探讨外周血CD4^＋、CD8^＋T细胞CD69在小儿类风湿关节炎发生过程中的免疫病理作用

目的：对小儿类风湿关节炎（RA）在发生过程中外周血中CD4＋、CD8＋T细胞CD69的表达水平与免疫病理作用进行探讨。方法：选取本院在2011年7月-2012年9月间采集的30例类风湿关节炎患儿与30例健康儿童的外周血标本,将前者定为观察组,后者定为对照组。对这两组儿童外周血中的CD4＋、CD8＋T细胞CD69采用流式细胞仪进行检测;观察组患儿采用药物治疗后,检测CD4＋、CD8＋T细胞CD69的表达水平情况。结果：观察组患儿的CD4＋、CD8＋T细胞CD69的表达水平明显高于对照组（P〈0.05）;且观察组患儿经过药物治疗后,RA症状明显有了改善,重新抽取其外周血进行检测,发现患儿CD4＋、CD8＋T细胞CD69的表达水平明显比治疗前要下降（P〈0.05）。结论：CD4＋、CD8＋T细胞CD69在疾病的发生过程中是起着一种激活、增殖的作用,通过控制CD4＋、CD8＋T细胞CD69能够达到缓解病情的作用。     

幼年型类风湿关节炎患者外周血和滑液CD4+和CD8+T细胞CD25表达及意义

目的 分析小儿类风湿关节炎(RA)患者的外周血和滑液CD4+和CD8+T细胞CD25表达水平,并探讨它们在小儿关节炎症发生过程中的免疫病理作用.方法 收集24例RA患儿和16例健康儿童外周血标本及24例患儿膝/腕/踝滑液标本,利用流式细胞仪检测CD4+、CD8+T细胞CD25表达,分析它们在疾病发展过程中的作用.结果 RA患儿外周血和滑液CD4+、CD8+T细胞CD25表达明显升高,与健康者比较有统计学差异(P<0.05),所有患儿均接受了有效的药物治疗3个月后,待症状控制后,分析发现患者的CD4+、CD8+T细胞表达CD25水平显著下降(P<0.05).结论 JRA患儿外周血T细胞表达CD25水平明显升高,提示T细胞在关节炎症病变过程中激活、增殖,参与关节滑膜组织及全身免疫应答.     

胰腺癌患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞分析

目的：探讨胰腺癌患者外周血高表达CD25的CD4＋调节性T（CD4^＋CD25^highT）细胞比率变化特点及其临床意义。方法：用流式细胞术检测58例胰腺癌患者和14名健康人外周血CD4^＋CD25^highT细胞水平,进行分层分析,初步探讨其表型特征。结果：胰腺癌患者外周血中CD4^＋CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的百分比率为（15.61±13.97）%,明显高于健康人群（2.53±1.26）%（P〈0.01）;CD4＋CD25highT细胞具有调节性T细胞的表面标记特征,即HLA-Ⅰ、CD45 RO阳性,CD45 RA、CD69阴性。人白细胞DR抗原的表达水平在不同个体间的CD4^＋CD25^highT细胞差异较大。这群细胞细胞膜表面共刺激分子CD80、CD86表达水平很低,而共刺激分子CD152（CTLA-4）在不同个体间的CD4^＋CD25^highT细胞差异较大。胰腺癌Ⅰ-Ⅱ期患者,其外周血CD4^＋CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的比率为（18.75±20.76）%;Ⅲ期为（13.71±9.53）%;Ⅳ期为（14.20±7.46）%;各期CD4^＋CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的比率均显著高于健康人群水平（P〈0.01）。结论：胰腺癌患者外周血CD4^＋CD25^highT细胞水平明显升高,可能与肿瘤免疫功能低下及肿瘤发生、发展密切相关。     

恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8~+CD28~-表达及意义

目的探讨恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^-表达及意义。方法采用流式细胞仪检测35例恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^-。结果恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^-与正常对照有显著性差异（P〈0．05）：治疗有效后两者趋于正常（P〉0．05）；而无效组与正常对照组相比仍有显著性差异（P〈0．05）。结论恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^-表达异常，不同治疗效果表达不同，恶性淋巴瘤患者有免疫功能异常，治疗有效后免疫功能恢复正常。     

新风胶囊对类风湿关节炎活动期伴贫血患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo调节性T细胞的影响

目的：探讨类风湿关节炎（RA）活动期伴贫血患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo调节性T细胞（Treg）的变化及新风胶囊对其的影响。方法：40例RA活动期伴贫血的患者按随机数字表法分为新风胶囊组（XFC）和正清风痛宁组各20例,均1月1疗程,1疗程后观察疗效;同时设健康志愿者正常对照组20例。采用流式细胞仪检测三组外周血中CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg的数量及其在CD4^＋T淋巴细胞中所占的比例,并研究其与临床症状积分、疾病活动度指标（DAS28分值）、实验室指标之间的关系。结果：①与正常对照组相比,RA活动期伴贫血患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg数量明显下降（P〈0.01）,活动期伴贫血患者及正常对照组外周血CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg占CD4^＋T淋巴细胞的百分比分别为（2.75±1.01）%和（4.18±0.89）%,前者明显低于后者（P〈0.01）。②RA活动期伴贫血患者CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg表达水平与临床症状积分、DAS28评分、血沉（ESR）、C反应蛋白（CRP）、血小板（PLT）呈负相关（P〈0.05）,与血红蛋白（HGB）、血清铁（SI）及补体C3、C4呈正相关（P〈0．05）,而与类风湿因子（RF）、红细胞（RBC）、血清铁蛋自（SF）、转铁蛋白（TF）无明显相关性（P〉0．05）。③两治疗组相比,XFC组在总有效率及改善关节症状及部分实验室指标方面与正清风痛宁组相似（P〉0．05）,但在上调CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg表达水平、降低DAS28分值及升高HGB、降低PLT数量方面显著优于正清风痛宁组（P〈0．05）。结论：RA活动期伴贫血患者外周血中CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg表达水平低,并且与疾病活动度及贫血相关指标密切相关,提示该细胞参与了RA的发病和疾病的活动,同时也可能为RA引起贫血的原因之一,XFC可以高CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg表达水平,升高HGB、降低PLT数量,改善RA患者临床症状、改善贫血     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对HCV感染者疾病进程影响的研究

目的：探讨HCV感染者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达状况以及与疾病进程的相关性。方法：选取HCV感染者69例及健康对照23例,应用流式细胞术检测外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达。结果：HCV感染组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞比例明显高于对照组（P〈0.01）;慢性感染组外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例高于HCV无症状携带组（P〈0.05）;肝硬化组外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例高于慢性感染组（P〈0.05）。结论：HCV感染者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与疾病进程具有相关性。     

外周血CD4^＋CD25^＋CD127^-调节性T细胞在过敏性紫癜中的表达及意义

目的 探讨外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋调节性T细胞在HSP患儿治疗前和治疗后的表达及其临床意义。方法选取HSP患儿4l例作为观察组,选取健康儿童41例作为对照组,检测对照组儿童及观察组患儿治疗前后的CD4^＋CD25^＋CD127^＋值。结果（1）治疗前与对照组比较,CD4^＋CD25^＋CD127^＋明显降低（P〈0．05）;（2）与治疗前比较,观察组患儿的CD4^＋CD25^＋CD127^＋值在治疗后明显升高（P〈0．05）;（3）与对照组比较,观察组患儿治疗后CD4^＋CD25^＋CD127^＋值差异无显著性（P〉0．05）。结论外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋值在HSP患儿治疗前显著降低,给予有效的治疗后其值显著升高,可能在HSP的发生发展过程中调节性T细胞进行了参与。而对于HSP患儿对疾病的有效预测．可以对其CD4^＋CD25^＋CD127^＋值进行测定。     

CD4+CD25+调节性T细胞在肺癌患者外周血中的表达

目的探讨肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及其与临床病理因素的关系。方法用流式细胞术检测60例肺癌患者和60例健康对照者的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量变化。结果肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显高于正常组（P〈0．05），其变化与病理分期和是否有转移有关（P〈0．05），而和性别、家族史、病理类型和肿瘤体积等无关。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可能在肿瘤免疫中发挥重要作用，导致和促进肺癌的发生和转移。     

CD69在慢性乙肝患者CD4+、CD8+T淋巴细胞的表达

目的：观测慢性乙肝患者外周血CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞早期激活标志CD69的表达.方法：静脉采集慢性乙肝患者普通肝素抗凝血2 ml,在植物血凝素（PHA）20μg/ml条件下进行全血培养,4 h后用双色免疫荧光标记流式细胞术检测CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞CD69的表达。结果：正常人外周血只有很少量CD4^＋与CD8^＋T淋巴细胞表达CD69分子,经PHA刺激后CD4^＋与CD8^＋T淋巴细胞CD69的表达率明显升高,较刺激前有统计学差异（P＜0.01）。同样,慢性乙肝患者在激活前后也有统计学差异（P＜0.01）;慢性乙肝患者在PHA刺激前有一部分CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞表达CD69分子,明显高于对照组（P＜0.01）。结论：本研究结果可能与乙肝患者体内病毒免疫紊乱有关系。     

类风湿关节炎CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达及其与病情关系探讨

目的：研究类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory Tcells,Treg）表达水平特点,探讨CD4^＋CD25^＋Treg在RA发生发展中的作用。方法：采用流式细胞术检测25例初发RA早期患者和13例健康人外周血CD4^＋CD25^＋Treg数量,并探讨CD4^＋CD25^＋Treg与RA活动性指标之间的关系。结果：RA患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg数量为（1．50±0．68）％,显著低于健康对照组（2．40±1．08）％（P〈0．01）。表明初发RA早期CD4^＋CD25^＋Treg数量减少。RA患者CD4^＋CD25^＋Treg水平与白介素-17、类风湿因子呈负相关（r=-0．576和r=-0．454,均P〈0．05）,与血沉和C反应蛋白无相关性（P〉0．05）。结论：RA早期患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg表达水平下降,且与病情活动程度负相关,CD4^＋CD25^＋Treg数量的减少可能与RA的发生、发展有关。     

小儿传染性单核细胞增多症患者外周血CD45RO＋、CD45RA＋T淋巴细胞亚群表达的研究

目的探讨传染性单核细胞增多症（IM）患儿CD4＋T辅助淋巴细胞CD4＋CD45RO＋和CD4＋CD45RA＋T淋巴细胞亚群的变化.方法用流式细胞术检测了30例活动期IM、急性期及恢复期患者CD4＋T辅助细胞CD45RO、CD45RA的表达率,并与对照组进行了比较.结果 IM患者急性期与对照组相比CD4＋CD45RO＋明显增高（P〈0.05）,CD4＋CD45RA＋明显对低于对照组（P〈0.05）;恢复期CD4＋CD45RO＋与急性期比较明显降低（P〈0.05）,但仍高于正常对照组（P〈0.05）;CD4＋CD45RA＋与急性期相比明显升高（P〈0.05）,但仍低于对照组（P〈0.05）.结论 CD4＋CD45RO＋和CD4＋CD45RA＋T淋巴细胞在IM患者的细胞免疫中起重要作用,CD45RA＋T辅助细胞减少是导致机体免疫功能失去平衡的重要原因.     

外周血调节性T细胞在儿童与成人重症肌无力发病机制中的作用

目的 初步探讨外周血CD4+CD25+调节性T细胞在重症肌无力(MG)发病中的作用.方法 用流式细胞术分别检测儿童和成人MG外周血CD4+CD25+调节性T细胞的数最及其表达Foxp3和CTLA-4的情况.结果 儿童MG外周血CD4+CD25+调节性T细胞的数量明显高于正常儿童对照组,但其表达Foxp3水平反而大大低于对照组,成人MG比较差异无统计学意义.所有MG患者外周血CD4+CIY25+调节性T细胞表达的表面分子CTLA-4与正常对照比较,差异无统计学意义.结论 儿童MG患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞存在着数量改变和功能缺失.提示儿童MG发病可能与外周血调节性T细胞免疫耐受功能受损有关.     

类风湿性关节炎患者外周血T淋巴细胞亚群分析

目的了解类风湿性关节炎患者外周血淋巴细胞亚群的分布特征,以探讨其发病机制。方法使用间接免疫荧光和直接免疫荧光方法对１９例类风湿性关节炎患者和１６例健康对照的外周血淋巴细胞进行研究。结果类风湿性关节炎患者与对照组比较ＣＤ３＋Ｔ细胞和ＣＤ４＋Ｔ细胞无明显变化,ＣＤ８＋Ｔ细胞明显减少,ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ比值增加。ＣＤ４＋２Ｈ４＋Ｔ细胞在ＣＤ４＋Ｔ细胞中所占比例减少,而ＣＤ４＋４Ｂ４＋Ｔ细胞所占比例增加。进一步研究发现,类风性性关节炎患者活化的ＣＤ２５＋Ｔ淋巴细胞增加;ＩｇＧ含量显著增加,ＩｇＭ和ＩｇＡ与正常组比较无明显差别。结论类风湿性关节炎患者存在细胞免疫和体液免疫的功能紊乱,而大量自身免疫球蛋白的产生可能是辅助Ｔ淋巴细胞升高,抑制性Ｔ淋巴细胞减少以及活化Ｔ淋巴细胞增加的结果,因此,Ｔ淋巴细胞亚群比例失衡在类风湿性关节炎的发病中可能起着更为重要的作用     

类风湿关节炎患者外周血调节性B细胞比例及功能变化的研究

目的 检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血CD19+CD24hiCD38hi调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs)比例及功能的变化情况,初步探讨Bregs在RA发病中的作用。 方法 采用流式细胞染色方法检测健康对照组及RA患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中CD19+CD24hiCD38hi B细胞和CD4 T细胞比例变化情况;活细胞荧光染料CFSE染色方法检测CD19+CD24hiCD38hi B细胞对Nave CD4 T细胞增殖能力的影响;同时检测CD19+CD24hiCD38hi B细胞分泌IL-10的能力及对CD4 T细胞分泌IFN-γ能力的影响。 结果 与健康对照组相比,RA患者外周血CD19+CD24hiCD38hi B细胞比例显著降低,而CD4 T细胞比例显著升高,且随着病情严重程度升高,差异有统计学意义(P＜0.05)。功能研究显示,RA患者外周血CD19+CD24hiCD38hi B细胞分泌IL-10水平显著降低(P＜0.01),且其抑制Nave CD4 T细胞增殖及分泌IFN-γ的能力均显著降低(P＜0.01)。 结论 RA患者外周血CD19+CD24hiCD38hi B细胞分泌IL-10能力下降,导致免疫抑制功能降低,进而引起CD4 T细胞比例升高和IFN-γ水平升高,影响RA病情进展。      

类风湿关节炎患者CD8+IL-17+T细胞升高及其机制

目的 探讨CD8+IL-17+T细胞在类风湿关节炎(RA)的改变及可能的机制.方法 随机采集39例RA患者和40名健康人的外周血.以流式细胞术测定全部RA患者和27名健康人的外周血CD8+IL-17+T细胞的比例;以ELISA方法测定全部RA患者和健康人的血清白细胞介素(IL)6、IL-23和IL-17水平,并分析这些指标可能的相瓦关系.结果 RA患者CD8+IL-17+T细胞在CD8+T细胞的比例中位数为2.7%,95%可信区间为1.55%-3.74%;而正常人中位数为1.61%,95%可信区间为1.25%-2.61%.RA患者外周血CD8+IL-17+T细胞升高(P<0.05).对CD8+IL-17+T细胞功能相关的IL-17水平测定结果为,RA患者为(429±502)ng/L,而正常人仅为(13±30)ns/L(P<0.01).RA患者血清IL-17水平明显升高.对于CD8+IL-17+T细胞分化相关细胞因子的血清测定结果,IL-23水平在RA患者为(157.83±27.07)ns/L,正常人为(21.97±3.52)ns/L(P<0.01);IL-6水平在RA患者为(32.67±34.50)ns/L,正常人为(1.82±1.51)ns/L(P<0.01);RA患者血清IL-6、IL-23水平明显升高.结论 RA患者CD8+IL-17+T细胞数量增多,作用增强,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因.     

肺癌患者外周血中髓源性抑制细胞的比例及其意义

目的: 研究肺癌患者外周血中髓源性抑制细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSCs)比例的变化,分析其与T淋巴细胞亚群的关系及临床意义。方法: 选取20名健康体检者和30例肺癌患者,收集其外周血;此外,选择其中15例术后30 d的肺癌患者,收集其外周血。用流式细胞术检测外周血中HLA DRˉCD33+CD11+MDSCs比例和T淋巴细胞亚群的比例,并分析两者的相关性。结果： 与健康对照相比,肺癌患者外周血中HLA DR-CD33+CD11+ MDSCs比例明显增高(P<0.05)。肺癌患者CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+/CD8+T细胞比值均明显低于健康对照(P<0.05),但CD8+T细胞比例明显高于健康对照(P<0.05)。肺癌患者术后外周血中MDSCs比例明显低于术前(P<0.05)。淋巴结转移患者外周血中MDSCs比例明显高于无淋巴结转移患者(P<0.05),Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)。肺癌患者外周血中MDSCs比例与CD4+T细胞比例呈负相关(r=-0.524 4,P<0.01),与CD8+T细胞比例呈正相关(r=0.444 9,P<0.05)。 结论： 肺癌患者外周血中MDSCs比例增高,与T淋巴细胞亚群数量相关,可能对机体免疫具有抑制作用。     

泌乳素对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞表面CD40/CD154表达的影响

目的 研究泌乳素(PRL)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞表面CD40、CD154表达的影响,从而探讨其在系统性红斑狼疮发病机制中的作用.方法 检测30例系统性红斑狼疮患者和20例正常健康人血清PRL水平,分离外周血单个核细胞(PBMC).采用流式细胞仪检测CD40、CD154的表达水平.结果 ①高PRL的SLE患者组CD154的表达水平明显高于正常PRL的SLE患者组和正常对照组(P＜0.05);②正常PRL的SLE患者组PBMC经重组泌乳素(rhPRL)刺激后CD154的表达水平较刺激前明显增加(P＜0.05),而正常对照组PBMC经rhPRL刺激后CD154表达增加不明显(P＞0.05);③高PRL的SLE患者组、正常PRL的SLE患者组(加rhPRL)加入溴隐亭(Brc)前后,CD154表达水平无明显差异(P＞0.05).④SLE患者组PBMC表面CD40表达水平与正常对照组差异无显著性(P＞0.05).结论 PRL可通过上调PBMC表面CD154的表达,在SLE的发病中起重要作用;Brc对内源性、外源性PRL均无明显抑制作用.     

类风湿关节炎患者Th17细胞膜上RANKL的表达及意义

目的探讨类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者外周血和关节液中Th17细胞膜上RANKL的表达水平与RA病情活动程度指标CRP、ESR、RF及DAS28评分的关系。方法用流式细胞术及RT-PCR方法检测RA患者外周血和关节液中Th17细胞膜上RANKL的表达水平。结果 RA患者外周血Th17细胞膜上RANKL表达明显高于健康对照组（P〈0.05）,RA患者关节液中Th17细胞膜上RANKL表达高于RA外周血（P〈0.05）,RA患者外周血Th17细胞膜上RANKL表达与DAS28评分呈正相关性（r=0.36,P〈0.05）。RTPCR结果提示RA患者CD4~＋T上RANKL表达较健康对照组升高（P〈0.05）。CD4~＋T细胞RANKL mRNA水平与IL-17mRNA水平呈显著正相关（r=0.63,P〈0.001）。结论 Th17细胞膜上RANKL表达明显升高,且与病情活动程度显著相关,提示Th17细胞可能参与RA骨破坏过程,在RA的破骨免疫致病机制中可能起重要作用。     

可诱导共刺激分子在系统性红斑狼疮病人外周血T细胞亚群的表达及与临床的关系

目的　检测可诱导共刺激分子(inducibleco stimulator,ICOS)及相关免疫分子在SLE病人外周血T细胞亚群的表达,探索其与SLE疾病活动程度、病程及血清抗dsDNA抗体和免疫球蛋白含量间的关系,为进一步研究ICOS在SLE免疫病理中的作用奠定基础。方法　采用流式细胞术检测第二军医大学附属长海医院住院和门诊SLE患者 (n=51)以及健康体检者 (n=30)外周血T细胞亚群表面ICOS及其他免疫分子CD45RO、CD45RA、HLA DR的表达水平,观察ICOS在不同细胞亚群表达水平与SLE活动程度、病程、血清抗dsDNA抗体和血清免疫球蛋白含量间的关系。结果　与正常人相比,活动期及稳定期SLE患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞表达ICOS的水平显著升高,但活动期患者与稳定期患者之间无统计学差异(P≥0 05);同一SLE患者在疾病活动期,外周血CD4+、CD8+、CD45RO+、CD4+CD45RO+和CD8+CD45RO+细胞表面ICOS的表达水平明显高于该患者经过治疗疾病缓解阶段(P<0 05);初发SLE患者CD45RO+细胞表达ICOS水平明显高于复发患者 (P<0 05);血清抗dsDNA抗体( +)及免疫球蛋白(IgG、IgM和IgA中任何一种 )异常升高的患者外周血CD45RO+及CD4+CD45RO+细胞表达ICOS的水平分别明显高于血清抗dsDNA抗体 ( -)和免疫球蛋白含量正常的患者(P<0 05)。结论　SLE患者外周血某些T