变异念珠菌常见菌落和菌体形态

目的 研究白色念珠菌变异后菌落及菌体形态的变化特征.方法 用唑类抗真菌药物对白色念珠菌标准菌进行实验室诱导得到不同的变异株;不同培养环境下获得白色念珠菌自发变异株.从抗真菌药物治疗效果不佳的临床念珠菌感染患者标本中分离培养的念珠菌变异株.将以上变异株进行培养,革兰染色,镜下观察菌体形态.结果 氟康唑诱导变异株菌落呈黏液状,革兰染色为阳性长杆状;伊曲康唑诱导的变异株菌落呈水滴状,革兰染色为阴性球杆状;酮康唑诱导的变异株菌落呈灰白色,革兰染色为阳性葡萄状;白色念珠菌自发变异株和临床分离念珠菌变异株菌落多产红色、黄色等色素形态为革兰阳性球菌状、革兰阴性杆状,也可呈白色毛绒状、淡粉色粉末样菌落,革兰染色为阳性念珠菌.结论 常用抗真菌药物、生长微环境改变、体内某些因素极易诱发念珠菌发生变异,变异后念珠菌无论菌落和菌体可发生类细菌样改变,因此,容易造成实验室在诊断念珠菌感染时的误诊和漏诊.     

念珠菌类细菌样变异株生物学性状及遗传学特征研究

目的 了解念珠菌发生变异后其形态、结构等生物学性状的改变情况,并通过其遗传学特征研究从分子水平揭示这种变异发生的机理。方法实验室研究中,利用不同的营养条件及生长环境、不同的唑类抗真菌药物对白色念珠菌标准菌株进行诱导使其变异; 临床研究中,从抗真菌治疗效果不佳患者的阴道分泌物、痰液、胸腔积液、胃液等标本中分离念珠菌变异株,并对以上变异株的形态特点、核结构、生化反应、耐药性、菌体组分、遗传学特征等进行研究。结果 菌体形态:念珠菌极易发生类细菌样变异,变异株菌体可呈G⁺球菌状、G⁺杆菌状、G⁺长丝状、G^-球菌状、G^-杆菌状等; 核结构:电镜透射扫描证实念珠菌变异株失去真核细胞固有的核结构而呈原核生物样改变; 生化反应:在所观察的20项生化试验中有 5项不同; 药敏试验:念珠菌发生变异后对原本敏感的抗真菌药物完全耐药,而对原本耐药的普通抗细菌药物敏感,且耐药谱与普通细菌耐药谱相同; 菌体组分改变:经质谱仪鉴定念珠菌变异株和变异菌返祖株菌体组分有明显不同; 真菌最保守基因表达:采取PCR技术对变异株进行真核生物最保守基因16S sRNA检测发现,念珠菌发生类细菌样变异后仍表达真核生物保守基因,由此可证明具有原核细胞生物学特性的念珠菌类细菌样变异株是源于具有真核细胞的念珠菌。结论 念珠菌极易发生类细菌样变异,变异株各种生物学特性与原核生物酷似。电镜观察具有明确亲缘关系的念珠菌标准菌株、念珠菌类细菌样变异株、变异菌返祖株在核物质存在形式上确有质的改变,此研究在生物进化特别是在原核细胞与真核细胞的进化联系上有非常重要的意义。     

奴卡氏菌致全身多发脓肿的诊断学特征分析

目的探讨奴卡氏菌致全身多发脓肿患者的诊断学特征。 方法回顾性分析1例于2017年12月26日在济宁医学院附属医院神经内科就诊的奴卡氏菌感染患者的临床资料,并文献复习。 结果患者临床表现为咳嗽、发热、发作性四肢抽搐伴有头痛,查体见胸壁脓肿破溃,脓液流出;脑脊液检查细胞数8×10⁶/L,蛋白定量1.448g/L,均正常,普通培养未见细菌、真菌及抗酸杆菌;胸部CT见双肺多发空洞及间质改变;颅脑磁共振(MRI)见额叶不均匀异常信号,多发环壁及周围水肿,环壁被强化;胸壁脓液培养3 d后见黄白色菌落,弱抗酸染色及革兰染色见分枝状杆菌,符合奴卡氏菌特点。给予磺胺嘧啶钠、阿莫西林克拉维酸钾抗奴卡氏菌感染治疗后患者症状改善,颅脑MRI示额叶脓肿较前明显吸收。 结论奴卡氏菌致全身多发脓肿患者病程迁延不愈,临床及影像学表现缺乏特异性。常规抗生素治疗欠佳且合并免疫抑制患者,应高度警惕此病并尽快行奴卡氏菌的培养鉴定。     

从胸腔积液中分离出—株巴西奴卡氏菌

一例男性患者因被人刺伤右胸,伤口愈合后出现胸闷、呼吸困难、低热、盗汗、时而轻咳少量血粘痰而就诊.B 超提示:右侧胸腔积液.胸腔穿刺吸出血水样液体进行细菌培养,生长巴西奴卡氏菌.现将菌株鉴定结果报告如下.1.染色与形态革兰氏染色阳性,呈树根状排列,抗酸染色为阴性.2.培养为需氧菌,沙氏琼脂37℃5天不生长.硫酸镁肉汤液体表面形成雪花样菌苔,下部液体澄清.血液琼脂37℃24h 菌落呈白色,凸起,光滑,蜡样,不易刮起.72h 后菌落表面有白色菌丝生长,有泥土味.     

呼吸道标本中1株奇异劳特普罗菌的分离及鉴定

目的探讨奇异劳特普罗菌(Lautropia mirabilis)的生物学特性。方法对一住院患者多次合格痰样本中分离的1株奇异劳特普罗菌行革兰染色、抗酸染色等形态学观察;采用微量生化反应管验证其生化反应;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)及16S r DNA测序对其进行鉴定。结果该菌在5%CO235℃血平板上培养24～48 h形成大小不等、白至浅黄色、粗糙、不溶血、干燥、呈"咬琼脂"现象的菌落;革兰染色呈革兰阴性不规则球状体,抗酸染色阴性;主要微量生化反应阳性结果包括脲酶、葡萄糖、麦芽糖、硝酸盐还原试验,阴性结果包括乳糖、蔗糖、苯丙氨酸脱氨酶、VP、吲哚、鸟氨酸、赖氨酸、枸橼酸、甘露醇; MALDI-TOF MS鉴定结果为奇异劳特普罗菌(Lautropia mirabilis,Score 2.130),16S r DNA鉴定确证为奇异劳特普罗菌(Lautropia mirabilis)。结论该菌菌落及镜下菌体形态不规则,目前基于MALDI-TOF MS的鉴定手段快速且准确。     

紫外线在杀菌中诱导绿脓杆菌与蜡状杆菌形成L型的观察

试验表明,在消毒剂量的紫外线照射下可诱导绿脓杆菌与蜡状杆菌形成L型。L型在菌落、形态、染色、生化反应等均有别与原菌。电镜显示L型胞壁存在缺损。     

耐万古霉素金黄色葡萄球菌生物学特性改变与细菌鉴定

目的 了解金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药后生物学特性的变化及其对临床细菌鉴定结果的影响。方法 使用万古霉素体外诱导试验将1株临床分离的异质性万古霉素耐药金黄色葡萄球菌（h-VRSA）逐渐诱导为万古霉素中介耐药金黄色葡萄球菌（VISA）,观察原代菌和诱导菌的生长特征和生化反应,并使用VITEK32和MicroscanWalkAway40进行细菌鉴定。结果 h-VRSA和VISA的主要生物学特性改变为：菌落大小不等、色素由淡黄色变成灰白色、溶血环消失,血浆凝固酶、甘露醇、甘露糖等生化反应由阳性转为阴性;对杆菌肽由敏感变为耐药;仪器鉴定结果为溶血葡萄球菌或模仿葡萄球菌。结论 金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药后可表现出培养特征、生化反应等一系列表型特征的改变,并可导致临床细菌鉴定结果错误。     

3株抗菌药物活性评价用标准菌株的建立与评价

目的 参照《病原微生物菌(毒)种国家标准菌株评价技术标准》(WS/T 812-2022),在实验室条件下对保藏于中国医学科学院病原微生物菌(毒)种保藏中心药用微生物相关菌(毒)种保藏分中心的大肠埃希菌CCPM(A)-P-000101、肺炎克雷伯菌CCPM(A)-P-000102、金黄色葡萄球菌CCPM(A)-P-000100菌株,分别测定病原微生物学特征,推动这3株细菌成为抗菌药物活性评价中使用的标准株。方法 进行菌落形态和革兰染色观察,根据生化鉴定、抗生素敏感性测试、16S rDNA测序,以及多次传代后,观察和比较不同代次间细菌生长、药敏特性以及感染实验动物的100%最小致死量的差别,了解3株细菌的传代稳定性,明确其病原微生物学特征。结果 菌落形态、革兰染色、生化鉴定、16S rDNA测序结果证明CCPM(A)-P-000101、CCPM(A)-P-000102、CCPM(A)-P-000100菌株具备大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌对应的典型特征,除对青霉素、氨苄西林等少数抗生素具有耐药性,3株细菌对多数受试抗生素具有敏感性表型。3株细菌的G10菌株与G1菌株比较,生长曲线...     

大肠埃希菌小菌落变异型的特征及临床意义研究进展

微生物表型和遗传的改变使其更能适应环境的压力。细菌小菌落变异株生长缓慢,菌落形态和生化特征不典型,给临床鉴定带来了挑战。与野生株比较,小菌落变异株更易存留在细胞内并且对部分抗菌药物不敏感,在临床上常导致复发或持续性感染。目前小菌落突变株在许多种属细菌中均有发现,针对金黄色葡萄球菌的研究最为广泛,而对大肠埃希菌突变的报道和机制研究较少。该文就大肠埃希菌小菌落突变株的表型、基因型特征、形成机制、临床感染情况、实验室诊断及治疗作一综述。     

白色念珠菌L型的生化实验观察

目的了解白色念珠菌发生L型变异后生化反应有无变化。方法将白色念珠菌氟康唑诱导株、自发变异株(不同形态和染色性的L型念珠菌)及恢复菌株进行生化反应鉴定,并与诱导前菌株的生化反应进行比较分析。结果白色念珠菌在发生L型改变后,生化反应明显改变,恢复菌株的生化反应也很难完全恢复。结论对于发生L型改变的白色念珠菌其生化反应不能作为其鉴定的依据。     

红色毛癣菌在7种培养基上的生物学特性

红色毛癣菌（Trichophyton rubrum）是最常见的亲人性致病性皮肤癣菌,了解它的生物学特性,如产色、产孢情况等对红色毛癣菌引起的皮肤癣菌病的诊断和治疗有十分重要的意义。红色毛癣菌被认为很难产孢,特别是大分生孢子［1］。且常发生产色变异,非产色株逐渐增多［2］。作者自2009年7月至2011年12月通过对红色毛癣菌在7种培养基上的菌落形态、镜下产孢情况的观察,菌落直径测量等,探讨红色毛癣菌在不同培养基条件下生物学性状的改变。报道如下。     

1株抗酸阳性丙酸杆菌的分离和鉴定

目的对1株乳腺脓肿标本分离的缓慢生长革兰阳性抗酸杆菌进行菌种鉴定。方法采用细菌的16S核糖体核糖核酸(rRNA)基因测序分析,结合细菌的菌体形态、生长特征、API 20A和手工生化实验进行菌种鉴定。结果该菌为厌氧的、无芽孢、直或弯曲的多形性杆菌,革兰和抗酸染色为阳性。血平板培养5d形成直径大于2mm、米黄色、圆形、光滑、突起、边缘整齐、β溶血性菌落。但16SrRNA基因测序分析发现,该菌与贪婪丙酸杆菌的同源性为100%,API 20A生化编码为44365062,VP试验的阳性,符合贪婪丙酸杆菌的特征。结论该乳腺脓肿的病原菌为贪婪丙酸杆菌,其抗酸染色阳性,为国内首次报道。     

抗酸染色技术在结核病诊断中的应用

抗酸染色技术是利用一些细菌细胞壁脂质含量高,菌体内有分枝菌酸,被着色后而不易洗脱的原理来检测该类细菌,主要用于检测分枝杆菌属和奴卡菌属细菌。结核病是由结核分枝杆菌所致的慢性传染病,结核分枝杆菌富含脂质和分枝菌酸,因而可用抗酸染色技术进行检测。自Koch1882年发现结核分枝杆菌,并用美兰染色该菌,直到Ziehl和Neelsen技术采用(Ziehl-Neelsen抗酸染色),迄今已100余年,Ziehl-Neelsen抗酸染色技术一直是结核病诊断实验室的首选技术。虽然抗     

亲水性气单胞菌败血症一例

自一例再生障碍性贫血和病毒性肝炎患者的血中,分离出一株亲水性气单胞菌.该菌革兰氏染色阴性,运动活泼.经培养、生化、菌落形态等全面鉴     

SLE患者血液分离出口腔纤毛菌1例

目的对从SLE患者血液分离的1株口腔纤毛菌进行鉴定及药敏试验。方法用生化鉴定ANC卡及手工方法进行综合鉴定;采用16S r DNA基因测序复核鉴定;K-B法检测菌株药物敏感性。结果该菌为厌氧、兼性微需氧的革兰阴性长杆菌。ANC卡鉴定为死亡梭杆菌(鉴定率88%),结合鉴定卡部分生化反应、生长试验、触酶试验、氧化酶试验及菌落形态特征鉴定为口腔纤毛菌。16S r DNA基因序列显示该菌与口腔纤毛菌的相似度最高,为99%。该菌除对万古霉素及庆大霉素抑菌圈直径小于10 mm外,对其他检测药物抑菌圈直径均大于20 mm。结论该血培养菌为口腔纤毛菌,16S r DNA基因序列分析是少见菌鉴定的有效工具。     

罕见豚鼠耳炎奴卡菌的鉴定及其药物敏感性分析

目的探讨罕见豚鼠耳炎奴卡菌的鉴定方法并评价其药物敏感性。方法采用形态、生理生化表型鉴定与16S rRNA序列分析相结合的方法鉴定菌株,使用微量肉汤法检测其药物敏感性。结果临床分离的奴卡菌被鉴定为豚鼠耳炎奴卡菌,其对哌拉西林、红霉素、头孢他啶、头孢哌酮、庆大霉素、头孢西丁、哌拉西林/他唑巴坦耐药,万古霉素、左氧氟沙星、亚胺培南、依替沙星、环丙沙星、阿米卡星、复方磺胺甲基异噁唑敏感。结论 16SrRNA基因序列分析法可用以鉴定豚鼠耳炎奴卡菌,磺胺类药物治疗有效。     

自贡地区438份前列腺液细菌培养及药敏试验结果分析

目的了解本地区前列腺液病原微生物及其药敏试验结果,指导临床合理用药。方法对2003-06-2009-09 438份前列腺液进行细菌培养及药敏试验。结果 438份前列腺液中分离出G＋菌191株,G-菌19株,真菌2株。药敏试验G＋菌对万古霉素、呋喃坦啶、利福平大于90%,对氨苄青霉素、青霉素耐药。G-菌对亚胺硫霉素、派拉西林/三唑巴坦敏感,对复方新诺明、氨苄青霉素耐药。结论溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌等为本地区感染性前列腺炎的主要病原菌。     

念珠菌类细菌样变异株基因特征初步研究

目的在对念珠菌发生变异后其形态、结构等生物学性状研究的基础上,进一步探讨念珠菌类细菌样变异株基因特征。方法在低温、营养缺乏条件下诱导白色念珠菌标准菌株使其变异;用不同浓度梯度的氟康唑等临床常用抗真菌药物诱导白色念珠菌标准菌株变异。采用煮沸法制备真菌基因模板,采用细菌保守基因16SRNA序列引物和真菌保守基因18SRNA序列引物分别扩增16SRNA和18SRNA序列,琼脂糖凝胶电泳,观察并记录结果。同时将细菌保守基因16S RNA扩增片段进行测序,所得序列进行BLAST比对分析。结果念珠菌类细菌样变异株16SRNA序列均扩增阳性,而白色念珠菌标准株未出现相应的扩增条带。念珠菌类细菌样变异株18SRNA序列扩增除2号菌株有微弱的条带外,其余变异株均未扩增出目的条带,而白色念珠菌标准株则出现相应的扩增条带,表明念珠菌类细菌样变异株基因组中18S RNA序列所占比例不多或是因多次传代遗失。念珠菌类细菌样变异株16SRNA扩增片段经纯化后进行DNA序列测定,BLAST进行比对分析,发现念珠菌类细菌样变异株序列与数据库中细菌序列有较高的相似性。结论念珠菌类细菌样变异株基因组含有细菌保守基因及少量真菌保守基因,具有原核生物学性状的念珠菌类细菌样变异株是源于真核生物的念珠菌。此研究在生物进化特别是在原核细胞与真核细胞的进化联系上有非常重要的意义。     

类细菌样念珠菌变异株真菌保守基因检测

目的 揭示念珠菌类细菌样变异株的分子基础及其相应的生物学特性的分子基础.方法 采用常规PCR方法,对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、两株不同来源的白色念珠菌标准菌株及源自于这两株念珠菌标准菌株的类细菌样念珠菌变异株进行真菌最保守18S rRNA基因的检测.结果 大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌无真菌基因表达;两株念珠菌标准菌株真菌基因为强表达;源自于念珠菌标准菌株的类细菌样念珠菌变异株真菌基因呈极弱表达.结论 念珠菌发生类细菌样变后,虽然生物学性状呈类细菌样改变,但仍部分表达真菌最保守基因.此结果也进一步证实了具有原核生物特性的类细菌样念珠菌变异株是源自于具有真核细胞特性的念珠菌.     

等离子体诱导L型细菌形成和代谢改变的观察

目的研究大气辉光放电等离子体诱导L型细菌形成,探讨其杀菌机理。方法用诱导培养基培养和染色镜检方法及糖代谢检测进行了试验观察。结果经等离子体处理后培养基上大肠杆菌菌落数比对照组显著减少,多数形态正常。培养至第2日,有针尖大小白色菌落长出,第4日菌落呈白色,表面干燥粗糙,有的呈颗粒状,形状不规则;第4日之后菌落数不再增加。经革兰染色镜检发现,白色菌落的细菌形状变为圆形,大小不均,染色特性也发生改变呈紫蓝色,着色不均匀,经证实为L型细菌。金黄色葡萄球菌L型菌的形成比大肠杆菌少,并且随培养时间增加不明显。L型细菌的形成随等离子体作用时间的延长而降低,暴露时间超过180 s的样品没有观察到L型细菌形成。经等离子体处理后L型大肠杆菌不能分解蔗糖和甘露醇,L型金黄色葡萄球菌对蔗糖分解能力降低,不能分解甘露醇。结论等离子体可以诱导大肠杆菌和金黄色葡萄球菌形成L型细菌,改变其糖代谢,推测等离子体杀菌可能以破坏细菌细胞壁为主。