卵巢癌特异性结合肽OSTP的鉴定

目的验证卵巢癌特异性结合肽(OSTP)对卵巢癌A2780细胞的特异性结合作用。方法合成OSTP并标记荧光素5-FAM。将培养的卵巢癌A2780细胞及对照组胃癌SGC7901细胞、骨肉瘤MG63细胞分别加5-FAM-OSTP孵育,荧光显微镜下观察拍照。构建卵巢癌A2780细胞荷瘤小鼠模型,尾静脉注入5-FAM-OSTP,循环1 h后进行左心室灌注,取肿瘤组织及各脏器组织,行冰冻切片,荧光显微镜下观察拍照。结果成功合成和标记5-FAM-OSTP。荧光显微镜观察显示：5-FAM-OSTP孵育后的卵巢癌A2780细胞产生明亮的黄绿色荧光,而对照组SGC7901、MG63细胞不产生荧光。裸鼠体内实验结果显示：肿瘤组织可见强荧光信号,平均荧光强度为17.656±1.980;肝组织平均荧光强度4.277±0.291;肾组织平均荧光强度4.422±0.767;其他脏器均无可见荧光信号。肿瘤组织与肝、肾组织的荧光强度间差异有显著性（P<0.05）。结论通过体内外实验证实了5-FAM-OSTP对卵巢癌A2780细胞具有特异结合作用,有望成为卵巢癌靶向化疗药物的导向肽。     

pre-hsa-miR-98对卵巢癌细胞增殖活性抑制的影响

目的卵巢癌的死亡率占各类妇科恶性肿瘤的首位,对女性患者的生命造成严重威胁。miR-98可抑制多种癌细胞增殖,但未见关于其应用于卵巢癌治疗的报道。文中为探讨卵巢癌治疗的新方法,用pre-hsa-miR-98转染卵巢癌SKOV3、HO8910和A2780细胞,观察转染率并研究转染后对卵巢癌细胞的增殖抑制作用。方法利用构建的pre-hsa-miR-98质粒HmiR和连接随机序列的质粒CmiR转染人卵巢癌细胞SKOV3、HO8910和A2780细胞,荧光显微镜与流式细胞仪计数计算转染率,MTT法检测细胞增殖抑制率与细胞计数绘制生长曲线研究转染对卵巢癌细胞的增殖抑制作用。结果转染HmiR后,荧光显微镜观察和流式细胞术计数结果显示SKOV3、HO8910、A2780细胞的转染率均在60%左右。转染HmiR后,MTT法检测SKOV3、HO8910、A2780细胞的增殖抑制率随转染时间延长而增加,72 h分别达到49.54%、53.25%、46.09%。生长曲线显示在72 h及96 h抑制率达到高峰,随后随时间延长抑制率不再显著升高。结论 3种卵巢癌细胞的转染率达到实验要求,HmiR转染后可抑制卵巢癌细胞增殖,其抑制作用随转...     

携带适配体AS1411的液态内核纳米超声造影剂的制备和评估

目的：探讨制备核酸适配体AS411靶向液态内核的纳米超声造影剂的方法,评价该靶向纳米超声造影剂 体外显影能力和寻靶能力。方法：将自合成的膜材料聚乳酸-羟基乙酸共聚物-聚乙二醇(PLGA-PEG-COOH)和全氟辛 溴烷(perfluoroctylbromide,PFOB),采用乳化溶剂挥发法,制备液态内核的纳米颗粒(nanoparticles,NP)。然后用1- 乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)催化法将AS1411连接到NP表面,制成靶向液态内 核的纳米颗粒(NP-AS1411)。用透射电镜检查NP-AS1411的形态。比较NP-AS1411和NP的大小、表面电荷、包封率、 生物相容性、体外显影能力和稳定性。用凝胶电泳检查AS1411是否连于NP表面。用荧光显微镜和流式细胞仪检测 NP-AS1411的靶向能力。结果：NP-AS1411在电镜下呈壳-核结构,直径为(245.4±16.5) nm,大于NP的直径(P=0.05)。 NP-AS1411和NP在表面电荷和包封率上差异无统计学意义(P>0.05)。高浓度(25.0 mg/mL)NP-AS1411与MCF-7细胞孵育 24 h后,细胞的活力(89%)和对照组相比明显下降(P=0.04)。NP-AS1411体外相对灰阶值为86.1±6.7,明显高于脱气去 离子水(P<0.05),与和NP的体外相对灰阶值相当(P>0.05)。常温保存24 h后,NP-AS1411的相对灰阶值为80.1±9.2,与 24 h前相比差异无统计学意义(P>0.05)。NP-AS1411的大小在放置24 h后也无明显变化(P>0.05)。凝胶电泳证实当NP和 AS1411的摩尔比为40:1时,连接到NP的AS1411最多。MCF-7细胞分别与载有荧光香豆素6的NP-AS1411,NP孵育后, NP-AS1411在荧光显微镜下能够产生更强的绿色荧光。流式细胞仪证实NP和NP-AS1411与MCF-7细胞均有结合,但是 NP-AS1411和MCF-7细胞结合后产生的荧光更强烈。结论：采用乳化溶剂挥发法和EDC/NHS催化法可以成功制备适配 体靶向液态内核纳米超声造影剂。该靶向液态内核纳米超声造影剂的体外显影能力好,也同时具有良好的稳定性和 特异性。     

miR-98前体转染卵巢癌细胞的效率检测及增殖抑制检测

目的 pre-hsa-miR-98转染卵巢癌SKOV3、HO8910和A2780细胞,观察转染率并研究转染后对卵巢癌细胞的增殖抑制作用,为卵巢癌新治疗方法研究提供实验依据。方法利用构建的pre-hsa-miR-98质粒HmiR和连接随机序列的质粒CmiR转染人卵巢癌细胞SKOV3、HO8910和A2780细胞,荧光显微镜观察和流式细胞仪计数计算转染率,MTT法检测转染对卵巢癌细胞的增殖抑制作用。结果 HmiR转染后24 h,荧光显微镜下观察,SKOV3、HO8910、A2780细胞的转染率分别为61.50%、68.59%、63.40%;流式细胞术计数,转染HmiR后SKOV3、HO8910、A2780细胞的转染率分别为57.93%、66.73%、58.59%。转染HmiR后,MTT法检测SKOV3、HO8910、A2780细胞的增殖抑制率随转染时间延长而增加,72 h达到49.54%、53.25%、46.09%。结论三种卵巢癌细胞的转染率均接近或超过60%,HmiR转染后可抑制卵巢癌细胞增殖,其抑制作用随转染时间延长而增强。     

LHRHa靶向紫杉醇脂质体的制备及体外抗肿瘤作用

目的：制备促黄体激素释放激素类似物（Luteinizing hormone releasing hormone analogues,LHRHa)靶向紫杉醇脂质体（Paclitaxel liposomes,PTX-Lipo）,研究其在体外增强紫杉醇（Paclitaxel,PTX）对卵巢癌A2780/DDP细胞的抑制作用。方法：采用薄膜超声法制备PTX-Lipo与LHRHa靶向紫杉醇脂质体（LHRHa-Paclitaxel liposomes,LHRHa-PTX-Lipo）,用透射电镜考察脂质体形态;高效液相色谱法测定2种PTX-Lipo的包封率;激光共聚焦法通过卵巢癌A2780/DDP细胞对4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑荧光素的摄取检测来反映细胞对NBD-Lipo与NBD-LHRHa-Lipo的摄取情况;MTT法及细胞克隆形成实验检测LHRHa-PTX-Lipo体外对卵巢癌细胞的生长抑制情况。-结果：制备LHRHa-PTX-Lipo的平均粒径123.4 nm,包封率在90%以上;A2780/DDP细胞对NBD-LHRHa-Lipo组的荧光摄取明显高于NBD-Lipo组;LHRHa-PTX-Lipo对A2780/DDP细胞的生长及克隆形成抑制明显高于PTX组及PTX-Lipo组（P＜0.05）。结论：采用薄膜超声法制备的LHRHa-PTX-Lipo可使药物在靶部位聚集,增强药物对卵巢癌细胞的抑制作用。     

基于HMSN载药系统的NVP联合DOX靶向治疗卵巢癌

目的：构建中空介孔二氧化硅纳米（hollow mesoporous silica nanoparticles,HMSN）复合载药系统靶向作用于卵巢癌细胞,评估此复合药物运载系统的作用,探究胰岛素样生长因子1受体（insulin-like growth factor receptor , IGF-1R）特异性抑制剂NVP通过HMSN运载系统联合阿霉素（doxorubicin,DOX）对卵巢癌的治疗效果。方法：在HMSN表面修饰羧基,通过机械搅拌和静电吸引作用包载DOX和荧光NVP构建HMSN复合载药系统;采用透射电镜、红外光谱仪、Zeta电位等方法表征此载药系统;检测HMSN载药系统中DOX和荧光NVP在不同pH值环境中的释放率;通过荧光共聚焦显微镜观察药物运载系统不同时间点在细胞中的聚集情况;将实验分为 HMSN-DOX-NVP组、HMSN-DOX组和游离对照组,分别作用于卵巢癌SKOV-3细胞株,MTT法检测3组细胞的抑制率,并通过流式细胞仪检测3组细胞的凋亡率。结果：HMSN在修饰羧基之前所带电荷为-22.3 mV,在其表面修饰羧基后,HMSN所带负电荷增多至-44.9 mV;HMSN负载药物后,其形态和粒径均未发生改变;HMSN复合载药系统所处环境的pH值逐渐降低时,DOX和荧光NVP的释放率逐渐升高;HMSN-DOX-NVP及HMSN-DOX可在细胞中聚集,并可随着作用时间的延长逐渐渗透进入胞核释放药物。HMSN-DOX-NVP组的细胞凋亡率和抑制率均高于HMSN-DOX组和游离对照组（P＜0.05）。结论：HMSN复合载药系统通过非特异性的内吞途径可以良好聚集在胞中释放药物并可保证药物活性,NVP联合DOX可提高DOX对卵巢癌细胞的杀伤率并实现针对IGF-1R的靶向抑制。     

LHRHa靶向紫杉醇脂质体的制备及体外抗肿瘤作用

目的:制备促黄体激素释放激素类似物(Luteinizing hormone-releasing hormone analogues,LHRHa)靶向紫杉醇脂质体(Paclitaxel liposomes,PTX-Lipo),研究其在体外增强紫杉醇(Paclitaxel,PTX)对卵巢癌A2780/DDP细胞的抑制作用。方法:采用薄膜超声法制备PTX-Lipo与LHRHa靶向紫杉醇脂质体(LHRHa-Paclitaxel liposomes,LHRHa-PTX-Lipo),用透射电镜考察脂质体形态;高效液相色谱法测定2种PTX-Lipo的包封率;激光共聚焦法通过卵巢癌A2780/DDP细胞对4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑荧光素的摄取检测来反映细胞对NBD-Lipo与NBD-LHRHa-Lipo的摄取情况;MTT法及细胞克隆形成实验检测LHRHa-PTX-Lipo体外对卵巢癌细胞的生长抑制情况。结果:制备LHRHa-PTX-Lipo的平均粒径123.4 nm,包封率在90%以上;A2780/DDP细胞对NBD-LHRHa-Lipo组的荧光摄取明显高于NBD-Lipo组;LHRHa-PTX-Lipo对A2780/DDP细胞的生长及克隆形成抑制明显高于PTX组及PTX-Lipo组(P<0.05)。结论:采用薄膜超声法制备的LHRHa-PTX-Lipo可使药物在靶部位聚集,增强药物对卵巢癌细胞的抑制作用。     

氯喹对卵巢癌细胞增殖、迁移和自噬的影响

目的：探讨氯喹对卵巢癌A2780细胞和SKOV3细胞增殖、迁移和自噬的影响。方法：采用CCK8法检测不同浓度氯喹处理A2780细胞和SKOV3细胞后的增殖能力;克隆形成实验检测氯喹对A2780细胞和SKOV3细胞克隆形成的影响;划痕实验和Transwell实验检测氯喹对A2780细胞和SKOV3细胞的迁移能力的影响;红绿双荧光mRFP-eGFP-LC3自噬双标质粒转染A2780细胞和SKOV3细胞,荧光显微镜观察氯喹处理48 h后自噬小体的形成和自噬流的变化;Western Blot检测氯喹处理A2780细胞和SKOV3细胞48 h后自噬标志蛋白LC3的表达及PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达。结果：氯喹显著抑制A2780细胞和SKOV3细胞增殖能力和迁移能力,另外,氯喹处理能显著抑制卵巢癌细胞的自噬水平。A2780细胞和SKOV3细胞经氯喹处理后LC3Ⅱ、PI3K、p-AKT和mTOR蛋白表达水平显著增高,而AKT、p-mTOR蛋白表达水平显著降低。结论：氯喹能显著抑制A2780细胞和SKOV3细胞增殖和迁移能力,并可能通过激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制细胞自噬。     

ISO-1在卵巢癌侵袭中的作用

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子MIF特异抑制剂(S, R)-3-(4-羟苯基)-4, 5-二氢-5-异噁唑乙酸甲酯(ISO-1)对卵巢癌细胞增殖、侵袭的作用以及对血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factorreceptor-2,VEGFR-2)的影响,为卵巢癌CD74靶向治疗奠定基础。方法 不同浓度ISO-1作用于人卵巢癌细胞SKOV3、A2780,对照组以相应浓度的稀释液处理。MTT法检测卵巢癌细胞增殖,L 多巴色素甲酯测定M IF互变异构酶活性,微孔迁移法检测卵巢癌细胞体外侵袭,RT- PCR检测mRNA表达情况。结果 ISO-1能显著抑制人卵巢癌细胞SKOV3、A2780的增殖及其MIF互变异构酶活性(P<0.05),且两者呈正相关性(SKOV3: r=0.841, P<0.01; A2780: r=0.862, P<0.01); 50μmol/L ISO-1作用于卵巢癌细胞SKOV3、A2780细胞24h后,其穿透聚碳酸酯膜的能力显著降低(P<0.05),同时卵巢癌细胞的CD74、VEGFR-2的mRNA水平显著降低(P<0.05)。结论 ISO-1通过抑制CD74的活性下调VEGF、VEGFR-2的表达,从而抑制卵巢癌细胞的增殖及侵袭。     

姜黄素诱导卵巢癌细胞株A2780细胞周期阻滞和凋亡

目的 探讨姜黄素对卵巢癌细胞株A2780的生长抑制作用及其机制。方法 10一50μmol/L姜黄素作用6—24h后，MTT比色法检测细胞生长活性，流式细胞仪测定细胞周期时相变化，末端TdT酶标记技术和DNA Ladder检测细胞凋亡；透射电镜观察细胞超微结构变化。结果 姜黄素能显著抑制卵巢癌细胞株A2780的体外生长，呈时间与剂量依赖性；细胞周期阻滞于G0／Gl期；部分细胞出现凋亡形态学改变，凝胶电泳可见“梯形”条带，凋亡率为6．41％一28．48％(P＜o．01)。结论 姜黄素通过抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡等机制，能显著地抑制卵巢癌细胞的体外生长。     

纳米材料介孔硅承载阿霉素在C6胶质瘤中的实验研究*

目的：探讨纳米材料介孔硅（MSN）承载阿霉素（DOX）在C6胶质瘤细胞和荷瘤大鼠的体内分布情况及其凋亡诱导作用。方法：将MSN按浓度梯度分别与C6胶质瘤细胞孵育,通过CCK-8细胞活力检测MSN细胞毒性;DOX与MSN/DOX按时间梯度分别与C6胶质瘤细胞共培养,荧光显微镜观察药物吞噬;构建荷瘤大鼠模型,尾静脉分别注射DOX与MSN/DOX后,通过免疫荧光及荧光分光光度计检测大鼠体内主要脏器的药物分布情况,Western Blot检测胶质瘤细胞凋亡。结果：MSN按浓度梯度1μg/mL、10μg/mL、50μg/mL加入C6胶质瘤细胞后,C6胶质瘤细胞增殖能力随介孔硅浓度递增差异无统计学意义（P>0.05）;50μg/mL浓度梯度组1h、6h、12h、24h酶标仪检测结果分析显示,C6胶质瘤细胞增殖能力差异无统计学意义（P>0.05）。荧光显微镜观察显示MSN/DOX组随时间增加在C6胶质瘤细胞中的DOX药物含量高于DOX组;MSN/DOX组在荷瘤大鼠胶质瘤组织中的DOX药物含量高于DOX组,且凋亡相关蛋白表达明显增加。结论：MSN细胞毒性低,可承载DOX更多地进入C6胶质瘤细胞,并促进C6胶质瘤细胞凋亡。     

OPCML抑制卵巢癌细胞的体外实验研究

目的:探讨鸦片受体类的细胞黏附因子OPCML在体外对卵巢癌细胞的影响.方法:将OPCML用重组慢病毒转导入人卵巢癌细胞A2780、OCC1和正常小鼠卵巢上皮细胞CD1.通过细胞增殖实验、细胞周期分析和细胞聚合力实验观察OPCML对卵巢癌细胞的影响.结果:①OPCML基因能被重组慢病毒高效地转导入靶细胞,转导效率可达100%,同时达到稳定的表达,Western blot 能检测到OPCML和标志绿色荧光GFP蛋白在靶细胞中的表达.②细胞增殖实验显示,A2780细胞中,转导OPCML基因72 h后的细胞(即A2780-OPCML细胞)数为(7.6±1.0)×105个,显著少于未转导基因(即A2780)或仅转导空载体(即A2780-pWPI)的细胞[分别为(20.0±2.6)×105和(18.1±1.7)×105个(P＜0.01)];但在OCC1和CD1细胞中,OPCML基因对细胞的增殖无明显的影响(P＞0.05);③细胞周期分析显示,OPCML基因对A2780细胞的细胞周期有明显的阻滞作用[转导前、后分别为66.5%、75.1%(P＜0.05)],但对OCC1、CD1细胞则无明显阻滞作用(P＞0.05);④细胞聚合力实验显示,OPCML基因能明显增强细胞的黏附力(P＜0.05).结论:OPCML能够增加细胞的黏附能力,抑制人卵巢癌细胞A2780的增殖,OPCML可能是一个新的抑癌基因.     

TLS9a核酸适配体对小鼠肝癌细胞的靶向作用研究

目的 探讨TLS9a核酸适配体对小鼠肝癌细胞的靶向作用.方法 制备马来酰亚胺修饰的装载阿霉素的脂质体(liposome),合成FITC荧光及巯基修饰的TLS9a核酸适配体,并将其耦联到脂质体表面.紫外分光光度法检测阿霉素包封率.动态光散射法(DLS)测纳米粒子粒径大小及电位分布,倒置荧光显微镜观察小鼠肝癌细胞对阿霉素摄入及用流式细胞技术检测平均荧光强度,评估小鼠肝癌细胞对药物摄入量.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性.结果 流式细胞术检测TLS9a核酸适配体与BNL.1ME.A.7R.1小鼠肝癌细胞结合率为54.1％,TLS9a耦联的脂质体平均粒径分布在(116.0±5.0)nm.TLS9a-liposome/DOX在pH 5.0的环境中可以快速释放化疗药物DOX,72 h药物释放量超过70％.TLS9a-liposome/DOX在体外能够有效抑制小鼠肝癌细胞BN L.1ME.A.7R.1生长.结论 TLS9a核酸适配体可以特异性与小鼠肝癌细胞BNL.1ME.A.7R.1结合,可用于检测小鼠肝癌细胞.     

光子晶体微载体三维培养平台用于HMSN复合载药系统抗肿瘤效果的初步鉴定

目的:通过光子晶体微载体构建三维仿生肿瘤细胞培养平台,初步检测此平台的药物筛选作用及HMSN-COOH@DOXfluorescence NVP复合载药系统在三维培养环境中对CD117⁺CD44⁺A2780和A2780细胞的化疗效果。方法:于常规二维培养及三维仿生平台分别接种CD117⁺CD44⁺A2780和A2780细胞,加入DOX、PTX、CDDP和5-FU,分别计算各组的抑制率及凋亡率,验证三维仿生平台的可行性。将HMSN复合载药系统(包载DOX)加入各组,对照组加入相同剂量的游离药物,共孵育12 h后检测细胞凋亡率。结果:光子晶体微载体为细胞提供了仿生的三维生长环境。三维培养平台中DOX、PTX、CDDP及5-FU对CD117⁺CD44⁺A2780和A2780细胞的化疗效果显著降低(P<0.05)。HMSN复合载药系统对在三维和二维培养环境中的细胞均有较好的促凋亡作用,等量游离药物对三维和二维环境中培养细胞的促凋亡作用均小于HMSN复合载药系统...     

卵巢癌细胞中小分子G蛋白Rho的表达及其意义

目的：研究小分子G蛋白Rho家族中RhoA、RhoC及其效应分子ROCK—1在不同卵巢癌细胞中的表达水平，探讨它们与卵巢癌转移的相关性。方法：RT—PCR检测RhoA、RhoC及ROCK--1在卵巢癌细胞SW626、Skov-3、A2780和Caov—3中mRNA的表达水平；Western Blot检测RhoA和ROCK—1蛋白的表达情况；Boyden小室体外侵袭试验检测四株卵巢癌细胞的体外侵袭能力。结果：RhoA、RhoC和ROCK—1在不同的卵巢癌细胞中均有表达，但仅RhoC的表达水平与癌细胞侵袭力能力至正相关(r＝0．95，P＜0．01)。此外RhoA在转录水平和蛋白水平并不至同步变化。四株卵巢细胞的体外侵袭能力，其中SW626最强，Caiv—3最弱，Skov—3和A2780居中；结论:RhoC的表达与卵巢癌细胞的体外侵袭能力相关，可能作为一个癌基因在卵巢癌中起作用，有可能成为治疗卵巢癌转移的新靶点或筛选早期卵巢癌的标志物。     

TRAIL与GX15-070联用诱导卵巢癌细胞凋亡的研究

[目的：探讨联合应用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）和GX15-070诱导卵巢癌细胞系A2780细胞凋亡的作用及其机制。方法：以联用或未联用GX15-070的TRAIL作用于卵巢癌A2780细胞,采用MTT法检测细胞存活率,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,JC-1染色流式细胞术检测细胞线粒体膜电位（?ψm）,比色测定试剂盒检测caspase-9、caspase-8和caspase-3活性。结果：TRAIL能在一定程度上降低卵巢癌A2780细胞的存活率、诱导癌细胞凋亡、降低?ψm、提高caspase-9、caspase-8和caspase-3活性,而GX15-070能显著增加TRAIL降低卵巢癌A2780细胞的存活率、诱导癌细胞凋亡、降低?ψm、提高caspase-9和caspase-3活性的效应。结论：GX15-070通过凋亡信号通路的内源性途径,促进卵巢癌A2780细胞对TRAIL诱导凋亡效应的敏感性。     

转铁蛋白修饰共载紫杉醇和金雀异黄素脂质体抑制卵巢癌株和荷瘤裸鼠肿瘤的生长

目的：制备转铁蛋白修饰共载紫杉醇（paclitaxel,PTX）和金雀异黄素（genistein,Gen）脂质体（liposome,LP）,并对其A2780细胞及对荷瘤裸鼠的治疗效果进行初步评价。方法：采用薄膜分散法制备普通载药LP,后采用插入法制备转铁蛋白修饰载药LP。考察LP的粒径,电位以及包封率;通过细胞摄取实验考察卵巢癌细胞对普通LP和转铁蛋白修饰脂质体（transferrin conjugated liposome,TFLP）的摄取效率。MTT实验考察不同LP对耐药卵巢癌细胞的细胞毒性;构建卵巢癌细胞肿瘤球模型,考察不同LP对肿瘤球的穿透能力以及不同载药LP对肿瘤球的生长抑制能力。构建卵巢癌裸鼠异位模型,考察不同载药LP对肿瘤生长抑制效果。结果：TFLP-PTX/Gen的粒径在（115.0±9.5） nm,电位为（-4.00±2.15） mV,PTX与Gen的包封率分别为83.4%和79.6%。细胞摄取实验结果显示,A2780细胞对TFLP的摄取效率是LP的2.8倍;MTT实验表明TFLP-PTX/Gen对耐药卵巢癌细胞的毒性显著强于TFLP-PTX、TFLP-Gen和LP-PTX/Gen;肿瘤球抑制实验和荷瘤裸鼠肿瘤生长抑制实验结果都表明TFLP-PTX/Gen具有良好的抗肿瘤效果。结论：转铁蛋白修饰共载PTX和Gen LP具有良好的卵巢癌细胞靶向性和抗卵巢癌作用,是一种潜在的卵巢癌靶向给药系统。     

超声联合紫杉醇微泡对卵巢癌细胞株A2780/DDP增殖和凋亡的影响

目的：探讨超声联合紫杉醇微泡对人卵巢癌细胞A2780/DDP细胞的增殖和凋亡的影响。方法：将人卵巢癌细胞株A2780/DDP随机分为5组：对照组、紫杉醇组、紫杉醇+超声组、紫杉醇微泡组和紫杉醇微泡+超声组。采用噻唑蓝（Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法检测作用24、48 h和72 h后卵巢癌细胞的增殖活性,并用Hochst 33258和TUNEL染色法检测细胞凋亡情况。结果：MTT法检测显示紫杉醇微泡+超声组24、48 h和72 h抑制率分别为（37.20±2.01）%、（51.60±2.10）%和 （57.47±2.85）%,明显高于其他各处理组（P＜0.05）;Hochst 33258和TUNEL染色均显示紫杉醇微泡+超声组凋亡率最高,作用24 h后的凋亡率为(46.10±4.15)%,明显高于其余各组（P＜0.05）。结论：超声联合紫杉醇微泡能明显抑制人卵巢癌细胞A2780/DDP的增殖和诱导其凋亡。     

OSTP增强紫杉醇诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用

目的 研究卵巢癌特异性结合肽（OSTP）及联合紫杉醇对卵巢癌A2780细胞生长及凋亡的影响.方法 体外培养卵巢癌A2780细胞,随机分为4组：溶剂对照组（1640和0.1％ DMSO组）、OSTP组、紫杉醇组、OSTP联合紫杉醇组.采用四甲基偶氮唑盐（MTT法）检测OSTP对A2780细胞生长的影响;用Annexin-V-FITC和PI双染法标记A2780细胞,通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 MTT法检测OSTP以不同浓度作用于卵巢癌A2780细胞时,可对该细胞的生长起到抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.应用流式细胞技术检测细胞凋亡发现：不同浓度的OSTP（20、40、80、160、320μmol/L）对A2780细胞的凋亡率分别7.88％、8.348％、8.727％、9.393％和10.68％,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）,提示OSTP可诱导细胞凋亡.OSTP和紫杉醇联合应用,在不同的预处理组（加OSTP80μ mol/L 0、3、6、12h）后再加紫杉醇10μmol/L作用48h,结果发现细胞凋亡率分别是39.40％、53.09％、48.18％和45.62％,均高于OSTP和紫杉醇单独用药及两者的凋亡率相加值,且差异有统计学意义（P ＜0.001）.提示OSTP能增强紫杉醇诱导的卵巢癌A2780细胞凋亡作用.结论 OSTP对卵巢癌A2780细胞有生长抑制及凋亡作用,尤其是OSTP能增强紫杉醇诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用,对于探讨和开发OSTP作为靶向化疗增敏剂治疗卵巢癌有良好的应用前景.     

RNAi抑制Aurora B激酶对卵巢癌A2780细胞增殖和周期的影响

目的研究RNAi抑制Aurora B激酶对卵巢癌A2780细胞增殖和周期的影响。方法采用RNAi方法,将AURKB RNAi转入A2780细胞,RT-PCR、Western blot检测Aurora B mRNA和蛋白的表达,MTT检测A2780细胞增殖情况,流式细胞术检测A2780细胞周期改变。结果①通过RT-PCR、Western blot检测到人类5种卵巢癌细胞株A2780、SKOV3、CAOV3、A2780/taxol及AD6中均明显表达Aurora B mRNA和蛋白;②A2780细胞转染AURKBRNAi后,Aurora B mRNA和蛋白的表达明显下降,转染浓度至200 pmol/L RNAi 48 h后,Aurora B mRNA和蛋白的表达被完全抑制;③MTT检测和锥虫蓝染色结果显示,于转染200 pmol/L AURKB RNAi第4天开始,A2780细胞增殖明显受到抑制,吸光度值与空白对照组和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);④Flow cytometry检测显示,转染200 pmol/L AURKB RNAi 24 h,大量A2780细胞进入有丝分裂期,并形成多倍体细胞,于72 h多倍体细胞比例达到峰值20.54%,转染后96 h转染组细胞凋亡率(11.67%)显著高于对照组(0.57%);⑤Hoechst 33258染色观察细胞凋亡结果显示,与A2780对照和阴性对照相比,转染200 pmol/L浓度AURKB RNAi 96 h后A2780细胞凋亡明显增多。结论 Aurora B的抑制使A2780细胞增殖受到明显抑制;导致多倍体形成,使细胞基因组严重不稳定,最终导致细胞凋亡,Aurora B可能是卵巢癌治疗的有效分子靶点。