转染细胞色素P450表氧化酶基因对TNF-α损伤大鼠内皮依赖性血管舒张反应的保护作用及机制研究

目的研究过度表达表氧化酶基因,增加内源性EETs的产生是否对TNF-α损伤大鼠内皮依赖性血管舒张反应具有保护作用,并初步从对血管VCAM-1表达的影响探讨其机制。方法将携带细胞色素P450表氧化酶基因的真核表达载体pCB6质粒导入大鼠体内,2周后经静脉给予TNF-α,6 h后观察去甲肾上腺素预收缩的主动脉血管环对乙酰胆碱的舒张反应,并以western blot 检测血管中VCAM-1蛋白质的表达情况。结果 TNF-α降低了主动脉环对乙酰胆碱的舒张反应, CYP2C11、CYP2J2和CYPF87V基因转染使得这种被TNF-α降低的血管舒张反应增强。TNF-α增加了血管VCAM-1表达,CYP2C11、CYP2J2和CYPF87V基因转染使得这种被TNF-α诱导的VCAM-1表达减少。结论CYP2C11、CYP2J2和CYPF87V基因能提高了血管对舒血管物质的反应性。本研究提示,通过上调体内表氧化酶基因表达水平提高内源性EETs浓度可减轻炎症介导的血管损伤,这为研究动脉粥样硬化的防治提供了新的思路。     

缝隙连接阻断剂对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞表型转化的影响

目的探讨缝隙连接阻断剂对大鼠血管平滑肌细胞表型转化的影响。方法采用贴块法培养大鼠主动脉平滑肌细胞,细胞免疫荧光染色法检测大鼠主动脉平滑肌细胞缝隙连接蛋白43的表达,荧光漂白后恢复技术检测缝隙连接介导的细胞间通讯。四唑盐比色法测定细胞增殖能力,逆转录聚合酶链反应法检测平滑肌α-肌动蛋白的表达,并观察缝隙连接特异性阻断剂18α-甘草次酸对上述指标的影响。结果大鼠血管平滑肌细胞体外培养3天后可表达缝隙连接蛋白43。荧光物质能够通过缝隙连接在相邻细胞间进行传递,孤立细胞荧光恢复率显著低于相邻细胞(7.30%±0.58%比80.61%±6.57%,P<0.01);而18α-甘草次酸能够抑制缝隙连接介导的细胞间通讯,18α-甘草次酸组荧光恢复率显著低于对照组(61.43%±7.62%比80.61%±6.57%,P<0.05)。18α-甘草次酸可抑制血管平滑肌细胞增殖,并且可促进平滑肌α-肌动蛋白信使核糖核酸的表达。结论缝隙连接阻断剂可促进大鼠血管平滑肌细胞由合成型向收缩型转化,提示缝隙连接在调节血管平滑肌细胞表型转化过程起一定作用。     

去除外膜对血管内膜增殖及反应性的影响

目的:观察去血管外膜后兔颈动脉血管内膜增殖及血管反应性改变的情况。方法:在体去除兔颈动脉外膜,于术后0周及1周时取出动脉作组织学检查,血管张力测试,免疫组织化学染色,用RT-PCR法测定返原型辅酶Ⅱ氧化酶P22亚单位(NADPH Oxidase P22Phox)信使核糖核酸(mRNA)。结果:(1)外膜去除方法对血管内皮及中层平滑肌无明显损伤;(2)外膜去除后血管内膜增生,增生成分为血管平滑肌细胞;(3)与完整外膜血管比较,去外膜血管对去甲肾上腺素(NE)的收缩反应在术后即刻及1周均减弱(P<0.05),对乙酰胆碱(Ach)的舒张反应在术后即刻增强(P<0.05);(4)与完整外膜血管比较,去外膜血管NADPH Oxidase P22Phox在1周时表达增高(P<0.05)。结论:外膜去除可致兔颈动脉内膜增生,同时引起血管舒缩反应性发生改变。     

大鼠耐力训练增加血红素加氧酶1诱导的血管舒张

目的观察大鼠急性耐力训练运动后血管收缩及舒张功能的变化并探讨其机制。方法健康雄性SD大鼠在运动平板上进行跑步适应性训练2周后,进行一周耐力训练。训练方式为平板跑,运动5d/周,耐力训练时平均运动距离2000~2300m/d。同年龄安静饲养动物为对照。运动结束时取降主动脉在体外检测血管对80mmol/L高钾溶液与1μmol/L苯肾上腺素的收缩反应,以及血管对乙酰胆碱的舒张反应。阻断一氧化氮合酶(NOS)及血红素加氧酶1(HO-1)后再次观察血管对乙酰胆碱的舒张反应。部分主动脉环进行免疫组织化学检测血管内皮HO-1。同年龄静止饲养大鼠作为对照。结果大鼠经1周耐力运动训练后,主动脉对高钾溶液的收缩反应未见明显变化,对苯肾上腺素引起的收缩反应显著减弱,对乙酰胆碱的舒张反应显著增强(P<0.01)。NOS阻断剂预孵后,正常不运动对照大鼠血管内皮依赖性舒张被阻断达(97.7±3.3)%,经过耐力训练的大鼠血管被阻断(78.8±2.1)%(与对照组比较,P<0.01),耐力训练组尚存的内皮依赖性舒张可被HO-1阻断剂proto-porphyrin IX Zinc(Ⅱ)进一步阻断。免疫组化结果显示主动脉血管HO-1显著增加。结论急性耐力运动训练后血管内皮依赖性舒张功能增强,该作用可能与运动诱导的血管内皮中HO-1增加有关。     

大鼠耐力训练增加血红素加氧酶1诱导的血管舒张

目的 观察大鼠急性耐力训练运动后血管收缩及舒张功能的变化并探讨其机制.方法 健康雄性SD大鼠在运动平板上进行跑步适应性训练2周后,进行一周耐力训练.训练方式为平板跑,运动5 d/周,耐力训练时平均运动距离2000～2300 m/d.同年龄安静饲养动物为对照.运动结束时取降主动脉在体外检测血管对80 mmol/L高钾溶液与1 μmol/L苯肾上腺素的收缩反应,以及血管对乙酰胆碱的舒张反应.阻断一氧化氮合酶(NOS)及血红素加氧酶1(HO-1)后再次观察血管对乙酰胆碱的舒张反应.部分主动脉环进行免疫组织化学检测血管内皮HO-1.同年龄静止饲养大鼠作为对照.结果 大鼠经1周耐力运动训练后,主动脉对高钾溶液的收缩反应未见明显变化,对苯肾上腺素引起的收缩反应显著减弱,对乙酰胆碱的舒张反应显著增强(P＜0.01).NOS阻断剂预孵后,正常不运动对照大鼠血管内皮依赖性舒张被阻断达(97.7±3.3)%,经过耐力训练的大鼠血管被阻断(78.8±2.1)%(与对照组比较,P＜0.01),耐力训练组尚存的内皮依赖性舒张可被HO-1阻断剂protoporphyrin Ⅸ Zinc(Ⅱ)进一步阻断.免疫组化结果显示主动脉血管HO-1显著增加.结论 急性耐力运动训练后血管内皮依赖性舒张功能增强,该作用可能与运动诱导的血管内皮中HO-1增加有关.     

兔髂动脉再狭窄模型中连接蛋白的表达

目的:通过建立兔髂动脉再狭窄模型,观察髂动脉病理改变及连接蛋白(Cx)的表达情况。方法:20只新西兰大白兔随机分为对照组与再狭窄组,采用高脂饲料喂养联合兔髂动脉二次球囊损伤建立再狭窄模型。所有髂动脉标本均行HE染色及免疫组织化学检测,采用RT-PCR法测定血管组织匀浆Cx43及Cx40mRNA表达。结果:与对照组相比,再狭窄组髂动脉管腔狭窄率增大[(23.00±3.53)%︰(89.32±6.93)%,P0.01],内膜明显增厚[(266.12±70.27)μm︰(2.85±0.19)μm,P0.01],α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)染色证实新生内膜主要细胞成分为血管平滑肌细胞(VSMCs)。免疫组织化学结果显示,两组均有Cx43表达,再狭窄组新生内膜处有大量Cx43表达,较正常对照组明显增强。两组血管ECs及中膜均有Cx40表达,再狭窄组Cx40表达仅比对照组略有增强。RT-PCR结果显示,与正常对照组比较,再狭窄组Cx43mRNA表达增加(P0.01);但两组Cx40mRNA表达量差异无统计学意义。结论:新生内膜增殖是再狭窄的病理基础,VSMCs是主要的增殖细胞成分,并且这一过程伴随有Cx43的表达增加,而Cx40表达无变化。     

内皮损伤后大鼠胸主动脉血管反应性的动态观察

本研究在大鼠胸主动脉内皮损伤内膜增生的模型上观察了内皮损伤后血管反应性的动态变化。实验大鼠随机分为对照组、术后３天组、术后１０天组、术后２１天组４组。组织学检查提示内皮损伤后的大鼠胸主动脉术后２１天内皮尚不能完全修复，且有新生内膜形成。血管条张力测定试验表明，３天组大鼠受损血管对去甲肾上腺素（ＮＥ）的最大收缩反应下降（与对照组比，Ｐ＜０．０００１），对阶梯浓度ＮＥ的反应曲线下移，而１０天组已恢复正常；３天组大鼠受损血管对乙酰胆碱（Ａｃｈ）的最大舒张反应亦显著受损（与对照组比，Ｐ＜０．０００１），对阶梯浓度Ａｃｈ的反应曲线下移，且术后２１天仍不能恢复正常；受损血管对硝普钠介导的非内皮依赖性舒张反应不受影响。提示血管内皮受损可致血管反应性异常，且长时间不能恢复。     

海带多糖对心理应激大鼠血管内皮依赖性舒缩功能的影响

目的 研究海带多糖对心理应激大鼠血管内皮依赖性舒张和收缩功能的影响.方法 采用空瓶刺激法建立心理应激大鼠模型,大鼠随机分为对照组、模型组、海带多糖低剂量组、海带多糖高剂量组及低分子肝素组.经旷场试验后,取胸主动脉置于恒温灌流系统,分别记录血管环在累积浓度乙酰胆碱、去甲肾上腺素诱导后的血管舒缩反应,以及一氧化氮合酶抑制剂(左旋硝基精氨酸甲酯)孵育后累积浓度硝酸甘油的血管舒张反应情况.结果 模型组、海带多糖低剂量组、海带多糖高剂量组和低分子肝素组旷场行为学评分显著高于对照组(P＜0.05).与对照组比较,模型组对乙酰胆碱诱导的血管舒张反应明显降低(P＜0.05),对去甲肾上腺素诱导的血管收缩反应明显增强(P＜0.05);与模型组比较,海带多糖高剂量组对乙酰胆碱诱导的血管舒张反应明显增强(P＜0.05),对去甲肾上腺素引起的血管收缩反应明显减弱(P＜0.05),海带多糖低剂量组和低分子肝素组血管舒缩反应无显著性变化(P＞0.05).左旋硝基精氨酸甲酯孵育后,与对照组比较,模型组、海带多糖低剂量组、海带多糖高剂量组和低分子肝素组对硝酸甘油引起的舒张反应均显著降低(P＜0.05),海带多糖高剂量组、海带多糖低剂量组和低分子肝素组加入左旋硝基精氨酸甲酯孵育后硝酸甘油诱导的血管最大舒张反应显著低于乙酰胆碱诱导(未加入左旋硝基精氨酸甲酯孵育)的血管最大舒张反应.结论 海带多糖对心理应激大鼠血管内皮依赖性舒缩功能具有保护作用.因此,海带多糖可以拮抗内源性肾上腺素增多导致的内皮损伤.     

茶色素胶囊对家兔离体血管平滑肌张力的影响

目的观察茶色素胶囊对离体家兔胸主动脉环舒缩的影响。方法采用测定离体血管环张力的实验方法,观察茶色素胶囊对离体家兔胸主动脉环静息张力的影响以及对去甲肾上腺素或氯化钾（KCl）引起的胸主动脉环收缩的影响。结果不同实验浓度的茶色素对家兔离体胸主动脉环的静息张力无明显作用,与对照组比较无统计学意义（P〉0．05）;2mg／mL。4mg／mL浓度的茶色素对由去甲肾上腺素和KCl引起的胸主动脉环的收缩有一定的抑制作用,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）,且高浓度组比低浓度组效果明显。结论茶色素可对抗去甲肾上腺素和KCl等缩血管物质引起的血管收缩,降低血管张力,使血管舒张。     

硝酸甘油耐受性对一氧化氮介导的血管舒张反应的影响

目的：观察硝酸甘油（ＮＴＧ）耐受性对一氧化氮介导的血管舒张反应的影响。方法：实验白兔分为硝酸甘油（ＮＴＧ）耐受组（１０ 只）和正常对照组（ＮＣ）组（１０ 只）。在ＮＴＧ组兔的胸前置一ＮＴＧ贴剂,持续７２ ｈ。然后将兔处死,开胸取出胸主动脉,剪一主动脉环。此环连接张力换能器。用去甲肾上腺素预收缩后,依序观察ＮＴＧ、乙酰胆碱（ＡＣｈ）和硝普钠（ＳＮＰ）的舒张血管的反应性,并与ＮＣ组的舒张血管反应性对比。结果：ＮＴＧ耐受组兔离体动脉环对ＮＴＧ、ＡＣｈ 和ＳＮＰ的最大舒张程度均显著低于ＮＣ组（均Ｐ＜ ０．０１）。结论：ＮＴＧ耐受性可抑制一氧化氮介导的血管舒张反应     

Effect of changes in vascular tone on the haemodynamic characteristics of the portal vascular bed of the isolated perfused rat liver

The effect of altered vascular tone on the haemodynamic characteristics of the intrahepatic portal vascular bed was studied in the isolated perfused rat liver preparation. The relationship between portal venous inflow (Q) and portal perfusion pressure (P) was determined in the presence of a maximally effective concentration of a vasoconstrictor agent (noradrenaline, NA_max, 3 × 10^?5mol/L), an intermediate concentration (NA_med, 1 × 10^?6mol/L) or a vasodilator agent (papaverine, PAP, 6 × 10^?4mol/L). At flow rates greater than 20 mL/min, the pressure-flow relationship could be regarded as linear (P < 0.001), with mean values for the extrapolated intercept with the pressure axis (P_o) of 6.8 ± 0.9 mmHg for NA_max, 4.5 ± 0.5 mmHg for NA_med, and 1.65 ± 0.05 mmHg for PAP-treated preparations. Over the full flow range (0–70 mL/min), in both NA- and PAP-treated preparations, portal vascular conductance (G = Q/P) was related directly to perfusion pressure. Thus, G = C.P, where C is a constant (mean values for NA_max, NA_med, and PAP-treated preparations were 0.0090 ± 0.0020, 0.023 ± 0.005, and 0.26 ± 0.02 mL/min per g per mmHg², respectively). It is concluded that both C and P_o may be useful indices of tone in the isolated perfused rat liver, and that analysis of hepatic portal haemodynamics in this manner may have considerable practical value in studies of the action of vasoactive agents.     

血管成形术后血管外膜改变与血管重塑的相关性研究

目的:探讨大鼠胸主动脉血管成形术后血管外膜激活与血管重塑的相关性。方法:用6F人冠状动脉快速交换球囊损伤大鼠胸主动脉,术后2周和6周取材,行血管形态学定量分析,并行增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色,观察PCNA在血管外膜上的表达。结果:血管成形术组血管外膜细胞数量、血管外膜细胞增殖指数,外膜面积、厚度均较对照组显著增大(P<0.05),血管外弹力板围绕面积、内弹力板围绕面积和管腔面积较对照组显著减小(P<0.05),血管呈收缩性重塑。结论:血管成形术后,血管外膜被牵拉激活,导致外膜细胞分裂、增殖,以及血管收缩性重塑,参与再狭窄的发生。     

血管平滑肌细胞表型的成骨转换与血管钙化

血管钙化是血管壁中钙盐沉积的过程,导致血管硬化和失去弹性。它通常发生在中老年人,尤其是患有动脉粥样硬化、高血压、糖尿病和慢性肾脏疾病等疾病患者。血管钙化是一个主动的过程,其中平滑肌细胞的成骨转换是重要事件之一。这些细胞在钙化过程中释放钙离子,导致钙盐的沉积,形成钙化斑块。血管钙化受多种因素调节,包括高磷、高钙水平及氧化应激、机械应力等。此外,中医药研究在减轻血管钙化方面显示出潜力,例如灵芝孢子粉和其衍生物,三七、黄芩素、根皮素、雷公藤甲素等。这些研究为进一步理解和干预血管钙化提供了重要的证据,并揭示了一些潜在的抑制因子,可以作为未来治疗血管钙化的研究方向。     

组织工程血管移植在血液透析通路中的应用

目的:探讨组织工程血管移植应用于血液透析(HD)通路的可行性。方法:广泛查阅近期有关组织工程血管应用于HD通路的文献,对其动物模型及临床研究进行总结评价。结果:分层构建法可获得具有足够机械强度的组织工程血管。此后出现的简化分层构建组织工程血管在一系列动物模型及临床实验中被证明可用于动静脉通路的建立。近期一种生物反应器构建组织工程血管在狒狒模型上进行动静脉搭桥试验也获得成功,有望成为较理想的动静脉内瘘移植血管。结论:组织工程血管移植应用于HD通路是可行的,值得进一步研究。     

microRNA调节血管钙化的研究进展

血管钙化与心血管疾病死亡风险的增加有着密切联系,然而在患有冠状动脉疾病(CAD)的患者中血管钙化却非常普遍。血管钙化的发病机制类似于骨发育和软骨形成的过程。血管平滑肌细胞转分化为成骨样细胞、钙磷调节失衡、破骨细胞活性和矿物质吸收能力的降低,在促进血管钙化过程中有着重要的作用。目前发现微小RNA(microRNA)通过引导血管平滑肌细胞进行复杂遗传基因重编码以及与血管钙化相关的其他细胞功能反应参与血管钙化的过程。文章将详细介绍关于microRNA介导血管钙化的重要调节作用。     

应用超声血管反应性充血法评价血管内皮功能

目的探讨应用超声血管反应性充血法评估血管内皮舒张功能的可行性和可靠性。方法 12名中青年健康体检者(健康对照组)和10例中青年心肌梗死患者(心肌梗死组)接受肱动脉超声检查,比较两组肱动脉反应性充血前后血管内径及血流量变化百分率。结果肱动脉基础内径及基础血流量两组间比较差异无统计学意义。反应性充血后血管内径变化百分率健康对照组显著高于心肌梗死组(13.6%±6.6%比7.2%±2.3%,P<0.05),反应性充血后血流量变化百分率健康对照组显著高于心肌梗死组(398.6%±150.4%比283.8%±146.3%,P<0.05)。结论肱动脉超声检查间接评价血管内皮功能,测定准确、操作简便、无创性、可重复检测且可提供动脉壁的解剖学图像。     

血管钙化的表观遗传调控

血管钙化是慢性肾病、糖尿病、高血压和动脉粥样硬化等疾病共同存在的血管病变,其是上述疾病患者心血管事件显著上升的重要危险因素。目前尚无有效药物可以预防或者逆转血管钙化。既往研究表明,血管钙化是一个主动的、可调控的、细胞介导的病理过程,高度类似于骨发生和骨代谢。血管平滑肌细胞向成骨样细胞转分化是血管钙化发生的关键机制。目前的研究表明,多种表观遗传调控途径参与血管钙化的病理进程。本文主要从DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA这三个层面综述血管钙化的表观遗传调控机制。靶向表观遗传调控因子有望为防治血管钙化提供新的策略。     

Fracture with the newer bioresorbable vascular scaffolds

Bioresorbable vascular scaffolds (BVS) are being increasingly used in complex, real‐world lesions. The possibility of strut fractures is a rare entity with the use of drug eluting stents (DES), but has not yet been adequately described for the BVS technology. In this report, we present a case of scaffold fracture of DEsolve BVS (Elixir Medical Corporation, USA) that was diagnosed both angiographically and by optical coherence tomography(OCT). Scaffold fracture with the newer BVS is a new Achilles' heel in the BVS technology. This gap in knowledge about the etiology such as over‐expansion and potential predictors of strut fracture need to be deeply investigated before a widespread use of such technologies is adopted. © 2017 Wiley Periodicals, Inc.     

血管、淋巴管内皮生长因子在胰腺癌中的表达

研究血管内皮生长因子(VEGF)在胰腺癌中的表达及意义,采用:Northern blot分析法检测正常胰腺组织和胰腺癌组织中VEGF-A、c mRNA的表达;采用免疫组织化学染色法检测胰腺癌标本中VEGF-A、C蛋白的表达。结果发现胰腺癌组织中VEGF-A和VEGF-C基因的表达分别是正常胰腺组织中的3.0和3.6倍;免疫组织化学染色法显示胰腺癌组织中VEGF-A和VEGF-C的阳性率分别为50％和80％;胰腺癌细胞VEGF-A的表达与肿瘤大小呈正相关,VEGF-C的表达与淋巴结转移呈正相关,均有统计学意义(P<0.05),而VEGF-A与VEGF-C表达无关联。胰腺癌非同步联合表达血管和淋巴管内皮生长因子,前者与肿瘤大小、局部范围相关联,后者与淋巴结转移相关联。     

17β-雌二醇抑制血管球囊损伤后血管外膜增殖

目的观察17β-雌二醇对血管球囊损伤后外膜增殖的影响。方法去卵巢颈动脉球囊损伤兔模型随机分为17β-雌二醇组(20μg.kg-1.d-1)和溶剂组(棉花油),每组25只,并分别在球囊损伤术后1、3、7、14、28天处死兔,处死前18 h和12 h给予5溴-2脱氧尿苷标记增殖的细胞,应用免疫组织化学的方法检测增殖的细胞,计算机图像分析系统测定外膜厚度并计数阳性细胞。结果溶剂组血管球囊损伤后3~7天,血管外膜明显增殖(P<0.05);与溶剂组比较,17β-雌二醇组外膜厚度明显变薄(15%,P<0.05),外膜增殖细胞数明显减少(45%,P<0.05)。结论17β-雌二醇可明显抑制兔颈动脉球囊损伤后外膜的增殖。