塞来昔布通过阻断丝裂原活化蛋白激酶信号途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(CXB)能否通过阻断丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖.方法:原代培养多囊肾囊肿衬里上皮细胞,以不同浓度CXB(0、2.5 ×10-6、5×10-6、1×10-5、2×10-5、3×10-5、4×10-5、5×10-5mol/L)处理细胞,采用BrdU法检测细胞增殖状态.ELISA法检测各组血管内皮生长因子(VEGF)的含量.荧光定量PCR技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)、磷酸化MAPK的mRNA含量,Western印迹法检测PCNA、MAPK和磷酸化MAPK的表达.结果:CXB对囊肿衬里上皮细胞的增殖具有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖性,其中2×10-5mol/L CXB作用24 h的抑制作用最强,抑制率为(63.9±1.2)%;CXB可减少囊肿衬里上皮细胞VEGF的分泌,而且抑制作用具有时间、浓度依赖性.CXB剂量依赖性减低PCNA和磷酸化MAPK的mRNA和蛋白表达.结论:CXB明显抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,抑制细胞产生VEGF;其作用与干扰MAPK磷酸化,部分阻断MAPK信号转导通路有关.     

COX-2抑制剂塞来昔布对大鼠脊髓损伤的保护作用

目的 观察选择性环氧化酶一2抑制剂塞来昔布（celecoxib）对大鼠脊髓损伤的保护作用。方法 48只SD大鼠，随机分为单纯损伤组及治疗组。采用改良Allen’s打击法制作脊髓损伤动物模型，分别在伤后12、24、72h测定脊髓标本的丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量。用苏木精-伊红染色观察损伤脊髓组织病理变化，原位末端标记法（TUNEL）标记凋亡细胞。同时采用Tarlov评分和斜板实验观察脊髓神经功能恢复情况，比较各组之间的差异。结果 治疗组较单纯损伤组神经功能明显改善（P〈0．05）。治疗组各时间点MDA含量较单纯损伤组明显降低（P〈0．05），SOD含量明显升高（P〈0．05），病理形态改变较轻且凋亡细胞少（P〈0．05）。结论 COX-2抑制剂塞来昔布可减少神经细胞凋亡，对继发性脊髓损伤起到保护作用。     

选择性COX-2抑制剂塞来昔布的研究及应用进展

塞来昔布（celecoxib）是一种高选择性COX-2抑制剂,在用于镇痛、抗炎方面的疗效与传统的NSA IDs相当,且能降低用药者的胃肠道风险。并通过抑制肿瘤细胞增殖、抑制血管增生及促进肿瘤细胞凋亡而用于消化道肿瘤、乳腺癌、肺癌和肝癌的治疗。同时能减缓动脉粥样硬化病变,在心血管疾病的治疗方面也具有一定价值。但长期较大剂量应用celecoxib,用药者心血管事件的相对风险增大。     

塞来昔布对喉癌Hep-2细胞COX-2和Caspase-3表达的影响

目的:探讨塞来昔布对喉癌细胞株Hep-2生长抑制及对环氧化酶-2(COX-2)和Caspase-3变化的影响。方法:将不同浓度塞来昔布作用于体外培养的人喉癌细胞株Hep-2,MTT法计算细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测COX-2表达,分光光度法检测Caspase-3活性。结果:塞来昔布呈剂量依赖性显著抑制Hep-2细胞生长,阻滞细胞G0/G1期转化,且可明显降低COX-2蛋白水平,增加Caspase-3活性。结论:塞来昔布能抑制喉癌细胞的生长,其机制可能与下调COX-2表达、增强Caspase-3活性有关。     

选择性COX-2抑制剂塞来昔布抗癌作用研究进展

选择性COX-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)作为一种新型NSAIDs,是一种高选择性环氧化酶抑制剂,由于其靶向性强、副作用小,已在多种肿瘤预防和治疗中发挥作用,近年来发现celecoxib可以增加抗癌药物浓度,降低甚至逆转对抗癌药物的耐药性,增强细胞对化疗药物的敏感性的作用,增强常规化疗疗效,同时塞来昔布对放疗也有一定的增敏作用。     

特异性COX-2抑制剂--塞来昔布

特异性COX－2抑制剂－塞来昔布不仅保持了很好的抗炎镇痛作用,而且具有良好的胃肠道耐受性,与使用传统非甾体类抗炎药（NSAID)比较所 导致的消化道不良反应的发生率低。     

塞来昔布对大鼠急性坏死性胰腺炎肾损伤的防护作用研究

目的研究塞来昔布对大鼠急性坏死性胰腺炎肾损伤的防护作用,初步探讨其作用机制。方法①24只Wistar大鼠随机分为假手术组（c）组,重症胰腺炎（P）组,塞来昔布千预组（T）组;②模型制备6h后采集血标本、胰腺及左肾标拳。血浆标本采用生化分析仪测定血浆淀粉酶、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）。胰腺及肾组织观察组织学改变,并用免疫组化法检测胰腺及肾脏COX-2的表达。结果①与C组相比,P组血浆淀粉酶（AMY）、尿素氮（BUN）、肌酐（Or）明显升高（P均〈0．05）;与p组相比,T组血浆AMY、BUN、Cr均有所降低（P均〈0．05）;②与C组相比,P组胰腺及肾脏病理改变明显加重;与P组相比,T组胰腺及肾脏的病理损害有所减轻（P均〈005）;⑧与c组相比,P组胰腺及肾脏中COX-2含量有明显增加;与P组相比,T组胰腺及肾脏中COX-2含量有所减少（P均〈0．05）。结论①肾脏组织中COX-2的升高是肾损害的重要原因;②塞来昔布可以有效抑制COX-2的表达,对ANP肾损害具有保护作用。     

塞来昔布对大鼠化学性乳腺癌的抑制作用及机制

目的 观察环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对化学致癌剂7,12-二甲基苯蒽(7,12-dimethybenz[a]anthracene,DMBA)化学诱发的大鼠乳腺癌的抑制作用并探讨其机制.方法 将DMBA油剂灌胃复制大鼠乳腺癌模型,大鼠分为对照组(24只)和实验组(25只),观察塞来昔布对大鼠乳腺癌的抑制作用,并采用基因芯片技术了解治疗后2组肿瘤的基因表达谱差异.结果 实验组塞来昔布处理后乳腺肿瘤的数目、直径、体积分别为(2.56±1.26)个、(1.162±0.355)cm、(1.967±1.725)cm.;明显小于实验前的(3.40±1.22)个、(1.948±0.481)cm、(8.794±6.389)cm3;明显小于对照组(3.88±1.73)个、(2.231±0.736)cm、(10.268±5.447)cm3,差异有显著性意义(均P＜0.01).对照组COX一2蛋白表达为62.5%(15/24),实验组COX-2蛋白表达为36.0%(9/25),差异有显著性意义(P＜O.05).基因表达谱显示两组之间表达丰度差异2倍及以上的基因共有243条,其中表达上调2倍或以上的基因片段124条,表达下调2倍或以上的基因片段119条,发现功能不明的新基因6条,其中表达上调的4条.结论 塞来昔布能抑制DMBA诱发的大鼠乳腺癌进展,其机制和多种基因改变有关.     

塞来昔布用于肝癌治疗的相关研究进展

塞来昔布(Celecoxib)是一种特异性环氧化酶2(COX-2)抑制剂,具有解热、镇痛、抗炎以及抑制肿瘤细胞增殖、肿瘤血管增生和促进肿瘤细胞凋亡的作用,现已被应用于消化道肿瘤、肺癌、乳腺癌及肝癌的化学辅助治疗及放射治疗增敏。本文对塞来昔布用于肝癌治疗的相关性研究进展作一综述。     

环氧酶与非甾体抗炎新药塞来昔布

非甾体抗炎药具有抗炎镇痛及消化道损害等双重作用,通过数十年的努力,科学家终于发现并了解了COX的两种异构酶,并以COX－2为靶标寻找选择性抑制COX－2的药物,最近在北京上市的塞昔布具有不良反应低的特点。     

常染色体显性多囊肾病Han:SPRD大鼠肾脏病理观察及其意义

目的:观察常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease, ADPKD)的Han:SPRD大鼠模型的肾脏病理变化,为揭示ADPKD发病机制提供证据与线索.方法:选取雄性2周龄Han:SPRD纯合大鼠(cy/cy)和3个月龄杂合大鼠(cy/ ),取其肾组织进行H-E染色、PAS染色、Masson染色以及透射电镜观察.结果:光镜下发现Han:SPRD大鼠肾脏体积增大;囊肿衬里上皮细胞增殖显著;小管基膜增厚,可见灶性小管萎缩和较多蛋白管型;肾小球数目减少、体积缩小,渐趋废弃,呈明显缺血样改变,血管壁增厚.透射电镜可见肾小球毛细血管腔阻塞,基底膜薄厚不均,部分断裂;小管上皮细胞胞质脱落,微绒毛紊乱、部分缺如;细胞外间质成分稀少;囊肿衬里上皮细胞内可见大量线粒体,高尔基体、核糖体丰富.结论:Han:SPRD大鼠肾脏组织学和超微结构的改变可解释多囊肾病的部分临床表现;并观察到Han:SPRD大鼠肾小管上皮细胞微绒毛异常,为揭示疾病的发病机制提供了线索.     

角质细胞生长因子对常染色体显性遗传型多囊肾病囊肿衬里上皮细胞的促增殖作用

目的：观察角质细胞生长因子（KGF）在体外对常染色体显性遗传型多囊肾病（ADPKD）囊肿衬里上皮细胞的促增殖探讨其可能的作用机制。方法：外源性给予不同浓度的KGF（0－100ng/ml），采用MTT法检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞周期，在电镜下观察细胞形态。结果：KGF呈剂量、时间依赖性地促进了ADPKD囊肿衬里上皮细胞的增生，表现为细胞数量增多，S期细胞比率增高，细胞分裂活跃，增生的细胞形态尤其是细胞核较正常体积增大。结论：KGF可显刺激ADPKD囊肿衬里上皮细胞的增殖，提示KGF可能参与ADPKD有囊肿的形成和发展。     

载脂蛋白D在常染色体显性多囊肾病中的表达及对囊肿衬里上皮细胞增殖的影响

目的探讨载脂蛋白D(apolipoprotein D,ApoD)在常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)发病中的作用。方法采用免疫组织化学及蛋白质印迹方法分析ApoD在ADPKD患者肾脏囊肿组织中的表达;蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测Han:SPRD大鼠肾组织ApoD蛋白和基因表达的变化。应用MTT法检测人重组ApoD蛋白对ADPKD囊肿衬里上皮细胞(WT9-12)增殖的影响;流式细胞术检测经人重组ApoD蛋白作用后WT9-12细胞的凋亡情况及细胞周期改变。结果ADPKD患者及Han:SPRD杂合型大鼠(cy/+)肾组织中ApoD表达量分别低于正常人及Han:SPRD正常大鼠(+/+)肾组织(P<0.05,P<0.01)。8、12、16、24周龄Han:SPRD杂合型大鼠(cy/+)肾脏中ApoD基因表达量均低于同周龄Han:SPRD正常大鼠(+/+)(P<0.05)。人重组ApoD蛋白以100、200、400 ng/ml作用于WT9-12细胞,作用48 h细胞增殖抑制率分别为8.21%、7.59%、8.07%(P<0.05),作用72 h细胞增殖抑制率分别为8.62%、6.43%、9.42%(P<0.05)。人重组表达ApoD蛋白以400 ng/ml浓度刺激细胞72 h,对细胞凋亡无明显影响,但可使G1期细胞增加8.26%,S期细胞减少8.09%(P<0.05)。结论ApoD蛋白可能通过调节细胞周期减弱WT9-12细胞增殖,其表达减少可能在ADPKD的发病过程中具有一定作用。     

常染色体显性遗传性多囊肾病囊肿液对肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察常染色体显性遗传性多囊肾病（ADPKD）囊肿液对肾小管细胞增殖，凋亡以及细胞周期的影响，以初步探讨ADPKD囊肿发生，发展的机制。方法：用不同浓度的ADPKD囊肿液处理MDCK和LLC－PK1两株肾小管细胞，采用MTT法观察细胞增殖，用流式细胞术检测细胞周期和凋亡指数。结果：（1）与对照组相比，不同浓度（10％，20％，40％，60％，V／V）ADPKD囊肿液作用24h能明显促进上述两株肾小管细胞增殖，并呈剂量依赖性；而且明显影响细胞周期，使G0－G1期细胞增多，S期细胞减少，（2）高浓度（40％，60％）ADPKD囊肿液作用48h对MDCK细胞仍有上述作用，但对LLC－PK1细胞则无类似作用。（3）不同浓度ADPKD囊肿液均不诱导上述两株细胞凋亡。结论：ADPKD囊肿液可剂量依赖性地促进肾小管细胞增殖，并在24h达作用高峰，但并不诱导肾小管细胞凋亡，其机制可能与囊肿液通过激活G1期细胞，使细胞未从G1期脱出细胞周期而发生凋亡有关。     

Celecoxib Inhibits Proliferation and Induces Apoptosis via Cyclooxygenase-2 Pathway in Human Pancreatic Carcinoma Cells

In order to evaluate the effects and mechanisms of celecoxib in inhibiting proliferation and inducing apoptosis on human pancreatic carcinoma cells, the anti-proliferative effect was measured by using methabenzthiazuron (MTT) assay. Cell cycle and apoptosis were analyzed by using flow cytometry (FCM), and the PGE2 levels in the supernatant of cultured pancreatic carcinoma cells were quantitated by enzyme-linked immunoabsordent assay (ELISA). Our results showed that celecoxib suppressed the production of PGE2 and inhibited the growth of JF-305 cells, and the anti-proliferative effect of celecoxib could be abolished by addition of PGE2. FCM revealed that celecoxib could inhibit proliferation and induce apoptosis by G1 S cell cycle arrest. It was concluded that cyclooxygenase-2 specific inhibitor celecoxib could inhibit proliferation and induced apoptosis of human pancreatic carcinoma cells via suppression of PGE2 production in vitro.     

塞来昔布对人食管癌细胞株Eca-109 增殖和凋亡的影响

目的 体外研究选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人食管癌细胞株Fca-109增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪(FCM)、吖啶橙染色结合荧光显微镜观察细胞形态等技术,研究塞来昔布对Eca-109细胞增殖的抑制和促进凋亡的影响.结果 MTT比色法显示塞来昔布对人食管癌Eca-109细胞有较强的抑制作用,呈时间和浓度依赖性;FCM显示有凋亡峰出现,凋亡率在(15.89±0.87)%～(73.57±1.63)%;塞来昔布使G0/G1期细胞比例升高,S期和G2/M期比例下降,呈一定效应关系;荧光显微镜下可见典型的细胞凋亡形态学特征细胞体积缩小、细胞核固缩,凋亡小体形成等.凋亡比例呈剂量和时间依赖.结论 塞来昔布体外能够显著抑制Eca-109增殖,诱导凋亡,可能与诱导凋亡和阻止细胞周期进展有关.     

雷公藤内酯醇治疗常染色体显性多囊肾病的现状及前景

常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是人类最常见的单基因遗传性肾脏疾病,其特点是双肾无数囊肿形成并进行性增大,破坏肾脏正常结构和功能,最后进展至终末期肾脏疾病。目前临床上尚无有效抑制囊肿形成和增大的治疗措施。雷公藤内酯醇(triptolide,TL)是从中药雷公藤中提取的环氧二萜类化合物,具有抗炎、抗增殖等多种作用,多个动物实验研究显示其具有抑制囊肿形成以及保护肾功能的作用,为将来的临床应用奠定了基础。     

PKD2基因在正常人和2型常染色体显性遗传性多囊肾病患者肾组织中的表达

目的 :观察 PK D2基因在正常人和 2型常染色体显性遗传性多囊肾病 (ADPKD)患者肾组织中的不同表达 ,探讨多囊肾病的发病机制。 方法 :抽提正常人肾组织细胞总 RNA ,通过 RT- PCR法获得 PK D 2基因第 12～ 13外显子 c DNA片段 ,以此为探针 ,用地高辛标记 ,对正常人和 2型 ADPKD患者肾组织分别进行原位杂交 ,并结合图像分析系统观察 PK D2基因表达情况。 结果 :正常人肾组织中 PK D2基因在 Henle襻的厚升支、远曲小管和皮质集合管有较强的表达 (平均光密度为 1.2 3± 0 .0 4 ) ;而 2型ADPKD患者肾组织中 PKD2基因仅在部分囊壁中有少量表达 (平均光密度为 0 .5 6± 0 .0 3)。 结论 :正常人肾组织中 PK D2基因表达量明显高于 2型 ADPKD患者 ,提示 PK D2基因表达降低在 2型 ADPKD的发生和发展中起着一定的作用