日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3的免疫诊断价值评估

目的探讨重组日本血吸虫信号蛋白14-3-3（rSj14-3-3）间接ELISA用于血吸虫病免疫诊断的价值。方法表达并利用纯化的rSj14-3-3建立间接ELISA法，比较其与可溶性虫卵抗原（SEA）ELISA和间接血凝试验（IHA）检测急慢性日本血吸虫病患者的阳性率及其它寄生虫患者和正常人血清的交叉反应。结果rSj14-3-3-ELISA、SEA-ELISA和IHA3种方法的敏感性分别为90．8％、94．2％和90．0％，特异性分别为87．0％，84．8％和84．8％，差异无显著性（P〉0．05）。结论rSj14-3-3抗原间接ELISA法具有可用于日本血吸虫病免疫诊断的价值。     

免疫印渍试验在斯氏肺吸虫病血清学诊断中的意义

应用免疫印渍试验（Immunoblottingtest）分析斯氏肺吸虫成虫、幼虫和囊蚴期的虫体可溶性抗原．结果显示感染斯氏肺吸虫的人和动物血清可识别22、24和26KD抗原蛋白带．依据病人血清对上述抗原组仿的识别，用免疫印渍试验诊断24例斯氏肺吸虫病人，皆为阳性，而对照组显阴性．与Dot－ELISA比较试验的敏感性和特异性，两试验的阳性检出事无显著性差异（P＞0．05）．Dot-ELISA的交叉反应率为18．75％（6／32），而免疫印渍试验无交叉反应．表明斯氏肺吸虫的22、24和26KD蛋白带为特异性诊断抗原，免疫印渍试验为斯氏肺吸虫病的高度敏感和特异的血清学诊断方法．     

血清抗转铁蛋白抗体的表达与子宫内膜异位症患者的关系

目的建立一种ELISA方法，检测患者血清中抗转铁蛋白抗体，评价其对子宫内膜异位症的诊断价值。方法用转铁蛋白抗原包被、间接ELISA方法检测患者血清中抗转铁蛋白抗体。采集患者血清，分3组：盆腔内异症组38例，Ⅰ、Ⅱ期20例，Ⅲ期9例，Ⅳ期9例；妇科良性疾病对照组30例；正常对照组40例。结果内异症患者血清中抗转铁蛋白抗体阳性率高达94．7％，正常对照组阳性率为2．5％，良性疾病对照组阳性率为0％，内异症组与两对照组比较差异有显著意义（P均〈0．01）。间接ELISA法诊断内异症临床敏感性为94．7％，特异性为98．6％，诊断符合率为96．5％。内异症各组阳性率比较差异无显著意义（P〉0．05）。结论用转铁蛋白抗原包被的间接ELISA法检测血清中抗转铁蛋白抗体诊断内异症敏感性、特异性强，诊断符合率高，可试作为内异症辅助诊断及疗效检测的一种非创伤性指标。     

鸡卵核中42000蛋白的纯化及其对系统性红斑狼疮的诊断价值

目的 纯化鸡卵核中42000蛋白，并探讨该抗原对系统性红斑狼疮（SLE）的诊断价值。方法 将常规SDS－PAGE和电洗脱技术相结合，分离纯化鸡卵核中42000蛋白，并用于Dot-ELISA诊断SLE。结果 用该技术分离纯化了鸡卵核中42000蛋白，获得约300μg具有明显免疫反应性的高纯度抗原。用于检测SLE病人血清126份，阳性86份，阳性反应率为68．25％；正常人血清100份未发现假阳性；对皮肌炎和多发性肌炎（DM／PM）72份、硬皮病（PSS）48份和混合性结缔组织病（MCTD）78份血清亦无交叉反应出现。结论 以纯化的鸡卵核中42000蛋白为抗原，建立的Dot-ELISA方法，用于诊断SLE，具有良好的特异性和敏感性。     

斑点金免疫渗滤法检测不孕症患者血清抗子宫内膜抗体

目的：建立一种快速测定抗子宫内膜抗体（antiendometrial antibody,EMAb）的新方法。方法：采用经抗人血清抗体－Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原（endometrium antigen ,EMAg)，以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体，根据免疫渗滤原理，建立斑点金免疫渗滤法（Dot-immunogold filtration assay,DIGFA）检测人血清 EMAb。共检测586份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验（ELISA）作对比研究。结果：纯化的人子宫内膜抗原与患者血清中特异性EMAb通过渗滤在硝酸纤维素膜上反应，8min内即可直接观察结果。在586份血清的检测中，阳性率为36．8％，与ELISA的结果基本一致（x^2＝3．45，P＞0．05），符合率95．0％。特异性为94．7％，敏感性为95．6％。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论：DIGFA可测定EMAb，具有推广使用的价值。     

3种方法检测胰岛素自身抗体的结果比较

目的比较酶联免疫（ELISA）、放射免疫（RIA）和免疫印迹（IB）法检测胰岛素自身抗体（IAA）敏感性和特异性的差别。方法用ELISA、RIA和IB法分别检测45例1型糖尿病和50例健康对照者血清中IAA，计算敏感性和特异性，用统计学方法分析3种方法的差异。结果ELISA、RIA和IB法检测T1DM患者血清中IAA的阳性率分别为35．56％、37．78％和24．44％，检测50例对照组的特异性分别为90．00％、92．00％和100％，三者的敏感性依次为RIA〉ELISA〉IB，特异性依次为IB〉RIA〉ELISA，经统计学分析ELISA和RIA的特异性和敏感性差异均无统计学意义（P〉0．05），两者的敏感性均高于IB法（P〈0．05），而两者的特异性明显低于IB法（P〈0．05）。结论IB法检测IAA的敏感性低于ELISA和RIA法，而其特异性可达100％，明显高于ELISA和RIA，可以作为IAA的确认试验。     

间接血凝试验和间接荧光抗体试验诊断人体包虫病的研究

应用间接血凝试验（ＩＨＡＴ）和间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）对３０例包虫病患者的血清进行了检测，抗体阳性率分别为８６．７％和９０．０％，而肝囊肿、肝脓肿、肿瘤和旋毛虫病患者及健康人血清均为阴性反应，囊虫病患者的交叉反应率分别为３７．５％和３１．３％。包虫囊肿的部位、数量及囊肿是否破裂对检测结果有明显影响。包虫ＩＨＡＴ冻干抗原和包虫囊壁冰冻切片抗原在－２０℃可分别保存２ａ和３个月而不丧失活性。结果表明：ＩＨＡＴ和ＩＦＡＴ对人体包虫病的诊断具有较高的敏感性和特异性。     

间接荧光抗体试验诊断实验性旋毛虫病的研究

本文应用间接荧光抗体试验比较了４种方法制备的旋毛虫幼虫抗原诊断实验性旋毛虫病的效果。结果表明，旋毛虫纯净幼虫冰冻切片抗原优于完整幼虫抗原、超声粉碎幼虫抗原及膈肌幼虫冰冻切片抗原。用此抗原检测感染旋毛虫的大鼠血清时，抗体阳性率为１００％（１３／１３），而１０份正常大鼠血清均为阴性反应。小鼠感染旋毛虫后２周即可检测到抗旋毛虫抗体，阳性率为１１．１１％（１／９），感染后５周抗体阳性率已升到１００％（８／８），升高的抗体滴度可一直持续至感染后第１５周。此抗原在－２０℃至少可保存２．５年而不丧失其活性和特异性。应用滤纸血也可取得满意的检测结果。     

胶体金免疫层析法在脑囊虫病诊断中的应用

目的 探讨胶体金免疫层析法在脑囊虫病诊断中的价值。方法 应用胶体金免疫层析法检测脑囊虫病患脑脊液（CSF）及血清中的循环抗原（CA），并与ELISA比较。结果 检测脑囊虫病人CSF和血清各48份，阳性检出率分别为81．25％和70．83％。检测健康人CSF和血清各26份，阴性符合率分别为92．31％和90．00％。检测23份非囊虫病（脑肿瘤、脑脓肿、脑结核、脑外伤）患CSF和血清的交叉率分别为8．70％和11．32％。检测包虫病患、血吸虫病患和华支睾吸虫患的血清各10份，交叉率分别为20．00％、10．00％和0。敏感性和特异性与ELISA相近。结论 胶体金免疫层析法用于脑囊虫病诊断具有较高的敏感性和特异性，操作简便、快速，无需特殊仪器设备，有较好的应用价值。     

葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原及相关自身抗体在类风湿关节炎诊断中的价值

用ELISA检测90例类风湿关节炎（RA）患者（RA患者组）、73例其他风湿性疾病患者（非RA疾病对照组）、50例健康者（健康对照组）血清中葡萄糖－6－磷酸异构酶（GPI）抗原、抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体,同时用速率散射比浊法定量检测类风湿因子IgM（RFIgM）,用间接免疫荧光法检测抗角蛋白抗体（AKA）。结果显示,RA患者血清GPI水平[1．73（参考值0．43—4．40）mg／L]明显高于非RA疾病对照组[0．14（0．10～0．18）mg／L]和健康对照组[0．12（0．09～0．15）mg／L],差异有统计学意义（H=18．13,P〈0．01）。GPI抗原、CCP抗体、RF—IgM和AKA对RA的敏感度分别为80％（72／90）、57％（51／90）、68％（61／90）和29％（26／90）;特异性分别为97％（119／123）、95％（117／123）、77％（95／123）和95％（117／123）;GPI抗原分别和CCP抗体、RF—IgM联合检测的敏感度分别为92％（83／90）、96％（86／90）,特异度分别为93％（115／123）、76％（93／123）。GPI与抗CCP和RF—IgM显著相关（r分别为0．674、0．533,P〈0．01）,GPI与AKA无相关性（r=0．12,P〉0．05）。提示,GPI对RA诊断有较高的灵敏性和特异性,可以作为RA早期诊断的辅助指标。     

斑点酶联免疫吸附试验检测血吸虫病

用成虫、卵及尾蚴抗原做斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)检测96份血吸虫患者血清,阳性率分别、为70.8%、91.7%及81.3%。三种抗原 Dot—ELISA 的互补阳性率为93.8%。而对50份献血员及38份肺吸虫患者血清进行检测都是阴性。Dot—ELHSA 的重现性及稳定性好,抗原用量少、简单、出结果快。     

Comparison of Dot-ELISA with Sandwich ELISA in detecting circulating antigen in patients with bancroftian filariasis.

Dot-ELISA assay was compared with standard Sandwich ELISA in detecting parasite antigen in sera from patients with bancroftian filariasis. The same monoclonal antibody and the same serum samples were used in both assays. With Dot-ELISA, 67 of 70 serum samples from microfilaremic patients were positive at a dilution of 1:50. End titers ranged from 1:80 to 1:1 280. While with Sandwich ELISA, 64 of the 70 serum samples were positive at a dilution of 1:10. End titers ranged from 1:10 to 1:320. The specificity of both assays was over 91%, but their sensitivity was markedly different. Dot-ELISA could detect as little as 0.055 ng/ml microfilarial antigen added to normal human serum, whereas the lower limit of detection by Sandwich-ELISA was 10 ng/ml parasite antigen. An additional advantage of Dot-ELISA is that it does not require radioactivity or sophisticated equipment and, therefore, can be performed in virtually all filariasis-endemic areas.

     

斑点免疫金银染色试验与斑点ELISA诊断血吸虫病的比较

以日本血吸虫成虫抗原，应用斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断日本血吸虫病，５５例粪检阳性病人血清抗体检出率均为１００．０％，５０例正常人血清阴性符合率均为９８．０％，与５０例肝吸虫病人的交叉反应分别为２．０％和４．０％，两法未见显著性差异（Ｘ１１＝０．３４４Ｐ＞０．０５）。但进一步研究显示金标法的混合阳性血清最终滴度较酶法高４～５倍；使用抗原节省；２０份阳性血清抗体检出阳性终点也较酶法高２～４个滴度。     

Dot—ELISA快速诊断日本血吸虫病的实验研究

目的：建立快速简便实用的血吸虫病诊断方法。方法：利用Dot-ELISA检测急性日本血吸虫病患者血清特异性IgG抗体。结果：Dot-ELISA和常规ILISA检测117例急性血吸虫病患者血清抗体的阳性率分别为94.0%和97.4%,高于粪便检测的阳性率（92.3%),两法检测结果的符合率达96.6%。108例粪检阳性患者,Dot-ELISA和常规ELISA的阳性率分别为94.4%和97.2%,两法检测结果的符合率为97.2%。25例肝吸虫病和50例正常人可出现不同程度的交叉反应。结论：两法在诊断的敏感性和特异性方面相似,检测结果无显著性差异,而Dot-ELISA操作简便,诊断快速,具有一定的实用诊断价值。     

长沙、澧县、吉首猪旋毛虫病血清流行病学调查

用酶联免疫吸附试验测定长沙、澧县和吉首三地区猪血清的旋毛虫抗体,阳性率分别为6.0％,26.0％及20.9％;长沙猪的阳性率明显低于澧县和吉首,而后二地无显著性差异。又用间接免疫过氧化物酶染色法检测长沙及吉首的猪血清旋毛虫抗体,阳性率分别为11.0％和27.4％,差异亦具高度显著性。①讨论了三地猪血清抗体阳性率的差异,认为旋毛虫病在我省可能存在。     

日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3对日本血吸虫病的诊断价值

目的 探讨纯化的日本血吸虫(中国大陆株)重组信号蛋白14—3—3(rSjl4—3—3)诊断血吸虫病的价值。方法 利用纯化的rSjl4—3—3抗原与成虫抗原，间接EUSA法检测急、慢性日本血吸虫病患者血清。结果 急、慢性血吸虫患者血清rSjl4—3—3抗体检出率为100％和92．0％，与正常人血清未出现交叉反应；抗AWA抗体检出率为98．0％和94．0％，与正常人有7．3％的交叉反应。结论 rSjl4—3—3为抗原诊断日本血吸虫病显示出高度的敏感性和特异性，具有实用价值。     

检测受染小鼠血清中循环抗原以诊断旋毛虫病的研究

应用双抗体夹心-ELISA法检测了94只受染小鼠血清中的旋毛虫幼虫循环抗原。受染3d后,即有7％的小鼠显示阳性反应,受染30d后,无论受染幼虫数目多寡(50、150及300条幼虫/只),全部受染鼠(100％)均显示阳性反应。给予丙硫苯咪唑治疗后的第1周,循环抗原的阳性率仍为100％,但在治疗后第2、3及4周,则分别降为60％、20％及10％,表明循环抗原的检测对诊断旋毛虫感染及考核药物疗效起一定作用。     

间接血凝试验诊断旋毛虫病

本文采用经Sephadex G-200层析后的旋毛虫幼虫抗原对实验感染旋毛虫大鼠和旋毛虫病人血清作间接血凝试验(IHA)。结果表明,20只大鼠感染后第16天全部出现阳性反应。9例旋毛虫病患者为阳性。本试验用于囊虫病、华枝睾吸虫病和健康人及正常大鼠均为阴性。检查本地区31只狗,阳性符合率为66.7％。     

GS-CLPT和Dot-ELISA法诊断旋毛虫病的价值

目的 :为探索检测旋毛虫病抗体的简便易行方法。方法 :采用胶纸条环蚴沉淀试验 (GS -CLPT)和斑点ELISA(Dot -ELISA)法检测感染旋毛虫的豚鼠血清。结果 :二种方法的阳性率分别为 95.0 %和 10 0 %。用此二种血清学方法检测正常豚鼠、血吸虫病兔、蛔虫病人和鞭虫病人血清 ,除 1例蛔虫病人血清Dot-ELISA法出现阳性反应外 ,其它血清二种方法均为阴性反应。结论 :二种方法对旋毛虫病特异性抗体的检测均有较好的敏感性和特异性。