c-Src与p-STAT3信号转导通路在上皮性卵巢癌发生、发展的关系研究

目的:探讨原癌基因c-Src与磷酸化信号转导及转录活化因子3(p-STAT3)在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达情况及临床意义.方法:应用实时荧光定量PCR及免疫组化SP法检测c-Src及p-STAT3蛋白分别在50例EOC癌组织(恶性组)、30例卵巢上皮性交界性肿瘤(交界性组)、30例卵巢上皮性良性肿瘤(良性组)及30...     

microRNA-622在卵巢上皮性癌中的表达及意义

目的探讨microRNA-622(miR-622)在卵巢上皮性癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株迁移和侵袭能力的影响。方法收集2003年1月至2016年12月在南方医科大学附属东莞人民医院手术切除的卵巢上皮性癌组织125例、卵巢良性上皮性肿瘤组织45例、正常卵巢组织25例。采用实时荧光定量PCR检测miR-622的表达水平;利用脂质体将miR-622模拟物瞬时转染至SKOV3卵巢癌细胞株,通过Transwell小室装置检测上调miR-622的表达对卵巢癌细胞株迁移和侵袭能力的影响。结果 miR-622在卵巢上皮性癌组织中的表达水平高于卵巢良性上皮性肿瘤组织和正常卵巢组织,差异具有统计学意义(P0.05)。miR-622表达水平与卵巢上皮性癌FIGO分期和是否发生淋巴结转移相关(P0.05)。体外细胞实验显示,上调miR-622表达可增强SKOV3卵巢癌细胞株的迁移和侵袭能力。结论 miR-622在卵巢上皮性癌组织中的表达增高,其可能通过促进癌细胞迁移和侵袭,参与卵巢癌的恶性演进。     

卵巢上皮性癌中肌切蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨肌切蛋白(Scinderin)在卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义.方法:运用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法和蛋白质印迹(Western blot)法分别检测34例卵巢上皮性癌、21例卵巢良性肿瘤和20例正常卵巢组织中肌切蛋白mRNA和蛋白的表达情况,并进行临床资料统计,分析肌切蛋白与卵巢上皮性癌临床病理参数间的关系.结果:卵巢上皮性癌组中肌切蛋白mRNA及蛋白表达量均显著高于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组(P＜0.01),而在正常卵巢组与良性卵巢肿瘤组中,肌切蛋白mRNA及蛋白表达量差异无统计学意义(P＞0.05).肌切蛋白mRNA和蛋白表达与卵巢上皮性癌病理分级、淋巴结转移有关(P ＜0.01;P＜0.05),而与患者年龄、肿瘤临床分期无相关性(P＞0.05).结论:肌切蛋白在卵巢上皮性癌中表达上调,且在低分化卵巢上皮性癌中表达高于中-高分化卵巢上皮性癌,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者,提示肌切蛋白与卵巢上皮性癌患者的不良预后相关,可作为判断卵巢上皮性癌预后的生物学标志物.     

STAT3、cyclinD1、cyclinB1在卵巢上皮性癌的表达及意义

目的:研究STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1在卵巢上皮性癌的表达及意义。方法:用Westernblot和RT-PCR方法检测32例卵巢上皮性癌组织和12例正常卵巢组织中STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1的表达。结果:STAT3在卵巢癌和正常卵巢组织的蛋白表达阳性率分别为90.6%(29/32)和16.7%(2/12)。卵巢癌组STAT3表达明显高于正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.01);STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1mRNA在卵巢癌组织的阳性表达率分别为93.75%、87.5%、71.88%,与正常卵巢组阳性率的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卵巢上皮性癌中STAT3表达升高及活化可能促进了抗凋亡基因cyclinD1、cyclinB1表达,刺激细胞持续异常增殖,导致肿瘤发生。     

YB1和CD44在上皮性卵巢癌中的表达及其与铂类耐药的关系

目的:检测上皮性卵巢癌中Y-盒结合蛋白1(YB-1)和黏附分子CD44的表达,分析其与卵巢癌化疗耐药的关系。方法:采用免疫组化SP法分别检测YB-1及CD44蛋白在铂类耐药或敏感的上皮性卵巢癌及正常卵巢组织中的表达情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot法分别检测上皮性卵巢癌顺铂敏感与耐药细胞中YB1及CD44 mRNA与蛋白水平,分析两者表达的相关性。结果:YB-1和CD44在上皮性卵巢癌组织中阳性率分别为56.3%和60.9%,耐药组织中表达均明显高于敏感组织,且两者表达呈正相关(r=0.456);顺铂耐药上皮性卵巢癌细胞株中YB-1和CD44 mRNA及蛋白水平明显高于敏感株(P均0.05)。结论:YB-1和CD44与上皮性卵巢癌铂类耐药相关,独立或联合检测可能预测化疗的敏感性。     

卵巢癌中微小RNA-210的表达及临床意义

目的：检测上皮性卵巢癌组织中微小RNA-210（miR-210）的表达水平,初步探讨miR-210在卵巢癌发病中的作用。方法：采用多聚腺苷酸加尾实时荧光定量反转录聚合酶链反应［ｐｏｌｙ（Ａ）－RT-qPCR]检测上皮性卵巢癌、良性上皮性卵巢肿瘤及正常卵巢组织标本中miR-210的表达。结果：miR-210在卵巢癌组中表达低于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组,3组间差异有统计学意义（F=893.213,P=0.000）;且随着卵巢癌组织临床分期及组织分化的进展,miR-210表达有下降的趋势。结论：miR-210在上皮性卵巢癌组织中低表达,在卵巢癌发生发展中发挥重要的抑癌基因作用,且与卵巢癌分期、组织分级及淋巴结转移密切相关。     

SETDB1基因在卵巢高级别浆液性癌组织中的表达及对卵巢上皮性癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨SET结构域分支型组蛋白赖氨酸甲基转移酶1(SETDB1)基因在卵巢高级别浆液性癌(HGSOC)组织中的表达, 并探讨其对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞增殖、侵袭能力的影响及其分子机制。方法 (1)收集2009年1月至2014年12月在郑州大学第一附属医院接受初次手术治疗且临床病理资料完整的90例HGSOC患者的癌组织标本, 以同期收治的30例因子宫肌瘤行子宫及双侧附件切除术患者的正常卵巢组织标本为对照。应用荧光定量PCR技术、免疫组化法检测SETDB1 mRNA、蛋白在HGSOC组织、正常卵巢组织中的表达, 分析SETDB1蛋白表达与HGSOC患者临床病理特征、预后的关系;(2)荧光定量PCR技术检测卵巢癌细胞系A2780、COC1、OVCAR3、SKOV3细胞中SETDB1 mRNA的表达。(3)过度表达及沉默SETDB1基因的卵巢癌细胞株的构建及筛选后, 活细胞计数法检测转染后卵巢癌细胞的增殖能力, 穿膜(transwell)小室实验检测转染后卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。(4)蛋白印迹(western blot)法检测转染后卵巢癌细胞中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B...     

肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子-Ⅰ、基质金属蛋白酶-2在卵巢上皮性癌组织中的表达及其相关性

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子*Ⅰ(IGF-Ⅰ)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在卵巢上皮性癌组织中的表达及其相关性.方法:分别收集正常卵巢组织20例(正常对照组),卵巢良性上皮性肿瘤组织30例(良性肿瘤组),卵巢上皮性癌组织70例(卵巢癌组).采用免疫组织化学SP法检测3组卵巢组织中HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2的表达,分析3个因子与卵巢上皮性癌临床病理因素间的关系,采用Spearman相关性检验分析3个因子间的相关性.结果:①HGF、IGF-Ⅰ和MMP-2在正常对照组、良性肿瘤组、卵巢癌组中的表达呈上升趋势,且组间两两比较,差异有统计学意义(P＜0.05).②卵巢癌组中,HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2的阳性表达在临床分期Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期及有无淋巴结转移中比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).③在卵巢癌组中,HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2的阳性表达三者间均呈正相关(P＜0.01).结论:HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2在卵巢上皮性癌组织中高表达,可能共同参与卵巢上皮性癌的发生发展,与癌细胞的增殖、浸润和转移有关,且存在协同作用.     

LAMC3低表达与卵巢上皮性癌不良预后的相关性研究

目的:探讨层粘连蛋白γ3亚基（LAMC3）表达与卵巢上皮性癌（卵巢癌）患者不良预后的相关性。方法:应用免疫组化SP法检测卵巢癌组织（包括商品化标本和本研究标本）中LAMC3蛋白的表达,其中商品化标本为购买的卵巢组织微阵列芯片（包括208份卵巢癌组织和8份癌旁正常卵巢组织）、本研究标本为2005年4月至2012年12月在...     

Survivin、caspase-3及PCNA在卵巢上皮性肿瘤中表达的临床意义

目的 探讨凋亡调控因子Survivin、半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)及细胞增殖标记指数(PCNA)在卵巢上皮性肿瘤中表达的临床意义.方法 采用免疫组织化学技术,检测2006年1月至2006年12月哈尔滨医科大学第一临床医学院收治的40例卵巢上皮性癌、10例交界性卵巢上皮性肿瘤组织及10例卵巢良性上皮性肿瘤中Survivin、caspase-3和PCNA的蛋白表达,并结合临床病理特征进行分析.结果 Survivin、caspase-3在卵巢上皮性肿瘤中表达呈负相关;Survivin和PCNA的蛋白表达呈正相关;Survivin在卵巢上皮性癌中表达率72.5%(29/40),且表达水平高于卵巢良性上皮性肿瘤(0)和交界性卵巢上皮性肿瘤(40%)(P＜0.05).caspase-3在卵巢上皮性癌中表达率0.5%(2/40),且表达水平远远低于卵巢良性上皮性肿瘤和交界性卵巢上皮性肿瘤(P＜0.01).结论 Survivin可能抑制caspase-3在卵巢癌中表达,导致卵巢癌细胞增殖,凋亡受阻,肿瘤形成;Survivin基因的表达可能发生在卵巢癌恶性转化的早期;Survivin的表达与瘤细胞分化、增殖密切相关,并且其高表达可能会作为预后不良的标志;caspase-3在卵巢癌中极低表达,有望成为卵巢癌良恶鉴别新的指标.     

卵巢上皮性癌组织中lnc-MyD88的表达及其与患者预后的关系

目的探讨长链非编码RNA-髓样细胞分化因子88(lnc-MyD88)在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织中的表达及其与患者预后的关系。方法选择2016年1月至2019年1月在四川省肿瘤医院接受初次肿瘤细胞减灭术且术后辅以铂类药物+紫杉醇方案化疗6～8个疗程的卵巢癌患者共70例, 收集其新鲜癌组织标本;另收集同期28例因妇科良性疾病行手术治疗患者的新鲜正常卵巢组织标本作为对照。采用逆转录(RT)-实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测卵巢癌和正常卵巢组织中lnc-MyD88、髓样细胞分化因子88(MyD88)mRNA的表达, 并采用Pearson相关法分析卵巢癌组织中lnc-MyD88与MyD88 mRNA表达的相关性;分析lnc-MyD88表达与卵巢癌患者临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法计算卵巢癌患者的生存率, 单因素生存分析采用log-rank检验, 多因素生存分析采用Cox比例风险模型。结果 (1)RT-qPCR技术检测显示, 卵巢癌组织中lnc-MyD88、MyD88 mRNA的中位表达水平分别为0.009(0.000～0.049)、0.001(0.000～0.006)...     

MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的:探究MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达水平及其与患者临床病理特征之间的关系。方法:免疫组化法检测46例上皮性卵巢癌、25例良性卵巢肿瘤及15例正常卵巢组织中MEX3A蛋白表达。结果:MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达明显高于良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织(P0.05),而良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织比较则无显著差异(P0.05)。MEX3A蛋白表达与上皮性卵巢癌的临床分期、淋巴结转移有关(P0.05),而与患者年龄、组织分级、组织类型及有无腹水无关(P0.05)。结论:MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中高表达,并与患者临床分期和淋巴结转移相关,在卵巢癌的发生发展中具有重要作用。     

基质金属蛋白酶-2在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及意义

目的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA和蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达以及与临床病理特征和预后的关系.方法用半定量逆转录聚合酶链反应技术、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法对41例卵巢上皮性癌及26例卵巢良性肿瘤组织中MMP-2mRNA及蛋白的表达分别进行定量和定位分析;应用蛋白印迹法定性检测MMP-2酶原和活性MMP-2在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达.结果良、恶性卵巢肿瘤组织中MMP-2mRNA表达分别为0.68±0.48和0.97±1.00,MMP-2蛋白表达阳性率分别为54%和76%,两者分别比较,差异无显著性(P＞0.05).卵巢上皮性癌组织中的活性MMP-2表达阳性率为71%,显著高于卵巢良性肿瘤组织的42%(P＜0.05).手术病理分期为Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者的活性MMP-2表达阳性率为81%,显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者的9例中3例(P=0.01).病情进展患者的活性MMP-2表达阳性率为86%,明显高于无进展患者的19例中10例(P=0.02).结论卵巢上皮性肿瘤普遍存在MMP-2mRNA及蛋白表达,活性MMP-2表达与卵巢上皮性癌侵袭、转移密切相关,是卵巢上皮性癌的一项预后监测指标.     

NGAL和MMP-9在卵巢上皮性癌中的表达及相关性研究

目的:检测中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在卵巢上皮性肿瘤组织和血清中的表达,了解两者与卵巢癌临床病理特征的关系。方法:应用半定量RT-PCR和ELISA法检测50例上皮性卵巢癌、21例卵巢良性肿瘤和18例正常对照的卵巢组织和血清中NGAL和MMP-9的表达水平。结果:(1)卵巢癌组的组织及血清中NGAL和MMP-9表达明显高于卵巢良性肿瘤组和正常对照组(P均<0.05);二者的高表达与临床分期、淋巴结转移正相关(P均<0.05);卵巢癌患者的组织及血清中NGAL与卵巢癌的组织分化程度正相关(P均<0.05),MMP-9则与卵巢癌的组织分化程度负相关(P均<0.05)。(2)卵巢癌患者的组织或血清中,NGAL表达均与MMP-9表达呈正相关(r=0.740,r=0.676,P均<0.05)。结论:NGAL和MMP-9在卵巢上皮性癌中表达上调,可能与卵巢上皮性癌的发生、发展有关。     

长链非编码RNA-HOST2在上皮性卵巢癌中的表达及生物学功能

目的:分析长链非编码RNA-HOST2在上皮性卵巢癌细胞和组织中的表达,探讨HOST2表达与卵巢癌生物学行为之间的潜在关系,为上皮性卵巢癌的靶向治疗提供理论依据和实验数据。方法:选择OVCAR-3上皮性卵巢癌细胞株,用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基常规标准条件下培养,利用实时定量荧光PCR技术检测HOST2的表达,利用siRNA靶向干扰HOST2表达,利用划痕实验、Transwell细胞小室和CCK-8试剂研究HOST2对上皮性卵巢癌细胞迁移、侵袭、增殖和凋亡的影响。结果:HOST2在上皮性卵巢癌中均特异性高表达,但在其他多种常见的恶性肿瘤中表达很低或几乎没有表达。HOST2的表达受抑制后,OVCAR-3细胞的迁移、侵袭和增殖能力均明显减弱,外源性降低HOST2表达能抑制上皮性卵巢癌皮下移植瘤的生长,延长裸鼠生存期。结论:HOST2参与上皮性卵巢癌细胞的迁移、侵袭、增殖等生物学行为,可用于上皮性卵巢癌的靶向治疗。     

热休克蛋白40 mRNA在卵巢上皮性癌中的表达及意义

目的:了解热休克蛋白40(heat shocking protein,Hsp 40)mRNA在卵巢上皮性癌组织中的表达,并分析其与临床病理资料之间的关系.方法:用RT-PCR技术检测40份卵巢上皮性癌组织、20份卵巢良性肿瘤组织、15份正常卵巢组织中Hsp 40 mRNA的表达情况并进行半定量比较,将其表达结果与临床病理资料进行统计学分析.结果:Hsp 40 mRNA在卵巢上皮性癌、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织中均有表达,但在卵巢上皮性癌组织中的相对表达水平明显高于卵巢良性肿瘤组织(P<0.01)及正常卵巢组织(P<0.01),差异有高度统计学意义;卵巢良性肿瘤组织中Hsp 40 mRNA的相对表达水平高于正常卵巢组织,差异有高度统计学意义(P<0.01).Hsp 40 mRNA的表达与组织类型、临床分期、病理分级无相关性.结论:Hsp 40 mRNA的表达可能与卵巢上皮性癌的发生、发展有关.     

血管内皮生长因子C及其受体3mRNA在上皮性卵巢癌组织的表达及意义

目的 探讨血管内皮生长因子C（VEGF-C）及其受体3（VEGFR-3）mRNA在上皮性卵巢癌组织的表达及与癌周淋巴管生成及淋巴转移的关系。方法 2003-04—2004-06第三军医大学附属西南医院采用RT-PCR方法，检测VEGF-C及VEGFR-3mRNA在良、恶性上皮性卵巢肿瘤组织的表达及组织化学淋巴管染色并计数，分析其与VEGF-C mRNA表达及淋巴转移的关系。结果 VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA在卵巢良、恶性肿瘤的表达差异有显著性。VEGF-C mRNA表达阳性及有淋巴结转移组的癌组织淋巴管密度分别大于VEGF-CmRNA表达阴性及无淋巴结转移组的癌组织，二者差异均有显著性。结论 VEGF-CmRNA在上皮性卵巢癌组织的表达上调导致了癌周淋巴管生成，促进了肿瘤的淋巴道转移。     

Dickkopf-1、LRP-5和LRP-6基因在卵巢上皮性癌中的表达及意义

目的 探讨Dickkopf-1(DKK-1)、低密度脂蛋白受体相关蛋白-5(LRP-5)和低密度脂蛋白受体相关蛋白-6(LRP-6)在卵巢上皮性癌中的表达和临床意义.方法 2002年1月至2008年4月在中国医科大学附属盛京医院采用RT-PCR的方法检测56例卵巢上皮性癌、35例卵巢上皮性良性肿瘤和12例正常卵巢组织中DKK-1mRNA、LRP-5mRNA和LRP-6mRNA的表达情况,分析3种基因与各临床病理参数的关系及其在癌组织中的表达相关性.结果 DKK-1mRNA,LRP-5mRNA和LRP-6mRNA在卵巢上皮性癌组织中的表达强度分别为0.90±0.32,0.71±0.27,0.80±0.28;明显高于卵巢上皮性良性肿瘤组织0.58±0.23,0.58±0.29,0.54±0.22和正常卵巢组织0.36 ±0.29,0.40±0.25,0.32 ±0.27(P均<0.0001).DKK-1 mRNA、LRP-5mRNA和LRP-6mRNA表达强度与临床分期(P=O.003～0.020)和病理分级(P=0.000～0.028)密切相关.DKK-1mRNA与LRP-5mRNA和LRP-6mRNA在卵巢上皮性癌中的表达强度存在统计学相关性(r=0.341,P<0.0001;r=0.815,P<0.0001).结论 DKK-1、LRP-5和LRP-6 mRNA在卵巢上皮性癌中表达增强,其表达强度存在相关联系.DKK-1、LRP-5和LRP-6在卵巢上皮性癌的发生、发展过程中起重要作用.     

NM23-H1B基因mRNA在卵巢上皮性肿瘤组织中表达的研究

目的研究NM23-H1B基因与卵巢上皮性肿瘤的相关性。方法收集2003年4月至2004年2月手术切除的卵巢上皮性肿瘤标本48份,其中卵巢上皮性癌（卵巢癌）40份,卵巢交界性上皮性肿瘤8份,正常卵巢组织标本8份。采用RT-PCR技术、RNA印迹（northern blot）法、原位杂交实验,检测NM23-H1B基因mRNA的表达。结果经RT-PCR方法检测在所有的标本中均有NM23-H1B基因mRNA的表达,在正常卵巢组织中表达较低,而在所有的卵巢肿瘤中表达均高于正常卵巢组织,早期（Ⅰ、Ⅱ期）卵巢癌中的表达高于晚期（Ⅲ、Ⅳ期）。northern blot法检测结果显示NM23．H1B基因mRNA在正常卵巢组织的表达较低,交界性肿瘤中的表达则与正常卵巢组织中相似,而在卵巢癌组织中表达明显增高,在早期卵巢癌中分化好（G1级）者表达明显高于分化较差（G2、G3级）者。原位杂交实验检测结果显示,在所有的卵巢癌标本中NM23-H1B基因mRNA阳性表达率为100％（40／40）,在正常卵巢组织中阳性表达率为0,在8份卵巢交界性肿瘤标本中,有2份NM230H1B基因表达阳性,阳性表达率为2／8。结论NM23-H1B基因与卵巢癌发生发展有相关性。     

卵巢癌组织中STAT3和免疫效应细胞的表达及其相关性分析

目的:研究卵巢上皮癌细胞中STAT3表达与DC、CD4+、CD8+表达之间的关系及临床意义,探讨卵巢癌发生过程中肿瘤免疫逃逸的机制。方法:选择42例卵巢上皮性癌患者为研究对象,25例卵巢良性肿瘤患者及13例正常卵巢组织为对照。用免疫组织化学SABC法检测组织中STAT3与DC、CD4+、CD8+的表达,并进行半定量及相关性分析。结果:(1)STAT3在卵巢上皮性癌中表达增高,与良性和正常对照组的差异有统计学意义(P<0.005);按FIGO分期,Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期的差异有统计学意义(P<0.05);(2)DC、CD4+在卵巢上皮性癌中表达降低,与良性和正常对照组的差异有统计学意义(P<0.005);按FIGO分期,Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期的差异有统计学意义(P<0.05);(3)CD8+在卵巢上皮性癌中表达降低,与良性和正常对照组的差异有统计学意义(P<0.005);按FIGO分期,Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期比较,低表达率增高,但无统计学意义(P>0.05);(4)卵巢上皮癌组织中STAT3表达与DC、CD4+、CD8+表达之间呈负相关,相关系数分别为-0.230、-0.081、-0.102,P均<0.05。结论:STAT3与DC、CD4+、CD8+的表达可作为判断卵巢癌恶性程度的指标;STAT3与DC、CD4+、CD8+在肿瘤组织的表达呈负相关。各因素间相互影响,可能是导致肿瘤逃脱机体免疫监视的机制之一。