活血通督汤对大鼠脊髓损伤后血-脊髓屏障的修复作用

目的：通过对大鼠脊髓损伤（SCI）后的行为学评分、脊髓组织病理分析以及血-脊髓屏障（BSCB）功能的评测,观察活血通督汤对大鼠SCI后BSCB的影响。方法：将24只雌性SD大鼠随机均分为假手术组、模型组及活血通督汤组,每组8只。假手术组仅咬除椎板不损伤脊髓,模型组和活血通督汤组采用改良Allen’s法建立SCI模型。分别于第1、3、5、7天行BBB评分,7 d后取材。采用HE染色观察大鼠脊髓组织受损程度,尼氏染色观察神经元形态,透射电镜观察BSCB紧密连接超微结构,EB染色检测BSCB通透性。结果：与假手术组比较,模型组和活血通督汤组相同时点BBB评分显著降低（P<0.01）,在干预第7天时,活血通督汤组大鼠BBB评分显著高于模型组（P<0.05）。HE染色结果显示：与模型组比较,活血通督汤组炎症细胞浸润有所减少,神经细胞形态结构较完整且数量增多,但仍存在脊髓空洞样病变;尼氏染色结果显示：与模型组比较,活血通督汤组神经细胞形态较好且数量增多,尼氏体数量较多,空泡样改变减少,瘀血面积较小或消失;透射电镜结果显示：与模型组比较,活血通督汤组大鼠脊髓血管内皮细胞紧密连接较完整,血...     

活血通督汤修复脊髓损伤的机制研究进展

中医药在脊髓损伤（SCI）中的运用可追溯到《黄帝内经》,且运用中医药防治SCI有其独特的优势。张安桢教授倡导将活血通督法作为SCI的治疗大法,该法代表方活血通督汤长期运用于治疗SCI等骨科病证,在临床与机制研究等方面成果颇丰。文章总结本研究团队近十余年有关活血通督法在SCI修复方面的研究,旨在为活血通督汤的临床应用及今后相关领域的研究提供科学思路。     

活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的影响

目的:通过观察活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤脊髓神经细胞凋亡的影响,探讨活血通督汤改善脊髓缺血再灌注损伤的机制。方法:66只新西兰家兔随机分为假手术组、模型组、活血通督汤组。模型组、活血通督汤组采用夹闭腰动脉法制作脊髓缺血再灌注损伤模型。假手术组不夹闭腰动脉,其它步骤同模型组。采用TUNEL法检测神经细胞凋亡水平。结果:(1)苏木精-伊红染色显示:假手术组脊髓神经细胞形态基本正常;模型组和活血通督汤组各时间点可见脊髓神经细胞核固缩、深染、结构模糊,间质可见出血点;活血通督汤组各时间点脊髓神经细胞形态优于模型组。(2)TUNEL染色显示:假手术组神经细胞凋亡较少;模型组和活血通督汤组各时间点神经细胞凋亡较假手术组明显增高,再灌注24h神经细胞凋亡最多;活血通督汤组各时间点脊髓神经细胞凋亡少于模型组。结论:活血通督汤可通过减少脊髓缺血再灌注损伤中脊髓神经细胞的凋亡,从而减轻脊髓缺血再灌注损伤。     

中药治疗血-脊髓屏障损伤的机制进展

正血-脊髓屏障作为一种调控血液和脊髓组织之间物质转运的生物屏障,其病理机制与脊髓损伤密切相关,脊髓损伤往往会造成血-脊髓屏障的破坏,导致其通透性增高,紧密连接破坏,致使脊髓微环境发生改变,是继发性脊髓损伤的重要因素之一,不利于脊髓的修复~([1])。虽然人们在脊髓损伤的治疗上进行了大量研究,但脊髓损伤后神经功能的康复仍是一个难题。随着现代中医药的运用与发展,有不少研究证实中药对治疗脊髓损伤有独特优势,     

活血通督汤对脊髓损伤后胶质瘢痕形成的影响

目的:观察活血通督汤对脊髓损伤后肢体运动功能和胶质瘢痕形成的影响,探讨活血通督汤治疗脊髓损伤的作用机制。方法:成年SD大鼠18只,采用随机数表法随机分为假手术组、模型组和活血通督汤组,每组各6只。假手术组仅行椎板切除术,模型组和活血通督汤组采用NYU脊髓打击器建立脊髓损伤模型,造模后假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,活血通督汤组给予活血通督汤灌胃。术后第1,3,5,7天行BBB肢体运动功能评分,7d后取材。采用尼氏染色法观察神经元细胞形态结构以及神经元受损情况,免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达,计算GFAP阳性细胞数。结果:自术后第3天起,活血通督汤组的大鼠BBB评分高于模型组大鼠BBB评分,差异有统计学意义(P0.05);尼氏染色结果显示活血通督汤组神经元受损情况得到改善,神经元的形态结构优于模型组;免疫荧光检测结构显示与假手术组相比,脊髓损伤后GFAP表达显著,损伤处GFAP阳性细胞数增多,差异有统计学意义(P0.05);与模型组相比,活血通督汤组GFAP阳性细胞数较少,差异有统计学意义(P0.05)。结论:活血通督汤能促进脊髓损伤后肢体运动功能的恢复,其机制可能与抑制GFAP表达、降低脊髓损伤后胶质瘢痕形成有关。     

血脊髓屏障模型的制作技术与方法研究进展

正血脊髓屏障是存在于血液和脊髓之间中枢神经系统所特有的屏障结构,由无孔毛细血管内皮细胞、基底细胞、周细胞、以及星形胶质细胞和紧密连接蛋白构成~([1-2])。当脊髓受到损伤时,血脊髓屏障也可能随之受损。血脊髓屏障被破坏会造成脊髓组织水肿、缺血缺氧和血浆内的各种分子无选择性的进入脊髓实质,造成严重的继发性脊髓损伤,导致患者生活自理能力下降甚至丧失~([3])。因此,尽早修复血脊髓屏障,改善脊髓微环境,是防治继发性脊髓损伤的关键。     

活血通督汤抑制脊髓损伤后炎症反应的实验研究

目的:观察活血通督汤对大鼠脊髓损伤后NLRP3,IL-1β及IL-18表达的影响,探讨该方对脊髓损伤后炎症的作用及其机制。方法:将24只成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、活血通督汤组(各8只)。假手术组行椎板切除术(不损伤脊髓),模型组和活血通督汤组采用NYU脊髓损伤打击器复制脊髓损伤模型。造模成功后,假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,活血通督汤组给予活血通督汤灌胃,给药剂量为12.6 mL/(kg·d),术后第3天取材。采用免疫组化法检测NLRP3炎症体的表达,尼氏染色法观察神经细胞形态,ELISA法检测炎症因子IL-1β和IL-18的表达。结果:尼氏染色显示活血通督汤组大鼠神经细胞的形态结构优于模型组。免疫组化法显示:与假手术组比较,模型组NLRP3炎症体表达较高,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,活血通督汤组NLRP3表达减少,差异有统计学意义(P0.05)。ELISA法检测结果显示模型组血清中IL-1β和IL-18表达较假手术组高,差异有统计学意义(P0.05);活血通督汤组IL-1β和IL-18低于模型组。结论:活血通督汤能抑制脊髓损伤后炎症反应,其机制可能与其抑制NLRP3的表达有关。     

活血通督汤对大鼠脊髓损伤后Ⅰ和Ⅳ型胶原蛋白表达的影响

目的:观察活血通督汤对大鼠脊髓损伤后Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)表达的影响,探讨该方对脊髓损伤后肢体运动功能恢复的作用机制。方法:将36只成年SD大鼠随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=12)及活血通督汤组(n=12)。假手术组行椎板切除术,不损伤脊髓,模型组和活血通督汤组采用NYU脊髓损伤打击器复制脊髓损伤模型。造模成功后,假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,活血通督汤组给予活血通督汤灌胃,给药剂量为12.6mL/(kg·d),术后第1,3,5和7天行BBB肢体运动功能评分。采用Western blot检测CollagenⅠ和CollagenⅣ蛋白表达量,尼氏染色法观察神经细胞形态,免疫组织化学染色法检测脊髓组织中CollagenⅠ和CollagenⅣ定位表达。结果:1)术后第3天开始,活血通督汤组BBB评分高于模型组(P0.05);2)尼氏染色显示活血通督汤组神经元的结构形态优于模型组,神经元受损状况得到改善;3)免疫组化和Western blot显示,与假手术组比较,模型组和活血通督汤组可见较多CollagenⅠ和CollagenⅣ表达(P0.05),但模型组CollagenⅠ表达比活血通督汤组少,模型组CollagenⅣ表达多于活血通督汤组(P0.05)。结论:活血通督汤促进脊髓损伤后肢体运动功能的恢复,其机制可能与其促进CollagenⅠ的表达且抑制CollagenⅣ的表达有关。     

活血通督汤对坐骨神经损伤后脊髓损伤性反应的作用机制

目的:观察活血通督汤对坐骨神经损伤后脊髓损伤性反应的作用机制。方法:将16只SD大鼠切断双侧坐骨神经后,随机分为模型组(8只)和活血通督汤组(8只)。活血通督汤组给予活血通督汤治疗,连续4周,2次/d;模型组灌服等量0.9%NaCl溶液,2次/d.4周后取出大鼠脊髓固定、包埋。应用免疫组织化学法检测脊髓中脑源性神经营养因子(Brain-derived Neurotrophic Factor,BDNF)和胶质原纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary Acidic Protein,GFAP)的表达,并用图像分析软件检测表达量。结果:活血通督汤组BDNF的表达明显高于模型组(P0.01),模型组GFAP的表达明显高于活血通督汤组(P0.01)。结论:活血通督汤保护脊髓损伤性反应的作用在于促进BDNF的产生,也与抑制星形胶质细胞的活性有关。     

活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤NF-κB、VCAM-1表达的作用

目的:观察活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤关键因子核因子-κB(NF-κB)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响,探讨活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤作用机制。方法:将新西兰家兔随机分为假手术组(8只)、模型组(32只)和活血通督汤组(32只)。3组术前7d均予连续灌胃,活血通督汤组灌服活血通督汤,每日2次,假手术组及模型组予灌服0.9%氯化钠溶液,每日2次。假手术组分离出L3-6动脉但不予夹闭,其余2组分离并夹闭L3-6动脉,制成脊髓缺血再灌注损伤模型。3组分别于术后0.5、1、4、8h取出家兔脊髓,采用免疫组化法和ELISA法检测脊髓组织中的NF-κB、VCAM-1的含量。结果:NF-κB在同一时点表达,假手术组最少,模型组最高;与假手术组相比,其余2组各时点NF-κB都明显升高(P<0.01);但活血通督汤组的表达水平显著低于模型组(P<0.05,P<0.01);VCAM-1在同一时点,假手术组表达最少,模型组表达最高;与假手术组相比,其余2组各时点VCAM-1的表达显著升高(P<0.01);血管表达率情况观察:假手术组始终无阳性血管表达,0.5h时3组皆无阳性血管表达,1、4、8h模型组阳性血管表达率明显高于活血通督汤组(P<0.05,P<0.01)。结论:活血通督汤能有效改抑制NF-κB、VCAM-1的表达,从而减轻炎性反应,以期达到减轻脊髓缺血再灌注损伤。     

后路椎板减压螺钉置入结合扶正通督活血汤治疗胸腰椎段骨折合并脊髓损伤临床观察

目的：观察后路椎板减压螺钉置入结合扶正通督活血汤治疗胸腰椎段骨折合并脊髓损伤的效果。方法：96例按随机数字表法分为两组各48例。两组均给予后路椎板减压螺钉置入术,观察组加用通督活血汤。结果：治疗后观察组MEP与SEP的潜伏期短于对照组,波幅、运动、感觉功能评分高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：后路椎板减压螺钉置入结合通督活血汤治疗胸腰椎段骨折合并脊髓损伤效果较好,且无严重不良反应。     

温肾通督方对脊髓损伤后微血管内皮细胞吞噬髓鞘碎片的影响

目的：探究温肾通督方对脊髓损伤后微血管内皮细胞（MECs）吞噬髓鞘碎片的影响及其作用机制。方法：采用改良A11en’s法制备脊髓损伤小鼠模型,1、3、7d后通过HE染色和尼氏染色观察损伤脊髓的病理改变。利用ELISA法检测损伤脊髓和血清中MCP-1、IL-6、IL-1β、TNF-α的表达水平,通过3D激光共聚焦观察损伤脊髓中MECs吞噬髓鞘碎片情况,采用多重免疫荧光染色检测脊髓损伤后MECs中HDAC6、LC3B、NLRP3表达。结果：与模型组比较,温肾通督方明显减少脊髓损伤后炎症细胞的浸润和神经元的固缩坏死;显著降低脊髓和血清中MCP-1、IL-6、IL-1β、TNF-α的水平（P<0.01,P<0.05）;促进MECs吞噬髓鞘碎片,并能下调HDAC6、NLRP3表达,上调LC3B表达（P<0.01）。结论：温肾通督方可能通过抑制HDAC6促进MECs吞噬髓鞘碎片,并能同时阻断NLRP3通路的信号转导,共同改善炎性微环境,促进脊髓损伤修复。     

通督活血汤配合后路椎板减压螺钉置入治疗胸腰椎段骨折合并脊髓损伤疗效观察

目的观察通督活血汤配合后路椎板减压螺钉置入治疗胸腰椎段骨折合并脊髓损伤患者的临床疗效。方法将64例胸腰椎段骨折合并脊髓损伤患者随机分为2组,对照组32例给予后路椎板减压螺钉置入治疗,研究组32例给予通督活血汤配合后路椎板减压螺钉置入治疗。观察2组治疗前后运动评分、触觉评分、伤椎椎体高度以及Cobb’s角变化情况。结果治疗后,2组运动评分、触觉评分及伤椎椎体高度均显著升高(P均<0.05),Cobb’s角均显著降低(P均<0.05),且研究组各指标改善情况均显著优于对照组(P均<0.05)。结论通督活血汤配合后路椎板减压螺钉置入治疗胸腰椎段骨折合并脊髓损伤,可有效促进患者功能恢复,疗效显著。     

中药提取物对脊髓损伤后血-脊髓屏障连接蛋白表达的调节机制与应用的研究进展

<正>血-脊髓屏障(Blood-spinal Cord Barrier, BSCB)是外周血管与中枢神经之间的天然屏障,能够调节血液与神经系统之间的物质交换。该屏障由多种成分组成,其中血管内皮细胞作为该屏障的重要组成部分,存在多种蛋白质构成的连接复合体,且各自发挥着不同功能,对维持脊髓微环境稳态发挥重要作用^[1]。在微观上,脊髓损伤(Spinal Cord Injury, SCI)可能造成血-脊髓屏障破坏,导致连接复合体中蛋白质表达异常,     

中医对脊髓损伤病机的认识

文章阐述了现代中医对脊髓损伤病机的认识，根据病变损伤部分和督脉的生理机能，认为本病的病机为瘀血阻滞督脉，枢机统率失职，三阳经气血逆乱而致督脉和其它经络、督脉和脏腑、督脉和气血之间功能紊乱，内治须以祛瘀通督为要。     

脊髓损伤早期发生血压波动机理的研究进展

脊髓损伤后会引起损伤平面以下躯体、内脏感觉的迟钝,随意运动的障碍,肌张力、反射活动的异常。而严重的高位脊髓损伤甚至在出现瘫痪的同时还伴随有继发性低血压、低血钠、低心率及高排尿等并发症。而这些症状在脊髓休克期结束后又都会有不同程度的缓解。其中,高位脊髓损伤后血压的异常波动,对脊髓损伤节段的修复以及维持重要脏器的功能有着重要的意义。本文是对目前脊髓损伤早期发生血压波动机制的研究进展加以总结。1脊髓损伤通过自主神经系统对血压的影响1.1通过交感节前神经元对血压的影响交感神经具有调节血管平滑肌活动,收缩血管,维持…     

通督健脾针灸法治疗脊髓损伤所致压疮的疗效观察

目的 观察通督健脾针灸法治疗脊髓损伤所致的Ⅱ和Ⅲ期压疮的临床疗效。方法 纳入脊髓损伤所致的Ⅱ和Ⅲ期压疮患者70例,并随机分为两组(治疗组和对照组),每组35例。对照组予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上予通督健脾针灸法治疗。采用压疮愈合量表(PUSH)对两组治疗前后伤口面积、伤口组织类型评分、渗出液量进行组内及组间比较,比较两组临床疗效。结果 治疗后,两组伤口面积、伤口组织类型计分、渗出量均低于同组治疗前(P<0.05),且治疗组均优于对照组(P<0.05)。治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。结论 在常规治疗基础上,通督健脾针灸法治疗脊髓损伤所致Ⅱ和Ⅲ期压疮,可有效缩小压疮伤口面积,减少渗出液量,疗效优于单纯常规治疗。     

三通针法治疗脊髓损伤恢复期截瘫患者临床观察

目的探索一种以通督、通(肠)腑、通调膀胱为特点的针灸治疗脊髓损伤恢复期的有效方法。方法将符合标准的60例患者随机分为治疗组(三通针法治疗)和对照组(普通针刺治疗),每组30例,均治疗2个疗程。结果治疗组显效率优于对照组(P<0.05)。结论三通针法治疗脊髓损伤恢复期的疗效优于普通针刺法。     

通督调神灸对脊髓损伤大鼠运动功能及炎性因子表达的影响

目的：观察通督调神灸对脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)大鼠运动功能及炎性因子表达的影响。方法：60只雄性SD大鼠采用改良Allens法制作脊髓中度损伤模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组和通督调神灸组,每组各30只。造模完成后,模型组大鼠仅给予预防感染等处理,通督调神灸组大鼠除预防感染外予以通督调神灸治疗,取百会、大椎、至阳、命门等穴,每穴5 min,每天1次,连续7 d。分别于术后第1天、第3天、第7天各取10只大鼠,选择Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分法评估脊髓损伤后的运动功能;ELISA法检测脊髓组织中高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein 1,HMGB1)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-18、核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的蛋白表达水平。结果：术后第1天,各组大鼠双下肢均出现迟缓性瘫痪,未见明显双下肢各关节的活动;术后第3天,各组大鼠双下肢部分关节有轻度活动;术后第7天,模型组大鼠双下肢各关节能够轻度伸缩运...     

“脊髓康”对大鼠脊髓损伤区Nogo-A表达的影响

目的：观察中药“脊髓康”对大鼠脊髓急性损伤后脊髓组织Nogo-A表达的影响。方法：选用162只SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、强的松组、脊髓康高剂量组、脊髓康中剂量组、脊髓康低剂量组,每组27只,分别于干预后3天、7天、14天处死大鼠,以免疫组化、Western Blot及荧光定量PCR检测大鼠脊髓组织中Nogo-A的表达量。结果：脊髓损伤各组在损伤后3天时Nogo-A蛋白和mRNA表达较低,7天后迅速上升达到高峰,至14天逐渐下降。与模型组比较,脊髓康中剂量组和强的松组在损伤后3天、7天、14天时,Nogo-A蛋白和mRNA表达差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：中药“脊髓康”能有效抑制大鼠脊髓损伤区Nogo-A表达,有利于脊髓损伤修复。