒径以及表面marker表达。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测CFAs、CAFs-exos和SKOV3中miR-625-3p和癌细胞侵袭抑制因子(SCAI)的表达。Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告基因实验确定miR-625-3p和SCAI的相互作用。最后,通过功能挽救实验确定SCAI对SKOV3细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 West...     

长链非编码RNA BCYRN1对SKOV3细胞恶性生物学行为的影响

  目的  探讨长链非编码RNA brain cytoplasmic RNA 1在卵巢癌组织中的表达及对SKOV3细胞恶性生物学行为的影响。  方法  选取温州市中心医院2017年3月—2019年3月收治的32例卵巢癌患者癌组织及其相应的癌旁组织标本,正常卵巢上皮细胞系IOSE和卵巢癌细胞系(SKOV3、HO8910、A2780)购自美国ATCC; 癌组织和癌细胞中BCYRN1的水平采用实时荧光定量法(qRT-PCR)检测; 采用BCYRN1高表达质粒和低表达质粒及其相应的对照物转染SKOV3细胞,分别构建BCYRN1高表达和低表达的细胞系; 采用BrdU法检测细胞的增殖; 采用划痕愈合实验检测细胞的迁移; 采用Transwell法检测细胞的侵袭。  结果  BCYRN1在卵巢癌组织中的表达(5.64±1.02)高于在癌旁组织中的表达(2.12±0.65);BCYRN1在卵巢癌细胞中的水平为SKOV3(2.25±0.78)、HO8910(2.85±0.78)、A27809(3.12±1.01),显著高于IOSE(1.01±0.12);BCYRN1高表达能够促进SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭。  结论  BCYRN1在卵巢癌中表达上调,其作为促癌基因促进卵巢癌的进展。      

化疗耐药及敏感卵巢癌细胞差异表达microRNA的筛查与组织鉴定

 目的探讨microRNA在卵巢浆液性癌化疗耐药及敏感组织的差异表达,为卵巢浆液性癌化疗耐药的研究提供理论依据。方法应用microRNA表达谱基因芯片,研究紫杉醇耐药卵巢癌细胞skov3-tr30及其敏感细胞skov3基因表达谱,获得表达差异的microRNA后, 选取部分差异表达的microRNA用实时聚合酶链反应方法对化疗耐药与敏感卵巢浆液性癌组织各20例进行验证。结果通过microRNA表达谱基因芯片方法筛选出171个与卵巢癌细胞化疗耐药相关microRNA,基因表达增高（上调趋势）69个,为miR-17、miR-19b、miR-92-1、miR-210、miR-1307等;基因表达降低（下调趋势）102个,为miR-134、miR-34、miR-196b等。miR-17~92是与卵巢癌耐药最相关的microRNA之一。miR-17~92基因簇在化疗耐药卵巢浆液性癌组织中表达水平显著高于敏感组织,具有非常显著统计学意义（P <0.01）。miR-17~92基因簇表达与卵巢浆液性癌及化疗耐药卵巢浆液性癌患者绝经前后、手术病理分期、组织学分级、是否行淋巴结清扫术和有无淋巴结转移均无明显相关性（均P >0.05）。结论microRNA表达谱基因芯片可筛查出化疗耐药及敏感卵巢癌细胞的差异表达基因,miR-17~92基因簇与卵巢浆液性癌化疗耐药有关。     

卵巢上皮性癌OPCML基因的表达缺失和启动子甲基化

目的探讨OPCML基因在卵巢上皮性癌中的失表达及其与基因启动子CpG岛甲基化的关系。方法用逆转录—聚合酶链反应、限制性内切酶-聚合酶链反应检测卵巢正常组织、良性上皮性肿瘤、上皮性癌组织和SKOV-3、3AO、CAOV3卵巢癌细胞株OPCML基因的失表达及CpG岛甲基化。结果在卵巢癌中OPCMLmRNA的表达率显著低于正常卵巢组织(χ2=30·108,P=0·0000)和卵巢良性肿瘤组织(χ2=21·162,P=0·000)。SKOV-3和CAOV3细胞未见OPCMLmRNA表达,而3AO细胞可见OPCMLmRNA表达。在卵巢癌中,启动子CpG岛尤其是HapⅡ酶切位点甲基化率显著高于正常卵巢组织(χ2=13·630,P=0·0000)和良性肿瘤组织(χ2=11·797,P=0·000)。卵巢癌OPCML启动子CpG岛甲基化和mRNA失表达呈显著相关(r=11·589,P=0·002)。SKOV-3和CAOV3细胞有内切酶位点甲基化,而3AO细胞无酶切位点甲基化。结论卵巢上皮性癌细胞存在OPCML基因失表达;基因启动子CpG岛,尤其是HapⅡ酶切位点的甲基化是导致OPCML基因失表达的途径,但不是唯一途径。     

miR-9和miR-210在卵巢癌SKOV-3及SKOV-3/DDP细胞株中的表达及机制探讨

目的 检验miR-9和miR-210在卵巢癌SKOV-3及SKOV-3/DDP细胞株中的差异表达,观察其对卵巢癌细胞生物学功能的影响并探讨其作用机制,为卵巢癌的靶向治疗积累数据,提供参考方向。 方法 培养人正常卵巢上皮细胞株,卵巢癌SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞株,RT-PCR(实时荧光定量聚合酶链反应)检验miR-9和miR-210在各细胞株中的表达差异;将miR-9mimics和miR-210mimics转染至卵巢癌SKOV-3及SKOV-3/DDP中,用CCK-8法检测细胞增殖,Annexin V/PI法测细胞凋亡,细胞划痕实验测细胞迁移能力的改变及细胞侵袭实验测细胞侵袭情况。 结果 miR-9在SKOV3及其耐药株SKOV-3/DDP中低表达,而miR-210在SKOV3及其耐药株SKOV-3/DDP中高表达;miR-9/miR-210过表达抑制3种细胞的增殖;miR-9/miR-210过表达促进细胞发生凋亡;miR-9/miR-210过表达导致3种细胞迁移和侵袭能力下降。 结论 miR-9/miR-210在卵巢癌细胞中起到抑癌基因的作用,过表达miR-9/miR-210能显著抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进肿瘤细胞的凋亡;miR-9/miR-210可以作为卵巢癌及复发性卵巢癌新的潜在治疗靶点。      

卵巢癌中抑癌因子SUFU的表达变化及意义

目的：探讨卵巢癌中抑癌因子SUFU（suppressor of Fused）表达变化及其意义。方法：通过免疫组化检测人卵巢癌和癌旁组织样本中SUFU的表达量，并在数据库大样本和细胞水平上进行验证。同时在人正常卵巢上皮细胞系IOSE80和卵巢癌细胞系SKOV3分别抑制和过表达SUFU后，运用MTT、EdU、流式细胞术、Western blot、Transwell、平板克隆形成实验等方法分别检测细胞的增殖、凋亡、上皮间充质转化（epithelial?mesenchymal transition，EMT）、迁移与侵袭的情况，并随后用Western blot和实时定量PCR（quantitative real?time PCR，qPCR）检测Sonic Hedgehog（SHH）信号通路的下游靶基因GLI1蛋白和mRNA水平。结果：在3例卵巢癌组织样本中，相比于癌旁组织，癌组织中SUFU蛋白表达有一定下调，而这个结果在TCGA数据库大样本中也得到验证；此外在细胞水平上，人正常卵巢上皮细胞IOSE80中SUFU蛋白和mRNA表达水平明显高于卵巢癌细胞SKOV3。进一步在SKOV3细胞中过表达SUFU能够有效抑制其增殖、EMT、克隆形成、迁移和侵袭，促进凋亡；相反，在IOSE80细胞中下调SUFU则能够促进细胞EMT、迁移和侵袭能力。同时，相比正常卵巢上皮细胞，卵巢癌细胞中GLI1 mRNA和蛋白水平明显上升；当在卵巢癌细胞中上调SUFU时，SHH信号通路的下游靶基因GLI1的表达则明显下调。结论：SUFU能够抑制卵巢癌的发生发展，其作用机制与SHH信号通路相关。     

卵巢癌免疫标记物研究进展

卵巢癌是发生于女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一,卵巢癌免疫标记物尤其是癌干细胞标记物的研究为卵巢癌的预后及靶向治疗提供了新的线索和尝试.文中对卵巢癌免疫标记物的研究进展作一综述.     

siRNA抑制survivin的表达诱导人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的研究

目的筛选能有效抑制survivin基因表达的小干扰RNA(siRNA),探讨survivin基因抑制对人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的影响。方法设计3段survivin siRNA靶位点,用PCR扩增siRNA表达框,与survivin-绿色荧光蛋白融合基因表达质粒共转染293T细胞,再构建有效siRNA的表达载体,转染卵巢癌SKOV-3细胞,分析sur-vivin基因的表达及细胞凋亡情况。结果筛选出了1段能高效抑制survivin表达的siRNA,能显著下调SKOV-3细胞内的survivin表达,并导致SKOV-3细胞凋亡。结论利用RNA干扰能有效抑制survivin基因表达并诱导人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡,为进一步的靶向survivin分子的体内抗肿瘤研究奠定了基础。