冬虫夏草含药血清诱导神经干细胞定向分化的影响

目的研究神经干细胞具有自我更新、未分化和多向分化潜能,冬虫夏草中的氨基酸、核苷和糖蛋白等能诱导神经干细胞的定向分化。方法取新生24 h内的Wistar大鼠大脑海马区分离培养神经干细胞三代后,加入低、中、高剂量冬虫夏草含药血清与对照血清进行培养,观察其对神经干细胞影响,通过MTT检测神经细胞生长曲线,免疫组化法和RTPCR半定量检测神经干细胞向神经元分化的情况。结果新生大鼠海马分离培养的神经克隆球,经免疫细胞化学染色检测为Nestin阳性细胞。NSC贴壁分化的细胞呈NSE、GFAP阳性。冬虫夏草低、中药物实验组诱导神经干细胞分化为神经元的阳性细胞明显高于对照组,且呈量效依赖关系,高浓度药物实验组与对照组没有明显差别。结论冬虫夏草药物血清可体外诱导神经干细胞向神经元方向分化,在一定范围内存在量效依赖关系。     

内源性MSCs向脑内迁移分化为多巴胺能神经元及其中药干预的可行性研究

研究表明：中脑黑质多巴胺能神经元变性缺失伴胞浆内Lewy小体的形成是帕金森病的主要病理改变。近年来,大量的实验证实：中药在体外可诱导MSCs分化为神经前体细胞及神经元。倘若我们可通过中药激活内源性的MSCs不断向脑内迁移,进而分化为DA能神经元,那么,相对于神经干细胞移植术而言,该治疗手段将有可能显得更为简单、安全。     

传代神经干细胞体外分化研究

目的：分离、培养和鉴定Wistar大鼠脑部的神经干细胞,传代培养后进行诱导分化。方法：分离培养神经干细胞,传代后进行诱导分化研究。结果：所分离培养的细胞具有增殖能力和分化潜能,表达nestin蛋白,诱导分化后经细胞免疫学证实为表达NSE的神经元和表达GFAP的星形胶质细胞。结论：神经干细胞具有体外诱导分化为神经元和星形胶质细胞的能力。     

中药对神经干细胞生物学影响的研究进展

神经干细胞（neural stem cell，NSC）是一类能生成神经组织或源自神经系统，并具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞，是近年来的一个研究热点。传统观点认为神经系统的神经元处于分化状态，受损后无法再生，研究发现NSC可分布在胚胎早期脑室和脑室下区、成年脑室区、纹状体、海马齿状回以及脊髓等部位。目前应用无血清培养、单克隆技术及免疫细胞化学技术对NSC进行分离、培养和鉴定，但诱导NSC分化的因素尚未完全明了，有关NSC体内外定向诱导分化为神经细胞一直是人们感兴趣的课题。众所周知，在神经干细胞的增殖分化过程中，外源性因素如生长因子、细胞因子等对其具有重要影响。我国学者在观察临床运用活血化瘀、益智生髓中药治疗中风等脑血管病获得良好疗效的基础上，尝试应用中医药学理论，开展中药及其有效成分对神经干细胞增殖分化影响的研究。目的是利用由其分化的神经元或少突胶质细胞替换因损伤而发生死亡的神经元或少突胶质细胞，修复重塑中枢神经结构和功能，可望为中医药在NSC领域的研究和应用开辟新的途径。本文就此方面的研究概况进行综述。     

黄芩甙诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的　黄芩甙体外定向诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞。方法　通过贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞 ,体外扩增培养。中药黄芩甙定向诱导分化为类神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学检测神经细胞特异性抗原标志物神经元烯醇酶 (NSE)、巢蛋白 (Nestin)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果　大鼠骨髓间充质干细胞可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。黄芩甙诱导 5h后大部分骨髓间充质干细胞转变为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色NSE及Nestin呈阳性 ,GFAP阴性。结论黄芩甙可在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞。     

中药诱导干细胞分化为神经元样细胞的研究思路和方法

介绍人脐血干细胞的生物学特性、体外定向分化为神经元样细胞及体内移植应用现状。阐述中药诱导脐血干细胞分化为神经元样细胞的思路和方法,主要有中医理论指导及中药的选择、中药诱导方法的优化、神经元样细胞功能的检测及在移植中的应用和主要风险。     

中药对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化影响的研究概况

骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）具有在体内及体外向神经细胞分化的潜能，为多种神经系统疾病的细胞治疗提供了新的思路。开展中药定向诱导间充质干细胞向神经细胞分化研究，可望为今后临床神经细胞移植提供安全有效的诱导分化剂，也可为中医药在间充质干细胞领域的应用开辟新的途径。     

电针血清与丹参注射液对骨髓间充质干细胞分化的影响

目的：研究电针血清与丹参注射液对骨髓间充质干细胞分化的影响。方法：通过贴壁法分离大鼠MSCs，体外扩增培养，MSCs用含10％健康大鼠电针血清、10％脑梗塞大鼠血清、10％脑梗塞大鼠电针血清和含10％丹参注射液的L-DMEM诱导MSCs，光镜下观察细胞形态，免疫细胞化学检测神经细胞特异性抗原标志。结果：大鼠骨髓间充质干细胞可以通过贴壁法成功分离，并可在体外大量扩增，健康大鼠电针血清、脑梗塞大鼠血清、脑梗塞大鼠电针血清诱导48小时之后未见神经元样细胞出现，免疫细胞化学染色NSE、Nestin阴性。丹参诱导4小时后，大部分MSCs转变为神经元样细胞，出现胞体和突起，免疫细胞化学染色NSE、Nestin染色呈阳性。结论：健康大鼠电针血清、脑梗塞大鼠血清、脑梗塞大鼠电针血清不能诱导MSCs体外分化；丹参注射液可以在体外诱导MSCs分化为神经元样细胞。     

从雌激素样活性解析中药诱导神经干细胞增殖及分化

中医药治疗神经退行性疾病的临床历史悠久,而近年来中药诱导神经干细胞增殖和分化的现代药理学研究进展迅速。为了发掘传统中医学理论的有关阐述与现代药理学研究成果的内在联系,笔者通过总结中药诱导神经干细胞增殖与分化的研究进展,以中医滋补肝肾理论及益气活血理论为出发点,结合雌激素诱导神经干细胞增殖与分化的研究成果,提出中药雌激素样活性滋补肝肾是中药诱导神经干细胞增殖分化的机制之一。     

不同治则中药单体对体外培养神经干细胞分化的影响

[目的]研究不同治则中药对体外培养大鼠神经干细胞分化及成熟的影响。[方法]体外培养胎鼠神经干细胞，按适当浓度接种于24孔板，以β-tublin代表非成熟神经元marker，以tau代表成熟神经元marker，RT-PCR方法检测β-tublin、tau的表达，观察黄芩苷、栀子苷，黄芪甲苷、三七总皂苷对神经干细胞分化及成熟的影响。[结果]结果表明，黄芩苷、栀子苷能诱导神经干细胞特异性分化成神经元，而联合应用黄芪甲苷、三七总皂苷能进一步促进分化神经元的成熟。[结论]不同治则中药，针对神经再生的增殖、分化过程，联合用药，具有促进神经再生的作用。     

中药诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的研究进展

骨髓间充质干细胞具有较强的自我复制和多向分化能力,近几年发现在一定的条件下,能够诱导分化为神经细胞.由于其具有取材方便,回植后不会发生免疫排斥反应,体外基因转染率高并能稳定高效表达外源基因等优点,将为神经系统疾病的治疗提供新的思路.通过分析相关文献着重对中药诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化方面的研究进行综述.     

补肾填精法促进骨髓基质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的:探讨补肾填精方右归丸含药血清体外诱导大鼠骨髓基质干细胞分化为神经元样细胞的作用.方法:用DMEM/F-12培养液培养Wistar大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs).用右归丸含药血清诱导BMSCs分化后,倒置显微镜观察细胞形态变化;用尼氏染色法观察神经细胞特征性结构;用免疫细胞化学染色法鉴定神经胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经细胞特异性标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE),微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达.结果:诱导6h后,骨髓基质干细胞胞体收缩,有突起伸出;诱导24 h后突起增多形成网络结构;尼氏染色法显示诱导后的细胞胞体中有尼氏体.免疫细胞化学染色示NSE及MAP-2阳性表达,GFAP无表达.结论:右归丸含药血清可以体外诱导大鼠骨髓基质干细胞分化为神经元样细胞.     

中药对间充质干细胞分化为神经细胞干预作用的研究

骨髓间充质干细胞(mesenchyrnal stem cells，MSCs)具有在体内及体外向神经细胞分化的潜能，为多种神经系统疾病的细胞治疗提供了新的思路。因间充质干细胞具有取材方便，易于在体外分离、培养和扩增，自体取材不存在排异反应等优点，使间充质干细胞用于神经系统疾病的治疗具有更大的优势。开展中药定向诱导间充质干细胞向神经细胞分化研究，可望为今后临床神经细胞移植提供安全有效的诱导分化剂，也可为中医药在间充质干细胞领域的应用开辟新的途径。     

中医药诱导缺血性脑损伤后海马神经干细胞增殖分化的研究进展

海马神经组织的干细胞具有多分化的潜能,通过采取干预措施调控相关通路可促使其分化、增殖、迁移形成神经元和神经胶质细胞,并且新生成的神经元可替代受损的神经细胞,修复神经损伤。缺血性脑损伤后神经元、胶质细胞、血管内皮细胞等组织结构会遭受损伤与破坏,因此通过激活海马神经干细胞促进其增殖、分化修复受损的神经组织成为治疗缺血性脑损伤的重要手段和方法。目前在中医药对缺血损伤后神经组织特别是神经元的修复和再生等方面进行了大量的实验研究,并在中医药诱导海马神经干细胞增殖分化,修复缺血损伤神经元的研究中取得了一定的成果。     

隐丹参酮诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的：观察隐丹参酮体外定向诱导成人骨髓间质干细胞（MSC）分化为神经元样细胞。方法：采用Ficoll-Paque液分离成人MSC，体外扩增，FACScan流式细胞仪检测表面抗原表达，采用含隐丹参酮的无血清DMEM诱导MSC分化为神经元样细胞。免疫组化鉴定神经元特异性烯醇化酶（NSE）、神经丝蛋白（NF－M，NF－H）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、巢蛋白（Nestin)的表达。结果：成人骨髓间质干细胞在体外扩增原代可获得0.5×10^6个细胞，15代可获得（2－3）×10^12个细胞，流式细胞仪检测显示CD29、CD44、CD90、CD105、CD166表达阳性，CD11a、CD14、CD34、CD38、CD45、CD80、CD86为阴性。加入隐丹参酮诱导后，MSC胞体收缩，突起伸出；免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF－M，NF－H、Nestin表达阳性，GFAP阴性。结论：隐丹参酮在体外可诱导成人骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞。     

刺五加注射液体外诱导骨髓间充质分化机制的研究

目的:探讨刺五加注射液对体外培养的骨髓间充质干细胞诱导为神经元样细胞的作用机制。方法:体外分离培养骨髓间充质干细胞,以刺五加注射液对其进行体外诱导,免疫组化鉴定NSE、MAP-2等神经标志物及尼氏体染色。结果:刺五加注射液可体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞,NSE、MAP-2反应及尼氏体染色均阳性。结论:刺五加注射液的诱导机制可能与其具有补肾益精及抗氧化性有关。     

骨髓间充质干细胞诱导分化成骨细胞的研究现状

归纳总结骨髓间充质干细胞的诱导方法和现代应用情况,为骨髓间充质干细胞诱导分化成骨细胞的深人研究提供参考。通过查阅、整理有关骨髓间充质干细胞的文献资料,从骨髓间充质干细胞的生物特性与制备、诱导成骨细胞的方法、在组织工程骨中的应用、所面临的问题以及未来的研究方向等方面进行总结和分析。结果显示骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,体外可诱导分化为成骨细胞,采用组织工程学技术可在体外构建骨组织工程支架。基于骨髓间充质干细胞的特性,使其在创伤修复、细胞替代治疗、支持造血、基因治疗等方面的应用前景也相当广阔。有必要开展骨髓间充质干细胞成骨诱导分化机制的研究,为其诱导分化成骨细胞提供指导意义和借鉴价值。     

丹参酮诱导间质干细胞分化为神经元样细胞的研究

神经干细胞的发现和研究,改变了以往神经细胞不可再生的传统观念.目的:研究丹参酮在体外诱导间质干细胞(MSC)分化为神经元样细胞的作用.方法:用Ficoll-Paque液将成人骨髓细胞进行密度梯度离心和贴壁筛选分离出MSC,体外扩增,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达和进行细胞周期测定.采用含丹参酮的无血清L-DMEM诱导MSC分化为神经元样细胞,并探讨丹参酮不同浓度对MSC诱导分化为神经元样细胞的影响.以免疫组化方法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF-M)、巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果:MSC原代可获得(6-8)×105、第5代可获得(2-3)×108个细胞.流式细胞仪检测结果CD29、CD44、CD166表达阳性,CD14、CD34、CD45、HLA-DR为阴性;扩增后的各代MSC表面抗原表达无显著差别;90%以上MSC都处在G0/G1期.丹参酮诱导后,MSC形态上转变为典型的神经元样细胞,免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF-M、nestin表达阳性,GFAP阴性.结论:采用的细胞培养条件适于MSC的纯化和扩增,培养细胞为MSC;丹参酮可以在体外诱导MSC分化为神经元样细胞,其诱导转化率与丹参酮的浓度有关.     

右归丸含药血清诱导骨髓基质干细胞分化的最佳浓度探索

目的:探讨右归丸含药血清体外诱导大鼠骨髓基质干细胞分化为神经元样细胞的最佳浓度。方法:用DMEM/F-12培养液培养Wistar大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs),采用不同浓度右归丸含药血清对其进行体外诱导,并用MTT法检测各组细胞生长情况,用免疫细胞荧光方法计算各组神经元样细胞阳性数加以比较。结果:BMSCs在2.5%含药血清培养液中活力最好。结论:2.5%右归丸含药血清培养液是诱导BMSCs分化实验的最佳浓度。     

中药调节神经干细胞增殖分化的研究进展

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)指能自我更新,并具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞潜能的细胞群。目前,神经再生和NSCs移植已成为治疗神经系统疾病的新策略,但NSCs移植仍存在存活率不高、定向分化困难、易成瘤和难以穿透疤痕组织等问题。如何通过调控内源性NSCs的增殖和定向分化是成体神经再生研究的新热点问题。药物诱导内源性NSCs增殖和定向分化的技术有望应用于再生医学,修复受损的神经,治疗中枢神经系统疾病。中药作为我国的传统医药,具有多靶点、多环节、多途径的治疗特点,在促进神经再生方面具有独特优势和广阔前景。近年来药理学研究表明中药可通过调控胞外信号通路[如Notch,Wnt/β-catenin,the Sonic Hedgehog(Shh)通路等],影响胞内转录因子以及改变神经发生微环境(如神经营养因子BNDF等)等多种途径间接或直接调控NSCs的增殖和分化。对近年来中药复方、中成药、单味中药及天然产物调节NSCs增殖分化的分子机制相关研究加以归纳总结,为中药防治中枢神经系统疾病提供新的思路。