慢性牙周炎中肿瘤坏死因子ɑ对骨髓间充质干细胞成骨分化的调控作用

骨髓间充质干细胞（BMSCs）在重构牙周组织结构和功能、促进牙周炎好转乃至愈合方面发挥重要作用,因此BMSCs的特性尤其是其成骨分化的调控机制是目前的研究热点。肿瘤坏死因子α（TNF-α）是牙周组织炎症微环境中的主要促炎因子,与BMSCs的成骨分化密切相关。探究TNF-α调控BMSCs成骨分化的机制有助于明确牙周炎的发病机制,寻找牙周疾病新的治疗靶点,改善牙周炎的治疗效果。本文将针对TNF-α在牙周炎发生发展过程中发挥的重要作用尤其是调控BMSCs成骨分化的可能机制作一综述。     

BCOR基因敲除促进骨髓间充质干细胞成骨分化的研究

目的研究BCL6共抑制因子-BCOR对骨髓间充质干细胞成骨定向分化能力的影响。方法利用慢病毒载体的BCORshRNA基因敲除BCOR,进行丧失性功能研究。通过检测ALP活性、茜素红染色、钙离子定量分析、成骨分化相关基因的表达,观察骨髓间充质干细胞体外成骨分化能力。结果BCOR在牙源性间充质干细胞和骨髓间充质干细胞的表达无明显差异。基因敲除BCOR促进了骨髓间充质干细胞ALP活性、体外矿化能力及成骨分化相关基因骨涎蛋白、骨钙素的表达。结论BCOR基因表达降低能促进骨髓间充质干细胞成骨分化,证实BCOR是骨髓间充质干细胞成骨分化的抑制基因。     

环状非编码RNA在间充质干细胞成骨向分化中作用的研究进展

间充质干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞。随着对间充质干细胞研究的不断深入,对间充质干细胞的生物学特性、分化能力及临床应用有了进一步认识。环状RNA(circRNA)是在真核细胞中广泛存在且多样的内源性非编码RNA,形成共价、闭合、连续稳定的环状结构,能够发挥微小RNA分子海绵作用,调控基因转录和选择性剪接。多项研究已经证实circRNA在间充质干细胞成骨向分化过程中发挥了重要作用,是细胞分化的重要调控靶点,参与维持细胞分化特性,并且从不同的角度和不同水平研究了circRNA的调控机制。本文对目前circRNA在不同间充质干细胞成骨向分化过程中的相关研究进行综述。     

miR146a参与炎症条件下骨髓间充质干细胞成骨分化的降低及其机制研究

目的：阐明炎症对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及miR146a在此过程中的调控作用。方法：将骨髓间充质干细胞置于3种不同条件培养基下培养：①成骨分化诱导培养基、②成骨分化培养基联合BMP2、③成骨分化联合炎症刺激TNF（10 ng/mL）,观察其成骨分化情况。通过miRNA特异性的qRT-PCR观察miR146a在上述条件下变化情况,进而对细胞转染miR146a的拮抗体antago-miR146a观察炎症条件下骨髓间充质干细胞的成骨分化情况。结果：建立了稳定的骨髓间充质干细胞体外培养体系,在不同诱导条件下其能成骨、成脂、成软骨。BMP2能够促进MSC成骨分化,而模拟炎症刺激TNF则能抑制MSC的分化;分化条件下,miR146a表达下降;而TNF剂量依赖性能增强miR146a的表达;miR146a拮抗体则能逆转TNF引起的骨髓间充质干细胞成骨分化降低。结论：miR146a参与炎症条件下骨髓间充质干细胞成骨分化的抑制。     

组蛋白去甲基化酶KDM6A促进骨髓间充质干细胞成骨分化研究

目的研究组蛋白去甲基化酶KDM6A对骨髓间充质干细胞成骨定向分化能力的影响。方法构建Flag-KDM6A慢病毒表达质粒。利用慢病毒转染构建稳定过表达KDM6A的骨髓间充质干细胞。碱性磷酸酶活性实验检测成骨分化早期指标-碱性磷酸酶活性。茜素红染色及钙离子定量分析检测干细胞体外矿化能力。实时：毫量RT-PCR检测成骨分化相关基因．骨桥蛋白和骨钙素的表达。结果过表达KDM6A促进骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶活性、骨髓间充质干细胞体外矿化能力以及骨桥蛋白和骨钙素的表达。结论组蛋白去甲基化酶KDM6A具有促进骨髓间充质干细胞成骨分化的潜能,可以作为一个候选的靶基因用于骨组织工程技术,促进骨组织再生。．     

Ⅱ型糖尿病中BMAL1调节骨髓间充质干细胞用于骨缺损修复的研究

目的 探讨Ⅱ型糖尿病环境下,过表达生物钟基因编码芳香烃受体核转运蛋白1(BMAL1)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化能力的影响,以及其在骨缺损修复中的应用.方法 构建自发性Ⅱ型糖尿病Goto-Kakizaki Wistar(GK)大鼠模型为实验组,以同期Wistar(WT)大鼠为对照.取两组BMSCs进行成骨诱...     

microRNA在间充质干细胞成骨分化中的调节作用

间充质干细胞分化为成骨细胞的过程中受到基因表达的精确调控.近年来诸多研究表明microRNA(miRNA)在间充质干细胞的成骨分化过程中发挥着重要的调节作用.miRNA是一类小分子非编码RNA,主要通过与靶基因mRNA的碱基配对导致其降解或翻译阻遏,对基因进行转录后的调控.本文就不同miRNA分子对间充质干细胞成骨分化过程的双向调节功能及环境因素对其影响等方面做一综述.     

组蛋白甲基化促进AP2a基因表达及骨髓间充质干细胞成骨分化

目的研究转录因子AP2a的组蛋白甲基化状态对骨髓间充质干细胞成骨分化功能的影响。方法利用染色质免疫沉淀技术检测AP2a启动子甲基化状态。利用慢病毒载体的AP2ashRNA基因敲除AP2a进行丧失性功能研究。通过ALP活性、茜素红染色及钙离子定量分析研究骨髓间充质干细胞体外成骨分化能力。结果与牙源性间充质干细胞相比,AP2a在骨髓间充质干细胞中表达明显升高,AP2a启动子区域H3K4me3和H3K36me2明显增强。基因敲除AP2a能抑制骨髓间充质干细胞ALP活性及体外矿化能力。结论AP2a启动子区域H3K4me3和H3K36me2升高可以促进AP2a的表达和骨髓间充质干细胞成骨分化能力。     

RNA腺嘌呤6-甲基化修饰调控骨髓间充质干细胞成骨向分化的研究进展

RNA腺嘌呤6-甲基化修饰是真核生物信使RNA和非编码RNA上最为常见的一种表观遗传修饰,对于真核生物多项生命活动的调控起着至关重要的作用。近来的研究发现,RNA腺嘌呤6-甲基化修饰在骨髓间充质干细胞的分化,尤其是成骨向分化上,扮演着十分重要的角色。本文通过对RNA腺嘌呤6-甲基化修饰调控骨髓间充质干细胞成骨向分化的相关研究加以总结,以期为后续基础研究以及临床应用提供新的思路。     

硝苯地平作用下miR-4651对牙龈间充质干细胞成骨分化功能的影响

目的 研究miR-4651在硝苯地平作用下对牙龈间充质干细胞(GMSCs)成骨分化的影响。方法 利用miR-4651mimics及miR-4651inhibitor在GMSCs进行丧失性及获得性功能研究。定量RT-PCR检测miR-4651表达,碱性磷酸酶活性(ALP)测定、茜素红染色、钙离子定量以及定量RT-PCR检测牙龈间充质干细胞成骨/成牙本质分化相关基因的表达。结果 过表达miR-4651能明显促进牙龈间充质干细胞ALP活性、体外矿化能力及成骨/成牙本质分化相关基因的表达。敲减miR-4651能明显抑制牙龈间充质干细胞ALP活性、体外矿化能力及成骨/成牙本质分化相关基因的表达。在1μg/ml硝苯地平作用下,过表达miR-4651同样能促进牙龈间充质干细胞骨向分化。1μg/ml硝苯地平作用下,敲减miR-4651同样是抑制牙龈间充质干细胞的骨向分化。结论 即使在一定量硝苯地平作用下,miR-4651仍可促进牙龈间充质干细胞的成骨分化。     

经典Wnt信号通路与牙周膜干细胞成骨分化

牙周炎是口腔最常见的疾病之一,累及牙周支持组织,随着疾病的进展将引起附着丧失、牙周袋形成、牙槽骨吸收,最终导致牙齿松动脱落。因被牙周炎破坏吸收的牙槽骨自愈能力十分有限,所以牙周炎的治疗目标是在彻底清除菌斑生物膜的基础上,争取获得较多的牙周组织再生。牙周膜干细胞作为最适宜进行牙周组织再生的细胞,被广泛研究。Wnt信号通路分为经典Wnt通路和非经典Wnt信号通路,为十分复杂而高度保守的通路传导途径。该通路与牙周膜干细胞成骨分化的关系十分密切,牙周膜干细胞的成骨分化又对牙周组织再生有重要意义。该文对经典Wnt信号通路与牙周膜干细胞成骨分化的研究概况作一综述。     

非编码RNA调控人牙周膜干细胞成骨向分化的研究进展

牙周炎是一种常见的炎症性疾病,以牙齿支持结构的进行性损伤为特点,是我国成人牙齿丧失的主要原因。治疗牙周炎的目的不仅是通过控制炎症来阻止疾病发展,更重要的是获得牙周再生。人牙周膜干细胞具有成骨向分化潜能,有望在牙周组织修复再生的临床应用上发挥重要作用。非编码RNA(ncRNA)一般是指不编码蛋白质的RNA。伴随高通量检测技术的不断发展,发现了大量的种类丰富的ncRNA,其生物学功能也被不断揭示。越来越多证据显示,ncRNA在分子机制及细胞组织层面对疾病的发生、发展起重要调控作用,因此探索ncRNA调控机制可为牙周再生的研究提供新思路。本综述主要阐述了目前研究较多的几种ncRNA在人牙周膜干细胞成骨向分化中的调控机制。     

基质细胞衍生因子-1对炎症和正常来源的 人牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

目的 通过体外培养炎症来源的人牙周膜干细胞（iPDLSCs）和正常来源的人牙周膜干细胞（hPDLSCs）,比较基质细胞衍生因子-1（SDF-1）对于两种来源细胞的成骨分化作用。方法 采用组织块酶消化法原代培养iPDLSCs 和hPDLSCs,经有限稀释法纯化,通过流式细胞仪对干细胞表面标记物检测鉴定后,对其进行成骨诱导;MTT法检测并比较SDF-1对两种来源的细胞增殖能力的影响;茜素红染色检测SDF-1作用于两种来源的细胞后钙化骨量的表达;碱性磷酸酶法比较SDF-1作用于两者的成骨分化能力;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测SDF-1作用于两种牙周膜干细胞前后成骨相关基因表达水平的变化。结果 两种来源的牙周膜细胞经纯化后均阳性表达干细胞标记物。hPDLSCs较iPDLSCs增殖能力高;两种细胞经SDF-1成骨诱导培养后,成骨相关基因的表达水平均较诱导前明显上调（P<0.05）,SDF-1在50、200 ng·mL ^-1时分别对iPDLSCs和hPDLSCs细胞成骨分化作用最明显（P<0.05）。结论 正常来源和炎症来源的人牙周膜干细胞均具有成骨分化能力,SDF-1可增强两种来源的牙周膜干细胞的成骨分化能力。     

基质细胞衍生因子-1对炎症和正常来源的人牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

目的 通过体外培养炎症来源的人牙周膜干细胞（iPDLSCs）和正常来源的人牙周膜干细胞（hPDLSCs）,比较基质细胞衍生因子-1（SDF-1）对于两种来源细胞的成骨分化作用。方法 采用组织块酶消化法原代培养iPDLSCs 和hPDLSCs,经有限稀释法纯化,通过流式细胞仪对干细胞表面标记物检测鉴定后,对其进行成骨诱导;MTT法检测并比较SDF-1对两种来源的细胞增殖能力的影响;茜素红染色检测SDF-1作用于两种来源的细胞后钙化骨量的表达;碱性磷酸酶法比较SDF-1作用于两者的成骨分化能力;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测SDF-1作用于两种牙周膜干细胞前后成骨相关基因表达水平的变化。结果 两种来源的牙周膜细胞经纯化后均阳性表达干细胞标记物。hPDLSCs较iPDLSCs增殖能力高;两种细胞经SDF-1成骨诱导培养后,成骨相关基因的表达水平均较诱导前明显上调（P<0.05）,SDF-1在50、200 ng·mL ^-1时分别对iPDLSCs和hPDLSCs细胞成骨分化作用最明显（P<0.05）。结论 正常来源和炎症来源的人牙周膜干细胞均具有成骨分化能力,SDF-1可增强两种来源的牙周膜干细胞的成骨分化能力。     

Factors that modulate the effects of bone morphogenetic protein-induced periodontal regeneration: a critical review

The healing process initiated by a single molecular species of bone morphogenetic protein (BMP) such as BMP-2 or BMP-7 sets in motion a cascade of cellular events resulting in differentiation of progenitor cells into phenotypes involved in periodontal regeneration. For example, animal studies show that a single dose of recombinant human (rh) BMP-2 increases the rate of normal intramembranous bone formation and enhanced cementum formation during periodontal wound healing. However, the optimal effects of BMPs are modulated by a range of factors that need careful evaluation in clinical studies. These factors include the influence of root conditioning, occlusal loading, BMP dose, and the release characteristics of the carrier as well as the suitability of the model to evaluate the efficacy of BMPs. Each of these factors may affect the rate of BMP-induced osteogenesis and cementogenesis and subsequent periodontal ligament (PDL) formation during the early and late stages of periodontal wound healing. Although BMP-2 initiates stem cells along an osteogenic pathway, the dose may have to be of sufficient concentration to ensure other growth and differentiation factors do not redirect or retard the osteogenic potential of the cell. Understanding when to manipulate the cell's differentiation pathway with the application of single or multiple doses of BMPs at the appropriate concentration is required to optimize the effect of BMPs in periodontal wound healing. Therefore, different release profiles from the same carrier may be particularly important in tissues with mixed cell populations such as in the periodontium, where similar tissues like bone and cementum grow at different rates. Furthermore, treatment of intrabony defects with BMPs are likely to not only require appropriate temporal release of the BMP(s), but also a carrier that can serve as a template for new tissue formation providing space maintenance and supporting the mucoperiosteal flap. Many of these issues have not been adequately addressed from a periodontal standpoint; therefore the purpose of this review is to clarify our current understanding of the factors that are likely to modulate the effects of BMP-induced periodontal regeneration. Moreover, assessing the importance of these factors is essential prior to conducting expensive human clinical trials.     

牙周膜干细胞的研究进展

牙周病是一种由菌斑微生物引起的慢性感染性疾病,可引起牙周支持组织的破坏和丧失,最终导致牙齿松动脱落。牙周病治疗的最终目标是修复和重建受损的牙周支持组织。从牙周膜中分离获取的间充质干细胞具有成体干细胞的特性及多重分化潜能,可以分化为骨组织和牙周支持组织等多种类型的组织,这对牙周组织修复再生和牙周组织工程具有重大意义,因而备受关注。本文就牙周膜干细胞、牙周膜干细胞的生物学特性、牙周膜干细胞的影响因素及其调控机制等研究进展作一综述。     

赖氨酸乙酰基转移酶2A通过经典Wnt通路影响牙周膜干细胞成骨分化

目的 探讨赖氨酸乙酰基转移酶2A（KAT2A）调控牙周膜干细胞（PDLSCs）成骨分化的机制。方法 分离培养来自健康志愿者的PDLSCs（H-PDLSCs）和牙周炎患者的PDLSCs（P-PDLSCs）,比较传代细胞中KAT2A基因的表达水平。采用KAT2A基因干扰H-PDLSCs,检测KAT2A基因干扰对H-PDLSCs成骨分化的影响;同时检测KAT2A干扰后对经典Wnt通路及其配体的影响,确定KAT2A基因与经典Wnt通路的上下游关系。结果 与H-PDLSCs相比,P-PDLSCs中KAT2A基因的表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）。KAT2A基因被干扰后,PDLSCs成骨能力下降（P<0.05）,同时经典Wnt通路被激活,拮抗剂Dickkopf-1（DKK-1）表达下调;加入DKK-1后,被干扰的PDLSCs成骨分化功能恢复,而KAT2A的表达不受影响,仍维持较低水平。结论 牙周炎可导致PDLSCs中KAT2A基因表达下降,激活经典Wnt通路,抑制细胞的成骨分化。     

机械刺激对牙周骨组织工程干细胞分化的影响

目前,细胞移植及其与支架材料的联合应用仍是牙周骨组织工程的主要策略之一.牙周骨组织中,牙槽骨和牙骨质等组织的硬度及空间结构有明显差异,支架材料的不同机械性能对干细胞的增殖、分化等生物学行为也具有不同诱导作用.研究显示,支架材料的基质硬度和拓扑结构等机械刺激因素参与调控包括脂肪来源间充质干细胞、牙周膜干细胞等在内的种子细...