胆固醇逆向转运与动脉粥样硬化的转基因动物研究进展

肝外组织获得的胆固醇通过胆固醇逆向转运(reverse cholesterol transport,RCT)回到肝脏排出体内。RCT起始于肝外组织细胞内胆固醇的流出,以胆固醇从肝脏分泌和粪便中排出体外结束。数个关键蛋白如三磷酸腺苷结合盒转运体A1/G1(adenotriphos binding cassette transporter A1/G1,ABCA1/G1)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecithin:cholesterolacyltransfer,LCAT)、胆固醇酯转移蛋白(cholesterol ester transfer protein,CETP)和B类Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor B1,SR-B1)参与了这个过程。本文综述RCT在心血管疾病中作用的转基因动物实验研究。这些动物和实验室资料对临床现象的解释和临床调查的未来方向可能有用。     

胆固醇逆向转运关键蛋白介导药物和小分子调控脂代谢的机制研究

胆固醇逆向转运(RCT)异常导致脂代谢紊乱是动脉粥样硬化发病重要环节,探讨介导RCT的关键蛋白在脂代谢中的作用及调控机制对阐明动脉粥样硬化发病的分子机制具有重要意义。本期专题收集的论文探讨了利拉鲁肽、苦瓜素以及生长分化因子11对细胞胆固醇流出及介导RCT中关键蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1和B类Ⅰ型清道夫受体表达的影响,分别从不同角度阐释RCT关键蛋白参与药物或小分子物质调控胆固醇流出的分子机制。     

ABCA1表达的microRNA转录后水平调控

胆固醇逆转运(RCT)是体内清除胆固醇的重要机制,对维持体内胆固醇稳态,预防动脉粥样硬化有着重要意义。ATP结合盒转运体A1(ABCA1)是胆固醇逆转运过程中的关键因子,ABCA1的表达受到转录水平和转录后水平的多种因素调控,其中microRNA介导ABCA1表达的转录后水平调控备受重视。近年来的研究发现,多种microRNA能直接以ABCA1为靶基因调控ABCA1的表达,同时也发现一些microRNA通过作用于调控ABCA1基因的转录因子间接发挥效应,如肝X受体α(LXRα)、过氧化体增殖物激活型受体γ(PPARγ)、视黄醇类核内受体α(RXRα)等间接调控ABCA1的表达,从而达到影响胆固醇流出的目的。这些microRNA包括miR-33a/b、miR-19b、miR-27a/b、miR-302、miR-758及miR-106b等。本文主要综述已知microRNA对ABCA1表达的影响。     

microRNA对ABCA1调控的研究进展

microRNA(miRNA)对许多生物学过程具有微调作用,ATP结合盒转运体A1(ABCA1)是调节高密度脂蛋白(HDL)代谢和功能的关键蛋白。目前已发现多种miRNA可抑制ABCA1表达,进而抑制胆固醇流出,降低血清HDL水平。而沉默miRNA或抑制其表达则无法抑制胆固醇流出,血清HDL水平无改变。目前对miRNA调控ABCA1表达进行了大量研究,有望带来治疗技术的革新,在调节脂代谢和抗动脉粥样硬化领域具有广阔前景。     

胆固醇逆向转运与动脉粥样硬化的转基因动物研究进展

肝外组织获得的胆固醇通过胆固醇逆向转运（reverse cholesterol transport,RCT）回到肝脏排出体内。RCT起始于肝外组织细胞内胆固醇的流出,以胆固醇从肝脏分泌和粪便中排出体外结束。数个关键蛋白如三磷酸腺苷结合盒转运体A1/G1（adenotriphos binding cassette transporter A1/G1,ABCA1/G1）、卵磷脂胆固醇酰基转移酶（lecithin：cholesterolacyltransfer,LCAT）、胆固醇酯转移蛋白（cholesterol ester transfer protein,CETP）和B类Ⅰ型清道夫受体（scavenger receptor B1,SR-B1）参与了这个过程。本文综述RCT在心血管疾病中作用的转基因动物实验研究。这些动物和实验室资料对临床现象的解释和临床调查的未来方向可能有用。     

血管紧张素（1-7）和血管紧张素Ⅱ对THP-1源性泡沫细胞胆固醇外流的影响

目的 观察血管紧张素（1-7）［Ang（1-7）］及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对THP-1源性泡沫细胞B族Ⅰ型清道夫受体（SR-BⅠ）、ATP结合盒转运体A1（ABCA1）表达及胆固醇外流的影响。方法 将THP-1单核细胞加入100 nmol/L佛波酯（PMA） 48 h诱导分化为THP-1源性巨噬细胞,加入氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）建立泡沫细胞模型。随机分为五组：空白对照组、AngⅡ组、Ang（1-7）组、Ang（1-7）+AngⅡ组及AngⅡ+Ang（1-7）+A-779组［A-779为Ang（1-7）受体特异性阻滞剂］。分别运用RT-PCR及Western blot方法检测SR-BⅠmRNA、ABCA1mRNA及其蛋白的表达,用液体闪烁计数仪检测胆固醇流出率的变化。结果 与空白对照组相比,加用AngⅡ组SR-BⅠmRNA、ABCA1mRNA及其蛋白的表达均明显减弱且胆固醇外流减少（P<0.05）;与AngⅡ组比较,加用Ang（1-7）促进SR-BⅠmRNA、ABCA1mRNA及其蛋白的表达,胆固醇外流增加（P<0.05）;与AngⅡ+Ang（1-7）组比较,AngⅡ+Ang（1-7）+A-779组SR-BⅠmRNA、ABCA1mRNA及其蛋白的表达减弱、胆固醇外流减少（P<0.05）,但与AngⅡ组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 AngⅡ抑制THP-1源性泡沫细胞SR-BⅠ、ABCA1的表达并减少胆固醇外流,而Ang（1-7） 通过其特异性受体MAS受体可减弱AngⅡ的作用,促进胆固醇外流,从而对动脉粥样硬化的进展起到抑制作用。     

热休克蛋白65对Jurkat细胞增殖和胆固醇流出的影响

目的探讨动脉粥样硬化中的重要炎性物质—热休克蛋白65(HSP65)诱导活化的Jurkat细胞发生增殖、免疫活化反应时胆固醇流出率的改变,并揭示其可能的分子机制。方法 Jurkat细胞经刀豆蛋白A(Con A)活化48 h后,与不同浓度HSP65孵育24 h,CCK-8检测细胞增殖能力,ELISA测定上清液中炎症因子干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素10(IL-10)含量,液闪计数仪检测Jurkat细胞胆固醇流出率;RT-PCR检测胆固醇相关转运蛋白,包括ATP结合盒转运体A1(ABCA1)和G1(ABCG1)、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)、过氧化体增殖物激活型受体γ(PPARγ)、肝X受体α(LXRα)的表达。结果 5 mg/L Con A与Jurkat细胞孵育48 h后可显著促进细胞增殖,HSP65呈剂量依赖性促进Con A诱导的Jurkat细胞增殖(P0.001)。以0.5、1 mg/L HSP65分别处理Jurkat细胞后,Jurkat细胞胆固醇流出率和IL-10含量均呈浓度依赖性下降,IFN-γ含量则逐渐升高(P0.01),细胞ABCA1、ABCG1、SR-BⅠ、PPARγ、LXRα的mRNA表达水平呈剂量依赖性降低(P0.01)。结论在0.5~1 mg/L浓度范围内,HSP65不仅可促进T细胞增殖、加剧细胞免疫反应,还可引起胆固醇流出率降低,其机制可能与下调胆固醇转运相关蛋白ABCA1、ABCG1、SR-BⅠ、PPARγ、LXRα的基因表达相关。     

非编码RNA在动脉粥样硬化中的作用

动脉粥样硬化是心血管疾病发病和死亡的主要原因之一,可导致心肌梗死或脑卒中等事件[1-5]。研究显示,动脉粥样硬化斑块发生发展过程中存在多种细胞参与的一系列关键分子调控通路,如低密度脂蛋白受体(LDLR)参与的胆固醇摄入通路及ATP结合组件蛋白A1(ABCA1)参与的胆固醇逆转运通路等[5]。近期发现,多种非编码RNA,如微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)和环状RNA(circular RNA,circRNA)在动脉粥样硬化的病理生理过程中起到重要的调节作用,可影响细胞的活化和增殖、脂质代谢和炎性因子分泌等。     

ATP结合盒转运蛋白A1与动脉粥样硬化

对Tangier病病因的研究,发现ATP结合盒转运蛋白A1(ATP binding cassette transport protein A1,ABCA1)在胆固醇逆向转运(reverse cholesterol transport,RCT)中起重要作用。ABCA1主要通过核受体PPARs途径发挥作用。ABCA1基因变异影响其功能。     

烟酸对高脂血症兔动脉粥样硬化斑块与胆固醇逆转运相关基因表达的影响

目的探讨烟酸对高脂血症兔动脉粥样硬化斑块和TC逆转运相关基因表达的影响。方法 24只兔分为对照组、高脂组和烟酸组,每组8只。实验前后检测血脂水平;14周末行主动脉病理学检测;采用实时荧光定量PCR检测ATP结合盒转运体A1(ABCA1)、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)和小凹蛋白1(Cav-1)mRNA表达。体外观察不同浓度烟酸(0⁵.0mmol/L)对Filipin阻断后ABCA1、SR-BⅠ和Cav-1表达的影响。结果与对照组比较,高脂组8周时TC、TG和LDL-C、主动脉内膜厚度和斑块面积明显增加,ABCA1、SR-BⅠ和Cav-1mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。与高脂组比较,烟酸组14周时TC、TG和LDL-C明显降低,HDL-C、ABCA1和Cav-1mRNA表达明显升高,主动脉内膜厚度和斑块面积明显缩小(P<0.01)。1.0mmol/L烟酸可明显改善Cav-1与ABCA1mRNA表达(P<0.05)。结论烟酸可明显改善血脂谱及稳定动脉粥样硬化斑块,上调ABCA1与Cav-1mRNA表达水平,但对SR-BⅠ表达无明显影响。